NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG CÔNG NGHỆ CHỐNG NẤM MỐC ÁP DỤNG TRONG SẢN XUẤT VÀ LƯU THÔNG CÁC LOẠI GIẦY VẢI, GIẦY DA XUẤT KHẨU

Phân lập, định tên các chủng loại nấm mốc cho các sản phẩm giầy vải và giầy da tại Công ty Da giầy Hà nội, phân lập các chủng loại nấm mốc trước và sau khi áp dụng các công nghệ phòng ch

BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CHƯƠNG TRÌNH KHOA HỌC CÔNG NGHỆ CẤP NHÀ NƯỚC

Chủ nhiệm đề tài:

Cơ quan chủ trì đề tài:

KS Trần Danh Đáng Công ty Da Giầy Hà nội,

Bộ Công nghiệp

6133

03/10/2006

HÀ NỘI, T12 - 2005

DANH SÁCH NHỮNG NGƯỜI THỰC HIỆN

Cơ quan chủ trì: Công ty Da giầy Hà Nội - Bộ Công nghiệp

Chủ nhiệm đề tài: Ks Trần Danh Đáng

Các cán bộ thực hiện đề tài:

1 Vũ Anh Tuấn - Kỹ sư Hoá - Công ty Da giầy Hà Nội

2 Ông Thế Nam - Kỹ sư Hoá - Công ty Da giầy Hà Nội

3 Tạ Việt Thành - Kỹ sư Hoá - Công ty Da giầy Hà Nội

4 Nguyễn Đức Chuyên - Kỹ sư Hoá - Công ty Da giầy Hà Nội

5 Hồ Đoài - Kỹ sư Hoá - Công ty Da giầy Hà Nội

6 Dương Văn Sáng - Kỹ sư Kinh tế - Công ty Da giầy Hà Nội

7 Hoàng Văn An - Kỹ sư Chế tạo máy - Công ty Da giầy Hà Nội

8 Bùi Duy Cam - Tiến sỹ Hoá - Đại hoạc Quốc gia HN

9 Phạm Văn Ty - Tiến sỹ vi sinh - Đại hoạc Quốc gia HN

10 Nguyễn Minh Thái - Tiến sỹ vi sinh - Đại hoạc Quốc gia HN

11 Đào Thị Lương - Tiến sỹ vi sinh - Đại hoạc Quốc gia HN

TÓM TẮT ĐỀ TÀI KC.06.16.CN

Công nghệ phòng chống nấm mốc được ứng dụng ngày càng nhiều trong các lĩnh vực khác nhau của KTXH, KHKT như các ngành về công nghệ thực phẩm, công nghệ vật liệu trong đó có ngành Da giầy Công nghệ phòng chống nấm mốc được Công ty Da giầy Hà nội nghiên cứu và áp dụng vào thực tiễn sản xuất các sản phẩm giầy dép xuất khẩu Trong báo cáo tổng kết KH &KT, Đề tài đã thực hiện các phần công việc chính như sau:

1 Phân lập, định tên các chủng loại nấm mốc cho các sản phẩm giầy vải và giầy da tại Công ty Da giầy Hà nội, phân lập các chủng loại nấm mốc trước và sau khi

áp dụng các công nghệ phòng chống nấm mốc, đề tài đã phân lập được 117 chủng loại nấm mốc trên các vị trí sản xuất, trên giầy trong lưu kho và lưu thông

2 Nghiên cứu tổng quan các loại hoá chất có thể sử dụng để tiêu diệt các loại nấm mốc trên cơ sở tìm hiểu qua phân lập nấm mốc, qua các patent tài liệu, qua các

dữ liệu của nhà cung cấp

3 Nghiên cứu, xác định được công nghệ chống ẩm áp dụng trong lưu kho và lưu thông các sản phẩm giầy

4 Xác lập được quy trình công nghệ chống nấm mốc cho các sản phẩm giầy vải, trên cơ sở xác định được các công nghệ sử dụng hoá chất, sử dụng các chất chống

ẩm, sử dụng các thiết bị phụ trợ

5 Xác lập được quy trình công nghệ chống nấm mốc cho các sản phẩm giầy da

6 Lắp đặt bổ sung một số thiết bị tự động hoá nhằm nâng cao hiệu quả kiểm soát của công nghệ phòng chống nấm mốc, đề tài được trang bị các thiết bị tự động hoá phụ trợ trên dây chuyền sản xuất, như thiết bị bồi tráng, thiết bị gia nhiệt, điều khiển nhiệt độ tự động, thiết bị điều khiển băng chuyền bằng motor biến tần, thiết bị chiếu tia UV

7 Một số các chuyên đề được đề tài nghiên cứu khác mang tính chất tham khảo và định hướng như chuyên đề sấy, keo dán, nguyên vật liệu sản xuất

I.4 Tóm tắt các nội dung đã thực hiện

Chương II TỔNG QUAN NHỮNG NGHIÊN CỨU VỀ CHỐNG NẤM MỐC

ĐƯỢC ỨNG DỤNG Ở TRONG NƯỚC VÀ QUỐC TẾ

II.1 Tổng quan những nghiên cứu nước ngoài

II.2 Tổng quan những nghiên cứu trong nước

Chương III TỔNG HỢP NỘI DUNG VÀ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU

III.1 Phân lập, định tên các chủng loại nấm mốc trên các sản phẩm giầy vải, giầy

da tại Công ty Da giầy Hà Nội

III.2 Các hoá chất sử dụng và công nghệ liên quan

III.3 Phân lập, định tên các chủng loại nấm mốc trên các sản phẩm giầy vải, giầy

III.4.2 Kỹ thuật sấy, công nghệ và thiết bị phụ trợ

III.4.3 Quy trình chống mốc cho các sản phẩm giầy vải, giầy da trong quá trình sản xuất

III.4.4 Quy trình chống mốc cho các sản phẩm giầy vải, giầy da trong quá trình bảo quản và lưu thông

III.5 Tổng hợp các kết quả nghiên cứu

Chương IV KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

LỜI CẢM ƠN

PHỤ LỤC

TÀI LIỆU THAM KHẢO

Chú giải ký hiệu viết tắt, thuật ngữ

QTCN Quy trình công nghệ

KHKT Khoa học và kỹ thuật

ĐHKHTN Đại học Khoa học Tự nhiên

ĐHQGHN Đại học Quốc gia HN

MỞ ĐẦU

Về vấn đề '' mốc'' đang là nạn dịch xảy ra ở mội nơi, mọi thời điểm, ảnh hưởng rất lớn đến chất lượng , mỹ quan các loại hàng hoá và thiệt hại lớn về kinh tế, làm giảm tối đa uy tín của nhà sản xuất đặc biệt là hành hoá phục vụ xuất khẩu Đã có nhiều đề tài về chống mốc được nghiên cứu, nhưng đối tượng là sản phẩm giầy dép trong quá trình sản xuất, lưu thông trong điều kện khí hậu nước ta và đặc biệt khi xuất khẩu sang các vùng khí hậu khác nhau trên thế giới thì chưa được nghiên cứu đề cập đến

Do đó đề tài được đặt ra nhằm nghiên cứu và tìm ra các giải pháp có thể áp dụng trong việc sản xuất và lưu thông các loại giầy vải và giầy da xuất khẩu là hết sức cần thiết Theo báo cáo từ các cơ sở sản xuất giầy dép, các sản phẩm giầy xuất khẩu chi lưu kho được trong khoảng thời gian từ 1-2 tháng là bắt đầu mốc và cũng có nhiều khách hàng khiếu nại về việc giầy dép bị mốc và phạt tiền rất nặng các nhà cung cấp, gây thiệt hại lớn về kinh tế và ảnh hưởng đến uy tín, chất lượng giầy dép xuất khẩu Trường hợp khách hàng PRIMARK Vương quốc Anh phạt 18 000 USD đơn hàng giầy da mocasin CP-01, sản xuất tại Công ty Da giầy Hà Nội do da mặt bị mốc Một

số Công ty khác như Thượng Đình, Thuỵ Khuê cũng không tránh khỏi giầy dép sản xuất ra bị mốc

Trong ngành Da giầy những biện pháp đang áp dụng để diệt nấm mốc như dùng một số laọi hoá chất, sử dụng thiết bị chiếu tia tử ngoại để diệt khuẩn (như đã trình bày ở trên) đang được áp dụng, song hiệu quả của việc diệt trừ nấm mốc cũng như ý nghĩa về mặt khoa học, kinh tế còn thấp và bị nhiều hạn chế Do vậy, vấn đề đặt

ra là nghiên cứu công nghệ chống nấm mốc áp dụng trong sản xuất và lưu thông các loại giầy vải, giầy da xuất khẩu là một nhu cầu vô cùng cấp bách và cần thiết

Chương I

PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ TÓM TẮT CÁC NỘI DUNG ĐÃ THỰC HIỆN

I.1 Cách tiếp cận

- Dựa vào các patent đã công bố liên quan đến các nội dung nghiên cứu của đề tài

- Những kiến thức và kinh nghiệm rút ra từ các đợt đào tạo, thăm quan khảo sát, trao đổi kinh nghiệm trong và ngoài nước

- Kế thừa những kết quả nghiên cứu có liên quan

- Những yêu cầu từ thực tế sản xuất và của khách hàng nhập khẩu

I.2 Phương pháp nghiên cứu

Để thực hiện đề tài, chúng tôi đã tập trung vào giải quyết những vấn đề mấu chốt có tính chất quyết định đến công nghệ chống mốc:

- Về sinh học: xác định, phân lập các chủng loại nấm mốc gây hại trên các sản

phẩm giầy vải, giầy da, xác định các đặc tính sinh lý, sinh hoá của chúng qua đó sử dụng tối đa các biện pháp sinh thái để bảo quản và phòng chống nấm mốc

- Về hoá học: xác định các hoá chất chống nấm mốc có khả năng kìm hãm và

tiêu diệt các loại nấm mốc gây hại sử dụng trong quá trình sản xuất, phương pháp pha chế và áp dụng trong dây chuyền sản xuất

* Sử dụng hỗn hợp 2-(thiocianometylthio) benzothiazole (TCMTB) và 2-propynyl-N-butylcarbamate (IPBC) [5] với một số phụ gia như polyoxyetylene triglyceride, polyalkylene glycor ether, xathan gum và dipropylene glycol dưới dạng sữa làm thuốc diệt nấm để tăng hiệu quả diệt nấm trên mặt da, tăng hiệu quả diệt nấm khi sử dụng keo

3-iodo-* Sử dụng dẫn xuất phenol phối với benzimidazol, imidazol hoặc morpoline làm chất diệt nấm trên da thành phẩm, tăng thời gian bảo quản trong kho

* Sử dụng dẫn xuất hoặc muối của phenol dễ tan trong nước phối hợp trong keo rất tiện lợi trong sản xuất và chống mốc ngay tại keo cho sản phẩm

- Về lý học: sử dụng tia cực tím để tiêu diệt nấm mốc trước khi lưu kho và lưu

chuyển qua tiêu dùng, xuất khẩu

- Xác định các yếu tố ảnh hưởng đến công nghệ phòng chống nấm mốc, từ đó

xây dựng quy trình công nghệ áp dụng trên dây chuyền sản xuất hiện có tại Công ty

- Thiết kế, chế tạo thiết bị chiếu tia cực tím, thiết bị phun tẩm, thiết bị bồi tráng

keo, thiết bị hút ẩm

I.3 Kỹ thuật đã sử dụng

Những kỹ thuật đã sử dụng trong quá trình thực hiện đề tài

Phân lập, xác định đặc tính sinh lý, sinh hoá của các chủng nấm mốc; phân lập tên, loài, họ của nấm mốc từ đó xác định các yếu tố môi trường có khả năng ức chế

hoặc kích thích khả năng sinh trưởng của chúng Nấm mốc nói chung là các vi sinh vật nhân thật, được chia ra thành hai chủng loại chính là nấm men (yeast) và nấm sợi (filamentous fungi) là những vi sinh vật có cơ thể nhỏ bé, cấu tạo đơn giản, chúng được xếp vào giới nguyên sinh theo hệ thống phân loại 5 của R.H.Whittaker Nói chung nấm thuộc một giới riêng biệt Cơ thể là một tản (thallus), có thể là đơn hoặc đa bào, đa số dạng sợi gọi là nấm hay khuẩn ti (hypha), có loại có màu, có loại không màu Một số loại tiết sắc tố và môi trường nuôi cấy gây ra loang mốc làm thay đổi màu sắc của vật phẩm

- Về mặt sinh học: Phân lập các chủng loại nấm mốc trên cơ sở thực hiện các

biện pháp kỹ thuật sau:

* Xác định hình thái và cấu trúc của tế bào nấm bằng phương pháp vỡ tế bào,

ly tâm và quan sát dưới kính hiển vi từ đó xác định được thành phần phần trăm protein, lipit, polisaccait, xác định cấu trúc thành nhân tế bào bằng kỹ thuật chiếu tia

tử ngoại

* Xác định chu kỳ sinh sản, xác định các điều kiện thuận lợi giúp nấm mốc sinh sản, các thông số kỹ thuật như độ ẩm không khí, độ ẩm nguyên vật liệu, nhiệt độ của môi trường, độ PH của môi trường nấm mốc phát triển (nhất là đối với nấm lên men)

* Chứng minh sự sinh trưởng hay “chết” của nấm mốc bằng các dung dịch hoá chất FeCl3 0,5%, dung dịch K3Fe(CN)6 với nồng độ thích hợp, trong quá trình kiểm tra theo dõi kết quả của các biện pháp chống mốc

- Về mặt hoá học: Những kỹ thuật đã sử dụng đối với các hoá chất diệt nấm:

* Xác định các thông số kỹ thuật phù hợp: nồng độ, độ hoà tan, độ phân tán, liều lượng sử dụng độ PH, thời gian tác dụng, nhiệt độ phân huỷ trong các công đoạn

sử dụng hoá chất cho vào keo, phun tẩm chau chuốt

* Xác định các đơn pha chế keo, pha chế dung dịch phun tẩm cho các loại nguyên vật liệu giầy vải, giầy da

- Về các thiết bị phụ trợ :

* Xác định thông số phù hợp cho các thiết bị tráng keo như: độ dầy, mỏng của lớp keo, nhiệt độ lò sấy, tốc độ bồi tráng, nhiệt độ làm khô, áp lực sấy khô hơi nước

* Xác định các thông số kỹ thuật phù hợp đố với thiết bị làm khô giầy trong quá trình

gò ráp, làm khô keo, nguyên vật liệu: nhiệt độ, tốc độ sấy

* Xác định thông số kỹ thuật phù hợp đối với thiết bị chiếu tia UV: nhiệt độ chiếu tia, công suất của bóng chiếu tia, thời gian chiếu tia

I.4 Tóm tắt các nội dung đã thực hiện:

- Khảo sát, đánh giá thực trạng vấn đề mốc giầy trong các doanh nghiệp

- Tình trạng các công nghệ sử dụng chất chống mốc cho nguyên liệu trong sản xuất giầy, các vấn đề về sử dụng keo, chất chống mốc trong các loại keo dung dịch nước;

- Công nghệ sản xuất như sấy, bồi tráng có đạt các tiêu chuẩn cần đạt về yếu tố sinh thái phòng chống nấm mốc không;

- Đánh giá cách lưu kho, bảo quản giầy thành phẩm trong các doanh nghiệp xem có chống ẩm, thông thoáng không? Từ đó rút ra các kết luận chính xác;

- Quá trình nghiên cứu đã đưa ra hai công nghệ phòng chống nấm mốc cho giầy vải và giầy da:

1.4.1 Quy trình công nghệ chống mốc dựa vào các biện pháp sinh học:

- Nghiên cứu, phân lập các chủng loại nấm mốc;

- Nghiên cứu xác định rõ những chỗ hiểm trong cơ thể vi nấm;

- Nghiên cứu các đặc điểm sinh thái "khắc nghiệt" mà nấm mốc không thể phát triển được;

- Triệt phá nguồn cung cấp thức ăn của nấm mốc

- Thiết lập quy trình công nghệ cho các phương pháp sinh thái phòng chống nấm mốc;

- Thiết kế chế tạo các thiết bị phụ trợ dùng trong các biện pháp trên;

1.4.2 Quy trình công nghệ dựa vào các biện pháp hoá học bao gồm các quy trình nhỏ sau:

- Trên cơ sở nghiên cứu các đặc tính sinh học tế bào của nấm mốc, tìm ra các hoá chất diệt nấm phù hợp:

- Quy trình công nghệ sử dụng hoá chất gây hại lên vách tế bào nấm mốc, các chỉ tiêu kỹ thuật của hoá chất, độ thẩm thấu của mỗi loại hoá chất lên vách tế bào, hiệu quả sử dụng của các quy trình công nghệ loại này

- Quy trình công nghệ sử dụng hoá chất gây hại lên các thành khác của tế bào nấm mốc, như là vón thể keo của tế bào chất, làm mất nước của nguyên sinh chất như chất dedoxyl guanidin acetat (điođin), gây ra các thảm các "thảm hoạ" đối với nấm mốc

- Quy trình chống mốc bằng hoá chất gây hại lên ty thể của tế bào nấm, nơi mà các enzym " làm việc" để cung cấp năng lượng sống cho tế bào, ít nhất cũng thiết lập được cơ chế dùng hoá chất để phá huỷ hoặc ngăn cản hoạt động của hai loại enzym trên ty thể: các enzym tham gia vào quá trình hô hấp, các enzym tham gia vào quá trình

Chương II

TỔNG QUAN NHỮNG NGHIÊN CỨU VỀ CHỐNG NẤM MỐC ĐƯỢC ỨNG

DỤNG Ở TRONG NƯỚC VÀ QUỐC TẾ II.1 Tổng quan những nghiên cứu nước ngoài

Vấn đề chống mốc cho các sản phẩm ngành da giầy từ lâu đã được các nước có nền công nghiệp da giầy phát triển hết sức quan tâm, có rất nhiều công trình được nghiên cứu chống lại sự phá hoại của nấm mốc đối với sản phẩm nghành da giầy đã được công bố trên thế giới Việc dùng hoá chất, các phương pháp sinh học, các biện pháp vật lý phụ trợ như công cụ sấy, phụ tẩm hoá chất, máy làm lạnh, máy chiếu tia tử ngoại để diệt khuẩn đã và đang được áp dụng như là một công cụ hữu hiệu nhất để ngăn chặn sự phá hoại của nấm mốc

Việc dùng các hoá chất để tiêu diệt nấm mốc cũng được nghiên cứu và công bố vào năm 1999 Trong công trình nghiên cứu này, tác giả sử dụng hỗn hợp 2-(thiocianometylthio) benzothiazole (TCMTB) và 3-iodo-2-propynyl-N-butylcarbamate (IPBC) với một số phụ gia như polyoxyetylene triglyceride polyalkylene glycol ether, xanthan gum và dipropylene glycol dưới dạng sữa làm thuốc diệt nấm Hỗn hợp được thêm một mol polyoxyetylene triglyceride để trộn IPBC và TCMTB sau đó thêm dung dịch chứa xanthan gum trong dipropylene glycol Thành phần hỗn hợp này rất phù hợp cho việc bảo quản trong công đoạn thuộc xanh cũng như trong công đoạn thuộc da Công trình nghiên cứu này cũng nói lên rằng thành phần các hoá chất trên đặc biệt hữu hiệu trong công nghiệp sản xuất da thuộc, ngoài ra còn có thể áp dụng trong sơn nước, keo nước và có thể nói rằng hỗn hợp này diệt mốc cũng rất hiệu quả đối với một số lĩnh vực khác như ngăn chặn sự phá hoại của nấm mốc trên các loại nguyên vật liệu và thành phẩm là vải sợi, keo dán, mỹ phẩm Có thể đây là một cách dùng hoá chất mới

và áp dụng được trên nhiều công đoạn trong sản xuất giầy như sản xuất keo dán, phun tẩm vải sợi, và đặc biệt là trong xử lý mốc ở da hay cho vào chất chau chuốt giầy thành phẩm

Các công nghệ chống mốc ứng dụng trong quá trình sản xuất, lưu kho và lưu thông các loại giầy vải, giầy da bằng phương pháp sinh học cũng được một số công trình nghiên cứu và công bố vào những năm của thập kỷ 90 thế kỷ XX, năm 1998 khi các tác giả {7} {PN:301999} sử dụng các hợp chất polyme siloxance và silane như trialkoxysilane để bảo quản các nguyên vật liệu vô cơ, hữu cơ bằng chác tẩm vào các nguyên liệu này với các chất trên trong công đoạn sau cùng để có một tính chất đặc biệt trong môi trường, đây là biện pháp sinh thái nhằm cách ly nguyên vật liệu với bào

tử nấm và độ ẩm trong môi trường có thể áp dụng trong phần hoàn thiện khi sản xuất giầy da, nhưng các thiết bị ngâm tẩm có cấu tạo ra sao thì chưa thấy các tác giả đề

cập đến; hoặc là phương pháp phun sấy và các biện pháp cô lập hơi dung môi ra môi trường khi phun thì chưa thấy đề tài nêu ra

II.2 Tổng quan tình hình nghiên cứu trong nước

Theo số liệu của Hiệp hội Da giầy Việt Nam và báo cáo của Tổng Công ty Da giầy Việt Nam thì sản lượng giầy dép sản xuất ở nước ta trong năm 2001 xấp xỉ 320 triệu đôi Kế hoạch dự kiến năm 2002 là 350 triệu đôi, giá trị xuất khẩu năm 2001 đạt 1.8 tỷ USD Sản lượng da thành phẩm năm 2001 đạt xấp xỉ 14 triệu sqfs và năm 2002

dự kiến đạt khoảng 20 triệu sqfs

Ngành Da giầy đã xây dựng Chiến lược phát triển ngành đến năm 2010 và có tầm nhìn 2020 đã được phê duyệt; theo đó đến năm 2005 sản lượng giầy dép các loại

sẽ đạt trên 500 triệu đôi, da thuộc thành phẩm sẽ là 50 triệu sqfs và kim ngạch xuất khẩu sẽ đạt 5 tỷ USD Những số liệu trên chứng tỏ ngành công nghiệp da giầy đang là một ngành kinh tế kỹ thuật mũi nhọn hướng ra xuất khẩu, có tốc độ tăng trưởng khá cao và có những đóng góp quan trọng trong sự nghiệp phát triển nền kinh tế đất nước trong những thập niên đầu của thế kỷ XXI

Các sản phẩm giầy dép thường tập trung chủ yếu theo 4 loại, đó là : giầy vải, chiếm khoảng 18%, giầy thể thao 50%, giầy da 17%, dép các loại 15% Nguyên liệu chính để sản xuất các loại giầy dép nói trên chủ yếu là da thành phẩm, vải sợi, bìa carton đây là những nguyên liệu rất dễ bị hút ẩm, mốc, nhất là trong điều kiện thời tiết nóng ẩm của nước ta Bằng một phép tính đơn giả, giả sử các sản phẩm giầy dép

bị nấm mốc chiếm khoảng 2% (Trong thực tế khả năng còn cao hơn) bị hư hại do mốc thì con số thiệt hại cũng mất đến 36 triệu đô la (xấp xỉ 550 tỷ đồng) đó là một con số không nhỏ

Đề giải quyết vấn đề này, nhiều đơn vị trong ngành da giầy đã có một số biện pháp tinh huống để chống nấm mốc ngay từ khâu thuộc da đến các khâu bảo quản da thành phẩm và nguyên vật liệu vải, sợi trong sản xuất giầy dép

Phương pháp sử dụng hoá chất được sử dụng trong bảo quản da nguyên liệu đã được Viện nghiên cứu da giầy nghiên cứu {1} năm 1997, nhưng chỉ áp dụng

để chống các vi khuẩn thâm nhập vào da tươi, chưa quan tâm đến công nghệ chống mốc da thành phẩm và lưu kho ngay trong các công đoạn thuộc, do đó da thành phẩm rất khó bảo quản, lưu kho chỉ được một thời gian ngắn đã có mốc trắng, vàng trên bề mặt da

Các công nghệ chống mốc đang được áp dụng trong dây chuyền sản xuất giầy ở nước ta như: Công ty Da giầy Hà Nội đã và đang áp dụng một số biện pháp

chống mốc cho da thành phẩm (nguyên liệu dùng cho các sản phẩm giầy da, giầy thể thao), áp dụng phương pháp chống mốc bằng sử dụng hoá chất để tẩy rửa mốc trên bề mặt như cồn công nghiệp, amooniac, và một số chất thuộc dẫn xuất của phenol,

Nhưng những giải pháp trên thị trường chỉ tạm thời đảm bảo trong thời gian ngắn để kiểm tra khi giao hàng, không chống được các tác nhân gây mốc còn tồn tại bên trong nguyên liệu, do vậy khi lưu thông trên thị trường vẫn bị khiếu nại về nấm mốc

Đối với công nghệ sản xuất giầy vải, một số công ty cũng đã áp dụng một số biện pháp chống mốc, chống arm nhưng chưa có hiệu quả rõ rệt, ví dụ như ở Công ty

Da giầy Hà Nội, đang sử dụng chất Benzoat Natri để hoà vào keo latex, keo PVAC, keo EVA dạng nhũ sử dụng trong bồi tráng và dán quy trình gò giầy, khi tan vào nước hợp chất này phân huỷ thành phenol và tạo môi trường kiềm tính có thể hạn chế nấm mốc phát triển sau một thời gian Ưu điểm của hoá chất này là dễ tan trong nước (muối của kim loại kiềm với phenol) nhưng nó cũng có không ít các nhược điểm như

dễ gây chết keo (do ảnh hưởng của độ PH) dẫn đến khả năng phân tán không đều trong dung dịch keo và hiệu quả chống mốc giảm đáng kể; dùng chất này đối với các loại keo nước thì thích hợp nhưng keo nước lại mang yếu tố ẩm ướt đối với nguyên vật liệu, đó là điều kiện rất thích hợp cho vi khuẩn phát triển khi chất chống mốc hết tác dụng

Chất PCP ( pentacloro- phenol) vẫn đang được nhiều xưởng thuộc da dùng làm chất bảo quản, theo (4), nhưng chất này rất độc và mùi hăng, mức độ chịu đựng của con người nhỏ hơn 0.5ppm, chất này có thể xâm nhập qua da gây hại đến sức khoẻ cho người sử dụng

Phương pháp sinh học để phòng chống nấm mốc được giới thiệu trong cuốn

sách "Nấm mốc và phương pháp phòng chống" (2) (tác giả GS Bùi Xuân Đồng, PGS

Hà Huy Kế - NXBKH&KT - 1999) nói một cách tổng quát là tạo ra các điều kiện sinh thái không thích hợp với sự phát triển của nấm mốc, hai điều kiện sinh thái quan trọng nhất ảnh hưởng tới đời sống của nấm mốc như chúng ta đã biết là độ ẩm (độ ẩm tương đối của không khí và độ ẩm của vật phẩm) và nhiệt độ môi trường xung quanh Muốn các bào tử của hầu hết các loài nấm không phát triển được nhất thiết ta phải giữ được

độ ẩm tương đối ở mức dưới 70% và điều kiện là nguyên vật liệu, hàng hóa thành phẩm phải thật khô, nhưng thật khô ở mức độ nào? Tác giả cũng đã nêu ra vấn đề này như sau: cần giữ độ ẩm tương đối là 65%, nguyên vật liệu bảo quản tuỳ thuộc từng loại, từng chất liệu mà hàm lượng nước chứa trong đó cho phép tối đa là bao nhiêu Hai phương pháp sinh thái chống mốc được đưa ra là "phương pháp kín" và "phương pháp hở"

Đối với "Phương pháp kín" là cách ly hoàn toàn vật phẩm với môi trường không khí bên ngoài và ngược lại " Phương pháp hở" là phải có lưu thông không khí

để đảm bảo nhiệt độ luôn luôn đồng đều trong khi lưu giữ và bảo quản Mục đích của hai phương pháp này là giống nhau nhưng kết quả lại hoàn toàn khác nhau Với

"Phương pháp kín" chúng ta có thể tạo được độ ẩm như ý muốn nhưng nhiệt độ trong

kho bảo quản không giống nhau, chỗ nào nhiệt độ cao hơn 25o C vẫn bị mốc đen, ngược lại với " Phương pháp hở" chỉ có tác dụng khi trời khô hanh, nếu trời nồm, ẩm,

dù có thông thoáng đến mấy thì cũng bị nấm mốc làm hư hại ít nhiều Do đó hai biện pháp sinh thái đưa ra vẫn còn chỗ cần làm rõ khi áp dụng vào bảo quản giầy dép xuáat khẩu

Phương pháp chống mốc bằng thiết bị đặc biệt như: Máy chiếu tia cực tím

(4) Công ty Da giầy Hà nội cúng đã tự chế tạo ra máy chiếu tia UV dùng để diệt khuẩn, nó có hiệu quả đáng kể với các vi khuẩn ruột già Vấn đề đặt ra với loại máy này là : Công suất bóng chiếu tia là bao nhiêu, thời gian, nhiệt độ chiếu tia là như thế nào mới phát huy được hiệu lực của nó, do vậy phải nghiên cứu thật kỹ về đặc tính của vi khuẩn, bởi có rất nhiều loại vi khuẩn có thể chống chịu được các điều kiện chiếu tia rất lâu Hơn nữa giầy lại có hình dạng lồi lõm mà tia chiếu lại đi thẳng do đó

có những chỗ không thể chiếu tia được Vì vậy nếu có hướng sử dụng phương pháp này thì phải tìm hiểu nâng cao tầm hiểu biết hơn nữa

Để giải quyết những vấn đề nêu trên liên quan đến nấm mốc trên các sản phẩm giầy vải, giầy da trong quá trình sản xuất, lưu kho và lưu thông, qua nghiên cứu tình hình ngoài nước, với tình hình thực tế sản xuất trong ngành da giầy và qua khảo sát kỹ các điều kiện khí hậu môi trường nước ta, chúng tôi nhận thấy cần phải có một giải pháp tốt nhất, hợp lý và khoa học nhất để chống mốc cho các sản phẩm giầy dép: Các phương pháp chống nấm mốc có thể:

- Phương pháp về mặt sinh hoá: Phân lập các loại nấm mốc, tìm ra điểm yếu

của chúng, từ đó có thể dùng các biện pháp hoá chất, các biện phấp sinh thái và các thiết bị chiếu tia để loại trừ

- Phương pháp hoá học: Trên cơ sở nghiên cứu về mặt sinh học của nấm mốc,

dùng các hoá chất có các tác dụng tốt nhất chống lại sự tồn tại và hoạt động phá hoại của nấm mốc, đảm bảo an toàn về hoá chất và đạt được các chỉ tiêu về hiệu quả kinh

tế như giá thành và chất luợng sản phẩm

- Giải phấp về công nghệ: Cố gắng áp dụng các công nghệ tiên tiến trong và

ngoài nước trong sản xuất và lưu thông, tính toán hợp lý trong công nghệ chống mốc, không gây ảnh hưởng đến năng suất, chất lượng của sản phẩm

- Thiết kế, chế tạo một số thiết bị phụ trợ: Lắp thêm trên dây truyền sản xuất

trong công nghệ chống mốc như các thiết bị bồi tráng, thiết bị phun, thiết bị chiếu xạ đảm bảo tốt về năng suất và chất lượng

Chương III

TỔNG HỢP CÁC NỘI DUNG VÀ KẾT QUẢ ĐỀ TÀI NGHIấN CỨU III.1 Phõn lập, định tờn cỏc chủng loại nấm mốc trờn cỏc sản phẩm giầy vải, giầy da tại Cụng ty Da giầy Hà Nội

Nấm là giới sinh vật phổ biến trong tự nhiên Chúng sống hoại sinh nhờ các hợp chất hữu cơ trong đất hoặc trên bề mặt đất Chúng cũng tồn tại trong không khí ở dạng bào tử, trong nước hoặc sống kí sinh trên các cơ thể sống Bên cạnh các chủng đã được

sử dụng rộng rãi trong các nghành sản xuất như: công nghiệp thực phẩm, công nghiệp dược phẩm thì còn có nhiều chủng vi nấm gây hại cho con người Chúng không chỉ

là tác nhân gây các bệnh khác nhau ở người, động vật, thực vật mà còn là thủ phạm gây hư hỏng nhiều loại vật liệu, sản phẩm hàng hoá dẫn đến những thiệt hại nặng nề

về của cải vật chất cho xã hội, trong số đó có ngành công nghiệp giày da

Việt nam là nước nhiệt đới với khí hậu nóng ẩm, đây là điều kiện thuận lợi cho

sự phát triển của nhiều loài vi nấm nói chung và nấm hại nói riêng Chúng phong phú cả về số lượng và chủng loại, có những loài có khả năng sinh trưởng phát triển trên các môi trường có hoạt độ nước (water activity) rất thấp từ 0.7 - 0.95, được các nhà nghiên cứu xếp thành một nhóm sinh thái riêng gọi là nhóm vi nấm ưa khô (xerophile) Đây là nhóm nấm chủ yếu phá hoại da giày và các sản phẩm bảo quản khô khác

Khi bào tử nấm mốc phát tán trong không khí, rơi xuống bề mặt giày vải hoặc

da, khi gặp điều kiện thuận lợi (nhiệt độ, độ ẩm thích hợp) bào tử sẽ nảy mầm rồi phát triển thành hệ sợi nấm Để ức chế sự nảy mầm của bào tử đó, người ta đã sử dụng các phương pháp hoá học như các chất diệt nấm trong xi đánh giày hoặc các hoá chất lau giày, các phương pháp khác như hạ nhiệt độ, độ ẩm Việc sử dụng các hoá chất có thể

ảnh hưởng xấu đến sức khoẻ cho người tiêu dùng dẫn đến khó bán, khó xuất khẩu Để

sử dụng các phương pháp sinh học trong bảo quản da giầy thì ta cần phải hiểu tường tận các đặc tính nuôi cấy, các đặc tính sinh trưởng và phát triển của những chủng nấm thường cư trú trên đó Dựa vào các đặc tính đó để thiết lập các phương pháp phòng chống nấm mốc một cách hiệu quả và kinh tế Từ những vấn đề đó, chúng tôi tiến hành phân lập, định tên các chủng loại nấm mốc trên dây truyền sản xuất, trong lưu kho và trong lưu thông cho các sản phẩm giầy vải, giầy da tại công ty giầy da Hà Nội

III.1.1 Tổng quan:

III.1.1.1 Sơ lược về nấm mốc

Theo hệ thống phân loại của Whittaker thì nấm mốc thuộc giới Nấm, là sinh vật

dị dưỡng nhân thật, không có khả năng quang hợp, sinh sản chủ yếu bằng bào tử Ty thể là vị trí chuyển hoá năng lượng của tế bào, có nguồn gốc từ vi khuẩn thực (eubacteria) như là kết quả của sự cộng sinh giữa vi khuẩn không lưu huỳnh màu tía với các tế bào nhân thực [9]

Nấm dinh dưỡng theo kiểu hấp thụ, chúng là vi sinh vật phân huỷ có vai trò quan trọng trong chu trình tuần hoàn vật chất Nhiều loài nấm sản sinh ra các enzym ngoại bào phân giải các polyme thực vật như: cellulose, lignin.[9]

Nấm phân bố rộng rãi trong đất, trong nước, trên các tàn dư thực vật, trên rau, quả và các chất có nguồn gốc từ thực vật Trong không khí là dạng bào tử phát tán

Nấm sợi phát triển tạo nên một cấu trúc phân nhánh gọi là sợi nấm (hypha), sợi nấm kết hợp với nhau hình thành nên hệ sợi nấm (mycelium), sợi nấm có thể phân cách thành các ngăn khác nhau bởi các vách ngăn (septa) Sợi thường được bao bọc

bởi lớp thành tế bào có chứa kitin hay cellulose [9] Sự phát triển của hệ sợi nấm là sự kéo dài ra ở các đầu sợi nấm Khi một đoạn sợi nấm đứt ra, nó có thể phát triển để tạo thành một hệ sợi nấm mới.[12]

Phần sợi nấm làm nhiệm vụ thu nhận dinh dưỡng gọi là sợi cơ chất, phần sợi mọc ra ở phía trên môi trường nuôi cấy gọi là khí sinh, thường sẽ phát triển thành cơ quan mang bào tử

Phân loại nấm mốc thường dựa vào các đặc điểm hình thái khuẩn lạc và cấu trúc cơ quan sinh sản.[12]

III.1.1.2 Các phương thức sinh sản của nấm

Nấm có ba phương thức sinh sản: sinh sản sinh dưỡng, sinh sản vô tính và sinh sản hữu tính

- Sinh sản sinh dưỡng: Phương thức này được thực hiện bằng nhiều cách:

* Bằng bào tử vách mỏng: Khi gặp điều kiện bất lợi các tế bào dinh dưỡng tách

rời nhau, chuyển sang trạng thái sống tiềm tàng, nếu gặp điều kiện thuận lợi mỗi tế bào này lại nảy mầm và phát triển thành một hệ sợi mới Bào tử vách mỏng cũng là một biện pháp phát tán của nấm

* Bằng sợi nấm: Các đoạn sợi nấm đứt ra phát triển thành hệ sợi nấm mới

* Bằng hạch nấm: Khi gặp điều kiện bất lợi, cả hệ sợi bện xít lại với nhau và

các sợi bên ngoài được bao bởi màng dày rồi phát triển dày lên thành lớp vỏ bảo vệ Khi gặp điều kiện thuận lợi, hệ sợi lại phát triển phá vỡ lớp vỏ bọc

* Bằng nảy chồi: ở nấm men đơn bào, các tế bào phân chia sinh dưỡng nhưng

không tách rời nhau tạo thành chuỗi

- Sinh sản vô tính: Phương thức này thực hiện bằng cách hình thành động bào

tử hay bào tử Có hai loại bào tử là bào tử nội sinh và bào tử ngoại sinh:

* Bào tử nội sinh còn được gọi là bào tử kín hình thành do nhân và nội chất của cơ quan sinh sản vô tính phân chia không giảm nhiễm nhiều lần tạo nên một số lượng bào tử thường là rất lớn, đựng trong cơ quan sinh sản vô tính gọi là nang bào tử Nang bào tử thường được nâng khỏi sợi nấm bằng cuống gọi là cuống nang bào tử

* Bào tử ngoại sinh hay còn gọi là đính bào tử Sự hình thành bào tử ngoại sinh

về cơ bản là tương tự như bào tử nội sinh, chỉ khác là bào tử này đính trên cuống chứ không bọc trong nang bào tử, cuống ở đây gọi là cuống đính bào tử

- Sinh sản hữu tính:

Cơ quan sinh sản nằm trên hai sợi nấm khác nhau hay chỉ là sự kết hợp hai nhân trong một tế bào nhưng có nguồn gốc từ hai bào tử khác nhau Sau khi kết hợp, hợp tử có thể nghỉ hoặc phân chia giảm nhiễm ngay, tạo thành bào tử hữu tính đơn bội

Là kết quả của quá trình phân chia giảm nhiễm nên bào tử hữu tính trên mỗi cơ quan sinh sản là số chẵn và thường là 2,4,8.16, ít khi nhiều hơn Những nấm có bào tử hữu tính nằm trong tế bào mẹ thì gọi là nấm túi, còn những nấm có bào tử hữu tính đính tự

do trên cơ quan sinh sản hữu tính thì là nấm đảm Các cơ quan mang bào tử hữu tính

có thể nằm rải rác trên sợi nấm hoặc tập trung trên cơ quan được gọi là quả thể.[4]

Một số loại nấm, thường là nấm gây bệnh, có hiện tượng lưỡng hình

(dimorphism) tức là có hai phương thức sinh trưởng Phương thức giống nấm mốc là

có cả sợi cơ chất và sợi khí sinh, phương thức giống nấm men là hình thức nảy chồi Hiện tượng lưỡng hình phụ thuộc vào nhiệt độ hay nồng độ khí CO2.[12]

Bào tử nấm khác nhiều so với nội bào tử ở vi khuẩn Nội bào tử của vi khuẩn chỉ cho phép một tế bào vi khuẩn chống lại những điều kiện môi trường bất lợi Một tế bào vi khuẩn tạo thành một nội bào tử, bào tử này về sau nảy mầm tạo thành một tế bào vi khuẩn Quá trình này không phải là sự sinh sản bởi vì số lượng tế bào vi khuẩn không tăng lên Còn ở nấm mốc, sau khi một bào tử nảy mầm nó sẽ tạo thành một hệ sợi nấm Hệ sợi này tạo ra rất nhiều cuống sinh bào tử, trên mỗi cuống sinh bào tử lại sinh ra rất nhiều bào tử đính, các bào tử này sau khi rời khỏi cuống sinh bào tử thì tồn tại rất lâu trong không khí do nó có trọng lượng nhỏ và kích thước rất bé Nhờ gió, các bào tử phát tán đi khắp nơi Điều đó giải thích cho tốc độ phát triển và khả năng lây lan của các loài nấm mốc

III.1.1.3 Các yếu tố ảnh hưởng tới sự phát triển của nấm mốc:

- Độ ẩm:

Tình trạng vật lý của nước được biểu thị bằng khả năng hoạt động nhiệt động học của nước trong cơ chất, và được gọi là hoạt độ của nước (water activity), viết tắt là aw

Hoạt độ của nước trong cơ chất được biểu thị bằng tỷ lệ giữa áp suất hơi nước trên bề mặt cơ chất (P), so với áp suất hơi nước trên bề mặt nước nguyên chất (P0) ở cùng một nhiệt độ (t) xác định

aw = P/ P0 [13]

Giảm aw của môi trường sẽ dẫn đến làm chậm quá trình phát triển của vi nấm,

đến một mức độ nào đó sẽ làm ức chế hoàn toàn sự phát triển của chúng Khả năng chống chịu ở môi trường có aw thấp của những chủng vi sinh vật khác nhau là rất khác nhau Vi khuẩn là nhóm có khả năng chịu đựng kém nhất đối với môi trường có awthấp Khi aw môi trường bằng 0,9 thì hầu hết các loại vi khuẩn đều không phát triển

được Trong khi đó, nhiều loại vi nấm có thể phát triển ở aw = 0,8, đặc biệt có những loài nấm sợi phát triển ngay ở aw = 0,55 như Penicillium adametzzi (Imsem hatski, 1984) Loài Aspergillus repens có thể phát triển ở aw = 0,65 (Zlochevski, 1986) Tuy

nhiên theo nhiều tác giả thì aw tối thiểu cho nấm sợi ưa khô nói chung là trong khoảng

từ 0,7 - 0,75,[7] điều đó có nghĩa là nếu aw giảm xuống dưới 0,7 thì có thể loại trừ

được khả năng phát triển của rất nhiều loại vi nấm Để tồn tại và phát triển, các loài nấm sợi có hiện tượng thích nghi, cơ chế của hiện tượng này đã được nhiều tác giả nghiên cứu nhưng cho đến nay vẫn chưa thống nhất Một số tác giả cho rằng để tăng hoạt độ của nước khi ở trên cơ chất có aw thấp, tế bào vi nấm phải tăng nồng độ chất hoà tan trong nội bào bằng cách tự tổng hợp hoặc hấp thụ từ bên ngoài

Nhiệt độ và độ ẩm có ảnh hưởng tương hỗ đối với sự phát triển của vi nấm Nếu mức chịu đựng cao nhất của một loài đối với hoạt độ nước thấp được tìm ra ở xấp xỉ nhiệt độ tối ưu thì mức chịu đựng cao nhất của nhiệt độ lại xấp xỉ ở hoạt độ nước tối

ưu Như vậy hoạt độ nước tối ưu sẽ trở nên thấp hơn tại nhiệt độ cao và nhiệt độ tối ưu cho sự phát triển sẽ cao hơn khi có hoạt độ nước thấp

Khi nhiệt độ môi trường giảm thấp so với nhiệt độ tối ưu thì khả năng chịu khô hạn của vi nấm cũng giảm theo Theo Scott (1957) đối với vi nấm, chỉ số hoạt độ nước tối thiểu có thể tăng từ 0,01 đến 0,05 hoặc cao hơn khi nhiệt độ môi trường thay đổi trong khoảng 100C Ví dụ loài Alternaria citri, nhiệt độ phát triển tối ưu là 300C tương ứng với chỉ số aw tối thiểu là 0,838 Khi môi trường có nhiệt độ là 180C hay 370C, awtối thiểu sẽ tăng lên 0,87, ở 100C là 0,98 và ở 50C là 0,99 Trên đối tượng Aspergillus chevalieri, Ayerst đã chứng minh được mối quan hệ giữa độ ẩm và nhiệt độ Nhiệt độ

tối ưu của vi nấm này khi thay đổi trong khoảng từ 300C đến 350C thì hoạt độ nước tối

ưu sẽ là từ 0,885 đến 0,90 Mức độ hoạt độ nước tối thiểu aw = 0,7 tìm thấy khi nuôi cấy vi nấm này ở nhiệt độ tối ưu, khả năng phát triển được ở nhiệt độ cao hơn 400C của vi nấm này lại tìm thấy khi môi trường có hoạt độ nước tối ưu

- Các yếu tố khác:

Ngoài nhiệt độ và độ ẩm, còn rất nhiều yếu tố khác ảnh hưởng đến sự sinh trưởng và phát triển của nấm mốc như:

* Nấm thường phát triển tốt hơn trong môi trường có pH = 5, là môi trường quá axit đối với sự phát triển của đa số các loài vi khuẩn

* Hầu hết nấm mốc là do thiếu khí

* Hầu hết các loại nấm mốc có khả năng chống chịu áp suất thẩm thấu cao hơn

so với vi khuẩn, chúng có thể phát triển được ở những nơi có nồng độ đường và muối cao

* Nhu cầu dinh dưỡng của nấm về nguồn nitơ ít hơn so với vi khuẩn khi tạo nên một lượng sinh khối tương đương

* Nấm mốc có thể phát triển trên những cơ chất có độ ẩm rất thấp, thường là qúa thấp đối với sự phát triển của vi khuẩn

* Nấm mốc có khả năng đồng hoá các loại hydrocacbon phức tạp giống như lignin, celluloza, tinh bột, gelatin Có được khả năng này là do nấm là những sinh vật

hoá dị dưỡng (chemoheterotroph), có hệ thống enzym ngoại bào rất phát triển Các

enzym sau khi đã tiết ra môi trường xung quanh, chúng phân huỷ các hydrocacbon phức tạp thành các phân tử nhỏ, sau đó các phân tử này được vận chuyển qua màng vào tế bào Đó là nguồn dinh dưỡng để nấm xây dựng các thành phần cần thiết cho tế bào [12]

Sự đơn giản về nguồn dinh dưỡng, khả năng chống chịu với các điều kiện khắc nghiệt của môi trường, cùng với các phương thức sinh sản đa dạng của nấm đã giúp cho chúng có mặt ở khắp mọi nơi với số lượng lớn, trong đó giày da và giày vải là những cơ chất không tránh khỏi sự xâm nhập của nấm mốc

III.1.1.4 Tác hại của nấm trong nghành công nghiệp Da - Giầy:

Do đặc tính nhỏ, nhẹ của bào tử Khi một vùng nào đó trong kho bảo quản bị nhiễm nấm mốc, nhờ các luồng gió thổi xung quanh kho kèm theo sự chuyển động của không khí, bào tử nấm sẽ phát tán khắp phòng Khi một bào tử nấm mốc rơi xuống

bề mặt giầy vải, hoặc giày da, gặp điều kiện thuận lợi, bào tử sẽ nảy mầm tạo nên hệ sợi phát triển theo cả ba chiều trên bề mặt cơ chất Trong quá trình phát triển, hệ sợi nấm tiết ra các loại enzym ngoại bào để phân giải cơ chất Một kết quả nghiên cứu về

Aspergillus oryzae cho thấy, trong quá trình phát triển, chủng nấm này đã tạo ra một

loạt các loại enzym như: glucose dehydrogenaza, mannitol dehydrogenaza, β - fructofuranosidaza, amylaza, proteinaza, ureaza, glucosidaza, catalaza, peroxidaza, nucleaza, lecithilaza, phytaza, transglucosidaza, β - glucosidaza, β - glactosidaza, xylosidaza, endo - 1,3 - xylanaza, endo - 1,3 - glucanaza [7] Các enzym này sẽ tấn công vào các sợi vải (hydrocacbon có nguồn gốc từ thực vật) và các sợi gelatin trên da, các sợi đó sẽ bị mục và bị đứt ra, ảnh hưởng lớn

đến chất lượng của sản phẩm

Trong quá trình phát triển, nhiều loài nấm mốc đã sử dụng nguồn dinh dưỡng sẵn có trên các sản phẩm giầy vải và da để tổng hợp nên các loại sắc tố, các chất dư thừa trong quá trình trao đổi chất, các chất này được tiết vào sản phẩm tạo nên các vết

lốm đốm, ảnh hưởng đến tính phẩm mỹ của sản phẩm Một kết quả nghiên cứu về

Aspergillus oryza đã cho thấy, bên cạnh một loạt enzym được tạo ra trong quả trình

sinh trưởng thì hàng loạt chất khác cũng được tạo ra như: các axit amin L - α - aminoadipic, betaine, stachydrin … các axit vô cơ như: axit kojic, uric, pyruvic, ketoglutaric, indone - 3 - axetic… các chất bay hơi như: 1 - octen - 3 - ol, 3 - octanon, 3 - methylbutanol, riboflavin… hai chất phát huỳnh quang

là asperoterin A và B, một loạt các chất khác như: hydroxybenzene maltorizine, dẫn xuất piperazine, anhydroaspergillomarasmine, porphyrin coproporphyrin I… [7]

Trong quá trình phát triển, nhiều loại nấm cũng tạo ra các chất độc gây ảnh hưởng đến sức khoẻ của con người và vật nuôi như: aflatoxin được tạo ra bởi một số

loài thuộc chi Aspergillus (như Aspergillus flavus), nó là tác nhân gây ung thư gan ở

người Các chất độc ergot alkaloid, ergometrine, ergotamine, ergotaminine cũng được sinh ra từ nấm, chúng là những tác nhân gây bệnh co cơ, bệnh thần kinh, bệnh tim mạch và một số triệu chứng nôn mửa, ỉa chảy…[9] Ngoài ra nhiều chất độc khác cũng

được tạo ra như Aspergillus oryza tạo ra axit cyclopiazonic, là chất rất độc đối với

động vật có vú Penicillium implicatum tạo ra citrinin, sclerotiorin, 7 - epi - sclerotiorin, là những chất độc đối với thận Penicillium oxalicum tạo ra axit secalonic

và oxaline , là những chất rất độc đối với gan Penicillium steckii tạo ra curvularin, là chất độc đối với động vật có vú, chuột, phôi gà, tôm biển Eurotium chevalieri gây nên

bệnh xuất huyết ở vịt con

Nấm mốc mọc ở trên giầy nên khi đi giầy, da chân của người tiếp xúc trực tiếp với bào tử và hệ sợi nấm, từ đó gây nên những kích thích dị ứng cho con người Hiện

tượng dị ứng thường gặp ở Aspergillus fumigatus và một số loài nấm khác thuộc chi Aspergillus [8]

- Một số chi nấm mốc thường gặp trên giầy vải và giầy da:

* Chi Penicillium

Chi Penicillium là một trong những nhóm nấm phân bố rộng rãi trên toàn thế giới, cư trú trên rất nhiều ổ sinh thái Vì thế nên các loài thuộc chi Penicillium dễ dàng

phân lập từ nhiều vị trí khác nhau như: trên da giầy, trên vải bạt, trên thực phẩm, trên

các sản phẩm nông nghiệp… Penicillium không chỉ bao gồm những cấu trúc sinh bào

tử riêng rẽ, nổi bật mà còn có rất nhiều các đặc tính sinh lý có tác động to lớn đến cuộc sống của con người theo cả phương thức có lợi hay có hại

Một trong những ví dụ quan trọng nhất về khía cạnh có lợi của những chủng nấm này là sự phát hiện ra chất kháng sinh Penicillin, một sản phẩm trao đổi chất bậc

hai được tạo ra từ Penicillium chyrogenum, Penicillin đã cứu sống rất nhiều sinh mạng

thoát khỏi bệnh nhiễm trùng trong chiến tranh thế giới thứ hai Tiếp theo là sự phát

hiện ra griseofulvin, được sinh ra từ P griseofulvum, đã chữa trị rất nhiều bệnh nấm

tóc, nấm da, nấm vảy Những phát hiện đó tạo đà to lớn cho nghành công nghệ dược phẩm phát triển

Những hoạt tính mạnh mẽ của hệ thống enzym ngoại bào ở các loài thuộc chi

Penicillium đã góp phần phân giải nhanh các mảnh thực vật, các chất thải động vật,

các phần hữu cơ dư thừa trong chu trình tuần hoàn vật chất Một vài loại enzym như: β

- glucanaza, dextranaza, pectinaza, proteaza đã được sử dụng rất hiệu quả trong công

nghiệp thực phẩm và công nghiệp hoá chất Việc sử dụng P verruculosum trong sản

xuất những chất kích thích phát triển thần kinh và não bộ đang ngày càng hứa hẹn

Bên cạnh những mặt có lợi, một số loài thuộc chi Penicillium là nguyên nhân

gây nên sự thối rữa và những chuyển hoá sinh học theo hướng không mong muốn trên

đồng ruộng, trong bảo quản lương thực thực phẩm và các đồ dùng khác Khoảng 50 loài thuộc chi này tạo ra những độc tố nấm nguy hại đến sinh mạng của người và động vật Một số loài gây bệnh ở thực vật như bệnh xanh rễ ở táo, cam, chanh Một số loài gây bệnh cơ hội ở người [10]

Penicillium thường có màu xanh xám Cuống đính bào tử là hình đế trên gắn

các thể bình, dạng phức tạp phân nhánh một hoặc hai lần, đối xứng hoặc không Trên nhánh mang cái metulae, trên metulae mang thể bình, nhờ phân nhánh nên số thể bình tăng lên rất nhiều lần Toàn bộ cuống đính bào tử đang mang bào tử có dạng một cái chổi, do vậy nấm này có tên là nấm chổi [9]

* Chi Aspergillus

Cùng với chi Penicillium, chi Aspergillus cũng phân bố khắp nơi trên thế giới,

và có thể phân lập được từ nhiều nguồn khác nhau, Aspergillus cũng có thể phát triển

được ở những nơi có hoạt độ nước thấp từ đó tạo cho chúng có tính cạnh tranh cao trên những vật liệu khô như các loại hạt trong bảo quản, các nguyên liệu vải, da trong công nghiệp da giày

Một số loài thuộc chi Aspergillus là những tác nhân gây dị ứng cho con người,

một số loài gây bệnh cho người và cả động vật đặc biệt ở những cơ thể có hệ thống miễn dịch yếu Một số loài gây bệnh ở thực vật Nhiều loài tạo độc tố cao điển hình là

A flavus và A parasiticus sinh aflatoxin, một chất gây ung thư gan cho cả người và

động vật có vú

Aspergillus cũng được sử dụng nhiều trong công nghệ lên men để tạo các chất

có hoạt tính sinh học cao như: vitamin, enzym, chất kháng sinh, inteferon Ngoài ra chúng còn có nhiều ứng dụng trong công nghiệp thực phẩm và hoá chất.[11]

Aspergillus thường có màu vàng Cuống đính bào tử của Aspergillus gồm một

cuống hình ống, hình thành trên một tế bào của sợi nấm gọi là tế bào chân, đầu cuống phình to hình cầu, hình bầu dục hay hình chuỳ, trên nó là các giá thể hình chai để đính các chuỗi bào tử gọi là thể bình Nếu chỉ có một lớp thể bình thì gọi là thể bình sơ cấp, nếu có hai lớp thì lớp mang bào tử là thể bình sơ cấp, lớp đính với đầu cuống đính bào

tử là thể bình thứ cấp Toàn bộ cuống đính bào tử đang mang bào tử trông giống như một bông hoa trinh nữ thu nhỏ [4]

III.1.2 Vật liệu và phương phỏp nghiờn cứu phõn loại nấm mốc:

III.1.2.1 Nguyên liệu và thiết bị

- Nguyên liệu

* Mẫu phân lập

Các mẫu giầy da, giầy vải bị nhiễm nấm mốc được lấy tại công ty giầy da Hà Nội tại kho nguyên liệu, trên dây chuyền sản xuất giầy vải, giầy da, tại kho thành phẩm

* Môi trường phân lập và phân loại nấm mốc

Môi trường Czapek (g/l)

* Các thiết bị cần thiết cho nuôi cấy vi sinh

III.1.2.2 Phương pháp nghiờn cứu phõn loại nấm mốc:

- Kiểm tra nấm mốc có trong không khí theo phương pháp Kock

Đặt 5 đĩa Petri có chứa môi trường Czapek ở các vị trí khác nhau tại nơi cần kiểm tra Thời gian mở nắp hộp là 10 phút Đóng nắp hộp ủ 28 - 300C trong 3 - 5 ngày

Theo Omelianki, tổng số khuẩn lạc trên diện tích thạch 100cm2 để trong thời gian khoảng 5 phút bằng tổng số khuẩn lạc trong 10 lít không khí, qui đổi ra 1 m3trong không khí ta có công thức sau: [5]

X = A x 100 x 100/ S x K

Trong đó: X là tổng số bào tử nấm mốc trong 1 m3 không khí

A là tổng số khuẩn lạc trong một đĩa thạch

5 ngày, lấy ra, đếm khuẩn lạc có trong mỗi đĩa Petri Thí nghiệm lặp đi lặp lại 3 lần

Số bào tử nấm mốc/dm2 được tính theo công thức sau:

X = a x M/ V x S Trong đó: X là số bào tử nấm mốc trên 1 dm2

A là số khuẩn lạc trung bình trên đĩa thạch ở dịch ban đầu

M là số ml dung dịch để cấy

S là diện tích lau

- Kiểm tra nấm mốc trên giầy vải, giầy da

Lấy các mẫu giầy vải, giầy da đã bị nhiễm mốc trong quá trình bảo quản, cân các mẫu đó rồi cho vào nước cất vô trùng rửa sạch bằng các dụng cụ vô trùng Pha loãng nước rửa trên đến 105 Hút 0,05 ml dịch từ các ống pha loãng trên vào đĩa Petri

đã chứa sẵn môi trường Czapek, gạt đều bỏ vào tủ ấm 28 - 300C sau 3 - 5 ngày, lấy

ra, đếm khuẩn lạc có trong mỗi đĩa Petri Số lượng nấm mốc trong 1g giầy được tính theo công thức:

X = a x 1/k x 1/v Trong đó: a là số khuẩn lạc trung bình trên đĩa Petri

Phân loại nấm dựa vào 2 tiêu chí:

 Đặc điểm hình thái khuẩn lạc

- Quan sát dạng mặt khuẩn lạc

- Màu sắc khuẩn lạc (mầu sắc hệ sợi nấm, bào tử) và các đặc điểm khác như mặt trái, giọt tiết

 Đặc điểm hiển vi của nấm

- Đặc điểm của cơ quan sinh bào tử trần và bào tử trần (tế bào chân, giá sinh bào tử trần, bọng đỉnh giá, cuống thể bình, thể bình, hình dạng, kích thước )

- Đặc điểm của bào tử túi (thể quả, nang bào tử, bào tử túi)

Phân loại đến chi: dùng khoá phân loại của H.L.Barnet và cộng sự

Phân loại đến chi Aspergillus dùng khoá phân loại của Raper và Fennell, 1966

và khoá phân loại "Aspergillus and related telemorphs" của S S Tzean, J L Chen, G

Y Liou, C C Chen, W H Hsu (Đài loan) Để phân loại chi Penicillium chúng tôi cũng dùng khóa phân loại "Penicillium and related telemorphs" của các tác giả trên

[10]

III.1.3 Kết quả và thảo luận

III.1.3.1 Tại kho nguyên liệu

- Số lượng bào tử nấm mốc trong không khí

Trong không khí, tại kho nguyên liệu, 9 chủng nấm mốc được phân lập, các chủng được ký hiệu từ O1 - O9 Qua phân loại, chủng có ký hiệu O3 và O4 là cùng một loài Kết quả được trình bày tại bảng 1

Bảng 1: Số lượng bào tử nấm mốc trong m3 không khí tại kho nguyên liệu

Kí hiệu

chủng

Số lượng mốc (bào tử/m3)

- Số lượng bào tử nấm mốc trên bề mặt nguyên liệu và giá để nguyên liệu:

Tại kho nguyên liệu, trên các bề mặt nguyên liệu và giá để nguyên liệu, 6 chủng nấm mốc được phân lập, các chủng được ký hiệu từ N1 - N6 Kết quả được trình bày tại bảng 2

Từ những số liệu ở bảng 1 và bảng 2 cho ta thấy: Ngay từ khâu đầu tiên trong quá trình sản xuất giầy, kho nguyên liệu đã bị nhiễm rất nhiều nấm mốc Trong không khí, đó là hỗn hợp bào tử của nhiều loài nấm mốc khác nhau thuộc nhiều chi khác

nhau trong đó 2 loài Penicillium levitum và Aspergillus fumigatus có tần số bắt gặp

cao nhất Trên bề mặt nguyên liệu và bề mặt giá nguyên liệu, xác xuất bắt gặp nấm

mốc chủ yếu ở 2 chi Aspergillus và Penicillium Điều này được giải thích là do trên

mỗi loại cơ chất khác nhau (nguyên liệu) có sự thích ứng khác nhau giữa các loài nấm mốc, kho nguyên liệu là sự tập hợp của rất nhiều loại nguyên liệu vải, da nên trên mỗi loại nguyên liệu đó có những khu hệ nấm mốc khác nhau, chúng sinh sống trên đó rồi phát tán bào tử vào trong không khí, từ đó không khí trong kho nguyên liệu là hỗn hợp bào tử của nhiều loài

Bảng 2: Số lượng bào tử nấm mốc trên các giá để nguyên liệu

Kí hiệu

chủng

Số lượng mốc (bào tử x 105/dm2)

nhau trong đó 2 loài Penicillium levitum và Aspergillus fumigatus có tần số bắt gặp

cao nhất Trên bề mặt nguyên liệu và bề mặt giá nguyên liệu, xác xuất bắt gặp nấm

mốc chủ yếu ở 2 chi Aspergillus và Penicillium Điều này được giải thích là do trên

mỗi loại cơ chất khác nhau (nguyên liệu) có sự thích ứng khác nhau giữa các loài nấm mốc, kho nguyên liệu là sự tập hợp của rất nhiều loại nguyên liệu vải, da nên trên mỗi loại nguyên liệu đó có những khu hệ nấm mốc khác nhau, chúng sinh sống trên đó rồi phát tán bào tử vào trong không khí, từ đó không khí trong kho nguyên liệu là hỗn hợp bào tử của nhiều loài

III.1.3.2 Trên dây chuyền sản xuất

- Số lượng bào tử của nấm mốc trong không khí tại phân xưởng pha cắt

Trong không khí, tại phân xưởng pha cắt, 9 chủng nấm mốc được phân lập, các chủng được ký hiệu từ M1- M6 Qua phân loại, chủng có kí hiệu M4 và M6 thuộc cùng

mội loài, chủng có kí hiệu là M9, M10 chưa xác định được rõ loài Kết quả được trình bày tại bảng 3

- Số lượng bào tử của nấm mốc trong không khí tại phân xưởng may

Trong không khí, tại phân xưởng may, 5 chủng nấm mốc được phân lập, các chủng được ký hiệu từ K1- K5 Chủng có kí hiệu là K3 có hình dạng giống với chủng có

kí hiệu M10, chủng có kí hiệu K4 có hình dạng giống với chủng có kí hiệu M9 Kết quả

phân xưởng may và kho nguyên liệu ta thấy số lượng bào tử trong không khí tại kho nguyên liệu là nhiều nhất sau đến phân xưởng pha cắt rồi đến phân xưởng may Điều này được giải thích là do trong kho nguyên liệu, nền kho thấp, các cửa đều đóng kín,

hệ thống thông gió không có, đó là môi trường thuận lợi cho các loại nấm mốc phát triển Khi nguyên liệu được đưa sang phân xưởng pha cắt rồi đến phân xưởng may, trên đường đi, một phần bào tử rơi vãi, hơn nữa phân xưởng pha cắt và phân xưởng may lại có hệ thống thông gió nên số lượng bào tử trong không khí giảm hơn so với kho nguyên liệu là lẽ đương nhiên

- Số lượng bào tử nấm mốc trong không khí tại dây chuyền sản xuất giầy vải, giầy da

Trong không khí, tại dây chuyền sản xuất giầy vải, giầy da, 21 chủng nấm mốc

đã được phân lập, các chủng được kí hiệu từ T1 - T21 Qua phân loại, chủng có kí hiệu

là T1 và T2 thuộc cùng một loài, chủng có kí hiệu T12 và T20 thuộc cùng một loài Kết quả được trình bày ở bảng 5

Bảng 5: Số lượng bào tử nấm mốc trong 1m3 không khí tại dây chuyền sản

xuất giầy vải, giầy da

Kí hiệu

chủng

Số lượng mốc (bào tử/m3)

Từ những số liệu trên ta thấy 3 chi Aspergillus, Penicillium và Curvularia vẫn

là những chi thường bắt gặp nhiều nhất trong không khí

- Số lượng bào tử nấm mốc trên dây chuyền sản xuất giầy da

Trên bề mặt các thiết bị của dây chuyền sản xuất giầy da, 4 chủng nấm mốc

được phân lập, các chủng được ký hiệu từ M1 - M4 Chủng có kí hiệu là E4 có hình thái giống chủng có kí hiệu là M10 Kết quả được trình bày tại bảng 6

Bảng 6: Số lượng bào tử nấm mốc trên dây chuyền sản xuất giầy da

Kí hiệu

chủng

Số lượng mốc (bào tử/dm2)

- Số lượng bào tử nấm mốc trên dây chuyền sản xuất giầy vải

Trên bề mặt các thiết bị của dây chuyền sản xuất giầy vải, 8 chủng nấm mốc

được phân lập, các chủng được ký hiệu từ Q1 - Q8 Kết quả được trình bày tại bảng 7

Bảng 7: Số lượng bào tử nấm mốc trên dây chuyền sản xuất giầy vải

Kí hiệu

chủng

Số lượng mốc (bào tử/dm2)

Từ những số liệu ở bảng 6 và 7 cho ta thấy: 2 chi Aspergillus và Penicillium

thường có mặt trên các thiết bị của dây chuyền sản xuất giầy vải, giầy da Sự có mặt của các bào tử nấm mốc đó là kết quả của quá trình rơi vãi bào tử từ các nguyên liệu vải, da bị nhiễm mốc ban đầu Tần suất bắt gặp các loài nấm mốc là khác nhau phụ thuộc vào thời điểm lấy mẫu và mặt hàng da giầy mà công ty đang sản xuất

III.1.3.3 Tại phòng lưu kho

- Số lượng bào tử nấm mốc trong không khí

Trong không khí, tại phòng lưu kho, 14 chủng nấm mốc đã được phân lập, các chủng được kí hiệu từ L1 - L14 Qua phân loại, chủng có kí hiệu là L5 và L6 thuộc cùng một loài, chủng có kí hiệu L4 và L13 thuộc cùng một loài, chủng có kí hiệu L4 và

L13 thuộc cùng một loài Kết quả được trình bày ở bảng 8

Bảng 8: Số lượng bào tử nấm mốc trong1m3 không khí tại phòng lưu kho

Kí hiệu

chủng

Số lượng mốc (bào tử/m3)

- Số lượng bào tử nấm mốc trên giầy vải chưa xử lý

Từ 5 mẫu giầy vải, lấy tại phòng lưu kho, chúng tôi đã phân lập được 26 chủng nấm mốc, các chủng được kí hiệu từ V1 - V26 Qua phân loại, chủng có kí hiệu là V3 và

V5 ở mẫu giầy vải số 2 thuộc cùng một loài, chủng có kí hiệu là V11 và V14, V13 và V17

ở mẫu giầy vải số 4 thuộc cùng một loài, chủng có kí hiệu là V20, V24, và V26 thuộc cùng một loài Kết quả được trình bày ở bảng số 9

Bảng 9: Số lượng bào tử nấm mốc trên giầy vải chưa xử lý

- Sè l−îng bµo tö nÊm mèc trªn giÇy da ch−a sö lý

Từ 6 mẫu giầy da, lấy tại phòng lưu kho, chúng tôi đã phân lập được 14 chủng nấm mốc, các chủng được kí hiệu từ D1 - D14 Qua phân loại, chủng có kí hiệu là D3 và

D4 ở mẫu giầy da số 2 thuộc cùng một loài Kết quả được trình bầy ở bảng 10

Bảng 10: Số lượng bào tử nấm mốc trên giầy da chưa sử lý

Khác với giầy vải, loại nấm mốc chủ yếu phát triển trên giầy da là các loài

thuộc chi Penicillium đặc biệt là Penicillium implicatum, ngoài ra còn có các loài thuộc chi Aspergillus như Aspergillus oryzae, Aspergillus fumigatus và chi Emericellopsis

III.1.3.4 Miêu tả đặc điểm phân loại của các chủng nấm mốc phân lập được

- Các loài thuộc chi Penicillium

Penicillium baarnense: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc chậm, đường

kính khuẩn lạc 2,5 - 3cm sau 2 tuần nuôi cấy ở nhiệt độ 24 - 260C, khuẩn lạc mỏng, trung tâm có khía, bề mặt bằng phẳng, lúc đầu có mầu trắng sau có mầu nhạt do có các quả thể, giọt tiết nhiều, mặt trái không mầu đến mầu vàng nhạt Chổi đôi khi một tầng, thường phân nhánh 1 - 2 - 3 Metulae có kích thước 10 - 20à x 2,2 - 3,0à Thể bình xếp chặt có kích thước 8 - 10à x 2,2 - 2,8à Bào tử hình elip, có kích thước 3,0 -

3,5à x 2,5 - 2,8à đôi khi lên tới 7 - 8à x 3,5 - 4,5à, nhẵn Quả thể hình cầu có kích thước 100 - 200à, nang bào tử túi 10 - 12à, có 8 bào tử túi Bào tử túi hình elip tròn 5,0 - 5,5à x 4,0 - 4,5à đôi khi tới 6,0 - 6,5, có hai gờ xích đạo nổi rõ khoảng 0,5 - 1,0à, chúng thường kết hợp với nhau chặt tới mức như một gờ, bề mặt lồi, ráp

Penicillium brefeldianum: Hệ sợi nấm và khuẩn lạc phụ thuộc nhiều vào môi

trường nuôi cấy Khuẩn lạc có mầu trắng, kem , hồng đào, nâu nai, mầu lông chuột hoặc mầu lục nhạt đến lục xám Chổi một tầng Thể bình có khích thước 2,5 - 3à x 7 - 10à, dạng ống Cuống sinh bào tử ngắn, phồng nhẹ ở đỉnh, có nhánh bên, kích thước 3

- 4à x 5 - 150à

Penicillium fellutanum: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc chậm, đường

kính khuẩn lạc 2 - 2,5cm sau 12 - 24 ngày ở nhiệt độ phòng, bề mặt khuẩn lạc dai, mép mỏng, trung tâm phồng cao, có mầu lục lơ, lục vàng, giọt tiết ít hoặc không có, mặt trái mầu kem đến mầu hồng da hoặc tím đỏ nhạt Giá bào tử trần phồng ở đỉnh có kích thước 4,0 - 5,0à Chổi 1 tầng, hiếm khi có nhánh Thể bình 6 - 8à x 1,5 - 2,2 Bào

tử hình elip đến gần cầu 2,5 - 3,0à, vách dày, nhẵn hoặc ráp

Penicillium humuli: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc chậm, đường kính

khuẩn lạc 2 - 2,5cm sau 10 ngày ở 240C Khuẩn lạc nhiều rãnh, phồng cao, mặt khuẩn lạc nhiều bụi phấn, có mầu da bò đến da bò hồng nhạt, không phân vùng, không giọt tiết, mặt trái cùng mầu khuẩn lạc, thạch không mầu Chổi 1 tầng được sinh ra từ các sợi ngang hoặc có các chổi tẽ có nhánh gồm 2 - 3 metulae Metulae có kích thước 20 - 25à x 2,2 - 3,3à Thể bình 10 - 15à x 2,5 - 3,5à Bào tử nhẵn, lúc đầu hình elip sau hình gần cầu và cầu, kích thước 3,0 - 4,0 - 4,5à

Penicillium implicatum: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc chậm, đường

kính khuẩn lạc 1,5 - 2cm sau hai tuần ở nhiệt độ 240C Mặt khuẩn lạc chặt, dai, dạng nhung, nhiều bào tử, có mầu lục tối Giọt tiết có nhưng ít, mầu vàng hoặc nâu đỏ Mặt trái khuẩn lạc và thạch xung quanh có mầu vàng đến da cam đến nâu đỏ Chổi 1 tầng, hiếm phân nhánh Thể bình có kích thước 12à x 2,0 - 2,5à Bào tử hình elip, kích thước 2,5 - 3,0à x 2,0 - 2,5à, gần cầu 2,5 - 3,0à có thể tới 4,5 - 5,0à, vách dày, bề mặt nhẵn hoạc ráp nhẹ

Penicillium lapidosum: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc rộng, đường

kính khuẩn lạc 5 - 6cm sau 2 tuần ở nhiệt độ phòng Khuẩn lạc bằng phẳng hoặc có rãnh nhẹ, có mầu da cam vàng, lúc già mầu đỏ nhạt, có thể quả mầu nâu da cam, mặt trái có mầu đỏ da cam đến nâu đỏ khi già, giọt tiết nhiều Thể quả hình cầu, gần cầu

300 - 350à, rất cứng, lấy ra rất khó Chổi ít, 1 tầng, kích thước 10 - 20à x 2,5 - 3,0à Thể bình 6,0 - 7,5à x 2,0à, đỉnh hẹp Bào tử chủ yếu hình elip 2,5 - 3,0à x 2,0 - 2,5à, hiếm khi hình gần cầu 2,0 - 2,5à, nhẵn, vách dày

Penicillium levitum: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc khá chậm, đường

kính khuẩn lạc 3 - 4 cm sau hai tuần ở 250C, thường mỏng, trung tâm cao hơn, có các

khía đồng tâm, bề mặt khuẩn lạc có dạng nhung, mầu trắng sau có mầu da bò nhạt đến

da ở vùng mép, lúc già thỉnh thoảng có chỗ có mầu vàng hay mầu hoa huệ, bào tử ít Thể quả ít, nằm sâu trong hệ sợi nấm, không phát triển các túi bào tử và các bào tử túi khi trưởng thành không làm ảnh hưởng đến bề mặt khuẩn lạc Giọt tiết ít, mặt trái khuẩn lạc có mầu vàng đến da bò sẫm Chổi nhỏ, cấu tạo đơn giản Thể bình có 4 - 5 cái trên một vòng, xắp xếp dị thường, thường đứng thành đôi một hay đơn độc, kích thước thay đổi 7 - 12à x 2,2 - 3,3à, đỉnh hẹp rõ rệt Bào tử hình cầu, gần cầu, oval hoặc hình thoi, dày,nhẵn, kích thước thay đổi 4,0 - 6à và thường từ 3,0 - 8,0à

Penicillium nalgiovensis: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc chậm, đường

kính khuẩn lạc 3 - 3,5 cm sau hai tuần ở 240C, bề mặt khuẩn lạc bằng phẳng hoặc dạng len, phía sâu có khía nhẹ, lúc đầu mầu trắng, về sau có mầu lục vàng nhạt và thường

có mầu da hoặc hồng nhạt, vùng mép không mầu Giọt tiết nằm sâu trong khuẩn lạc,

có mầu sáng hoặc mầu rượu vang đỏ, mặt trái khuẩn lạc có mầu da cam đến mầu tối, thạch xung quanh khuẩn lạc có mầu tương tự Cấu trúc sinh bào tử thường là dạng nhánh được tạ nên từ sợi khí sinh Có metulae, thể bình hiếm khi có nhánh Metulae có kích thước 8 - 12à x 2 - 3à Thể bình 8 - 10à x 2à Bào tử hình cầu, gần cầu 3,2 - 3,6à, bề mặt nhẵn hoặc hơi xốp

Penicillium ochro – chloron: Khuẩn lạc mọc nhanh trên môi trường Czapek,

đường kính khuẩn lạc 4,0 – 5,0 cm sau hai tuần ở nhiệt độ 250C, bề mặt khuẩn lạc xốp, lúc đầu trắng sau có mầu hồng nhẹ rồi đến mầu da bò, mặt trái có mầu da bò đến mầu

da Chổi thường tập trung ở vùng mép nhiều hơn vùng trung tâm, kích thước thay đổi,

có 2,3,4 metulae, giữa nhánh và metulae thường khó phân biệt, kích thước 10 - 20à x 2,0 - 2,5à, bề mặt ráp Thể bình chặt nhưng tẽ ở đỉnh, có kích thước 7,5 - 8,5à x 2,0à,

đỉnh thể bình hẹp Bào tử hình elip, một đầu nhọn có kích thước 3,0 - 3,5à x 2,0 - 2,5à, nhẵn hoặc ráp nhẹ

Penicillium oxalicum: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc rộng, đường kính

khuẩn lạc 3,5 - 5,0 cm sau hai tuần, bề mặt khuẩn lạc bằng phẳng, có dạng nhung với nhiều bào tử hình thành ở các lớp sâu, có màu xanh lục lơ, khi già chuyển thành màu xám đậm , không có giọt tiết, mặt trái không màu hoặc có thể màu vàng Chổi hai tầng không đối xứng, hiếm khi thấy một tầng Có 2 - 3 metulae hoặc metulae và nhánh ở cùng một mức Metulae có kích thước 15 - 20à x 3,3 - 3,8à Thể bình có kích thước 9

- 15à x 3 - 3,5à với đỉnh thon nhọn Bào tử hình elip, nhẵn có kích thước 4,5 - 6,5à x

3 - 4à

Penicillium pusillum: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc chậm, đường

kính khuẩn lạc khoảng 1cm sau 12 ngày nuôi cấy, khuẩn lạc có mầu xám xanh với các

sợi trắng đến tím đỏ, mỏng và dai, mặt trái có mầu tím sẫm đến tím nâu với sắc tố khuyếch tán vào môi trường Chổi thường 1 tầng, đôi khi có các metulae trộn lẫn với các thể bình Thể bình hình trục, có kích thước 10 - 15 à x 1,8 - 2,0 Bào tử nhẵn, lúc

đầu hình trứng, sau hình cầu hoặc gần cầu, kích thước 2,0 - 2,5à

Penicillium roseo - purpureum: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc rất

chậm, đường kính khuẩn lạc 1,5 - 2cm sau hai tuần ở nhiệt độ 240C, khuẩn lạc có mầu trắng xám đến mầu da hoặc hồng nhạt, sau có mầu lục của đậu Hà Lan Giọt tiết ít hoặc không có, mầu hồng đến mầu tím đỏ Mặt trái khuẩn lạc có mầu da cam đỏ với môi trường thạch xung quanh có mầu tương tự nhưng nhạt hơn Chổi một tầng Thể bình có kích thước 6 - 7à x 1,5 - 2,0à Bào tử hình cầu, gần cầu, kích thước 2,0 - 2,5à,

bề mặt ráp nhẹ

Penicillium steckii: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc khá chậm, đường

kính khuẩn lạc đạt 2cm sau hai tuần ở 250C Mặt khuẩn lạc dạng nhung hoặc sợi nhẹ,bằng phẳng hoặc có rãnh, mép khuẩn lạc có mầu trắng, mầu xanh lục, mầu xám

đậm, có nhiều bào tử Chổi 2 tầng, có 3 - 5 metulae, kích thước metulae 12 - 15à x 2,8

- 3,0à Thể bình 8,0 - 10à x 1,8 - 2,2à Bào tử hình cầu, gần cầu, nhỏ 2,0 - 2,5à, bề mặt nhẵn hoặc ráp nhẹ

- Các loài thuộc chi Aspergillus

Aspergillus aculeatus: Khuẩn lạc mầu nâu đen, đường kính khuẩn lạc khoảng

5,5cm sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek ở 250C Khôngsinh giọt tiết Sắc tố hoà tan màu vàng nhạt Mặt sau khuẩn lạc từ không mầu đến mầu vàng nhạt Đầu cuống sinh bào tử hình cầu hoặc gần cầu, kích thước 35 - 100à Thể bình 6,0 - 10,0à x 3,75à Bào tử hình cầu, gần cầu, trứng, có gai, kích thước 3,5 - 5,0à

Aspergillus arenarius: Khuẩn lạc mầu lục vàng xẫm, đường kính khuẩn lạc

khoảng 1,0cm sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek ở 250C Giọt tiết ít Mặt sau khuẩn lạc có mầu vàng nâu xẫm Đầu cuống sinh bào tử kiểu xoắn hình thìa, kích thước 7 - 11à Metulae có kích thước 6 - 10à x 3,3 - 4,4à Thể bình có kích thước 5,0 - 6,5à x 2,0 - 2,5à.Bào tử cầu, gần cầu, kích thước 2,2 - 2,8à , bề mặt nhẵn, vách dầy

Aspergillus asperescens: Khuẩn lạc mầu vàng, lục nâu sẫm, đường kính khuẩn

lạc khoảng 2,5cm sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek ở 250C Giọt tiết nhiều, giọt nhỏ, mầu sáng đến vàng Sắc tố hoà tan từ không mầu đến mầu vàng nhạt Mặt sau khuẩn lạc từ mầu vàng đến mầu da cam Đầu cuống sinh bào tử có hình bán cầu

đến cầu, kích thước 9 - 15à Metulae có kích thước 6 - 9à x 3 -3,5à Thể bình có kích thước 7,5 - 9à x3 - 3,5à Bào tử hình elip đến hình cầu, bề mặt nhẵn đến ráp, kích thước 4 - 6à x 3,5 - 4,5à

Aspergillus fumigatus: Khuẩn lạc mầu lục xám, đường kính khuẩn lạc khoảng

4,5cm sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek ở 250C Không sinh giọt tiết

Không sinh sắc tố hoà tan Mặt sau khuẩn lạc không mầu đến mầu vàng Đầu cuống sinh bào tử trần có hình bình, kích thước 20 - 30à Thể bình có kích thước 6 - 8à x 2 - 3à Bào tử hình cầu, hơi cầu, bề mặt hơi ráp, kích thước 2 - 3,5à

Aspergillus niger: Khuẩn lạc mầu nâu tối, nâu đen, đường kính khuẩn lạc

khoảng 4,8cm sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek ở 250C Không sinh giọt tiết, không tiết sắc tố hoà tan Mặt sau khuẩn lạc có mầu vàng ngà Đầu cuống sinh bào tử hình cầu, kích thước 16 - 80à Metulae 5,6 - 58à x 3,8 - 13à Thể bình 3,6 - 14,3à x 2,4 - 5,2à Bào tử cầu, gần cầu, bề mặt gai ráp, kích thước 3,2 - 4,8à

Aspergillus oyzae: Khuẩn lạc mầu nâu vàng, đường kính khuẩn lạc khoảng

5,5cm sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek ở 250C Không sinh giọt tiết, không tiết sắc tố hoà tan, mặt sau khuẩn lạc không màu Đầu cuống sinh boà tử gần cầu, kích thước 40 - 75à Metulae 8,0 - 12,0à x 4,0 - 5,0à Thể bình 8,0 - 10,0à x 3,0 - 3,5à Bào tử hình elip, cầu, hoặc gần cầu, kích thước 4,5 - 10,0à

Aspergillus restrictus: Khuẩn lạc mầu lục, đường kính khuẩn lạc khoảng 1,0cm

sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek ở 250C Không sinh giọt tiết Không hình thành sắc tố hoà tan Mặt sau khuẩn lạc có mầu lục nhạt hoặc lục tối Đầu cuống sinh bào tử có hình bình, bán cầu, kích thước 6 - 12à Thể bình có kích thước 5,5 - 10à x 2

- 3,3à Bào tử hình trụ, elip hay hình quả lê, bề mặt ráp, kích thước 4 - 5à x 3 - 3,5à -

6 x 4à

Aspergillus sydowi: Khuẩn lạc mầu lục xanh, đường kính khuẩn lạc khoảng

4,0cm sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek ở 250C Giọt tiết nhiều, có mầu rượu vang đỏ Không sinh sắc tố hoà tan Mặt sau khuẩn lạc có màu đỏ rượu vang

Đầu cuống sinh bào tử trần có hình gần cầu, kích thước 15 - 20à Metulae có kích thước 6 - 7à x 2 - 3à Thể bình có kích thước 7 - 10à x 2 - 3à Bào tử có hình cầu, gần cầu, bề mặt ráp, kích thước 2,5 - 3,5à

Aspergillus zonatus: Khuẩn lạc mầu nâu vàng, đường kính khuẩn lạc khoảng

6,5cm sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek ở 250C Không sinh giọt tiết Mặt sau khuẩn lạc có mầu nâu nhạt Đầu cuống sinh bào tử có hình cầu hoặc bán cầu, kích thước 20 - 40à Metulae có kích thước 6,5 - 8,0à x 2,5 - 3,0à Thể bình 7,0 - 9,0 - 13,0à x 2,6à Bào tử hình oval, kích thước 2,8 - 3,4à x 2,2 - 2,8à

- Các loài thuộc chi Cuvularia

Cuvularia brachyspora: Khuẩn lạc dầy, màu nâu đen hoặc nâu sáng, bề mặt

khuẩn lạc dạng nỉ hoặc đôi khi xốp Sợi nấm gần như trong suốt hoặc nâu, nhẵn Hạch nấm đen, hình trụ Cuống sinh bào tử trần, đơn độc hoặc từng nhóm, thẳng hoặc khúc khuỷ, có mầu nâu, gần đỉnh nhạt hơn Bào tử sinh ra tạo thành cụm ở đỉnh cuống, thường hơi cong, có hình elip hoặc hình thoi tròn nhưng thường không đối xứng, 3 vách ngăn, vách giữa dày hơn, tối hơn, kích thước 19 - 26 x 10 - 14à

Cuvularia eragrostidis: Khuẩn lạc đen, dầy, sợi nấm mầu nâu đến mầu nhạt

Hạch nấm mầu đen, hình trụ Cuống sinh bào tử mọc đơn độc hoặc trong nhóm ở tận cùng hay ở bên cạnh sợi nấm, dạng thẳng, hoặc khúc khuỷ Bào tử hình elip, thường có

ba vách ngăn, vách giữa ở giữa bào tử, thường dài, đối xứng, kích thước 22 - 33à x 10 -18à hoặc có thể lên tới 18 - 37à x 11 -20à

Cuvularia pallescens: Khuẩn lạc không chặt, mầu nâu, nâu xám như tóc Sợi

nấm chìm, phân nhánh, ngăn vách, có mầu nâu nhạt, nhẵn Hạch nấm không có Giá bào tử trần đơn độc hoặc thành nhóm, đơn giản hoặc phân nhánh, thẳng hoặc cong, phồng ở đỉnh Bào tử thẳng hoặc cong nhẹ, có 3 vách ngăn ngang, hình elip 21 - 32à x

8 - 11à

- Một số loài thuộc các chi khác

Fusarium fusarioides: Khuẩn lạc mầu trắng sau trở thành mầu đỏ đến hồng, tốc

độ phát triển 3 - 5 cm sau hai tuần, khuẩn lạc khô Khuẩn lạc trở nên tối mầu hơn sau

10 - 14 ngày với sự với sự hình thành của các bào tử áo có mầu nâu Các bào tử nhỏ

được hình thành từ các tế bào sinh bào tử trần hướng ngọn, hình chuỳ hay hình chuỳ ngược Bào tử nhỏ, khô, hình quả lê đến chuỳ với đỉnh tròn, thường một vách ngăn, kích thước 13 - 15à x 3 - 4,5à Các bào tử lớn hình thành từ các thể bình từ cuống sinh bào tử trên mặt thạch, hình thùng Bào tử lớn hình thoi, đỉnh nhọn đến tròn, có 4 - 6 vách ngăn, kích thước 40 - 55 x 5 - 6à

Emericellopsis terricola: Khuẩn lạc trên môi trường OA có mầu hồng, ẩm ướt,

đường kính khuẩn lạc từ 4 - 7cm sau 2 tuần ở nhiệt độ 240C Bào tử túi hình elip, có kích thước 6,3 - 8,5à x 4,1 - 5à Bào tử trần hình elip, có kích thước 4,7 - 8,0à x 2,1 - 3,2à

Cladosporium nigrellum: Khuẩn lạc ướt, mầu nâu vàng sẫm đến nâu đen, dạng

nhung Cuống sinh bào tử trần, khúc khuỷ, mầu nâu đỏ, gần đỉnh nhạt, kích thước 250à x 5 - 9à Bào tử đơn giản hoặc từng chuỗi phân nhánh, có hình trụ, hình elíp, hình thoi hoặc hình hạt chanh, có từ 0 - 3 vách ngăn, nhẵn, kích thước 5 - 15à x 4 - 7à

Memnoniella echinata: Khuẩn lạc có mầu đen, dạng hạt, mặt trái mầu vàng đến

nâu xám Giá bào tử trần có kích thước 70 - 90à x 3 -5à, lúc đầu trong suốt, sau mầu vàng lục, đôi khi ráp Thể bình hình trứng ngược đến elip, mầu vàng lục nhạt, có kích thước 7 - 10à x 3 - 4à Bào tử thành chuỗi, hình cầu hơi khuyết, ở dưới bào tử lúc đầu nhẵn về sau ráp, có mầu xám vàng lục tối, kích thước 3 - 6à

Cercospora gerberae: Khuẩn lạc sinh sản lưỡng tính Giá bào tử trần trong bó

giá, có kích thước 70 - 170à x 4 - 5à Bào tử trong suốt, có 8 - 30 vách ngăn, kích thước 80 - 380à x 3 - 4à

Choanephora trispora: Sporangia và Sporangiola (nang sinh bào tử) sinh ra

riêng rẽ trên giá sinh bào tử trần Sporangia hình cầu, có lõi, sinh ra ở đầu giá bào tử

đơn giản, khi chín vỏ nang bào tử nứt đôi Giá bào tử trần không có cổ, bào tử trần mầu tối, có vạch với các sợi Sporangiola có ít bào tử, hình elip, không có lõi, sinh ra trên đỉnh bọng của các giá bào tử trần phân nhánh Bào tử trần nhẵn hoặc có vạch Dị tản, bào tử tiếp hợp sinh ra giữa các dây treo

Myrothecium verrucaria: Khuẩn lạc trên môi trường thạch khoai tây với hệ sợi

nấm xốp bông và các khối bào tử trần trên đệm giá mầu lục đen hoặc đen Sợi nấm nhẵn, không mầu, kích thước 1,5 - 3à Đệm nấm thường chỉ có một lớp mỏng Giá bào

tử trần tạo thành cụm trong đệm giá hoặc thành cụm nhỏ, ngăn vách không mầu, có 2 -

4 nhánh ở đỉnh giá bào tử trần hoặc đôi khi có vách ngang dưới đỉnh, phân nhánh 2

đến 3 lần, kích thước 2 - 3à x 12 - 30à Thể bình thành cụm 3 - 6 cái trên đỉnh các nhánh tận cùng hình trụ tròn đầu, đôi khi gần hình chuỳ, không mầu, mầu tối ở xung quanh lỗ đỉnh, kích thước 1,5 - 2,5à x 10 - 15à Bào tử trần hình elip, không ngăn vách, nhẵn, một đầu nhọn, một đầu bẹt, kích thước 2 - 3,5à x 6 - 8à, tạo thành khối mầu đen Các sợi nấm ở dìa đệm nấm phân nhánh, cong, có một nốt sần

Eurotium chevalieri: Khuẩn lạc lục sáng hoặc vàng nâu, đường kính khuẩn lạc

khoảng 2,5cm sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek ở 250C Mặt sau khuẩn lạc mầu đỏ da cam đến nâu Đầu cuống sinh bào tử hình cầu, kích thước 25 - 35à Thể bình 5,0 - 7,0à x 3,0 - 3,5à Bào tử trần hình oval đến elip, bề mặt có gai Bào tử túi hình hạt đậu, kích thước 4,6 - 5,0à x 3,4 -3,8à, bề mặt ráp, 2 gờ xích đạo mỏng, uốn cong

III.1.4 Kết luận

III.1.4.1 117 chủng nấm mốc đã được phân lập từ không khí, trên bề mặt

nguyên liệu, trên bề mặt giá để nguyên liệu, trên bề mặt thiết bị, trên các sản phẩm giầy vải, giầy da tại kho nguyên liệu, phân xưởng pha cắt, phân xưởng may, trên dây chuyền sản xuất giày vải, trên dây chuyền sản xuất giầy da, tại phòng lưu kho ở công

ty giầy da Hà Nội Dựa vào các đặc điểm hình thái khuẩn lạc, đặc điểm nuôi cấy trên các môi trường, hình thái cuống sinh bào tử và hình dạng bào tử, 108 chủng đã xác

định được tên loài và chi Số còn lại không thể xác định được do có các đặc điểm khác với các loài đã mô tả

III.1.4.2 Trong không khí tại các phân xưởng có hỗn hợp các loại bào tử của các loài nấm mốc khác nhau tập trung chủ yếu vào 3 chi: Aspergillus, Penicillium, Curvularia

III.1.4.3 Trên bề mặt nguyên liệu có các loài nấm mốc tập trung chủ yếu vào 2 chi: Aspergillus, Penicillium

III.1.4.4 Các sản phẩm giầy vải thường nhiễm các loài nấm mốc thuộc

chiAspergillus

III.1.4.5 Các sản phẩm giầy da thường nhiễm các loài nấm mốc thuộc chi

Penicillium

III.1.4.6 Tình hình ô nhiễm nấm rất nặng nề ở tất cả các khâu sản xuất, lưu

kho, trong không khí cũng như trên nguyên liệu và máy móc nhiễm Đó là nguyên nhân nhiễm nấm mốc trên sản phẩm

III.2 Cỏc hoỏ chất sử dụng và cụng nghệ liờn quan

III.2.1 Tổng quan

Vấn đề chống mốc cho các sản phẩm ngành da-giầy từ lâu đã được các nước có nền công nghiệp da-giầy phát triển hết sức quan tâm, có rất nhiều công trình được nghiên cứu ngăn chặn sự phá hoại của nấm mốc đối với các sản phẩm ngành da-giầy Việc dùng hoá chất, các phương pháp sinh học, các biện pháp vật lý phụ trợ như dụng

cụ sấy, phụ tẩm hoá chất, máy làm lạnh, máy chiếu tia tử ngoại để diệt khuẩn đã và

đang được áp dụng như là một công cụ hữu hiệu nhất để ngăn chặn sự phá hoại của nấm mốc

Có nhiều phương pháp để chấng sự phá hoại của nấm mốc, như dùng hoá chất bằng việc phối hợp giữa các chất phenol và azole hoặc hợp chất morpholine để bảo vệ

da tươi và da thành phẩm, chống được sự phá hoại của vi khuẩn khi lưu trữ và bảo quản da tươi cũng như da thành phẩm trong một thời gian dài Điểm ưu thế của phương pháp này là đã phát hiện ra các hợp chất azole như benzimidazole, imidazole, triazole và dẫn xuất của morpholine khi dùng phối hợp với các hợp chất phenol bảo quản tốt da tươi và da thành phẩm trong suốt quá trình sản xuất và lưu kho Chỉ cần dùng tối thiểu một chất triazole hoặc benzimidazole hoặc imidazole hoặc dẫn xuất của morpholine phối hợp với hợp chất phenol cũng đủ để bảo vệ da tươi và da thành phẩm trong sản xuất và lưu kho

Phương pháp dùng các hoá chất để tiêu diệt nấm mốc bằng cách sử dụng hỗn hợp 2-(thiocianometylthio) benzothiazole (TCMTB) và 3-iodo-2-propynyl-N-butylcarbamate (IPBC) với một số phụ gia như polyoxyetylene triglyceride, polyalkylene glycol ether, xanthan gum và dipropylene glycol dưới dạng sữa làm thuốc diệt nấm Hỗn hợp được thêm một mol polyoxyetylene triglyceride để trộn IPBC

và TCMTB sau đó thêm dung dịch chứa xanthan gum trong dipropylene glycol Thành phần hỗn hợp này rất phù hợp cho việc bảo quản trong công đoạn thuộc xanh cũng như trong công đoạn thuộc da Phương pháp này cũng nói lên rằng thành phần các hoá chất trên đặc biệt hữu hiệu trong công nghiệp sản xuất da thuộc, ngoài ra còn thể áp dụng trong sơn nước, keo nước và có thể nói rằng hỗn hợp này diệt mốc cũng rất hiệu quả đối với một số lĩnh vực khác như ngăn chặn sự phá hoại của nấm mốc trên các loại nguyên vật liệu và thành phẩm là vải sợi, keo dán và mỹ phẩm

Các công nghệ chống mốc ứng dụng trong quá trình sản xuất, lưu kho và lưu thông các loại giầy vải, giầy da bằng phương pháp sinh hoá học bằng cách sử dụng các

hợp chất polyme siloxane và silane như trialkoxysilane để bảo quản các nguyên vật liệu vô cơ, hữu cơ bằng cách tẩm vào các nguyên vật liệu này với các chất trên trong công đoạn hoàn tất để có một tính chất đặc biệt trong quá trình bảo quản nguyên vật liệu chống lại sự tác động của môi trường, đây là biện pháp sinh thái nhằm cách ly nguyên vật liệu với bào tử nấm và độ ẩm trong môi trường có thể áp dụng trong phần hoàn thiện khi sản xuất giầy da, nhưng các thiết bị ngâm tẩm có cấu tạo ra sao thì chưa thấy các tác giả đề cập đến; hoặc là phương pháp phun sấy và các biện pháp cô lập hơi

dung môi bay ra môi trường khi phun thì chưa thấy đề tài nêu ra

Phương pháp sử dụng hoá chất được sử dụng trong bảo quản da nguyên liệu cũng đã được Viện nghiên cứu Da giầy nghiên cứu năm 1977, nhưng chỉ áp dụng để chống các vi khuẩn thâm nhập vào da tươi nguyên liệu, chưa quan tâm

đến công nghệ chống mốc da thành phẩm và lưu kho ngay trong các công đoạn thuộc

III.2.2 Hoá chất diệt nấm mốc

III.2.2.1 O-phenylphenol(OPP) và muối kim loại kiềm Na-OPP

OPP hoặc muối kim loại kiềm của nó (Na-OPP) ở dạng chất khử trùng kết hợp với anđêhit và nitơ để kháng khuẩn, có thể dùng để pha vào các dung dịch nước như: keo nước, chất phân tán keo, dung dịch đậm đặc, các loại chất phụ gia, dung dịch huyền phù, dung dịch màu, men gốm sứ, xi giầy, sáp nhũ tương…ở đây chỉ quan tâm

đến công dụng ngành công nghiệp Da-giầy

Đặc tính hoá học của OPP

1 Thành phần: 2-phenyphenol, ortho-phenylphenol

2 Đặc điểm: dạng vẩy, không màu, có mùi nhẹ của phenol Hoặc

dạng tinh thể, màu hơi vàng

3 Hàm lượng TK: 99.5% min

4 Điểm chảy: 560C min

5 Trọng lượng riêng: 1.26 g/cm3(ở 200C)

6 Trọng lượng(flakes):650kg/m3

7 Ap suất hơi: ~0.0007 mbar (ở 200C); 1mbar (ở 1000C)

8 Điểm sôi: ~2860C (ở 1013mbar)

9 Điểm flash: ~1380C (DIN 51758)

13 Thời hạn sử dụng: 2 năm trong điều kiện bảo quản tốt

Đặc tính hoá học của Na-OPP

1 Thành phần: Natri-2-phenyphenolate

2 Đặc điểm: dạng vẩy, màu hơi vàng, là muối ngậm nước

3 Hàm lượng TK: 99.5% min C12H9NaO.4H2O (Na-OPP.4H2O)

8 Thời hạn sử dụng: 2 năm trong điều kiện bảo quản tốt

Cách sử dụng OPP và Na-OPP

Các sản phẩm không chứa halogen như OPP và Na-OPP đặc biệt có tác dụng tiêu diệt các loại vi khuẩn, nấm men, nấm mốc (xem bảng 1)

Trước khi sử dụng OPP và Na-OPP, cần phải hoà tan hoặc trong dung dịch xút

chứa một chút alcohol (như glycol), hoặc hỗn hợp nước/alcohol Để pha được dung dịch 30% trong dung dịch xút cần 1kg OPP hoà tan trong 1.85l nước và 0.5kg xút 50% Không cần phải pha sẵn dung dịch này vì nó sẽ chuyển dần thành dung dịch như Na-OPP, đương nhiên nó dễ dàng tan trong nước

Trong các dung dịch nước có pH<9, độ tan của OPP là rất nhỏ nếu như muốn

có một dung dịch OPP đậm đặc để bảo quản tốt nhất da nguyên liệu thì rất khó, điều

đó cũng đúng với Na-OPP Thậy vậy, nếu pH<9, dung dịch Na-OPP sẽ giải phóng ra OPP, trường hợp này nói lên rằng, Chlorocresol(CMC) hoặc muối natri-chlorophenolate, được dùng hoặc riêng hoặc phối hợp với OPP, Na-OPP, hoặc có thể phối hợp với một số chất hoạt hoá khác thì hiệu quả diệt mốc mới tốt

OPP và Na-OPP có sự bền nhiệt cao, tuy nhiên sự giải phóng các phần tử phenol tự do trong quá trình sản xuất như sấy keo… là không thể tránh khỏi, các phân

tử phenol hoạt tính rất dễ bay hơi Nếu như pH của dung dịch>9, sẽ giảm sự phóng thích các phần tử phenol

OPP và Na-OPP cũng có thể kết hợp với nhau trong các sản phẩm rắn như: keo bột, mực in cũng như ở các sản phẩm chau chuốt OPP, Na-OPP cũng có trộn và nghiền lẫn với bột để cho vào các sản phẩm rắn

Tác dụng của OPP và Na-OPP trên các loại nấm mốc

Bảng 11 Nồng độ nhỏ nhất (mg/l) chống được các loại nấm mốc của OPP,

Na-OPP (trong môi trường agar-agar)

Vi khuẩn

Bacillus subtilis 100-200 Pseudomonas aeruginosa 1500

Desulfovibrio desulfuricans 50 Pseudomonas flourescens 1000

Enterobacter aerogenes 200 Staphylococus aureus 200-300

Nấm men

Rhodotorula mucilaginosa 100 Torulautilis 100-200

Saccharomyces cerevisiae 200

Nấm mốc

Aureobasidium pullulans 35 Penicilium glaucum 50

Cephaloascus fragrans 200 Penicilium italicum 85

Cephaloascus pilifera 100 Phanerochaete sanguinea 100

Ceratomium globosum 50-100 Phialophora fastigiata 200

Cladosporium sphaerospermum 40 Rhizopus stolonifer 200

Gliocladium virens 200 Stereum sanguinolentum 100

Trichlophyton

mentagrophytes

50

Những lưu ý đối với các sản phẩm OPP, Na-OPP

OPP và Na-OPP là các sản phẩm ở dạng rắn, phải tránh tiếp xúc với da Cẩn

thận khi vận chuyển, sử dụng, tránh hít phải bụi của chúng Có thể tham khảo nhưu

lưu ý trên nhãn bao bì, và công nhân phải đeo đầy đủ bảo hộ lao động như quần áo,

găng tay, khẩu trang…nếu bị dây vào da, phải rửa ngay chỗ da đó bằng xà phòng và

xối thật nhiều nước, nếu bị bắn vào mắt, thì phải rửa sạch bằng nước, nếu không khỏi

thì phải đến bác sĩ ngay, quần áo nhiễm bẩn phải bỏ ra ngay