Các yếu tốchính trong cơ chế bệnh sinh của mụn trứng cá là tăng tiết bã nhờn, bấtthường sừng hoá nang lông, kích thích androgen và viêm do sự xâm nhập củaMật độ phân bố của vi khuẩn này
ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Phương pháp nghiên cứu
Nghiên cứu mô tả cắt ngang, có nhóm đối chứng.
Công thức ước tính cỡ mẫu cho nghiên cứu gồm 2 mẫu độc lập, so sánh hai giá trị trung bình :
: xác suất sai lầm loại 2, chọn = 0,05
=0,842 với hiệu lực thống kê 80% và : Độ lệch chuẩn của hai nhóm : Hiệu số trung bình của hai nhóm : tỉ só cỡ mẫu ⁄ Chọn = 1.
Dựa vào nghiên cứu của Aly Atef Shoun 85 với 40 bệnh nhân nhóm bệnh và 100 người nhóm chứng, có kết quả độ lệch chuẩn của nhóm bệnh và nhóm chứng tương ứng 598,9 pg/ml và 158,44 pg/ml Ước lượng hiệu số trung bình mong muốn 350 pg/ml.
Từ đó, ta tính được cỡ mẫu tối thiểu hai nhóm cần nghiên cứu là 25. Thật tế thu nhận vào nghiên cứu 30 bệnh nhân mụn trứng cá thông thường (nhóm bệnh) và 30 bệnh nhân nhóm đối chứng (nhóm chứng) tương ứng về độ tuổi và giới tính với nhóm bệnh.
2.2.3 Các biến số nghiên cứu
Bảng 2.1 Các biến số nghiên cứu
Tên biến Loại biến Đo lường
Giới tính Nhị giá Nam, Nữ
Nơi ở Nhị giá Nông thôn, thành thị
Nghề nghiệp Định tính Học sinh - sinh viên, văn phòng, khác.
Trình độ học vấn Định tính Trung học phổ thông, cao đẳng- đại học, sau đại học
Tuổi khởi phát Định lượng Năm
Thời gian mắc bệnh Định lượng Tháng
Loại da Định tính Dầu, khô, hỗn hợp, bình thường
Sữa và chế phẩm từ sữa Định tính Không bao giờ, 1 lần/ngày, 2 lần/ngày, 1 lần/tuần, 2-6 lần/tuần
Thói quen ăn Định tính Thịt cá nhiều, rau củ quả nhiều, hỗn hợp
Loại sang thương Định tính Mụn đầu trắng, mụn đầu đen, sẩn, mụn mủ, nốt, nang.
Di chứng sẹo lõm Nhị giá Có, không
Phân bố sang thương Định tính Mặt, lưng, ngực, cánh tay Độ nặng Định tính Nhẹ, trung bình, nặng, rất nặng. Điểm số GAGS Định tính Điểm
B12 huyết thanh Định lượng pg/ml
- Độ nặng của bệnh được tính theo phân độ nặng GAGS 51
Nhẹ: 1-18 điểmTrung bình:19-30 điểmNặng: 30-39 điểm
+ Da dầu: lỗ chân lông rộng, da sáng bóng, dày, xỉn màu, thường xuyên nổi mụn, dễ dàng làm sạch sau khi trang điểm.
+ Da khô: lỗ chân lông không thấy, căng da sau khi rửa mặt, màu da tươi sáng, nếp nhăn xung quanh mí mắt, môi, má.
+ Da bình thường: không thấy lỗ chân lông, màu da bình thường, kết cấu da mịn, không nổi mụn.
+ Da hỗn hợp: dầu vùng chữ T (trán, mũi, cằm), khô vùng chữ U (má, mí mắt).
+ Ăn thịt cá nhiều: chế độ dinh dưỡng trong một bữa ăn không cân đối dinh dưỡng, chất đạm (thịt, cá) chiếm > 15%, chất xơ < 30g/ngày
+ Ăn rau nhiều: chế độ dinh dưỡng trong một bữa ăn không cân đối dinh dưỡng, chất đạm (thịt, cá) chiếm < 15%, chất xơ > 30g/ngày
+ Ăn hỗn hợp: hế độ dinh dưỡng trong một bữa ăn cân đối dinh dưỡng, cụ thể tinh bột-đường chiếm 60%, chất đạm chiếm 15%, chất béo chiếm 25%, chất xơ là 30g/ngày.
2.2.4 Công cụ thu thập số liệu
- Bảng thông tin dành cho người tham gia và chấp thuận tham gia nghiên cứu (phụ lục 1).
- Phiếu thu thập thông tin, số liệu nghiên cứu khoa học (phụ lục 3).
- Phiếu chỉ định xét nghiệm nồng độ vitamin B12 huyết thanh.
2.2.5 Phương pháp thu thập số liệu
- Hỏi bệnh, thu thập thông tin liên quan tới dịch tễ, tiền sử, đặc điểm lâm sàng vào phiếu thu thập số liệu.
- Chụp ảnh trực tiếp thương tổn.
- Xét nghiệm vitamin B12 huyết thanh từ mẫu máu 2ml của bệnh nhân bằng kỹ thuật hoá phát quang, mẫu xét nghiệm được lấy trực tiếp tại Khoa Xét nghiệm - Bệnh viện quận Bình Thạnh tại thời điểm bệnh nhân đến khám (đã nhịn ăn ít nhất 8 giờ).
2.2.6 Kỹ thuật định lượng nồng độ vitamin B12 huyết thanh
- Vitamin B12 được định lượng theo nguyên lý miễn dịch cạnh tranh sử dụng công nghệ hoá phát quang hay điện phát quang.
- Xử lý mẫu bằng thuốc thử tiền xử lý vitamin B12 nội sinh.
- Sự tạo thành phức hợp kháng nguyên vitamin B12 và kháng thể kháng vitamin B12 (kháng thể được đánh dấu ruthenium là chất có khả năng phát quang), lượng phức hợp tạo ra tỉ lệ với nồng độ chất phân tích có trong mẫu.
- Thêm vào các vi hạt phủ streptavidin và kháng nguyên vitamin B12 đánh dấu biotin Kháng nguyên này sẽ gắn cạnh tranh với kháng thể kháng vitamin B12 (đánh dấu ruthenium) gắn trên protein Phức hợp vitamin B12 (trong mẫu bệnh phẩm) - kháng thể kháng vitamin B12 gắn trên protein - kháng nguyên Vitamin B12 đánh dấu biotin được hình thành.
- Toàn bộ phức hợp trở nên gắn kết với pha rắn thông qua sự tương tác giữa biotin và streptavidin Như vậy, nồng độ vitamin B12 trong mẫu thử càng cao thì phức hợp này càng thấp và do vậy tín hiệu ánh sáng phát ra tỷ lệ nghịch với nồng độ vitamin B12 có trong mẫu thử.
Chúng tôi tiến hành định lượng nồng độ vitamin B12 huyết thanh bằng phương pháp miễn dịch hoá phát quang, trên máy phân tích sinh hoá-miễn dịch Abbott Architect i2000SR.
- Lấy 2ml máu tĩnh mạch vào ống không chống đông có đầy đủ thông tin của đối tượng tham gia nghiên cứu đạt yêu cầu.
- Đem mẫu máu quay ly tâm với 3000 vòng/phút để lấy huyết thanh.
- Mẫu ổn định trong 2 ngày là 2-8°C Tránh ánh sáng.
- Nạp mẫu bệnh phẩm vào máy phân tích và ấn máy chạy.
- Trả kết quả: thông qua kết quả được đưa lên dữ liệu trên máy tính và trả trực tiếp bằng phiếu kết quả.
- Giá trị bình thường của vitamin B12 trong huyết thanh: 179-660 pmol/L hay 220-925 pg/mL.
2.2.7 Xử lý và phân tích số liệu
Số liệu thu thập được nhập và xử lý bằng phần mềm SPSS Statistics 26.
Biến số định tính được thể hiện bằng tần số và tỉ lệ phần trăm Biến số định lượng sẽ được mô tả bằng giá trị trung bình và độ lệch chuẩn.
- Dùng phép kiểm Chi bình phương (χ2) hoặc phép kiểm định Fisher’s Exact (khi giá trị kỳ vọng của mỗi ô nhỏ hơn 5) để kiểm định mối liên quan giữa 2 hay nhiều biến định tính.
- Dùng phép kiểm t- Student (nếu là phân phối chuẩn) và phép kiểm
Mann Whitney U (nếu không là phân phối chuẩn) để so sánh biến số định lượng ở 2 nhóm độc lập Phép kiểm ANOVA một chiều (nếu là phân phối chuẩn) và Kruskal Wallis (nếu là phân phối không chuẩn) để so sánh các biến số định lượng ở 3 nhóm độc lập trở lên.
- Phép kiểm tương quan Spearman (Spearman rank correlation test) để kiểm định mối tương quan giữa hai biến định lượng nếu là phân phối không chuẩn và phép kiểm tương quan Pearson nếu là phân phối chuẩn.
- Hồi quy tuyến tính với biến phụ thuộc là biến định lượng.
-Sự khác biệt được xem có ý nghĩa thống kê khi p
