Ngành: Bảo vệ thực vật Mã số: 9 62 01 12 Tên cơ sở đào tạo: Học Viện Nông nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu của luận án Trên cơ sở các kết quả nghiên cứu về thành phần loài, diễn biến
NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
VẬT LIỆU VÀ DỤNG CỤ NGHIÊN CỨU
- Một số giống nhãn đang được trồng phổ biến tại Việt Nam (nhãn Hương chi, Miền thiết, T2, Ido và Tiêu da bò) Các giống nhãn Hương chi, Miền thiết, T2 là các giống nhãn phổ biến ở phía Bắc; các giống nhãn Ido và Tiêu da bò là các giống nahxn phổ biến ở phía Nam Trong đó giống Ido có nguồn gốc từ Thái Lan, nhập nội vào Việt Nam; các giống nhãn còn lại là các giống nhãn của Việt Nam
- Quần thể ruồi B dorsalis và B correcta đã được thiết lập và nuôi duy trì trong điều kiện ổn định ở nhiệt độ 28℃, ẩm độ 70 - 80%, thời gian chiếu sáng: tối
(12: 12) bằng hệ thống các lồng nuôi tại Trung tâm KDTV sau nhập khẩu I Ruồi đục quả nuôi đến thế hệ thứ 4-5 được dùng để làm thí nghiệm Các lồng nuôi có kích thước 50 x 50 x 90 cm được phủ bằng lưới, trưởng thành ruồi đục quả được nuôi bằng men khô (Yeast Hydrolysate Enzymatic) trộn đường tỷ lệ 1: 4, đựng trong các đĩa petri (kích thước 6 x 1,5 cm) Ruồi sử dụng cho thí nghiệm khi đã đạt đến số lượng nuôi ổn định 1.500 cá thể trên 1 lồng nuôi
- Thức ăn nhân tạo từ men bia (TA1): gồm có 204 g men bia, 121,8 g đường, 2 g Nipagin, 2 g sodium benzoate, 23,1 g axit citric, 2 ml dầu mầm lúa mì (wheat germ oil), 10 g agar và 1.000 ml nước Các nguyên liệu (trừ bột agar) được trộn với 500 ml nước và xay nhuyễn, bột agar được nấu với 500 ml nước còn lại Đổ hỗn hợp agar đã nấu với hỗn hợp đã xay để xay trộn đều hỗn hợp, vớt bọt và đổ ra đĩa petri (25 g/đĩa)
- Thức ăn nhân tạo từ cám mì (TA2): 175 g cám mì, 50 g đường, 35 g nấm men torula (torula yeast), 25 g giấy vệ sinh, 0,75 g natri benzoate, 20 ml HCL (3,5% 1N), 650 ml nước Sử dụng 500 ml nước để xay các nguyên liệu theo tỷ lệ này, sau đó cho tiếp 150 m nước để xay lần nữa cho hỗn hợp được trộn đều Đổ hỗn hợp ra đĩa petri (25 g/đĩa)
Để chế biến thức ăn nhân tạo từ cám gạo (TA3), cần sử dụng 175 g cám gạo, 50 g đường, 35 g nấm men torula, 25 g giấy vệ sinh, 0,75 g natri benzoate, 20 ml HCL (3,5% 1N) và 650 ml nước Xay 500 ml nước cùng các nguyên liệu đã chuẩn bị, sau đó đổ thêm 150 ml nước vào xay tiếp cho đến khi hỗn hợp hòa quyện Chia hỗn hợp thành các đĩa petri, mỗi đĩa chứa 25 g.
- Thức ăn từ nhãn xay (TA4): 86 g cùi nhãn tươi giống Hương chi xay nhuyễn, 2 g nipagin, 12 g torula yeast Trộn đều hỗn hợp theo tỷ lệ trên, xay nhuyễn bằng máy xay và đổ hỗn hợp ra đĩa petri (25 g/đĩa) TA4 được sử dụng tươi, không nấu chín
Thức ăn sau khi nấu được đựng trong hộp kín, bảo quản trong ngăn mát tủ lạnh trong thời gian 2 tuần Riêng TA4 thì được sử dụng trong ngày
3.1.2 Dụng cụ và thiết bị nghiên cứu
- Các dụng cụ, thiết bị để nhân nuôi sinh học bao gồm: tủ định ôn; lồng nuôi, ống thu trứng; kính lúp; cân điện tử, kẹp gắp, lưới đen, dao mổ, băng keo màu, băng keo y tế, hộp nhựa đựng quả, …
- Buồng xử lý nhiệt lạnh nhãn hiệu Bondor (model LNHC-1), sai số 0,1℃, kích thước buồng xử lý 180 × 180 × 220 cm, trong đó kích thước trong lòng buồng xử lý 160 × 160 × 210 cm Thí nghiệm sử dụng ba cảm ứng nhiệt (sensor) để theo dõi nhiệt độ buồng xử lý và ba cảm ứng nhiệt khác để theo dõi nhiệt độ tâm quả
Riêng thí nghiệm xác nhận thông số thì sử dụng 07 cảm biến theo dõi nhiệt độ tâm quả Các cảm ứng nhiệt này được đặt ở lớp trên cùng, lớp giữa và lớp đáy của buồng xử lý Buồng xử lý nhiệt lạnh và cảm ứng nhiệt được hiệu chỉnh trước mỗi lần thực hiện thí nghiệm
- Các vật liệu khác phục vụ thu thập mẫu quả, ruồi và nhân nuôi.
NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Xác định thành phần loài và diễn biến tỷ lệ hại của các loài ruồi đục quả gây hại trên cây nhãn ở một số vùng trọng điểm trồng nhãn phía Bắc và phía Nam nước ta là một khâu quan trọng trong quá trình xây dựng biện pháp phòng trừ hiệu quả Các loài ruồi đục quả được ghi nhận gây hại trên nhãn gồm Bactrocera dorsalis (Hendel), B correcta (Bezzi), B carambolae (Drew & Hancock) và Dacus zonatus (Saunders) Tỷ lệ hại do các loài này gây ra có sự khác biệt giữa các vùng, tùy thuộc vào điều kiện khí hậu, giống nhãn và biện pháp canh tác Việc theo dõi và nắm bắt tình hình thành phần loài và diễn biến tỷ lệ hại của ruồi đục quả hại nhãn là cần thiết để xây dựng các biện pháp phòng trừ phù hợp, giảm thiểu thiệt hại kinh tế do loài dịch hại này gây ra.
- Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học, sinh thái của loài ruồi đục quả
B dorsalis, B correcta trên các loại thức ăn khác nhau
- Nghiên cứu sự ưa thích của ruồi đục quả Bactrocera spp đối với quả nhãn của các giống nhãn phổ biến
- Nghiên cứu thông số xử lý nhiệt lạnh đối với ruồi đục quả hại quả nhãn trước khi xuất khẩu
3.2.2.1 Điều tra thành phần loài và diễn biến tỷ lệ hại của các loài ruồi đục quả hại nhãn ở một số vùng trọng điểm trồng nhãn ở phía Bắc và phía Nam
Để xác định loài ruồi đục quả gây hại trên cây nhãn và mức độ thiệt hại, chúng tôi tiến hành khảo sát theo TCVN 13268-4:2021 về phương pháp điều tra sinh vật gây hại (Cục Bảo vệ thực vật, 2021) Nghiên cứu được thực hiện trong hai năm 2021 và 2022, cung cấp thông tin quan trọng về thành phần loài và mức độ gây hại của ruồi đục quả trên cây nhãn.
Để tiến hành điều tra, các vườn điều phải có diện tích tối thiểu 2 ha và đang trong giai đoạn khai thác Mỗi vườn sẽ được chọn 10 điểm điều tra, mỗi điểm lựa chọn 1 cây cách xa đường biên tối thiểu 1 hàng cây để đảm bảo độ chính xác Trên mỗi cây được chọn, 4 hướng ở tầng giữa được lựa chọn ngẫu nhiên để điều tra 2 chùm quả trên mỗi hướng Tổng cộng 10 quả được hái kết hợp với những quả rụng trong phạm vi tán cây và chuyển về phòng thí nghiệm để theo dõi.
Thời gian điều tra định kỳ 7 ngày/lần từ khi cây bắt đầu hình thành quả tới cuối vụ thu hoạch Các quả nhãn rụng dưới tán cây và một số quả nhãn ở trên cây được thu thập và đưa về phòng thí nghiệm để kiểm tra Các quả thối hỏng hoặc sắp thối hỏng sẽ được bổ ra để kiểm tra ngay, nếu phát hiện sâu non hoặc trứng của ruồi đục quả sẽ chuyển sang nuôi bằng thức ăn nhân tạo cho đến khi trưởng thành vũ hóa Đối với các quả còn nguyên vẹn hoặc chưa có dấu hiệu rõ ràng của vết châm thì đặt vào trong hộp nhựa có nắp lưới, dưới đáy lót một lớp đá vơ mi (vermiculite), theo dõi hàng ngày đến khi quả thối hỏng thì làm như bước trên
Chỉ tiêu theo dõi là thành phần loài ruồi và tỷ lệ hại trên quả nhãn (%)
Tỷ lệ hại trên quả nhãn được tính bằng công thức
Tỷ lệ hại (%) = Tổng số quả bị hại x 100 Tổng số quả điều tra
Các mẫu ruồi đục quả thu thập được từ ngoài đồng và bẫy được chuyển đến phòng thí nghiệm để xác định tên khoa học Định danh loài dựa theo hình thái học của mẫu trưởng thành, sử dụng khóa phân loại trong tài liệu "The Australian Handbook for the Identification of Fruit Flies Version 3.1" (The Plant Health Australia, 2018) và tiêu chuẩn quốc tế về KDTV số 27 về giám định sinh vật gây hại, phần 29 về loài Bactrocera dorsalis (International Plant Ptotection Convention, 2017).
* Xác định diễn biến số lượng trưởng thành ruồi đục quả bằng phương pháp treo bẫy
Sử dụng thuốc dẫn dụ côn trùng T-P Nongfeng 950SL (hoạt chất Methyl Eugenol 900g/l + Naled 50g/l) hay còn gọi là bẫy Methyl Eugenol (ME) dẫn dụ trưởng thành đực Cuộn bông (loại bông thấm nước) thật chặt tròn kiểu dạng đầu điếu thuốc lá (bấc), dài 4-5cm, đường kính 1cm Treo miếng bông vào trong bẫy
Lấy kim tiêm để bơm mồi (2-3ml/ 1 lần) Bẫy treo dưới tán cây, tránh ánh sáng trực xạ, cách mặt đất 1,5 - 2 m với số lượng 15 bẫy/vườn Thời điểm đặt bẫy từ khi bắt đầu hình thành quả cho đến khi thu hoạch xong Thời gian thu bẫy là 7 ngày/lần
Thí nghiệm được thực hiện năm 2021 tại Hải Dương và 2022 tại Cần Thơ.
Chỉ tiêu theo dõi: số lượng trưởng thành vào bẫy mỗi lần thu
* Định danh ruồi đục quả bằng phương pháp giải trình tự gen - Số lượng và nguồn gốc mẫu:
Các mẫu ruồi đục quả được thu tại vườn nhãn bằng phương pháp thu bẫy ở các tỉnh Tây Ninh, Cần Thơ, Hải Dương, Sơn La (đối với B.dorsalis) và Hưng
Yên, Cần Thơ, Tây Ninh, Hải Dương ( đối với B correcta) Mỗi điểm thu 3 mẫu cá thể ruồi đục quả để chiết tách DNA
DNA tổng số được chiết tách theo phương pháp chiết tách cá thể Mẫu ruồi đục quả thu được tại từng địa điểm được dùng để chiết DNA DNA tổng số thu được sẽ dùng cho phản ứng PCR Phương pháp chiết nhanh củaWang & cs (1993) được áp dụng để chiết tách DNA tổng số Một cá thể ruồi đục quả trưởng thành cái được nghiền trong 100 μl dung dịch NaOH 0,5 M trong ống bằng chày nhựa (Kontes™ Pellet Pestle) 5 μl dịch sau nghiền được chuyển sang ống eppendorf 1,5 ml có chứa 100 μl đệm Tris 100 mM, pH 8 và được dùng làm khuôn DNA cho phản ứng PCR
Phản ứng PCR được thực hiện bằng kít Phusion® High-Fidelity PCR
Phản ứng PCR được tiến hành với 3 μl dung dịch DNA, 21,5 μl dH2O và Enzyme DNA polymerase Cặp mồi sử dụng là LCO1490 (5’-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3’) và HCO2198 (5’-TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA-3’) (Folmer et al., 1994), được thiết kế để nhân đoạn Folmer dài 658 bp trên gen COI ty thể của côn trùng Điều kiện phản ứng PCR bao gồm bước tiến hành: 94℃ (1 phút); 35 chu kỳ phản ứng
92℃ (30 giây), 50℃ (30 giây), 72℃ (45 giây); kết thúc ở 72℃ (3 phút) Sản phẩm PCR được điện di trên gel agarose 1% chứa 0,5 mg/ml Ethidium bromide trong dung dịch đệm TAE (Tris Acetic acid EDTA) bằng hệ thống điện di Mupid-exU Mini System (Helixxtec) với hiệu điện thế 100 V chạy trong 30 phút
- Giải trình tự và phân tích trình tự
Sau điện di, sản phẩm PCR được tinh sạch từ gel agarose dùng bộ kít tinh chiết Expin Gel SV Kit (GeneAll Biotechnology) theo quy trình của nhà sản xuất
Sản phẩm DNA tinh sạch được kiểm tra hàm lượng bằng điện di agarose Sản phẩm DNA tinh chiết được gửi đi giải trình tự trực tiếp cả 2 chiều tại Viện Công nghệ sinh học
Trình tự đoạn DNA mã vạch của các mẫu thành công được sử dụng để tìm kiếm trình tự tương đồng trên GenBank bằng công cụ trực tuyến BLAST tại NCBI (Trung tâm Thông tin Công nghệ Sinh học Quốc gia GenBank) Trình tự DNA của ruồi đục quả B dorsalis và B correcta cũng được lấy từ cơ sở dữ liệu NCBI.
PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU
Phần mềm Excel và SPSS 20 hỗ trợ thống kê dữ liệu thu thập được Phân bố chuẩn của dữ liệu được kiểm tra bằng phép thử Kolmogorov-Smirnov Kiểm định Kruskal-Wallis áp dụng với dữ liệu không phân bố chuẩn, trong khi kiểm định ANOVA một chiều dành cho dữ liệu phân bố chuẩn Kiểm định Mann-Whitney U xác định sự khác biệt giữa từng cặp công thức thức ăn có dữ liệu không phân bố chuẩn Dữ liệu dạng tỷ lệ phần trăm (tỷ lệ cái, tỷ lệ hại trên quả na) được nhập dưới dạng nhị phân (1: cái/hại, 0: đực/không hại) Generalized Linear Model trong SPSS xác định sự khác biệt giữa các công thức Giá trị P nhỏ hơn hoặc bằng 0,05 trong mọi kiểm định biểu thị sự khác biệt có ý nghĩa thống kê.
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
THÀNH PHẦN LOÀI VÀ DIỄN BIẾN TỶ LỆ HẠI CỦA RUỒI ĐỤC QUẢ HẠI NHÃN TẠI MỘT SỐ TỈNH TRỌNG ĐIỂM TRỒNG NHÃN CỦA QUẢ HẠI NHÃN TẠI MỘT SỐ TỈNH TRỌNG ĐIỂM TRỒNG NHÃN CỦA
4.1.1 Diễn biến số lượng trưởng thành ruồi đục quả vào bẫy ME
Các phương pháp bẫy ruồi đục quả để phát hiện, theo dõi và kiểm soát loài sinh vật gây hại này đượ sử dụng rộng rãi ở trên thế giới nói chung và Châu Mỹ nói riêng dựa vào hành vi kiếm ăn, phản ứng của ruồi đục quả với các tín hiệu khứu giác và thị giác (Lasa & cs., 2024) Nghiên cứu này sử dụng bẫy treo với chất dẫn dụ ME tại vườn nhãn ở Hải Dương năm 2021 trên 3 giống nhãn Hương chi, Miền thiết và T2 Kết quả ghi nhận có 2 loài ruồi đục quả vào bẫy đó là B dorsalis và
Số lượng trưởng thành ruồi đục quả B dorsalis vào bẫy dẫn dụ có xu hướng gia tăng theo giai đoạn phát triển quả nhãn, đạt cao nhất vào thời kỳ chuẩn bị thu hoạch và thu hoạch quả Trong giai đoạn chuẩn bị thu hoạch, số lượng trưởng thành ruồi đục quả loài B dorsalis vào bẫy nhiều nhất ở vườn trồng nhãn giống Miền thiết (trung bình 34,81 con/bẫy/7 ngày), tiếp đó là T2 (32,06 con/bẫy/7 ngày) Đến giai đoạn thu hoạch thì vườn nhãn giống Hương chi có số lượng trưởng thành ruồi
B dorsalis vào bẫy nhiều nhất (trung bình 32,56 con/bẫy/7 ngày), trong khi ở vườn nhãn giống T2 số lượng trưởng thành ruồi B dorsalis vào bẫy chỉ đạt trung bình 19,38 con/bẫy/7 ngày (bảng 4.1)
Bảng 4.1 Số lượng trưởng thành ruồi đục quả vào bẫy ME ở các giai đoạn phát triển quả nhãn của 3 giống nhãn tại Hải Dương, năm 2021
Thời kỳ phát triển quả nhãn
Số lượng trưởng thành vào bẫy (con/bẫy/7 ngày)
B dorsalis B correcta B dorsalis B correcta B dorsalis B correcta
Hình thành và phát triển cùi quả
Chuẩn bị thu hoạch 31,44 13,69 34,81 21,19 32,06 20,81 Thời kỳ thu hoạch 32,56 15,06 23,63 17,31 19,38 16,50
Khác với kết quả thành phần loài thu được từ quả nhãn, đã ghi nhận có trưởng thành ruồi đục quả loài B correcta vào bẫy tại các vườn nhãn Số lượng trưởng thành ruồi đục quả B correcta vào bẫy cao nhất là ở giống Miền thiết trong giai đoạn chuẩn bị thu hoạch (21,19 con/bẫy/7 ngày), tiếp đó là giống T2 ở cùng thời kỳ với trung bình 20,81 con/ bẫy/7 ngày Ở giai đoạn quả non, giống Hương chi ghi nhận có ít ruồi đục quả B correcta vào bẫy nhất với trung bình 7,31 con/bẫy/7 ngày
Kết quả này có chút khác biệt so với kết quả nghiên cứu của nhóm Bùi Minh
Hồng & cs (2019) khi thu thập côn trùng gây hại tại thành phố Chí Linh, tỉnh Hải Dương bằng vợt, dụng cụ chuyên dụng khua và hứng phía dưới Nhóm này đã phát hiện cả ruồi đục quả B curcubitae ngoài B dorsalis Sự khác biệt này có thể lý giải do cách thu thập mẫu và điều tra khác nhau
Kết quả theo dõi bẫy dẫn dụ với chất ME tại vườn nhãn ở Cần Thơ năm 2022 được thể hiện tại bảng 4.2 cho thấy ngoài hai loài ruồi đục quả B correcta và B dorsalis còn phát hiện có trưởng thành loài ruồi B umbrosa Tương tự như ở phía Bắc, ruồi đục quả B correcta và B dorsalis được phát hiện trên bẫy ở tất cả các giai đoạn phát triển quả nhãn
Bảng 4.2 Số lượng trưởng thành ruồi đục quả vào bẫy Methyl Eugenol ở các giai đoạn phát triển quả nhãn của 2 giống nhãn tại Cần Thơ, năm 2022
Thời kỳ phát triển quả nhãn
Số lượng trưởng thành vào bẫy (con/bẫy/7 ngày)
Vườn trồng giống Ido Vườn trồng giống Tiêu da bò
B dorsalis B correcta B umbrosa B dorsalis B correcta B umbrosa
Hình thành và phát triển cùi quả
Thời kỳ thu hoạch 92,40 53,00 - 137,60 59,00 8,03 Đối với vườn trồng giống nhãn Ido, số lượng trưởng thành ruồi B correcta và B dorsalis ở thời kỳ thu hoạch (tương ứng là 53,00 và 92,40 con/bẫy/7 ngày) Đối với giống nhãn Tiêu da bò, loài B umbrosa được phát hiện ở tất cả các giai đoạn phát triển của quả nhãn Khác với bẫy treo trong vườn trồng giống nhãn Ido, số lượng trưởng thành các loài ruồi B correcta và B dorsalis vào bẫy ở giai đoạn chuẩn bị thu hoạch thấp hơn so với ở thời kỳ thu hoạch (bảng 4.2)
4.1.2 Tỷ lệ hại quả nhãn của ruồi đục quả B dorsalis năm 2021-2022
Quả rụng và quả trên cây được thu thập hàng tuần để đánh giá diễn biến tỷ lệ hại trên quả nhãn do loài ruồi B dorsalis đối với 5 giống nhãn Hương chi, Miền thiết, T2, Ido và Tiêu da bò Kết quả được thể hiện ở bảng 4.3
Kết quả ở bảng 4.3 cho thấy ở tất cả các địa điểm điều tra và trên tất cả các giống nhãn trong 2 năm 2021-2022 đều không phát hiện ruồi đục quả B dorsalis ở giai đoạn quả non và giai đoạn hình thành, phát triển cùi quả Có lẽ do ở 2 giai đoạn này cùi quả còn mỏng, quả nhãn chưa có độ ngọt nhất định và vỏ thì vẫn còn xù xì, dày nên không hấp dẫn trưởng thành ruồi đục quả đến đẻ trứng
Bảng4.3 Tỷ lệ hại của ruồi đục quả B dorsalis ở các giai đoạn phát triển quả nhãn ở một số giống nhãn tại Việt Nam giai đoạn 2021-2022
Tỷ lệ hại (%) ở các giai đoạn phát triển quả nhãn Quả non
Hình thành và phát triển cùi quả
Ghi chú: -: không phát hiện; Các chữ cái giống nhau trong cùng cột của một địa điểm điều tra, trong cùng một năm và giai đoạn sinh trưởng của quả nhãn biểu thị tỷ lệ quả bị hại không khác nhau với P>0,05 với kiểm định Generalized linear model với số liệu được nhập theo dạng nhị phân Ở giai đoạn chuẩn bị thu hoạch, ở các điểm điều tra tại phía Bắc, lác đác xuất hiện ruồi đục quả, nhưng sang đến thời kỳ thu hoạch tất cả các địa điểm điều tra và các giống nhãn đều nhiễm ruồi đục quả Đối với các tỉnh phía Nam, từ giai đoạn chuẩn bị thu hoạch, trên cả hai giống nhãn Ido và Tiêu da bò đều đã xuất hiện sâu non ruồi đục quả ở trong quả
Trong vụ thu hoạch, ruồi đục quả B dorsalis hoạt động mạnh nhất, gây hại trên tất cả các tỉnh khảo sát và các giống nhãn Tỷ lệ hại cao nhất ghi nhận ở các tỉnh phía Bắc với giống Hương chi đạt 1,98-2,41% và giống T2 là 0,45-1,47% Trong khi đó, tại các tỉnh phía Nam, tỷ lệ hại tương đối thấp, dao động từ 0,20-0,84% vào giai đoạn chuẩn bị thu hoạch đến 0,68-1,09% vào thời điểm thu hoạch.
2,05% ở thời kỳ thu hoạch Tỷ lệ hại trên quả ở nhãn Tiêu da bò đạt 0,29-2,05%, còn trên nhãn Ido đạt thấp hơn, chỉ là 0,2-1,35% Tuy nhiên, khi xử lý thống kê thì nhận thấy không có sự sai khác ở mức có ý nghĩa thống kê về tỷ lệ hại trên quả giữa các giống nhãn khác nhau (bảng 4.3) Điều tra ở phía Nam ghi nhận ruồi B dorsalis gây hại ở cả thời kỳ chuẩn bị thu hoạch và thời kỳ thu hoạch, còn ở phía Bắc chỉ ghi nhận loài này trong thời kỳ chuẩn bị thu hoạch Ghi nhận này tương tự như kết quả nghiên cứu về sự gây hại của B dorsalis trên đu đủ, chỉ các quả đu đủ ở giai đoạn cận thu hoạch hoặc chín hoàn toàn mới ghi nhận có sâu non ruồi đục quả Phương đông (Seo & cs., 1982)
Trong nghiên cứu này, tỷ lệ quả nhiễm ruồi đục quả đối với các giống nhãn đều rất thấp so với các loại cây trồng khác đã được ghi nhận trong các nghiên cứu của Nguyễn Thị Thanh Hiền (2014) Ví dụ, tỷ lệ hại đã ghi nhận trên quả đào mèo lên tới 74,7% vào năm 2012, trên quả hồng là 40,7% và trên quả gioi là 61,1% vào năm 2011 Kết quả tại nghiên cứu này tương đồng với tỷ lệ hại 1,8% năm 2011 và 1,6% năm 2012 đối với quả nhãn trong nghiên cứu của Nguyễn Thị Thanh Hiền (2014) Đặc điểm vật lý của quả nhãn, nhất là phần vỏ quả được coi như một rào cản cơ học có tác dụng ngăn chặn việc đẻ trứng vào trong quả của trưởng thành các loài ruồi đục quả có ống đẻ trứng ngắn như A fraterculus, A suspensa, C.capitata, và B dorsalis Do ống đẻ trứng ngắn, trứng thường được đẻ ở bề mặt quả và nhanh chóng bị khô rồi chết (Aluja & Mangan, 2008; Gould & cs., 1999) Thực tế, sự gây
Kết quả thu thập ruồi đục quả trên quả nhãn tại các tỉnh trồng nhãn trọng điểm chưa phát hiện ruồi đục quả B correcta trong khi kết quả thu thập bằng mẫy ME đã ghi nhận loài ruồi này có xuất hiện trong vườn nhãn Độ dày vỏ quả của quả nhãn có thể là một yếu tố ngăn cản việc châm ống đẻ trứng của ruồi đục quả
B correcta; thêm vào đó, quả nhãn có lớp màng vỏ quả tương đối dai, dày cũng là một lớp bảo vệ khỏi sự gây hại của B correcta Đến nay, chỉ duy nhất công bố của Allwood & cs (1999) xác nhận phát hiện
B correcta trên quả nhãn dựa vào việc phát hiện cá thể loài ruồi đục quả này trên
ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA RUỒI ĐỤC QUẢ BACTROCERA SPP
TRÊN CÁC THỨC ĂN KHÁC NHAU 4.2.1 Đặc điểm sinh học của ruồi đục quả Bactrocera spp trên các giống nhãn
4 2 1 1 Ảnh hưởng của các giống nhãn đến một số chỉ tiêu sinh học của ruồi đục quả phương đông B dorsalis a Ảnh hưởng của các giống nhãn đến kích thước và khối lượng các pha phát dục của ruồi đục quả B doralis
Kích thước và khối lượng cơ thể là những yếu tố quan trọng để nghiên cứu sự phát triển của quần thể côn trùng nói chung và ruồi đục quả nói riêng Các chỉ tiêu này có mối liên quan chặt chẽ tới sức khỏe và khả năng sinh sản của ruồi đục quả Thức ăn pha sâu non có ảnh hưởng đáng kể đển kích thước và khối lượng các pha phát dục của ruồi đục quả Kết quả đánh giá ảnh hưởng của 05 giống nhãn đến kích thước và khổi lượng các pha phát dục của ruồi đục quả B dorsalis được thể hiện ở bảng 4.8
Chiều dài: chiều dài cơ thể của sâu non tuổi 1 và sâu non tuổi 2 không có sự khác biệt rõ rệt khi nuôi bằng các giống nhãn khác nhau Ở giai đoạn sâu non tuổi
3, loài B dorsalis nuôi bằng nhãn giống Ido có kích thước nhỏ nhất (8,171mm) trong khi kích thước chiều dài nuôi bằng các giống nhãn khác không có sự khác biệt rõ rệt Chiều dài pha nhộng của ruồi đục quả B dorsalis đạt cao nhất khi nuôi bằng giống nhãn Miền thiết và T2, lần lượt là 5,510mm và 5,319mm Ở pha trưởng thành thì cả trưởng thành đực và trưởng thành cái khi nuôi bằng giống Miền thiết và T2 vẫn là các công thức có kích thước chiều dài lớn nhất, lần lượt là 7,112mm, 8,865 mm đối với Miền thiết và 8,865mm, 8,689mm đối với T2
Chiều rộng: số liệu tại bảng 4.9 cho thấy sâu non tuổi 2 khi nuôi bằng giống nhãn Ido cho kích thước chiều rộng thấp nhất (1,16mm) trong khi không có sự khác biệt rõ rệt khi nuôi bằng các giống khác Ở pha sâu non tuổi 3, ruồi đục quả
B dorsalis nuôi bằng giống nhãn Miền thiết và T2 cho chiều rộng lớn nhất, lần lượt là 1,835 mm và 1,806mm, các giống nhãn khác (Hương chi, Ido và Tiêu da bò) cho kích thước chiều rộng thấp hơn và không có sự khác biệt rõ rệt Pha nhộng của loài B dorsalis có chiều rộng thấp nhất khi nuôi bằng giống nhãn Hương chi và Tiêu da bò, cao nhất khi nuôi bằng giống Miền thiết Đối với pha trưởng thành, trưởng thành cái có kích thước chiều rộng lớn nhất khi nuôi bằng giống T2 (2,569mm), tiếp đó là giống Miền thiết (2,347mm) và Ido (2,353mm), thấp nhất là khi nuôi bằng giống Tiêu da bò (2,104mm)
Khối lượng các pha phát dục cũng có sự sai khác đáng kể khi nuôi bằng các loại thức ăn khác nhau Kết quả theo dõi khối lượng một số pha phát dục của
B dorsalis khi nuôi bằng các giống nhãn khác nhau được thể hiện ở Bảng 4.9 Ở pha sâu non tuổi 3 và pha nhộng, ruồi đục quả B dorsalis khi nuôi bằng giống nhãn T2 đều cho khối lượng lớn nhất, lần lượt là 18,243 mg và 12,156 mg Khối lượng của trưởng thành đực không có sự khác biệt ở mức có ý nghĩa thống kê khi nuôi bằng 5 giống nhãn khác nhau trong thí nghiệm Khối lượng trưởng thành cái loài B dorsalis nuôi bằng giống nhãn Miền thiết (15,347mg) và T2 (15,087mg) cho khối lượng lớn nhất, tiếp đó là giống Tiêu da bò (14,015mg) trong khi đó Hương chi là giống nhãn cho khối lượng trưởng thành cái thấp nhất (12,46mg)
Từ kết quả nghiên cứu này có thể thấy giống nhãn Miền thiết và T2 phù hợp với sinh trưởng của ruồi đục quả B dorsalis Nếu so sánh theo nhóm giống theo vùng miền thì loài B dorsalis khi nuôi bằng giống nhãn Hương chi có kích thước, khối lượng nhỏ nhất trong nhóm giống nhãn phía Bắc trong khi đó trong nhóm giống nhãn phía Nam, dường như nuôi sâu non bằng nhãn Tiêu da bò có kích thước nhỉnh hơn so với Ido
Chiều dài của sâu non tuổi 1 RĐQ B dorsalis khi nuôi bằng các giống nhãn tương đương với khi nuôi bằng đu đủ, ổi hay chuối trong nghiên cứu của Waqar & cs (2018a) Trong khi đó, chiều dài của sâu non tuổi 3 khi nuôi bằng giống nhãn Miền thiết và T2 có phần lớn hơn so với nuôi bằng đu đủ (8,44m) ổi (8,94mm) và chuối (8,34mm)
Bảng 4.8 Ảnh hưởng của các giống nhãn đến kích thước các pha phát dục của ruồi đục quả Bactrocera dorsalis
Thức ăn Trứng SN tuổi 1 SN tuổi 2 SN tuổi 3 Nhộng TT đực TT cái
Hương chi 1,212 a ±0,019 2,507 a ±0,089 5,882 a ±0,100 8,967 b ±0,151 4,948 a ±0,064 6,815 ab ±0,132 8,196 a ±0,088 Miền thiết 1,192 a ±0,018 2,503 a ±0,072 5,775 a ±0,113 9,285 b ±0,160 5,510 b ±0,093 7,112 b ±0,077 8,865 b ±0,207 T2 1,214 a ±0,021 2,506 a ±0,087 5,877 a ±0,101 9,167 b ±0,119 5,319 b ±0,067 7,263 b ±0,107 8,689 b ±0,072 Tiêu da bò 1,212 a ±0,019 2,507 a ±0,089 5,882 a ±0,100 8,968 b ±0,151 4,948 a ±0,064 6,917 ab ±0,1141 8,464 ab ±0,066
Hương chi 0,264 a ±0,006 0,460 a ±0,020 1,260 b ±0,020 1,720 a ±0,016 2,125 a ±0,035 2,068 a ±0,072 2,165 ab ±0,064 Miền thiết 0,291 a ±0,013 0,477 a ±0,029 1,373 b ±0,059 1,835 b ±0,056 2,427 c ±0,063 2,707 c ±0,081 2,347 b ±0,050
T2 0,263 a ±0,006 0,460 a ±0,020 1,321 b ±0,026 1,806 b ±0,022 2,362 bc ±0,035 2,603 c ±0,028 2,569 c ±0,057 Tiêu da bò 0,265 a ±0,007 0,433 a ±0,017 1,211 b ±0,033 1,722 a ±0,016 2,125 a ±0,035 2,338 b ±0,055 2,104 a ±0,056 Ido 0,269 a ±0,008 0,530 b ±0,020 1,160 a ±0,020 1,688 a ±0,005 2,174 ab ±0,064 2,223 a ±0,046 2,353 bc ±0,050
Ghi chú: n: số cá thể theo dõi (n ) Điều kiện thí nghiệm ở nhiệt độ 28±0,5℃, ẩm độ 70-80%
Các chữ khác nhau trong cùng một cột biểu diễn sự sai khác rõ rệt ở mức P≤ 0,05 với kiểm định Kruskal Wallis (chiều dài pha trứng, sâu non tuổi 1, sâu non tuổi 2, nhộng, trưởng thành cái; chiều rộng pha trứng, nhộng); kiểm định One Way ANOVA (chiều dài sâu non tuổi 3, trưởng thành đực; chiều rộng sâu non tuổi 1, sâu non tuổi 2 và sâu non tuổi 3 trưởng thành đực và trưởng thành cái); χ2 -, df - và P - là giá trị của kiểm định Kruskal Wallis với mẫu phân bố không chuẩn; F -, df - và P - là giá trị của kiểm định One Way ANOVA với mẫu phân bố chuẩn;
Bảng 4.9 Ảnh hưởng của các giống nhãn đến khối lượng một số pha phát dục của ruồi đục quả Bactrocera dorsalis
Thức ăn Sâu non tuổi 3
Hương chi 17,060 b ±0,282 11,290 ab ±0,308 10,360 a ±0,699 12,460 a ±0,727 Miền thiết 17,790 bc ±0,238 11,810 bc ±0,403 11,304 a ±0,203 15,374 c ±0,285 T2 18,234 c ±0,201 12,156 c ±0,254 11,297 a ±0,185 15,087 c ±0,207 Tiêu da bò 16,005 a ±0,328 10,896 ab ±0,403 10,476 a ±0,203 14,015 b ±0,285
Ghi chú: số cá thể theo dõi n Đơn vị tính : miligram (mg) Điều kiện thí nghiệm ở nhiệt độ 28℃±0,5, ẩm độ 70-80% Các chữ khác nhau trong cùng một cột biểu diễn sự sai khác rõ rệt ở mức P≤ 0,05 với kiểm định Kruskal Wallis (sâu non tuổi 3, nhộng, trưởng thành cái); kiểm định One Way ANOVA (trưởng thành đực); χ2 -, df - và P - là giá trị của kiểm định Kruskal Wallis với mẫu phân bố không chuẩn;
F -, df - và P - là giá trị của kiểm định One Way ANOVA với mẫu phân bố chuẩn;
Như vậy, có thể thấy ruồi đục quả B dorsalis khi nuôi bằng thức ăn là giống nhãn Miền thiết và T2 có kích thước của hầu hết các pha phát dục lớn hơn khi nuôi bằng những giống nhãn còn lại; B dorsalis khi nuôi bằng nhãn Hương chi hoặc Tiêu da bò có kích thước nhỏ nhất trong số các giống nhãn thí nghiệm b Ảnh hưởng của các giống nhãn đến thời gian phát dục và vòng đời của loài B dorsali
Thời gian phát dục các pha là yếu tố quan trọng để xác định loại thức ăn phù hợp hoặc không phù hợp với sự sinh trưởng, phát triển của côn trùng nói chung và ruồi đục quả nói riêng Các loại quả tươi khác nhau sẽ có ảnh hưởng khác nhau đến thời gian phát dục của ruồi đục quả Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của các giống nhãn khác nhau đến thời gian phát dục của ruồi đục quả B dorsalis được thể hiện ở Bảng 4.10 Đối với ruồi đục quả B dorsalis cái, giai đoạn sâu non tuổi 1 và tuổi 2 thì khi nuôi bằng Hương chi và Tiêu da bò có thời gian phát dục dài hơn hẳn khi nuôi bằng 3 giống nhãn còn lại Thời gian phát dục của sâu non tuổi 3 khi nuôi bằng nhãn giống Miền thiết có thời gian phát dục ngắn nhất (chỉ 2,06 ngày), tiếp đó là T2 (3,62 ngày) và Ido (3,55 ngày); và lớn nhất là giống Hương chi (5,42 ngày) và Tiêu da bò (5,50 ngày) Thời gian tiền đẻ trứng khi nuôi bằng giống nhãn Miền
Bảng 4.10 Ảnh hưởng của các giống nhãn đến thời gian phát dục và vòng đời của ruồi đục quả Bactrocera dorsalis
Thời gian phát dục (TB±SE) (ngày)
Sâu non tuổi 3 Nhộng Trước trưởng thành
Thời gian vòng đời Ruồi cái
Hương chi 64 2,05 a ±0,03 2,63 b ±0,09 2,53 b ±0,13 5,42 c ±0,30 11,09 a ±0,55 23,72 d ±0,58 14,33 b ±0,68 37,46 d ±0,90 Miền thiết 62 2,03 a ±0,13 1,24 a ±0,05 1,74 a ±0,08 2,06 a ±0,06 10,27 a ±0,35 17,35 a ±0,34 10,35 a ±0,16 27,71 a ±0,26 T2 61 2,08 a ±0,12 1,25 a ±0,06 1,46 a ±0,06 3,62 b ±0,10 10,31 a ±0,16 18,72 b ±0,20 13,93 b ±0,09 32,66 b ±0,21 Tiêu da bò 65 2,05 a ±0,03 2,65 b ±0,09 2,42 b ±0,15 5,40 c ±0,30 11,06 a ±0,55 23,57 d ±0,58 14,25 b ±0,68 37,82 d ±0,69
Hương chi 70 2,00 a ±0,00 2,76 c ±0,07 2,63 c ±0,13 5,90 c ±0,34 10,89 a ±0,47 24,17 d ±0,62 Miền thiết 56 1,98 a ±0,13 1,32 a ±0,06 1,73 ab ±0,08 1,91 a ±0,05 10,04 a ±0,28 16,98 a ±0,31 T2 54 2,09 a ±0,13 1,26 a ±0,06 1,54 a ±0,07 3,61 b ±0,10 10,07 a ±0,19 18,57 b ±0,24 Tiêu da bò 69 2,00 a ±0,00 2,74 c ±0,07 2,39 c ±0,13 5,90 c ±0,34 10,81 a ±0,48 23,84 d ±0,60
Ghi chú: n là số cá thể theo dõi, Điều kiện thí nghiệm ở nhiệt độ 28±0,5℃, ẩm độ 70-80% Các chữ khác nhau trong cùng một cột biểu diễn sự sai khác rõ rệt ở mức P≤
Thời gian vòng đời của B dorsalis dài nhất khi nuôi bằng nhãn Hương chi
(37,46 ngày) và Tiêu da bò (37,82 ngày); ngắn nhất là nuôi bằng nhãn Miền thiết (27,71 ngày), sau đó là T2 (32,66 ngày)
Nhộng Trưởng thành
SỰ LỰA CHỌN KÝ CHỦ CỦA RUỒI ĐỤC QUẢ ĐỐI VỚI CÁC GIỐNG NHÃN KHÁC NHAU GIỐNG NHÃN KHÁC NHAU
4.3.1 Một số đặc điểm của quả các giống nhãn thí nghiệm Để có tổng quan về đặc điểm quả tươi của năm (5) giống nhãn sử dụng trong các thí nghiệm, 30 quả nhãn tươi được thu hái ở thời kỳ thu hoạch để tiến hành đo đếm các chỉ tiêu lý hóa Kết quả được thể hiện ở bảng 4.28
Các giống nhãn Miền thiết, Ido và Tiêu da bò có vỏ quả màu sáng nhạt Về khối lượng, Ido và Miền thiết lớn nhất, tương ứng 14,46g và 13,68g, trong khi Hương chi thấp nhất 8,14g Kích thước quả cũng tương tự, Miền thiết lớn nhất 29,22mm, Ido 26,72mm, Tiêu da bò nhỏ nhất 20,87mm Độ dày cùi dao động từ 4,30mm (Hương chi) đến 6,73mm (Ido).
Như vậy, có thể thấy trong số nhóm giống nhãn phía Bắc thì Hương chi là giống cho quả nhãn nhỏ nhất, tiếp đó là T2 và Miền thiết là giống nhãn cho quả lớn nhất Đối với nhóm giống nhãn phía Nam thì Ido có kích thước lớn hơn hẳn so với Tiêu da bò
Độ dày vỏ quả ảnh hưởng đáng kể đến lựa chọn ký chủ của ruồi đục quả Quả có vỏ mỏng, nhẵn và không có lớp màng dai bên trong thuận lợi cho ruồi châm ống đẻ trứng, tránh gây tổn thương Trong nghiên cứu với 5 giống nhãn, Hương chi và Tiêu da bò có vỏ mỏng nhất (lần lượt là 0,59 và 0,62mm), trong khi T2 (1,11mm) và Ido (1,12mm) có vỏ dày nhất.
So sánh độ ngọt dựa trên chỉ số Brix, nhãn Tiêu da bò dẫn đầu với chỉ số 22,63, tiếp đến là các giống nhãn Miền thiết, T2 có chỉ số Brix lần lượt là 19,23 và 19,47 Trong khi đó, hàm lượng nước trong quả nhãn lại giảm dần theo thứ tự: Miền thiết (84,14%) - T2 (83,97%) - Hương chi (81,39) - Ido (79,91%) - Tiêu da bò (78,95%).
Bảng 4.28 Đặc điểm quả của năm giống nhãn thí nghiệm
Ghi chú: n là số cá thể ruồi đục quả, n0 Các chữ khác nhau trong cùng một cột biểu diễn sự sai khác rõ rệt ở mức P≤ 0,05 với kiểm định Kruskal Wallis (độ brix, khối lượng quả, đường kính quả,độ dày cùi, hàm lượng nước); kiểm định One Way ANOVA (độ dày vỏ quả); χ2 -, df - và P - là giá trị của kiểm định Kruskal Wallis với mẫu phân bố không chuẩn; F -, df - và P - là giá trị của kiểm định One Way ANOVA với mẫu phân bố chuẩn;
Tên giống Nhóm giống nhãn ở phía Bắc Nhóm giống nhãn phía Nam F/ χ 2 df P
Hương chi Miền thiết T2 Ido Tiêu da bò Độ Brix 20,31 b ±0,22 19,47 a ±0,28 19,23 a ±0,23 20,06 b ±0,00 22,63 c ±0,09 74,20 4