Khảo sát đặc điểm di truyền liên quan đến tính kháng thuốc và độc lực của các chủng streptococcus suis serotype 2 phân lập từ bệnh nhân và heo tại việt nam

[...]... S suis 2 Trong nghiên cứu, tôi sử dụng: - + + + + S suis 31533 (serotype 2) làm chứng dương: cps2J sly epf mrp S suis 31533 là chủng độc lực được phân lập từ heo bệnh ở Pháp và là chủng điển hình ở châu Âu - + − − + S suis 89-1591 (serotype 2) làm chứng âm: cps2J sly epf mrp S suis 89- 1591 là chủng độc lực được phân lập từ heo bệnh ở Canada và là chủng điển hình ở Bắc Mỹ Hai chủng S suis 31533 và. .. Bắc Giang(tháng 04 /20 07), 3 chủng ở Đồng Nai (tháng 02/ 2009), 4 chủng ở Sóc Trăng (tháng 07 /20 10) và 3 chủng ở Tiền Giang (tháng 08 /20 10) - 58 chủng được phân lập từ dịch não tủy và máu của những bệnh nhân nhiễm S suis điều trị tại bệnh viện Bệnh nhiệt đới (thành phố Hồ Chí Minh) từ tháng 03 /20 09 đến tháng 12/ 2010 ở các tỉnh miền nam Việt Nam 2. 2 Cách bố trí thí nghiệm Kháng sinh đồ: SXT, CHL, LEV,... lập từ người và heo bao gồm: - 22 chủng được phân lập vào tháng 03 /20 09 từ mẫu amidan của heo khỏe Những mẫu amidan này được thu nhận từ heo đã được kiểm tra sức khỏe trước khi đem đến các cơ sở giết mổ ở tỉnh Tiền Giang - 17 chủng được phân lập từ các cơ quan như tim, gan, phổi, lách, máu và não của heo nhiễm S suis, trong đó gồm có 5 chủng ở Hà Nội (tháng 03 /20 07), 2 chủng ở Bắc Giang(tháng 04 /20 07),... hết chủng phân lập từ bệnh nhân và heo bệnh tại Bắc Mỹ không chứa gen sly [7], [43] Do đó, suilysin không phải là yếu tố độc lực duy nhất và mang tính phổ quát của S suis 2 1.3.3 Protein phóng thích muramidase (muramidase released protein – MRP) và yếu tố protein ngoại bào (extracellular protein factor – EF) Vecht và cộng sự đã nghiên cứu protein của các chủng S suis 2 phân lập từ heo mang trùng và heo. .. mối liên hệ giữa gen tet(M) và Tn916 Bước Thời gian Biến tính 950C 2 phút Biến tính 950C 30 giây Bắt cặp 580C 1 phút Kéo dài 720 C 2 phút Kéo dài 2. 3.3.3 Nhiệt độ 720 C 30 chu kỳ 5 phút Khảo sát sự hiện di n của các yếu tố độc lực bằng multiplex PCR Tôi khảo sát sự hiện di n của các gen cps2J, sly, epf và mrp được xem là các yếu tố đóng vai trò quan trọng trong quá trình xâm nhiễm và phát sinh bệnh của. .. độ trên toàn bộ bộ gen [ 32] Hình 1.4: Sự khác biệt về trình tự promoter salKR giữa chủng S suis phân lập tại Việt Nam với chủng S suis phân lập tại Trung Quốc (P1: promoter salKR Trung Quốc, P2: promoter salKR Việt Nam) Luận văn thạc sĩ HVTH: Nguyễn Thanh Tòng Trang 14 Theo nghiên cứu của TS Ngô Thị Hoa và cộng sự, vùng upstream của salKR đối với các chủng phân lập tại Việt Nam bị mất một đoạn khoảng... so với các chủng phân lập tại Trung Quốc (kết quả chưa công bố) Do đó, nhóm nghiên cứu đã xác định một promoter tiềm năng cho salKR đối với các chủng phân lập tại Việt Nam (Hình 1.4) 1.4 Quá trình sinh bệnh của S suis 1.4.1 Khu trú tại đường hô hấp trên và xâm nhập vào tế bào biểu mô của ký chủ S suis có thể tồn tại dai dẳng và thoát khỏi hệ thống miễn dịch của heo sau khi xâm nhập và cư ngụ tại amidan... ngoại lai và được thu nhận trong quá trình chuyển gen theo chiều ngang (Hình 1.3) Để hiểu rõ vai trò của SalK/SalR trong tính độc lực, năm 20 08, Ming Li và cộng sự đã tiêm những chủng S suis 2 đột biến gen salKR vào heo, kết quả cho thấy heo không bị chết nhưng chủng đột biến lại mất khả năng cư trú tại mô so với chủng hoang dại Hơn nữa, SalK/SalR có thể kiểm soát tính độc lực của S suis 2 bằng cách điều... bằng máy NanoDrop và trữ DNA ở -20 0C 2. 3.3 Phương pháp multiplex PCR (Polymerase Chain Reaction) Tôi khảo sát sự hiện di n của những gen kháng kháng sinh và những gen liên quan đến độc lực của S suis 2 bằng phương pháp multiplex PCR  Nguyên tắc PCR PCR là phương pháp khuếch đại trình tự gen nhờ hoạt động tổng hợp một mạch DNA mới từ mạch khuôn của enzym DNA polymerase với sự hiện di n của mồi chuyên... khác Năm 20 07, Chen và cộng sự đã phát hiện được đảo gen độc lực 89K (PAI - pathogenicity island) chỉ hiện di n trong những chủng phân lập từ hai trận dịch tại Trung Quốc [8] Những cơ Luận văn thạc sĩ HVTH: Nguyễn Thanh Tòng Trang 12 chế phân tử như quorum sensing, hệ thống truyền tín hiệu hai thành phần và hệ thống vận chuyển ABC thường liên quan đến đảo gen độc lực này Do vậy, đảo gen độc lực có thể