Nghiên cứu thực trạng bệnh viêm vú bò sữa ở huyện nghĩa đàn, tỉnh nghệ an và biện pháp phòng trị

Kiểm tra khả năng mẫn cảm của các vi khuẩn phân lập ựược từ sữa bò bị viêm vú với một số thuốc kháng sinh thông dụng..... Kiểm tra tắnh mẫn cảm của các vi khuẩn phân lập ựược từ sữa bò b

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI

   

NGUYỄN THỊ THÚY

NGHIÊN CỨU THỰC TRẠNG BỆNH VIÊM VÚ

BÒ SỮA Ở HUYỆN NGHĨA ðÀN, TỈNH NGHỆ AN

LỜI CAM ðOAN

Tôi xin cam ñoan ñây là công trình nghiên cứu của tôi, những số liệu trong luận văn này là hoàn toàn trung thực và kết quả nghiên cứu chưa từng ñược

sử dụng Mọi thông tin trích dẫn trong báo cáo này ñã ñược ghi rõ nguồn gốc

Hà Nội, ngày tháng 10 năm 2013

Người thực hiện

Nguyễn Thị Thúy

LỜI CẢM ƠN

để hoàn thành ựề tài này, ngoài sự cố gắng của bản thân, tôi còn nhận ựược rất nhiều sự quan tâm giúp ựỡ của các thầy cô giáo, gia ựình, bạn bè và ựồng nghiệp

Trước hết tôi xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc tới PGS.TS Bùi Thị Tho- Bộ

môn Nội Ờ Chẩn Ờ Dược Ờ độc chất, Khoa Thú y, trường đại Học Nông Nghiệp

Hà Nội người cô ựã tận tình hướng dẫn giúp ựỡ tôi trong suốt quá trình thực hiện ựề tài Chúng tôi cũng xin bày tỏ lời cảm ơn tới Ban lãnh ựạo Trạm thú y huyện Nghĩa đàn tỉnh Nghệ An ựã tạo ựiều kiện giúp ựỡ tôi trong quá trình học tập, nghiên cứu, thực hiện thắ nghiệm, thu thập số liệu

Xin chân thành cảm ơn các thầy cô giáo trong Viện ựào tạo sau đại học, Ban chủ nhiệm Khoa Thú y, Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội ựã giúp ựỡ, tạo ựiều kiện trong suốt thời gian học tập cũng như trong thời gian thực hiện ựề tài

Xin chân thành cảm ơn!

Hà Nội, ngày tháng 10 năm 2013

Người thực hiện ựề tài

Nguyễn Thị Thúy

MỤC LỤC

Lời cam đoan i

Lời cảm ơn ii

Mục lục iii

Danh mục bảng……… vi

Danh mục hình……… vii

Danh mục viết tắt……….viii

MỞ ðẦU i

1 ðặt vấn đề 1

2 Mục tiêu nghiên cứu của đề tài 2

3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài 3

Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4

1.1 Tình hình nghiên cứu bệnh viêm vú bị sữa 4

1.1.1 Tình hình nghiên cứu bệnh viêm vú bị sữa trên thế giới 4

1.1.2 Tình hình nghiên cứu bệnh viêm vú bị sữa ở Việt Nam 4

1.2 Cấu trúc bầu vú bị sữa 5

1.2.1 Tuyến sữa 5

1.2.2 Bầu vú bị sữa 5

1.2 Sữa và thành phần của sữa 6

1.2.1 Quá trình tạo sữa ở bầu vú 6

1.2.2 Chu kì tiết sữa 7

1.2.3 Phản xạ tiết sữa 7

1.2.4 Thành phần của sữa 8

1.3 Bệnh viêm vú bị sữa 8

1.3.1 Khái niệm về bệnh viêm vú ở Bị sữa 8

1.3.2 Phân loại viêm vú bị sữa 8

1.3 3 Những yếu tố cĩ ảnh hưởng đến bệnh viêm vú 13

1.3.4 Chẩn đốn bệnh Viêm vú 22

1.3.5 Sự đề kháng kháng sinh của các vi khuẩn gây bệnh 27

Chương 2 ðỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29

2.1 ðối tượng, địa điểm và thời gian nghiên cứu 29

2.1.1 ðối tượng nghiên cứu 29

2.1.2 Thời gian nghiên cứu 29

2.1.3 địa ựiểm nghiên cứu 29

2.2 Nội dung nghiên cứu 29

2.2.1 điều tra tình hình chăn nuôi bò sữa và khảo sát tỷ lệ bò mắc bệnh viêm vú lâm sàng tại các hộ chăn nuôi bò sữa thuộc huyện Nghĩa đàn tỉnh Nghệ An 29

2.2.2 Áp dụng phương pháp CMT Ờ Califorlia Mastitis Test trong chẩn ựoán sớm bò bị viêm vú cận lâm sàng 29

2.2.3 Phân lập, giám ựịnh các vi khuẩn hiếu khắ có trong sữa bò thường gặp có trong sữa bò mắc bệnh viêm vú và sữa bò ở trạng thái sinh lý bình thường 29

2.2.4 Kiểm tra khả năng mẫn cảm của các vi khuẩn phân lập ựược từ sữa bò bị viêm vú với một số thuốc kháng sinh thông dụng 29

2.2.5 Thử nghiệm một số phác ựồ ựiều trị bệnh viêm vú bò 29

2.2.6 Xây dựng quy trình phòng bệnh viêm vú bò sữa 29

2.3 Nguyên liệu, vật liệu nghiên cứu 29

2.3.1 Nguyên liệu 29

2.3.2 Vật liệu nghiên cứu 30

2.3.3 Các loại môi trường nuôi cấy, phân lập, giám ựịnh vi khuẩn thông thường và chuyên dụng 30

2.4 Phương pháp nghiên cứu 30

2.4.1 Phương pháp lấy mẫu sữa 30

2.4.2 Phương pháp xác ựịnh bò mắc bệnh viêm vú lâm sàng 30

2.4.3 Phương pháp xác ựịnh bò sữa bị viêm vú cận lâm sàng 30

2.4.4 Phân lập và giám ựịnh vi khuẩn hiếm khắ có trong sữa 31

2.3.5 Kiểm tra tắnh mẫn cảm của các vi khuẩn phân lập ựược từ sữa bò bị viêm vú với một số kháng sinh thường dùng 36

2.4.6 Xử lý số liệu 36

Chương 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 37

3.1 điều tra tình hình chăn nuôi bò sữa và khảo sát tỷ lệ bò mắc bệnh viêm vú dạng lâm sàng tại các hộ chăn nuôi bò sữa thuộc huyện Nghĩa đàn tỉnh Nghệ An 37

3.1.1 Cơ cấu ựàn bò sữa tại huyện Nghĩa đàn tỉnh Nghệ An (2011 Ờ

2013) 37

3.1.2 Cơ cấu giống ựàn bò sữa tại huyện Nghĩa đàn 37

3.1.3 Kết quả khảo sát tỷ lệ bò sữa mắc bệnh viêm vú dạng lâm sàng tại huyện Nghĩa đàn 38

3.1.4 Kết quả về số lượng và tỷ lệ bò sữa bị bệnh viêm vú theo mùa dạng lâm sàng 40

3.1.5 Tỷ lệ bò sữa bị viêm vú theo phương pháp vắt sữa 42

3.2 Kết quả áp dụng phương pháp CMT Ờ Califorlia Mastitis Test trong chẩn ựoán sớm bò bị viêm vú cận lâm sàng 42

3.3 Phân lập vi khuẩn hiếu khắ có trong các mẫu sữa bò bị viêm vú 45

3.3.1 Kết quả phân lập xác ựịnh số giống vi khuẩn hiếu khắ có trong một mẫu sữa bò bình thường và sữa bò bị viêm vú 45

3.3.2 Kết quả xác ựịnh tần xuất và tỷ lệ xuất hiện các loại vi sinh vật khuẩn hiếu khắ thường gặp trong mẫu sữa bò bình thường và mẫu sữa bò bị viêm vú 48

3.4 Kết quả kiểm tra khả năng mẫn cảm của các vi khuẩn phân lập ựược từ sữa bò bị viêm vú với một số thuốc kháng sinh thương dùng 51

3.4.1 Kiểm tra tắnh mẫn cảm và tắnh kháng thuốc của vi khuẩn Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, E.coli với các thuốc kháng sinh thường dùng 51

3.5 Kết quả ựiều trị thử nghiệm bệnh viêm vú bò 60

3.6 Quy trình phòng bệnh viêm vú bò sữa 61

KẾT LUẬN VÀ đỀ NGHỊ 63

Kết luận 63

đề nghị 64

TÀI LIỆU THAM KHẢO 69

DANH MỤC BẢNG

STT Tên bảng Trang

Bảng 3.1 Cơ cấu ựàn bò sữa tại Huyện Nghĩa đàn (2011 Ờ 2013) 37

Bảng 3.2 Cơ cấu giống của ựàn bò sữa 38

Bảng 3.3 Tỷ lệ bò mắc bệnh viêm vú lâm sàng qua các năm 39

Bảng 3.4 Kết quả về số lượng và tỷ lệ bò sữa bị bệnh viêm vú theo mùa 40

Bảng 3.5: Tỷ lệ bò sữa bị viêm vú theo phương pháp vắt sữa 42

Bảng 3.6: Kết quả tỷ lệ bò mắc bệnh viêm vú cận lâm sàng và mức ựộ dương tắnh với CMT 43

Bảng 3.7: Số giống vi khuẩn hiếu khắ có trong một mẫu sữa bò bình thường và sữa bò bị viêm vú 46

Bảng 3.8: Tần xuất xuất hiện các loại vi khuẩn hiếu khắ thường gặp trong các mẫu sữa khi phân lập và giám ựịnh 49

Bảng 3.9: Kết quả kiểm tra khả năng mẫn cảm với kháng sinh của 9 chủng Streptococcus phân lập ựược từ mẫu sữa bò bị viêm vú 52

Bảng 3.10: Kết quả kiểm tra khả năng mẫn cảm với kháng sinh của 11 chủng Staphylococcus phân lập ựược từ các mẫu sữa bò bị viêm vú. 55

Bảng 3.11: Kết quả kiểm tra khả năng mẫn cảm với kháng sinh của 8 chủng E.coli phân lập từ mẫu sữa bò bị viêm vú 57

Bảng 3.12 So sánh khả năng mẫn cảm của các vi khuẩn Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, E.coli phân lập ựược từ sữa bò bị viêm vú với các thuốc kháng sinh 59

Bảng 3.13 Kết quả ựiều trị bệnh viêm vú lâm sàng trên bò sữa 60

DANH MỤC HÌNH

STT Tên hình Trang

Hình 1.1: Giải phẫu tuyến vú 6

Hình 1.2: Cấu tạo nang tuyến 6

Hình 1.3: Cấu tạo núm vú 6

Hình 1.4 Chu kỳ tiết sữa ở bò sữa 7

Hình 1.5 Phản xạ tiết sữa ở bò 8

Hình 3.1 : Viêm vú sữa có tính chất bã ñậu 40

CÁC CHỮ VIẾT TẮT TRONG ðỀ TÀI

OS ( Other Streptococci) Streptococcus khác

CMT ( California Mastitis Test) Phương pháp CMT

ắt khó khăn cả về chất lượng con giống, qui trình kỹ thuật, trong ựó phải kể ựến khả năng phòng chống bệnh cho ựàn bò sữa Một trong những bệnh thường xuyên gây khó khăn cho ngành chăn nuôi bò sữa ở Việt Nam ựang phải ựối mặt

ựó là bệnh viêm vú

Nghệ An, trong ựó nổi bật là huyện Nghĩa đàn với lợi thế của vùng ựịa hình bán sơn ựịa, diện tắch rộng, thuận tiện cho việc trồng cỏ và chăn thả ựàn bò Nghệ An còn có nhiều sông lớn chảy qua ựủ cung cấp nguồn nước nên rất thuận lợi cho phát triển chăn nuôi bò sữa Hiện còn có nhiều hộ nông dân ựã tắch lũy ựược nhiều bài học kinh nghiệm trong chăn nuôi bò sữa của nhiều năm nay Với những lợi thế như trên kể cả về ựiều kiện thự nhiên, khắ hậu cũng như kinh nghiệm ựã có, nên gần ựây tỉnh Nghệ An ựã mạnh dạn ựầu tư và còn có nhiều chắnh sách ựể hỗ trợ về kinh tế cho người chăn nuôi bò sữa của tỉnh trong ựó có huyện Nghĩa đàn như: tập trung qui hoạch lại vùng phát triển chăn nuôi; Các bộ khuyến nông mở các lớp tập huấn, hỗ trợ về công tác ựào tạo nghề, chuyển giao các quy trình kỹ thuật chăn nuôi bò sữa ựến từng hộ gia ựình; Các hộ chăn nuôi

bò sữa còn ựược hỗ trợ tiền vốn ựể mua giống bò, cải tạo, nâng cấp và sửa chữa

ty sản xuất, chế biến sữa ựầu tư xây dựng những nhà máy ựảm bảo việc tiêu thụ sữa cho nông dân, mở rộng phát triển vùng nguyên liệu, ựảm bảo chăn nuôi phát triển bền vững và mang lại hiệu quả kinh tế cao

Tuy nhiên trong chăn nuôi bò sữa hiện nay, việc chăm sóc nuôi dưỡng chúng theo ựúng quy trình kỹ thuật, ựặc biệt các quy trình vệ sinh phòng bệnh còn ựang bị hạn chế nhiều nhất là các gia trại mới ựầu tư thêm ựể mở rộng sản xuất Hiện trên ựịa bản, các bệnh về nội khoa, ngoại - sản khoa, ký sinh trùng cũng còn xảy ra khá phổ biến làm ảnh hưởng không nhỏ ựến hiệu quả chăn nuôi Một trong những bệnh gây thiệt hại lớn ựến ngành chăn nuôi bò sữa Việt Nam nói chung, ở huyện Nghĩa đàn nói riêng là bệnh viêm vú Bệnh xảy ra gây thiệt hại lớn về kinh tế, làm giảm sản lượng, chất lượng sữa Nếu không phát hiện kịp thời, việc ựiều trị khá tốn kém, nhiều khi còn phải loại thải Bên cạnh ựó, khi bò

bị viêm vú dạng tiềm ẩn còn có khả năng gây kế phát các bệnh truyền nhiễm nguy hiểm hay các bệnh sản khoa làm ảnh hưởng ựến hiệu quả kinh tế, gây tâm

lý lo lắng bất ổn trong ựầu tư sản xuất mở rộng

để giúp người chăn nuôi hiểu rõ hơn về bệnh viêm vú của bò sữa tại huyện, chúng tôi ựã tiến hành thu thấp số liệu, ựiều tra thực trạng bệnh của ựịa phương, thông qua ựó ta có thể tìm hiểu thêm về nguồn gốc và các nguyên nhân gây bệnh, ựâu là nguyên nhân chắnh, trên cơ sở ựó ựề ra qui trình phòng trị bệnh có hiệu quả kinh tế cao được sự phân công của khoa và hướng dẫn trực tiếp của PGS.TS Bùi Thị Tho, Bộ môn Nội Ờ Chẩn - Dược, Khoa Thú y, Trường đại học Nông nghiệp

Hà Nội, Chúng tôi tiến hành thực hiện ựề tài:

ỘNghiên cứu thực trạng bệnh viêm vú bò sữa ở huyện Nghĩa đàn, tỉnh Nghệ An và biện pháp phòng trịỢ

2 Mục tiêu nghiên cứu của ựề tài

Từ các kết quả ựiều tra, chúng tôi ựã xác ựịnh ựược thực trạng bệnh viêm

vú bò sữa trên ựàn bò sữa tại các hộ chăn nuôi bò sữa thuộc huyện Nghĩa đàn tỉnh Nghệ An

Từ những thắ nghiệm tại phòng thắ nghiệm trọng của Bộ Nông Nghiệp ựặt tại khoa thú y: phân lập, giám ựịnh vi khuẩn hiều khắ có trong sữa viêm, trên cơ

sở ñó sẽ xác ñịnh ñược các vi khuẩn gây bệnh chính

Từ kết quả làm kháng sinh ñồ với 3 loại vi khuẩn hiếu khí có trong sữa viêm sẽ chọn những thuốc còn ñộ mẫn cảm cao với vi khuẩn bố trí các thử nghiệm ñiều trị bệnh trên lâm sàng

3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của ñề tài

Từ các kết quả chính của ñề tài như: ñiều tra thực trạng bệnh, phân lập, giám ñịnh vi khuẩn, làm kháng sinh ñồ ñể chọng thuốc ñiều trị bệnh, Kết quả của ñề tài sẽ giúp nhà chăn nuôi chọn thuốc và các phác ñồ ñiều trị cụ thể vừa mang lại hiệu quả kinh tế cao vừa khắc phục ñượng hiện tượng kháng thuốc của

vi khuẩn

Kết quả của ñề tài giúp người chăn nuôi thực hiện ñúng các qui trình chăn nuôi bò sữa, tránh lạm dụng kháng sinh, khống chế ñược hiện tượng kháng thuốc của vi khuẩn gây bệnh ðặc biệt còn chống ñược tồn lưu kháng sinh trong sữa, chống ô nhiễm môi trường do vi khuẩn kháng thuốc và còn ñảm bảo ñược vệ sinh an toàn sữa cho người tiêu dùng

Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

1.1 Tình hình nghiên cứu bệnh viêm vú bò sữa

1.1.1 Tình hình nghiên cứu bệnh viêm vú bò sữa trên thế giới

Bệnh viêm vú bò sữa ñã ñược nghiên cứu từ rất lâu và ñã thu ñược nhiều kết quả

- Về vi khuẩn gây bệnh

Schalm và cs (1976) Cho rằng thành phần ñộc tố chính gây viêm vú hoại

thư của Staphylococcue aures là toxin

Macdoland (1976), thông báo : Các loại vi khuẩn gây bệnh viêm vú chủ

yếu là Streptococcus agalactiac và Streptococcus uberis

Các tác giả Heidrick và Renk (1976), Anri Akita (2002) cho rằng các vi

khuẩn dạng Ecoli có thể gây viêm vú cata mãn tính ở ñàn bò sữa

Theo Wenz và cs (2001) thì Coliforms có vai trò lớn trong các nguyên

nhân gây viêm vú thể cấp tính bò sữa ở Mỹ

1.1.2 Tình hình nghiên cứu bệnh viêm vú bò sữa ở Việt Nam

Bệnh viêm vú bò sữa là vấn ñề ñược toàn thế giới quan tâm Tình trạng bệnh có thể khác nhau ở mỗi quốc gia nhưng chương trình kiểm soát dich bệnh ở các nước thì cơ bản giống nhau ( Anri Akita Kanameda, 2002.)

Ở Việt Nam, bệnh viêm vú bò sữa ñã ñược nghiên cứu từ lâu Nguyễn Ngọc Nhiên (1986), tiến hành phân lập vi khuẩn từ các mẫu sữa bò nghi bị viêm vú

ựã phát hiện thấy các vi khuẩn Streptococcus agalactiac (21,3%):

Staphylococcue aures (27,2%): Ecoli(12,5%): Streptococcus uberis (13,7%)

và Klebsilla (5,1%)

Nguyễn Ngọc Nhiên, Cù Hữu Phú (1996-1997) nghiên cứu chẩn ựoán bệnh viêm vú bò bằng phương pháp CMT ở một số cơ sở chăn nuôi bò sữa thấy tỷ lệ viêm vú phi lâm sàng là 24,8%

Bạch đăng Phong và cs (1995) cho rằng ở Việt Nam có thể có tới 50%

số bò ựang cho sữa mắc bệnh viêm vú thể tiềm tàng

Trịnh Quang Phong (1998) nghiên cứu phương pháp chẩn ựoán nhanh bệnh viêm vú ở bò sữa và biện pháp phòng ngừa thấy 3 dung dịch thử nhanh là: Deterol, Teepol và LSS ( Lauril Sulfata Sodium) có thể thay thế nhau ựể tiến hành chẩn ựoán nhanh bệnh này

Nguyễn Ngọc Nhiên, Cù Hữu Phú (1999) tiến hành phân lập vi khuẩn

gây viêm vú bò sữa thấy Staphylococcue chiếm tỷ lệ 26,8%; Streptococcus chiếm tỷ lệ 38,13%; Ecoli chiếm tỷ lệ 34,1% Các vi khuẩn khác chiếm tỷ lệ

thấp từ 3,16-7,18%

Lưu Quỳnh Hương và Trần Thị Hạnh (2002), kiểm tra 275 mẫu sữa bằng phản ứng CMT phát hiện viêm vú phi lâm sàng của 70 con bò sữa ở 3 ựịa phương lấy mẫu là Ba Vì, đông Anh, Gia Lâm, kết quả cho thấy tỷ lệ dương tắnh cao nhất là ở Gia Lâm (10,5%), đông Anh(7,5%), Ba Vì ( 6%)

1.2 Cấu trúc bầu vú bò sữa

vú thành 4 phần ựộc lập với nhau bầuvú thành 4 phần ựộc lập với nhau

Hình 1.1: Giải phẫu tuyến vú

1.2 Sữa và thành phần của sữa

1.2.1 Quá trình tạo sữa ở bầu vú

Sữa ñược tạo ra từ các nang tuyến Sữa ñược tổng hợp từ các nguyên liệu trong máu Trung bình cứ khoảng 540 lít máu chảy qua hệ thống mạch máu bầu vú thì 1 lít sữa ñược tạo ra

1.2.2 Chu kì tiết sữa

Sau khi ñẻ, tuyến sữa bắt ñầu tiết sữa liên tục cho ñến khi cạn sữa chuẩn bị cho kỳ ñẻ kế tiếp Thời gian ñó gọi là chu kỳ tiết sữa Một chu kỳ tiết sữa ở bò sữa thường kéo dài 10 tháng (305 ngày) Sau chu kì này các tuyến sữa ngừng hoạt ñộng một thời gian ngắn ñể chuẩn bị cho chu kỳ tiếp theo Thời kỳ này gọi là giai ñoạn cạn sữa, thường kéo dài từ 45 -60 ngày

Hình 1.4 Chu kỳ tiết sữa ở bò sữa

(nguồn: www.en.delava.cn)

1.2.3 Phản xạ tiết sữa

Sữa ñược tiết theo cơ chế phản xạ Phản xạ tiết sữa ñược ñiều khiển bởi thần kinh và thể dịch Khi bò nhận ñược các tác nhân kích thích như xoa bóp bầu vú,… thông qua hệ thần kinh các kích thích sẽ ñược dẫn truyền tới vỏ ñại não

Từ ñây sẽ phát các xung thần kinh ñến các cơ quan và hệ thống thể dịch ñể thực hiện việc tiết sữa: như kích thích hệ thống cơ trơn của ống dẫn, bể sữa và tiết oxytocin.

Các tác nhân kích thích bao gồm: Thị giác: nhìn thấy bê, người vắt sữa, máy vắt sữa, chỗ vắt sữa Thính giác: nghe tiếng bê kêu, tiếng máy vắt sữa hoạt ñộng, tiếng xô vắt sữa, tiếng người vắt sữa,… Khứu giác: mùi người vắt sữa, mùi thuốc sát trùng bầu vú Xúc giác: xoa bóp, massage bầu vú

1.3 Bệnh viêm vú bò sữa

1.3.1 Khái niệm về bệnh viêm vú ở Bò sữa

Bệnh viêm vú bò sữa là một trong những bệnh phổ biến gây thiệt hại nghiêm trọng cho ngành chăn nuôi bò sữa không những ở Việt Nam mà ngay

cả ở những nước chăn nuôi bò sữa phát triển, bệnh gây nên do nhiều yếu tố tùy thuộc nguyên nhân: vi khuẩn, thời tiết,…

1.3.2 Phân loại viêm vú bò sữa

Viêm vú bò sữa có 2 dạng là viêm vú lâm sàng và viêm vú cận lâm sàng

1.3.2.1 Viêm vú lâm sàng

Viêm vú lâm sàng là sự nhiễm trùng của bầu vú thể hiện rõ triệu chứng lâm sàng như sự thay ñổi tính chất của sữa (sữa bị vón, loãng, màu sắc và mùi khác thường), hình dạng bầu vú (bầu vú sung huyết, sưng to,…) và một số trường hợp có triệu chứng toàn thân (sốt, kém hay bỏ ăn,…)

Viêm vú lâm sàng ñược phân chia thành các loại sau:

 Theo thời gian

Viêm vú quá cấp tính thường kèm theo triệu chứng toàn thân do nhiễm trùng huyết hoặc nhiễm ñộc huyết bao gồm: xáo trộn hô hấp, tuần hoàn, sốt, biếng ăn, suy nhược, giảm nhu ñộng dạ cỏ, tiêu chảy, mất nước, trường hợp nặng có thể làm chết bò Triệu chứng toàn thân thường xảy ra trước những thay ñổi ở bầu vú và sữa (Quinn và cs., 1994)

* Viêm vú thể cấp tính

Viêm thể cấp tính cũng có ñặc ñiểm là xảy ra ñột ngột Bầu vú viêm có biểu hiện sưng, nóng, ñau ở mức trung bình tới nặng, giảm sản lượng sữa; sữa có chứa sợi huyết, sữa vón cục và các chất tiết bất thường trong tuyến vú (Quinn và cs., 1994) Những dấu hiệu của xáo trộn toàn thân (trở ngại cơ năng) như sốt, suy nhược, biếng ăn và suy yếu Tuy nhiên, những triệu chứng này không nghiêm trọng bằng thể quá cấp tính (Menzies và cs., 2001)

* Viêm vú thể bán cấp tính

ðặc ñiểm của viêm vú lâm sàng bán cấp tính là viêm nhẹ Mặc dù có thể không có thay ñổi nào ở bầu vú nhưng vẫn xuất hiện các chất tiết bất thường từ tuyến vú và sữa có màu khác thường Không có dấu hiệu rối loạn

toàn thân

* Viêm vú thể mạn tắnh

Thường có những ổ mủ bên trong bầu vú, to nhỏ tùy mức ựộ Bầu vú

có thể mềm bình thường nhưng có thể sưng kéo dài trong nhiều ngày, nhiều tháng thậm chắ nhiều năm Bệnh có thể làm cho thùy vú bị xơ cứng hay teo lại Thể bệnh này là hậu quả của việc không phát hiện kịp thời hay ựiều trị

không triệt ựể khi bò bị viêm vú (Quinn và cs., 1994)

Theo tắnh chất viêm

Dựa vào tắnh chất vú viêm lâm sàng, phân làm các loại viêm vú như sau:

- Viêm vú thể thanh dịch: Bầu vú sung huyết, thường hay xảy ra sau

khi bò sinh vài ngày, do vi trùng tấn công vào nơi bầu vú bị xây xát hay do kế phát của quá trình viêm tử cung hay nội mạc tử cung hóa mủ Khi vi trùng theo máu vào sâu trong tuyến vú thì toàn bộ tuyến vú sưng to Sờ nhẹ không ựau nhưng ấn mạnh con vật ựau và phản ứng Lượng sữa của thùy vú viêm giảm rõ, chất lượng sữa lúc ựầu biến ựổi không rõ, sau loãng, lợn cợn Ngoài các triệu chứng cục bộ, có thể bò còn có triệu chứng toàn thân như kém ăn, sốt cao, ủ rủ Bệnh nhẹ thì sau 7 - 9 ngày hiện tượng viêm giảm nhưng dễ trở thành mạn tắnh Khi tổ chức tuyến vú bị tổn thương nghiêm trọng thì bầu vú

có thể bị xơ cứng

- Viêm vú thể cata: Triệu chứng cục bộ không rõ, nhìn bên ngoài không

thấy có thay ựổi nơi bầu vú nhưng lượng sữa giảm Lúc ựầu sữa loãng, khi bệnh tiến triển trong sữa thấy có lợn cợn hay cục vón đôi khi cục sữa vón làm tắc ựầu vú Con vật không có biểu hiện triệu chứng toàn thân

- Viêm vú có mủ: Gồm 2 thể là viêm cata có mủ và viêm vú thể áp- xe

* Thể viêm cata có mủ do vi khuẩn gây bệnh ựa số là Staphylococcus,

ngoài ra còn có Streptococcus, E coli và các vi khuẩn gây mủ khác Ở bò

bệnh, bể sữa, ống tiết sữa, tuyến vú bị viêm làm cho dịch thẩm xuất và mủ chảy vào bể sữa và các ống dẫn sữa Bệnh dễ lây sang bò khỏe

Bệnh có 2 thể cấp tắnh và mạn tắnh

- Cấp tính: Bò sốt cao, ủ rủ, kém ăn Thùy vú bị viêm sưng, ñỏ, nóng, ñau Sữa loãng, màu hồng nhạt, vị ñắng, trong sữa có mủ lợn cợn, hạch lâm

ba vú sưng to

- Mạn tính: sau 3 - 4 ngày tiếp theo, hiện tượng viêm giảm dần, nhưng sữa vẫn loãng, nhớt màu vàng nhạt hay màu vàng do lẫn mủ Cuối cùng tuyến vú bị teo và các tổ chức tăng sinh làm tắc ống dẫn sữa Do ñó, ñiều trị không có kết quả và nếu ñể bệnh kéo dài sẽ lây sang các thùy vú khác Thường trường hợp này phải xử lý thùy vú cho teo ñi và làm cho vú mất khả năng tiết sữa

* Viêm vú thể áp – xe: Một phần của thùy vú viêm sưng ñỏ, da căng,

nóng, ñau, ñôi khi sờ có cảm giác lùng nhùng Nếu bọc mủ nông thì hiện tượng viêm rất rõ, nếu có nhiều bọc mủ làm bề mặt thùy vú viêm có nhiều chỗ phồng lên Nếu bọc mủ ở sâu bên trong thì khó nhận diện Lượng sữa giảm, khi tuyến sữa bị nhiễm mủ thì sữa tiết ra có lẫn mủ, có khi bầu vú vỡ

mủ Khi bọc mủ to, con vật ñi lại khó khăn và có triệu chứng toàn thân, hạch

vú sưng to, có thể gây ra huyết nhiễm mủ hay lan sang các cơ quan nội tạng khác như phổi, thận,

- Viêm vú có máu: Bệnh gây các tổ chức của ống tiết sữa bị xuất huyết

Thường gặp ở bò sau khi sanh vài ngày Thú sốt ñến 41oC, ủ rủ, kém ăn hay

bỏ ăn Vú viêm sưng rõ rệt, bề mặt xuất hiện những ñám ñỏ Khi vắt sữa, con vật tỏ ra ñau ñớn Sữa loãng, màu hồng hay ñỏ như máu

- Viêm vú hoại tử: Bò có những dấu hiệu toàn thân rất rõ ràng: sốt, suy

nhược do nhiễm trùng huyết, biếng ăn,…Lúc ñầu, bầu vú viêm sưng rất lớn, ñỏ

và bò tỏ ra rất ñau Sau ñó, bề mặt bầu vú xuất hiện những ñám màu tím hồng, hạch lâm ba vú sưng to Cuối cùng, những ñám này vỡ ra, ấn tay vào có dịch màu hồng hay mủ chảy ra Sữa viêm lẫn mủ, máu, các mảnh mô vú hoại tử và

có mùi thối

1.3.2.2 Viêm vú cận lâm sàng

Theo Quinn và cs.,1994; Gianneechini và cs., 2002, viêm vú cận lâm sàng là sự nhiễm trùng không lộ rõ của bầu vú, không có triệu chứng ñặc

trưng Viêm vú cận lâm sàng ñược phát hiện bởi sự gia tăng tổng số bạch cầu trong sữa hoặc bằng phương pháp gián tiếp khác như phương pháp thử CMT (California Mastitis Test), nuôi cấy vi sinh vật, tính dẫn ñiện của sữa,

sự thay ñổi nồng ñộ các enzyme,…Thường tỉ lệ viêm vú cận lâm sàng nhiều hơn viêm vú lâm sàng và luôn luôn xảy ra trước dạng viêm vú lâm sàng Viêm vú cận lâm sàng làm giảm sản lượng sữa cũng như ảnh hưởng ñến chất lượng sữa, có thể chuyển thành dạng viêm vú lâm sàng (Barkema,

và cs., 1998)

Viêm vú ñược gọi là cận lâm sàng khi chưa có dấu hiệu viêm trên lâm sàng, nghĩa là số lượng tế bào bản thể trong sữa cao nhưng không có bất kỳ sự

bất thường rõ ràng nào trong sữa hoặc bầu vú (Radostits và cs., 2002)

Một số biến chứng của bệnh Viêm vú

* Xơ cứng bầu vú

Các chức năng sinh lý bị ảnh hưởng và bầu vú bị cứng lại, còn tổ chức tuyến vú bị teo ñi Sờ vào thấy cứng hoặc ấn mạnh tuyến vú thấy những cục cứng hoặc cứng toàn bộ Sau khi vắt sữa thể tích thùy vú không giảm Lượng sữa giảm, nếu sơ cứng một phần tuyến vú thì sữa loãng màu xám và có cục vón lợn cợn

* Bầu vú hoại tử

Bầu vú thối loét và phân hủy do vi khuẩn gây hoại tử xâm nhập vào tuyến vú qua ñường tiết sữa, vết thương hoặc mạch máu Lúc ñầu bề mặat bầu

vú có những ñám màu hồng tím, cứng, ñau, về sau loét và hoại tử có mủ toàn

bộ thùy vú sưng to, ấn vào thấy nước hồng chảy ra Hạch lâm ba vú sưng to, ñau, có triệu ñau, có triệu chứng bại huyết

1.3 3 Những yếu tố có ảnh hưởng ñến bệnh viêm vú

bò giảm theo tuổi và cơ vòng ñầu núm vú giảm sự ñàn hồi

 Giai ñoạn cho sữa

Theo trích dẫn Phạm Bảo Ngọc (2002), viêm vú lâm sàng hay xảy ra

ở giai ñoạn ñầu của chu kỳ cho sữa, do lúc này sức ñề kháng của bò giảm Qua khảo sát, các tác giả ghi nhận 30% viêm vú lâm sàng xảy ra trong những tháng ñầu tiên của chu kỳ cho sữa Menzies và cs., 2001 nhận xét rằng sự tăng áp lực xoang vú do tồn ñọng sữa có thể là nguyên nhân gây rò

rỉ sữa, từ ñây vi khuẩn xâm nhập qua kênh vú và nhân lên trong tuyến vú Ngoài ra, việc tăng thể tích sữa trong bầu vú làm cho nồng ñộ những yếu tố

ñề kháng tự nhiên của cơ thể giảm như lactoferin, immunoglobulin, tế bào thực bào (Sandholm và cs., 1995)

Thời kỳ ñầu của giai ñoạn cạn sữa có nhiều yếu tố bất thường tác ñộng lên tuyến vú Do sữa không ñược vắt trong khi tuyến vú vẫn tiếp tục tiết sữa làm cho bầu vú rất căng, bò khó chịu Những nghiên cứu cho rằng thời kỳ ñầu cạn sữa và khoảng 2 - 3 tuần trước khi sinh ước tính có 40 - 50% tổng số thùy

vú bị nhiễm trùng mới (Waldner, 2002)

Ruegg và cs.,(2002) cho rằng ở giai ñoạn cạn sữa, viêm vú xảy ra cao nhất vào những tuần lễ ñầu tiên và trong 15 ngày trước khi sinh Những tuần ñầu tiên của thời kỳ cạn sữa bầu vú nhạy cảm với sự nhiễm trùng gấp nhiều lần so với thời kỳ cho sữa trước ñó và hơn 80% sự nhiễm trùng ở kỳ cạn sữa tồn tại ñến khi sinh

 Cấu trúc bầu vú

Cấu trúc của bầu vú có liên quan ñến sự xâm nhập của những mầm bệnh gây viêm vú Sự mất cân bằng bầu vú là một trong những tác nhân của nguy cơ gây viêm vú Một bầu vú ñược ñịnh nghĩa là cân ñối khi tất cả 4 núm

vú ñều nằm trên cùng một mặt phẳng nằm ngang

Shearer và cs., (1992) cho biết những vết nứt, tổn thương ở vú thường

bị nhiễm vi khuẩn Staphylococcus aureus và Streptococcus dysgalactiae

Theo Menzies và cs., (2001) những núm vú có ñường kính lớn dễ dẫn ñến viêm vú lâm sàng Những núm vú quá lớn không vừa với lỗ máy vắt sữa làm tăng nguy cơ bầm dập khi vắt sữa Những núm vú hình lăng trụ, phạm vi tác ñộng của máy vắt sữa lớn hơn và tỉ lệ bị bệnh viêm vú cũng cao hơn núm vú

hình nón Những núm vú quá dài dễ bị xây xát do va chạm (Saloniemi, 1995)

Những bò có ñầu mút núm vú dạng nhọn hay tròn ít bị viêm vú hơn những bò

có dạng lõm vào như cái phễu, vì ñầu núm vú lõm vào thường xuyên có một giọt sữa ở ñầu mút của núm vú sau khi vắt sữa và ñó là ñiều kiện thuận tiện cho việc vấy nhiễm vi sinh vào vú

ðường kính của lỗ núm vú hay kênh vú và sức co (tính ñàn hồi) của cơ vòng ñầu vú ảnh hưởng ñến tốc ñộ vắt sữa Khi tốc ñộ vắt sữa tăng lên thì nguy

cơ nhiễm trùng vú cũng tăng (Menzies và cs., 2001)

Sự ñóng lại của lỗ núm vú có liên quan mật thiết với bệnh viêm vú, cơ vòng ñầu núm vú bị hở là một nguy cơ gia tăng số lượng tế bào bản thể trong sữa so với những thùy vú không hở cơ vòng ñầu núm vú và là nguy cơ dẫn ñến viêm vú lâm sàng trên bò sữa

Dingwell (2004) nghiên cứu 300 bò sữa ở Canada sau khi cạn sữa ñã ghi nhận 23% lỗ núm vú hình thành nút keratin ñóng lại trong tuần ñầu tiên của giai ñoạn cạn sữa, 23% số núm vú vẫn còn mở sau 6 tuần Ở mức ñộ toàn ñàn, 68%

số núm vú ñóng kín lại trong 3 tuần ñầu Tuy nhiên, có 3 - 5% số núm vú không bao giờ ñóng kín trong suốt thời gian khô sữa Những bò có ít nhất một núm vú

hở thì tỉ lệ nhiễm trùng vú cao gấp 2,5 lần so với những bò không có núm vú hở

Menzies và cs., 2001cho rằng những thùy vú sau của bầu vú nhạy cảm với sự nhiễm trùng hơn những thùy vú trước do diện tích da bề mặt quá lớn nên dễ bị lạnh, chấn thương hoặc bị vấy nhiễm vi khuẩn từ phân và sản dịch

2.3.3.2 Nguyên nhân vi sinh vật

ðây là nhóm nguyên nhân chính yếu gây bệnh viêm vú bò sữa, bao gồm nhiều tác nhân

 Vi khuẩn

Theo Schalm và cs., 1971, có trên 130 loài vi khuẩn khác nhau gây viêm vú

bò sữa Dựa ào nguồn gốc khu trú và tính chất lây lan, chúng ñược phân chia thành hai nhóm lớn gồm nhóm mầm bệnh gây viêm vú truyền nhiễm và nhóm

mầm bệnh gây viêm vú môi trường (Blowey và cs., 1995)

- Nhóm vi khuẩn gây bệnh viêm vú truyền nhiễm

ðây là nhóm mầm bệnh sống kí sinh và nhân lên trong cơ thể vật chủ, ñặc biệt là trong tuyến vú, xung quanh núm vú và bầu vú bị tổn thương Chúng thường gây viêm vú dạng cận lâm sàng, làm tăng số lượng tế bào bản thể trong sữa, số ít biểu hiện dấu hiệu lâm sàng Nhóm này phổ biến nhất là

Staphylococcus aureus và Streptococcus agalactiae, ngoài ra còn có Mycoplasma spp và Corynebacterium bovis Chúng lây lan từ bò này sang bò

khác trong quá trình vắt sữa thông qua máy vắt sữa, tay người vắt sữa, khăn lau

vú hoặc truyền lây do bê con bú, (Radostits và cs., 2002)

- Nhóm vi khuẩn có nguồn gốc từ môi trường

Bao gồm những loài Staphylococcus khác, Streptococcus uberis, S

dysgalactiae, coliforms, Pseudomonas spp,… Những vi khuẩn này sống ở

lông, da bò và ngoài môi trường

Badinand (1999) phân chia mầm bệnh theo mức ñộ gây bệnh của vi

sinh vật ra làm các nhóm: nhóm gây bệnh chính (nặng) gồm S aureus, S

agalactiae, S dysgalactiae, S uberis, E coli, Klebsiella spp và Mycoplasma

spp.; nhóm hiếm gặp gồm Actinomyces pyogenes, Bacillus cereus, Norcadia,

Candida; nhóm gây bệnh nhẹ gồm Staphylococcus có phản ứng coagulase âm

tính (Coagulase-negative Staphylococcus - CNS), các loại Streptococcus khác (OS), Corynebacterium bovis, và Bacillus

• Họ vi khuẩn Staphylococcaceae

Gồm các vi khuẩn G (+), phản ứng catalase (+) ðây là vì khuẩn thường xuyên phân lập từ bò viêm gian tuyến sữa Trong ñó

Staphylococcus aureus ñược coi là một trong những nguyên nhân chủ yếu

gây viêm vú bò sữa

+ ðặc tính nuôi cấy và sinh hóa:

Khuẩn lạc của Staphylococcus gây bệnh phát triển trên môi trường

thạch thường có màu trắng sứ hoặc vàng da cam Màu vàng da cam là do sự biến màu của chất Carotenoid

Các khuẩn lạc vàng có hoạt tính sinh hóa và khả năng gây bệnh lớn trong môi trường nước thịt sau 24h nuôi cấy hình thành vẩn mây, có cặn nhầy

ở ñấy

Staphylococcus aureus gây dung huyết trên thạch máu với vòng dung

huyết kép (double haemolysis) gồm phần dung huyết (α) gây dung giải hồng cầu thỏ ở 370C ðây là một loại ñộc tố có bản chất protein, bền với nhiệt ñộ

Là một kháng nguyên hoàn toàn, gây hình thành kháng thể kết tủa và trung hòa Dưới tác dụng của Focmol và nhiệt ñộ nó biến thành giải ñộc tố có thể dùng làm vaccin

Dung huyết tố (β) gây dung giải hồng cầu người, kém ñộc hơn dung huyết alpa

Dung huyết tố gama(γ): gây dung giải hồng cầu người, thỏ và cừu

- Khuẩn tố diệt bạch cầu (Leucocidine):

Dưới tác dụng của ñộc tố này bạch cầu mất tính di ñộng, mất hạt và nhân bị phá hủy Giữ vai trò quan trọng trong cơ chế sinh bệnh của của tụ cầu

Các ezym

Men ñông huyết tương (Coagulase): là một protein bền với nhiệt, có tính kháng nguyên yếu Men này là một yếu tố gây ñông vón huyết tương

trong tĩnh mạch và gây nên nhiễm khuẩn huyết Men ñông huyết tương còn có tác ñộng trực tiếp lên fibrinogen, chất này gắn vào vi khuẩn tạo thành một loại

vỏ xung quanh vi khuẩn giúp cho vi khuẩn chống lại hiện tượng thực bào

Men làm tan huyết (Fibrinolysine hay staphylokinase)

Ngoài ra còn có một số men khác như Deoxyribonuclease, men hyaluronidase các men này có tác dụng thủy phân axit deoxyribonucleic, axit hyaluronic và men pennicilinase dưới tác dụng của men này làm peniciline mất tác dụng

Sức ñề kháng

Tụ cầu có sức ñề kháng tốt ở nơi khô ráo hay ñóng băng, có thể sống ñược trên 200 ngày Axits phenic 3% - 5% diệt vi khuẩn trong 3-5 phút Formol 1% diệt vi khuẩn trong 1h Tụ cầu có sức ñề kháng kém với nhiệt ñộ, hóa chất Ở nhiệt ñộ 700C tụ cầu chết trong 1giờ, Ở 800c chết trong 10- 30 phút, với 1000C chết trong vài phút

Họ vi khuẩn Streptococaceae

Là các vi khuẩn G (+), phản ứng Catalase âm tính

Trong họ này, các chủng Streptococcus agalactiae, Streptococcus

dysgalactiea, Streptococcus uberis ñược coi là nguyên nhân chủ yếu gây viêm

vú ở bò Streptococcus agalactiae gây viêm vú dạng cấp tính, mạn tính với

370C,vi khuẩn hình thành các khuẩn lạc ñường kính 1mm tròn, trơn, bóng láng ( khuẩn lạc dạng S) Môi trường nước thịt, (pH = 7,6-7,8) vi khuẩn mọc

tốt có chuỗi dài, lớp trên môi trường trong suốt, lớp dưới có cặn, lắc thì ñục

ñều Trong thạch hay huyết thanh ñông khuẩn lạc trắng nhạt Streptococcus

không sản sinh Indole và H2S Một số chủng Streptococcus có khả năng dung

huyết, các yếu tố dung huyết gồm: dung huyết tố alpha (β) tạo nên vòng dung huyết không hoàn toàn bao quanh khuẩn lạc: dung huyết tố gram(γ ) tạo thành vùng dung huyết hẹp không hoàn toàn, màu xanh bao quanh một vùng các tế bào bị phân giải hoàn toàn

+ ðặc tính sinh vật hóa học: lên men glucose, Lactose, Saccarose, Trehalose, Salixin

+ Sức ñề kháng: trong không khí chuồng nuôi vi khuẩn tồn tại hàng tháng Vi khuẩn thường bị diệt 56 0C trong 30 phút Các hóa chất thông thường diệt ñược vi khuẩn trong ñiều kiện không có ánh sáng vi khuẩn sống vài tuần

ðặc ñiểm gây bệnh: các vi khuẩn cư trú ở da, hạch amidan, phân, ñường niệu, có thể lây truyền qua máy vắt sữa, khăn lau vú và các dụng cụ khác

Vi khuẩn E.coli

+ Hình thái: là trực khuẩn hình gậy gắn, kích thước (0,5-1) × (2-3)µm

Di ñộng hoặc không di ñộng, không hình thành nha bào, một vài chủng có thể

có giáp mô, bắt màu G (-)

ðặc tính nuôi cấy: trên môi trường MacConkey hình thành khuẩn lạc hồng và cả trên môi trường SS Vi khuẩn hình thành khuẩn lạc tím ñen ở môi trường EMB, PH thích hợp là 7,4 Vi khuẩn hoặc hiếu khí hoặc yếm khí tùy tiện Ở môi trường nước thịt sau 24 giờ nuôi cấy nhiệt ñộ 370C thì vi khuẩn hầu hết là di ñộng Một số chủng có khả năng gây dung huyết β ở môi trường thạch máu

+ ðặc tính sinh hoá: Lên men sinh hơi glucose, galactose, lactose, mantose, arbinose, xylose, manitol Không lên men: dextrin, amidon, inositol Phản ứng idole dương

+ Sức ñề kháng thường bị diệt khi bị hấp ướt ở 1210C trong 15 phút Một vài chủng chịu ñược nhiệt ñộ khá tốt kể cả thuốc sát trùng

+ Tính gây bệnh: Ecoli là trực khuẩn G (-) gây viêm vú quan trọng nhất Nhiễm trùng Ecoli thường gây sưng tuyến vú, có các dịch nhầy lẫn trong sữa Sự hấp thu nội ñộc tố vào máu dẫn ñến sốt cao, suy nhược, giảm bạch cầu, hạ ñường huyết kéo dài, trong trường hợp nghiêm trọng có thể dẫn ñến sốc và chết

* ðường xâm nhiễm vi khuẩn gây viêm vú

Theo Badinand (1999), vi khuẩn gây viêm vú có thể xâm nhập vào vú qua các ñường sau:

- Theo ñường hướng xuống

Vi khuẩn xâm nhập vào cơ thể bằng ñường máu hoặc ñường bạch huyết

và ñịnh vị ban ñầu ở một vài mô và cơ quan ñích Sau ñó từ những nơi này chúng sẽ sinh sản và phân tán ñến vú Những vi khuẩn này cũng ñược sinh sản trong ñường máu hoặc ñường bạch huyết

- Theo ñường hướng lên

ðây là trường hợp vi khuẩn từ môi trường xâm nhiễm vào tuyến vú qua ống dẫn sữa của núm vú

- Theo ñường da tổn thương

Do có sự tổn thương của da trên thùy vú hoặc các núm vú, sự nhiễm trùng xảy ra và lan dần ñến các phần của tuyến vú

1.3.3.3 Nguyên nhân do ngoại cảnh

 Thời tiết

Mỗi mùa trong năm thích hợp cho sự phát triển của một số nguyên nhân gây bệnh viêm vú khác nhau Những nghiên cứu của tác giả Wilson và cs., (1997) khảo sát trên những ñàn bò sữa vùng Wiscosin (Mỹ) ñã kết luận tỉ

lệ bò bị bệnh viêm vú ở mùa hè và mùa ñông cao hơn so với mùa xuân và

mùa thu Ở New York, bệnh viêm vú lâm sàng do Mycoplasma xảy ra thường

xuyên ở mức ñộ cao vào những tháng mùa ñông Bệnh bắt ñầu từ cuối thu,

ñỉnh cao là tháng giêng và giảm xuống vào giữa mùa xuân (Gonzalez và cs., 2003) Ở những nước thuộc bắc bán cầu, vào mùa ñông, vú bò thường bị nứt

nẻ do thời tiết giá lạnh và khô Từ những vết nứt này, vi khuẩn môi trường

cũng như vi khuẩn truyền lây ñặc biệt là Staphylococcus aureus và

Streptococcus agalactiae nhân lên và xâm nhập vào tuyến vú trong thời gian

vắt sữa gây nhiễm trùng bầu vú

 Phương thức chăn nuôi

Bệnh viêm vú xảy ra nhiều trên bò trong giai ñoạn nuôi nhốt suốt trong chuồng hơn là trong giai ñoạn chăn thả trên ñồng cỏ Trong nuôi nhốt mà bò bị cột xích thì vết thương ở núm vú cao 2 - 5 lần so với nuôi nhốt mà bò ñược thả

tự do (Badinand, 1999)

 Chuồng trại

Cũng theo Badinand, 1999 chuồng trại chật hẹp, nhất là nuôi nhốt tự do mật ñộ bò quá lớn, nền chuồng trơn trợt hay vách ngăn chuồng quá ngắn dễ dẫn ñến gây tổn thương vú làm gia tăng bệnh viêm vú

* Chất ñộn chuồng

Chất ñộn chuồng là nơi cư trú chủ yếu của vi khuẩn họ Enterobacteriaceae (E coli, Enterobacter spp., Klebsiella), nhóm streptococci (S uberis, S

faecalis, S faecium, S bovis) Chất ñộn chuồng thường xuyên ẩm ướt là ñiều

kiện làm bệnh viêm vú gia tăng (Badinand, 1999)

* Ánh sáng

Không ñủ ánh sáng ảnh hưởng ñến quá trình vệ sinh bầu vú và kiểm soát toàn bộ thời gian vắt sữa, những tổn thương nhỏ trên bầu vú khó ñược phát hiện ñể can thiệp kịp thời (Manninen , 1995)

* ðộ thông thoáng

Ẩm ñộ cao trong chuồng bò và gió lùa làm tăng sự nhạy cảm của bò ñối với bệnh viêm vú Sự ẩm ướt của bầu vú từ sàn chuồng ướt hoặc do vệ sinh bầu vú thường xuyên cộng với gió lùa làm mất nhiệt của da bầu vú và giảm lượng máu tuần hoàn làm sức ñề kháng của bầu vú giảm (Manninen, 1995)

 Dinh dưỡng

Smith và cs., (2002) cho biết có mối liên quan giữa khẩu phần ăn với tỉ

lệ mắc bệnh viêm vú Khẩu phần bò cho sữa cần cung cấp ñủ và cân bằng về năng lượng, protein, béo, chất xơ, khoáng (ñồng, selenium, sắt), vitamin như vitamin A, E, C, D,… và β-caroten Thiếu những loại khoáng và vitamin này,

bò giảm số lượng tế bào bạch cầu, giảm khả năng ñáp ứng miễn dịch dẫn ñến tăng tính nhạy cảm với những nguyên nhân gây viêm vú Trong một nghiên cứu trên những ñàn bò ở New York, Goff và cs., (1997) ñã xác ñịnh có sự liên quan rất mật thiết giữa bệnh sốt sữa (thiếu calci và magnésium huyết) với bệnh viêm vú Những bò bị sốt sữa có tỉ lệ viêm vú cao hơn gấp 8,1 lần so với

bò bình thường, sự phát triển bệnh viêm vú do coliforms cũng cao hơn Oltenacu và cs (1994) khảo sát ở Thụy ðiển ghi nhận bệnh xê – ton (ketose) huyết làm nguy cơ viêm vú cao gấp 2 lần

Khâu vệ sinh

* Vệ sinh bầu vú: Theo Galton (1982); Gutebock (1984); Schreiner và

cs., (2003) cho rằng mức ñộ vệ sinh của bầu vú ảnh hưởng ñến số lượng và loại vi sinh vật hiện diện trên bề mặt vú và tỉ lệ bệnh viêm vú

* Vệ sinh dụng cụ: Bệnh viêm vú do mầm bệnh truyền lây thường phát

tán trong ñàn thông qua những dụng cụ vắt sữa (Bradley, 2002) Tay người vắt sữa cũng là một yếu tố mang truyền cơ học những vi khuẩn gây viêm vú (Philpot và cs., 1996)

Máy vắt sữa có thể làm lây lan vi khuẩn bằng nhiều ñường khác nhau nếu không thực hiện tốt công tác vệ sinh (Manninen, 1995)

 Kỹ thuật vắt sữa

Badinand (1999); Menzies và cs., (2001) cho biết thời gian vắt sữa và

kỹ thuật vắt sữa ảnh hưởng ñến tình trạng của bầu vú và bệnh viêm vú Thời gian vắt sữa nhanh buộc người vắt sữa phải tăng tốc ñộ hoạt ñộng của máy, nghĩa là phải tăng áp lực hút của máy Kết quả lượng sữa thải xuống bể sữa không kịp và bị tồn ñọng sữa trong ống dẫn sữa, hoặc lực hút quá mạnh gây

tổn thương mơ vú

 Stress

Những yếu tố gây stress là nguyên nhân làm tăng số lượng tế bào bản thể trong sữa bị Heeshen (1975), Saloniemi (1995) cho rằng nhiệt độ tăng cao (trên 25oC), ẩm độ tăng cao (trên 80%) và những mùi hơi thối của phân chuồng là những yếu tố gây stress cho bị Ẩm độ cao cũng làm tăng những nguy cơ xâm nhập của vi sinh vật trong khơng khí đến thùy vú và trong chất độn chuồng ẩm ướt ðiều này dẫn đến sự gia tăng quần thể vi khuẩn trong chất độn chuồng Sự thơng giĩ tốt tạo nên một yếu tố quan trọng cho tất cả các hình thức nuơi trong chuồng, cũng như đảm bảo tiện nghi của bị nhằm hạn chế sự tiếp xúc với vi khuẩn gây bệnh viêm vú

Ngồi ra một số trường hợp khác cũng cĩ liên quan đến bệnh viêm vú

Nghiên cứu ở Thụy ðiển cho thấy nguy cơ viêm vú gia tăng trên những bị bị sĩt nhau, bị sinh đơi, bị rối loạn sinh sản, què chân (Emanuelson và cs., 1993)

1.3.4 Chẩn đốn bệnh Viêm vú

1.3.4.1 Chẩn đốn lâm sàng

Kiểm tra trên lâm sàng bầu vú và tính chất sữa là một trong các yếu tố

để chẩn đốn viêm vú ðây là biện pháp đơn giản và ít tốn kém mà người chăn nuơi cĩ thể thực hiện

Kiểm tra bằng mắt nhìn: Người chăn nuơi quan sát sự đối xứng của các

lá vú gồm 2 lá vú trước (bên phải, trái), 2 lá vú sau (phải, trái); kích thước, hình dạng bầu vú, lá vú, núm vú; phía mặt ngồi da của bầu vú như độ căng, đàn hồi, nhăn nheo, chỗ sưng chứa bọc mủ, máu, mụn cĩc, da sừng hĩa và màu sắc của da bầu vú (đỏ, hồng, trắng bĩng, ); hình dạng các núm vú, đầu núm vú và lổ tiết sữa; sự phát triển hệ thống mạch máu trên bầu vú; tình trạng

và hình dạng của hạch lâm ba vú; kiểm tra các phần phụ như: viêm hạch lâm

ba phía sau bầu vú, nhạy cảm ánh nắng; phần trước bầu vú như phù kiểm tra bên hơng bầu vú như: phần sát đùi nĩng, sưng, da đỏ hay cĩ mủ

Kiểm tra bằng biện pháp sờ nắn bầu vú: sờ nắn bầu vú được thực hiện

khi đã vắt hết sữa trong bầu vú ra, xác định được tình trạng của bầu vú như trạng thái, kích thước đều đặn và rắn chắc bầu vú; tình trạng bên trong ống dẫn sữa của núm vú (sừng hĩa, dầy cứng, mềm mại); xoang sữa dưới gốc núm vú; di động giữa da vú với các phần mềm dưới da vú, xem độ đàn hồi, chắc chắn của da vú; kiểm tra các chùm mơ tuyến vú và các nang, khối u trong bầu

vú, phản xạ đau và nhiệt độ bầu vú; sự thay đổi về hình dáng và kích thước hạch sau vú

Sữa và dịch tiết được kiểm tra trên các cơ sở

- Màu sắc: sữa bình thường cĩ màu trắng, sữa cĩ màu hồng hay đỏ, màu

xanh của mủ khi viêm vú, màu vàng khi viêm vú ở dạng viêm thanh dịch

- Mùi: mùi sữa cĩ mùi đặc trưng dễ chịu và thay đổi khi bị viêm vú

như: mùi trứng thối(vi khuẩn sinh mủ), mùi chua (vi khuẩn yếm khí), mùi

chua của trái cây (vi khuẩn E.coli)

- ðộ nhớt: tăng độ nhớt ở giai đoạn tiết sữa non hay cuối thời kỳ cho

sữa ðộ nhớt thay đổi khi nhiễm trùng trong sữa hay lẫn mủ máu, dịch tiết viêm (mủ lẫn các cục sữa làm mất tính đồng nhất – kiểm tra tia sữa đầu qua cốc lọc màng đen)

- Kiểm tra lượng sữa: giảm nhẹ đến mạnh tùy mức độ viêm vú lâm

sàng hay cận lâm sàng Khi lượng sữa trở lại bình thường là biểu hiện sự hồi phục bệnh

- Kiểm tra tia sữa đầu: Trước khi vắt sữa, người chăn nuơi vắt từ 3 -5 tia sữa đầu vào cốc lọc màng đen để kiểm tra viêm vú

1.3.4.2 Chẩn đốn dựa trên các phản ứng hố lý

 Phát hiện sữa viêm bằng giấy chỉ thị màu

Giấy chỉ thị màu được sử dụng nhằm để xác định 1 hay nhiều lá vú bị viêm, xác định được vị trí cần điều trị ðây là một phương pháp đơn giản cho người sử dụng nhất là người chăn nuơi ít kinh nghiệm dựa trên nguyên tắc thay đổi độ pH của sữa bị bị viêm Hiện nay trên thị trường cĩ nhiều cơng ty sản xuất

giấy chỉ thị màu dùng cho chẩn đốn bệnh viêm vú Một loại giấy chỉ màu tương đối phổ biến là giấy chỉ thị màu cĩ tên Bovivet (cơng ty Kruuse), là loại giấy thấm gồm 4 ngăn để xét nghiệm 4 lá vú Giấy được tẩm bromothymol, nitragine

và đổi màu như sau:

- pH từ 6.0 –7.6: màu xanh bromothymol phân giải thành màu vàng sang xanh

- pH từ 6.4 –6.8: màu nitragine phân giải thành màu vàng sang xanh lục (Sữa bình thường cĩ độ pH từ 6,5 – 6,7)

Chú ý trong kết quả thử sữa:

- Các trường hợp sữa bị thay đổi do sinh lý sẽ bị sai lệch Bị khỏe mạnh cũng cĩ thể thay đổi pH trong sữa theo giai đoạn tiết sữa

- Sữa đầu cĩ tính acid hơn

- Cuối giai đoạn cho sữa thì độ pH của sữa bị cao hơn hay bằng 6,8

- Viêm vú do Streptococcus agalactiae sẽ làm cho sữa chua do chuyển

hĩa đường lactoza thành acid lactic (sẽ cĩ phản ứng âm tính giả)

Thao tác thử nghiệm

- Bĩp bỏ vài tia sữa đầu; sau đĩ, cho tia sữa lên ơ giấy thử Tiếp tục thực hiện cho các núm vú khác

- Kết quả được đọc sau 1 –2 phút:

- Bị khỏe: giấy thử cĩ màu vàng lục (pH 6,5 – 6,7)

- Bị bệnh: giấy thử chuyển từ màu vàng lục sang màu xanh (pH gần bằng 7) Nguyên nhân do lượng đường lactose giảm đi song song với lượng muối kiềm tăng lên trong sữa

- Sự tăng pH trong sữa là dấu hiệu của bệnh viêm vú

 Phương pháp thử cồn

Phương pháp này dựa vào nguyên tắc chất đạm trong mơi trường acid

sẽ bị tủa bởi cồn Cồn được sử dụng là cồn 70-75 độ Tỷ lệ cồn và sữa: 1:1

- Tiến hành: cho 2ml sữa vào 2ml cồn 70 độ chứa trong ống nghiệm, quan sát trên thành ống nghiệm

- Kết quả: Dung dịch ñồng nhất là âm tính (không viêm vú); có mảng bám lợn cợn trên thành ống nghiệm có thể bị viêm vú

 Phương pháp thử nghiệm Blue Methylen (Blue Methylen Test)

Phần lớn các vi sinh vật gây ô nhiễm sữa khi phát triển làm thay ñổi hiệu thế oxy hoá khử Nếu cho chất màu vào sữa chất màu sẽ thay ñổi, tuỳ theo thời gian ñổi màu có thể ước tính ñộ nhiễm vi sinh của sữa

Dung dịch Blue Methylen pha như sau: Blue Methylen 5ml, nước cất vừa ñủ 100cc tạo dung dịch Blue Methylen, ống nghiệm sấy tiệt trùng có nút ñậy, Pipete 10ml và 1ml.Tiến hành thử: thử nghiệm trong ñiều kiện vô trùng, cho vào ống nghiệm 10ml sữa, Blue Methylene 1ml Nút ống lại cẩn thận, lắc nhẹ cho dung dịch trộn ñều sau ñó ñể vào tủ ấm 37oC Sau mổi giờ lắc nhẹ 1 lần và xác ñịnh ñộ mất màu trong thời gian như sau: lúc vừa cho vào tủ ấm, sau 10 phút, sau 1 giờ, sau 3 giờ

- Nếu mất màu trước 15 phút: sữa nhiễm vi sinh rất nhiều

- Nếu mất màu sau 15 phút ñến 1 giờ: sữa bị nhiễm nặng

- Nếu mất màu sau 1 giờ ñến 3 giờ: sữa bị nhiễm nhẹ

- Nếu mất màu sau hơn 3 giờ: sữa ñược coi như ñạt tiêu chuẩn

 Phát hiện sữa viêm bằng thuốc thử CMT (California Mastitis Test)

Nguyên tắc của phướng pháp này là nhằm phát hiện bệnh viêm vú qua

số lượng tế bào bạch cầu trong 1 ml sữa Tỷ lệ xét nghiệm: 1-1 (giữa dung dịch CMT và sữa)

- Thao tác: sau khi vắt sữa rửa sạch núm vú, lấy sữa trên từng lá vú cho

vào khay thử, lấy 2ml lượng vừa ñủ ñể xét nghiệm Bơm 2ml thuốc thử CMT vào khay có chứa 2ml sữa Lắc nhẹ khay kiểm tra ñọc kết quả ngay dựa trên

sự keo nhớt và thay ñổi màu sắc của hổn hợp

Mức ñộ tạo keo nhớt phụ thuộc vào mật ñộ các tế bào bạch cầu trong sữa với các mức ñộ ño lường tình trạng viêm nhiễm Kết quả:

- Bò mạnh khoẻ: dưới 300.000 tế bào/ ml

- Bò bị nhiễm: trên 800.000 tế bào/ ml

Dù theo các tác giả nào để thử, khi đọc kết quả cần các chú ý như sau:

- Kết quả âm tính hay nghi ngờ khi thử CMT thì phải xem xét và cân nhắc cẩn thận Kết quả âm tính cũng khơng cĩ nghĩa hồn tồn là khơng cĩ bệnh

- ðây là phương pháp đọc kết quả cĩ tính chủ quan người đọc và bị ảnh hưởng bởi nhiều yếu tố khác

- Khi để kết quả khá lâu cĩ thể sẽ thấy âm tính giả vì gen trong đĩa bị biến mất

- Sử dụng sữa mới vắt cho kết quả chính xác hơn sữa bảo quản hơn 24 giờ

- Chú ý dụng cụ chứa sữa để thử và yếu tố nhiễm khuẩn bên ngồi gây acid hĩa sẽ làm kết quả âm tính

- Hàm lượng chất béo trong sữa cao ảnh hưởng đến sự chuyển màu đỏ bromocresol Theo Daniel và cs., chứng minh kết quả CMT cịn tùy thuộc vào đàn gia súc đang cĩ hàm lượng chất béo cao hay thấp, từ đĩ sẽ gây phản ứng dương tính hay âm tính

- Số lượng tế bào cĩ thay đổi và dao động nhiều trong chu kỳ cho sữa, thời gian vắt sữa, trạng thái sức khỏe bầu vú và tùy loại vi khuẩn gây bệnh

 Nuơi cấy mẫu sữa

Các mẫu sữa được lấy từ các vú riêng biệt hoặc lấy từ mẫu chung của bốn bầu vú của một cá thể bị ðặc biệt chú ý tới dụng cụ lấy mẫu phải đảm bảo sạch sẽ, tránh nhiễm tạp khuẩn quá trình lấy mẫu phải đảm bảo thao tác kĩ thuật Mẫu đem

về được nuơi cấy trên các mơi trường thích hợp để phân lập vi khuẩn nhằm xác định các vi khuẩn gây viêm vú Ngồi ra phương pháp nuơi cấy mẫu sữa cịn cĩ vai trị đặc biệt quan trọng trong việc đưa ra các phác đồ điều trị hay loại thải bị

 Chẩn đốn dựa vào máy đo điện trở

Nguyên tắc hoạt động của máy là phát hiện sự thay đổi điện trở của sữa

bị khi bị bị bịnh viêm vú cận lâm sàng Khi bị bị viêm vú cận lâm sàng, hàm lượng muối khống trong sữa sẽ tăng lên làm thay đổi điện trở của sữa

- Cách sử dụng:bỏ một lượng sữa nhỏ vào cốc và bấm nút đo và chờ

đọc kết quả hiển thị trên màn hình của thiết bị

- Kết quả: ñiện trở càng thấp khả năng bò bị viêm vú cận lâm sàng càng

cao Bên cạnh ñó tỷ lệ béo trong sữa cũng ảnh hưởng ñến kết quả Mức ñộ

300 là trung bình Thấp hơn là bò bắt ñầu bị viêm vú cận lâm sàng

 Thiết bị ño số lượng tế bào thân (Somatic Cell Counter)

- Nguyên lý hoạt ñộng: Số lượng tế bào thân trong sữa là một vấn ñề ñược quan tâm thường xuyên bởi vì tính chất phức tạp của nó và mối liên hệ của nó với chất lượng sữa, sức khoẻ của bò, khả năng sản xuất Người chăn nuôi bò sữa cần phải biết và hiểu rỏ tầm quan trọng của yếu tố này trong chăn nuôi bò sữa Cơ thể bò sữa là một hệ thống phức hợp nội tại mà cho phép nó có thể bảo vệ cơ thể chống lại nhiều yếu tố bất lợi từ bên ngoài xâm nhập vào, chẳng hạn như các vi trùng gây bệnh Ví dụ, cơ thể nó có khả năng huy ñộng các tế bào “chiến ñấu” ñến bầu vú nếu các vi trùng gây bệnh bắt ñầu xâm nhập vào bộ phận này Các tế bào này chiến ñấu này chính là tế bào thể (tế bào sinh dưỡng hay bạch cầu) sẽ di chuyển ñến các mô, các bộ phận bị nhiễm trùng và bắt ñầu những hành ñộng ñể hạn chế sự nhiễm và tiến ñền tiêu diệt những tác nhân gây nhiễm Tế bào thân ñược trang bị nhiều công cụ ñể thực hiện nhiệm

vụ này của nó

- Máy ño số lượng tế bào thể ðặc ñiểm hoạt ñộng của máy :

+ ðếm trực tiếp trên số lượng tế bào

+ Thời gian thực hiện dưới 45 giây

+ Qui trình tinh chỉnh ñã ñược mặc ñịnh sẵn không phải thực hiện lại ở mỗi lần ño

+ Thao tác trên bàn phím, lưu trữ, tìm kiếm, theo dõi diễn tiến tình hình sức khoẻ của ñàn bò

+ Hoạt ñộng bằng pin và sử dụng ở bất cứ ñâu

1.3.5 Sự ñề kháng kháng sinh của các vi khuẩn gây bệnh

Thế nào là vi khuẩn kháng kháng sinh?

Một vi khuẩn ñược coi là kháng lại một (ñơn kháng – drugs reristance) hay nhiều loại kháng sinh nào ñó cùng một lúc (hiện tượng ña kháng – multy

drugs reristance) nếu sự phát triển của nó không bị ngừng lại khi dùng các kháng sinh ñó trong ñiều trị mà vốn trước ñây chúng rất mẫn cảm

Các kiểu kháng kháng sinh của vi khuẩn

Kháng thuốc giả tức sự kháng thuốc của vi khuẩn không phải do di truyền

- Hệ thống miễn dịch của bệnh nhân bị suy giảm, không ñủ khả năng tiêu diệt các vi khuẩn ñã kháng sinh ức chế

- Vi khuẩn chui sâu vào tế bào, tạo vỏ bọc, không sinh sản và phát triển,

do ñó không chịu tác ñộng của kháng sinh (tuy nhiên khi phân chia sẽ lại chịu tác ñộng của kháng sinh)

- Khi có vật cản, tuần hoàn ứ trệ, kháng sinh không thấm ñược vào ổ viêm nên không tác ñộng vào vi khuẩn ñược

Kháng thuốc thật

- Kháng thuốc tự nhiên: Là tính kháng thuốc vốn có của một số vi khuẩn

ñối với một số kháng sinh Ví dụ các vi khuẩn Gram âm luôn kháng vancomycin và penicillin

- Kháng thuốc thu ñược: là kháng thuốc do biến ñổi di truyền mà có Vi khuẩn từ chỗ không có trở thành có gen kháng thuốc Nghĩa là, ADN của vi khuẩn

có khả năng ñột biến gen hoặc nhận gen ñề kháng từ vi khuẩn khác truyền cho

Chương 2 đỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 đối tượng, ựịa ựiểm và thời gian nghiên cứu

2.1.1 đối tượng nghiên cứu

đàn bò sữa ựược nuôi tại các gia trại (từ 15-20 bò/gia trại) và một số hộ gia ựình thuộc huyện Nghĩa đàn -tỉnh Nghệ An

2.1.2 Thời gian nghiên cứu

Từ tháng 4 năm 2012 ựến tháng 6 năm 2013

2.1.3 địa ựiểm nghiên cứu

- Thu gom mẫu sữa bệnh lý và bình thường của ựàn bò sữa ựược nuôi tại các gia trại (từ 15-20 bò/gia trại) và một số hộ gia ựình thuộc Huyện Nghĩa đàn -Tỉnh Nghệ An

- Bộ môn Nội Ờ Chẩn Ờ Dược Ờ độc chất khoa Thú y

- Phòng thắ nghiệm Trọng ựiểm Công Nghệ Sinh học khoa Thú y trường đại học Nông nghiệp Hà Nội

2.2 Nội dung nghiên cứu

2.2.1 điều tra tình hình chăn nuôi bò sữa và khảo sát tỷ lệ bò mắc bệnh viêm vú lâm sàng tại các hộ chăn nuôi bò sữa thuộc huyện Nghĩa đàn tỉnh Nghệ An

2.2.2 Áp dụng phương pháp CMT Ờ Califorlia Mastitis Test trong chẩn ựoán sớm bò bị viêm vú cận lâm sàng

2.2.3 Phân lập, giám ựịnh các vi khuẩn hiếu khắ có trong sữa bò thường gặp có trong sữa bò mắc bệnh viêm vú và sữa bò ở trạng thái sinh lý bình thường

2.2.4 Kiểm tra khả năng mẫn cảm của các vi khuẩn phân lập ựược từ sữa bò bị viêm

vú với một số thuốc kháng sinh thông dụng

2.2.5 Thử nghiệm một số phác ựồ ựiều trị bệnh viêm vú bò

2.2.6 Xây dựng quy trình phòng bệnh viêm vú bò sữa

2.3 Nguyên liệu, vật liệu nghiên cứu

2.3.1 Nguyên liệu

Mẫu sữa ựược lấy từ các bầu vú của ựàn bò sữa ựược nuôi tại các gia trại (khoảng 15-20 bò/gia trại) và một số hộ gia ựình thuộc huyện Nghĩa đàn -tỉnh Nghệ An

2.3.2 Vật liệu nghiên cứu

- Thuốc thử CMT, khay thử CMT

- Các trang thiết bị và dụng cụ trong phịng nghiên cứu: phiến kính sạch, pipet, kính hiển vi quang học, tủ ấm, que cấy, cồn, đèn cồn,… Giấy tẩm kháng sinh của cơng ty TNHH Nam Khoa thành phố Hồ Chí Minh sản xuất đạt tiêu chuẩn quốc

tế khi kiểm định

2.3.3 Các loại mơi trường nuơi cấy, phân lập, giám định vi khuẩn thơng thường

và chuyên dụng

2.4 Phương pháp nghiên cứu

2.4.1 Phương pháp lấy mẫu sữa

2.4.2 Phương pháp xác định bị mắc bệnh viêm vú lâm sàng

Thơng qua báo cáo về cơng tác phịng và điều trị bệnh hàng tháng của các bộ thú

y thú y các xã Tới các gia đình nuơi nhiều bị sữa để hỏi thêm về tiền sử bệnh Trực tiếp tham gia điều trị những ca bệnh cụ thể, thơng qua đĩ để năm thêm về trạng thái chung và các đặc điểm bệnh lý điển hình của tuyến vú khi bị viêm: hình dáng, kích thước, tính nguyên vẹn của da vú và đặc điểm của

2.4.3 Phương pháp xác định bị sữa bị viêm vú cận lâm sàng

- Bệnh viêm vú cận lâm sàng được chẩn đốn bằng phương pháp CMT (California Mastitis Test) (Anri và cs., 2002)

Phát hiện sữa viêm bằng thuốc thử CMT (California Mastitis Test)

Nguyên tắc của phướng pháp

Phương pháp này là nhằm phát hiện bệnh viêm vú qua số lượng tế bào bạch cầu trong 1 ml sữa Tỷ lệ xét nghiệm: 1-1 (giữa dung dịch CMT và sữa)

- Thao tác: sau khi vắt sữa rửa sạch núm vú, lấy sữa trên từng lá vú cho vào

đĩa Pétri hay cốc đựng, lấy 2ml lượng vừa đủ để xét nghiệm Bơm 2ml thuốc thử CMT vào đĩa Pétri cĩ chứa 2ml sữa Xoay trịn đĩa, đặt đĩa Pétri trên nơi hơi tối để quan sát, đọc kết quả ngay dựa trên sự đĩng vĩn và thay đổi màu sắc của hỗn hợp

Thành phần hố chất thuốc thử gồm: chất màu đỏ xẩm bromocrésol 1/10.000

và dung dịch teepol10% Sự đơng vĩn phụ thuộc vào mật độ các tế bào bạch cầu trong sữa với các mức độ đo lường tình trạng viêm nhiễm

- Kết quả:

- Bị mạnh khoẻ: dưới 300.000 tế bào/ ml

- Bị bị nhiễm: trên 800.000 tế bào/ ml

Dù theo các tác giả nào ựể thử, khi ựọc kết quả cần các chú ý như sau:

- Kết quả âm tắnh hay nghi ngờ khi thử CMT thì phải xem xét và cân nhắc cẩn thận Kết quả âm tắnh cũng không có nghĩa hoàn toàn là không có bệnh

- đây là phương pháp ựọc kết quả có tắnh chủ quan người ựọc và bị ảnh hưởng bởi nhiều yếu tố khác

- Khi ựể kết quả khá lâu có thể sẽ thấy âm tắnh giả vì gen trong ựĩa bị biến mất

- Sử dụng sữa mới vắt cho kết quả chắnh xác hơn sữa bảo quản hơn 24 giờ

- Chú ý dụng cụ chứa sữa ựể thử và yếu tố nhiễm khuẩn bên ngoài gây acid hóa sẽ làm kết quả âm tắnh

- Hàm lượng chất béo trong sữa cao ảnh hưởng ựến sự chuyển màu ựỏ bromocresol Theo Daniel và cs chứng minh kết quả CMT còn tùy thuộc vào ựàn gia súc ựang có hàm lượng chất béo cao hay thấp, từ ựó sẽ gây phản ứng dương tắnh hay âm tắnh

- Số lượng tế bào có thay ựổi và dao ựộng nhiều trong chu kỳ cho sữa, thời gian vắt sữa, trạng thái sức khỏe bầu vú và tùy loại vi khuẩn gây bệnh

Sử dụng pipet hút 1ml sữa cho vào khay thử theo vị trắ từng lá vú, sau ựó hút tương ựương 1 lượng thuốc thử CMT cho vào khay, lắc nhẹ trong vài giây rồi ựọc kết quả đánh giá mức ựộ ngưng kết (+), (++), (+++), (++++) dựa vào mức ựộ dắnh nhớt và màu sắc của hỗn hợp sữa và thuốc thử theo hướng dẫn của nhà sản xuất thuốc thử CMT

2.4.4 Phân lập và giám ựịnh vi khuẩn hiếm khắ có trong sữa

Chúng tôi tiến hành phân lập và giám ựịnh các vi khuẩn hiếu khắ có trong sữa theo phương pháp thường qui (Nguyễn Như Thanh và cs., 1997) trong các loại môi trường thông thường và môi trường chuyên dụng

Phương pháp thu mẫu sữa

Các mẫu sữa ựược lấy từ các vú riêng biệt hoặc lấy từ mẫu chung của bốn bầu vú của một cá thể bò Trong khi thu mẫu cần ựặc biệt chú ý khâu khử trùng các dụng cụ lấy mẫu: dụng cụ ựảm bảo sạch sẽ, vô khuẩn, tránh nhiễm tạp khuẩn Quá trình lấy mẫu phải tuân thủ ựúng các thao tác kĩ thuật Mẫu sữa thu gom về phòng thắ nghiệm cần ựược nuôi cấy sử lý ngay Nếu chưa lịp sử lý, cần bảo quản trong tủ lạnh dương Mấu sữa thu gom ựược dùng trong các thắ nghiệm: phân lập và giám ựịnh vi khuẩn hiếu khắ có trong các mẫu sữa bình thường và bệnh lý, tìm vi khuẩn bội nhiễu trong mẫu sữa viêm, từ ựó kiểm tra tắnh mẫn cảm của các vi khuẩn bội nhiễm với những kháng sinh thông dụng Phương pháp kiểm tra kháng sinh ựồ trên cơ sở ựó chọn thuốc ựiều trị theo sơ ựồ