TRƯỜNG ĐẠI HỌC QUẢNG NAM NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG BÃ SẮN PHẾ THẢI ĐỂ NUÔI TRỒNG NẤM ĂN VÀ NẤM DƯỢC LIỆU

Kỹ Thuật - Công Nghệ - Báo cáo khoa học, luận văn tiến sĩ, luận văn thạc sĩ, nghiên cứu - Kế toán TRƯỜNG ĐẠI HỌC QUẢNG NAM KHOA: LÝ – HÓA - SINH ---------- TRẦN THỊ HOÀNG SANG NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG BÃ SẮN PHẾ THẢI ĐỂ NUÔI TRỒNG NẤM ĂN VÀ NẤM DƯỢC LIỆU KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Quảng Nam, tháng 4 năm 2015 Trang 1 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi, các số liệu và kết quả nghiên cứu trong khóa luận này là trung thực và chƣa từng công bố trong bất kì công trình nào khác. Tác giả khóa luận Trần Thị Hoàng Sang Trang 2 LỜI CẢM ƠN Trên thực tế không có sự thành công nào mà không gắn liền với những sự hỗ trợ, giúp đỡ dù ít hay nhiều, dù trực tiếp hay gián tiếp của người khác. Để hoàn thành đề tài khóa luận tốt nghiệp này tôi xin bày tỏ lòng lòng biết ơn sâu sắc đến: - Giáo viên hướng dẫn tôi, ThS. Phan Thị Thanh Diễm, người đã tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tôi hoàn thành tốt đề tài khóa luận tốt nghiệp này. - Ban giám hiệu, các thầy cô trường Đại học Quảng Nam, đặc biệt là các thầy cô trong Khoa Lý – Hóa – Sinh đã tạo điều kiện thuận lợi và tận tình truyền đạt kiến thức, kinh nghiệm của mình cho chúng tôi trong suốt thời gian học tập, quá trình làm khóa luận. - Xin cảm ơn những lời động viên, khích lệ của gia đình, người thân và những chia sẻ, học hỏi của bạn bè đã góp phần lớn giúp tôi hoàn thành tốt bài khóa luận tốt nghiệp. Do trình độ còn hạn chế về kiến thức cũng như kinh nghiệm nên trong quá trình làm khóa luận tốt nghiệp khó tránh những thiếu sót, tôi rất mong được sự đóng góp ý kiến của quý thầy cô giáo để bài khóa luận của tôi được hoàn chỉnh hơn. Một lần nữa, tôi xin chân thành cảm ơn và kính chúc quý thầy cô dồi dào sức khỏe, niềm tin để tiếp tục thực hiện sứ mệnh cao đẹp của mình là truyền đạt kiến thức cho thế hệ mai sau Sinh viên thực hiện Trần Thị Hoàng Sang Trang 3 DANH MỤC BẢNG Số hiệu bảng Tên bảng Trang 1.1 Thành phần dinh dƣỡng của nấm ( chất khô) 6 1.2 Hàm lƣợng vitamin và chất khoáng trong nấm 7 3.1 Hàm lƣợng các chất có trong bã sắn 25 3.2 Phối trộn nguyên liệu khi trồng nấm sò 27 3.3 Sự sinh triển của nấm sò qua các khoảng thời gian 28 3.4 Hiệu quả nấm sò qua các khoảng thời gian 30 3.5 Tỉ lệ nhiễm của các bịnh nấm 31 3.6 Hiệu quả kinh tế của nấm sò khi trồng trên cơ chất khác nhau 32 3.7 Sự sinh trƣởng của nấm linh chi qua các khoảng thời gian 33 3.8 Hiệu quả kinh tế của nấm linh chi khi trồng trên cơ chất khác nhau 35 3.9 Sự sinh trƣởng và phát triển của nấm rơm qua các khoảng thời gian 36 3.10 Thành phần dinh dƣỡng của hệ sợi nấm trên cơ chất là bã sắn 38 Trang 4 DANH MỤC HÌNH Số hiệu hình Tên hình Trang 3.1 Sự sinh trƣởng của nấm sò qua các khoảng thời gian 29 3.2 Biểu đồ hiệu quả nấm sò sau một đợt thu hái 30 3.3 Sự sinh trƣởng của nấm linh chi qua các khoảng thời gian 34 3.4 Sự sinh trƣởng của nấm rơm qua các khoảng thời gian 37 3.5 Hoạt tính enzyme có trong bã sắn 39 Trang 5 MỤC LỤC Phần 1. MỞ ĐẦU ................................................................................................... 1 1.1. Lý do chọn đề tài ............................................................................................. 7 1.2. Mục tiêu của đề tài .......................................................................................... 8 1.3. Đối tƣợng và phạm vi nghiên cứu ................................................................... 8 1.4. Phƣơng pháp nghiên cứu ................................................................................. 8 Phần 2. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU ..................................................................... 9 Chƣơng 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU .................................................................... 9 1.1. Tình hình xử lý bã sắn phế thải ....................................................................... 9 1.2. Công nghệ trồng nấm ăn và nấm dƣợc liệu từ các phế phụ phẩm nông nghiệp .............................................................................................................................. 10 1.2.1. Sơ lƣợc về ngành sản suất nấm ở Việt Nam .............................................. 10 1.2.2. Giá trị dinh dƣỡng của nấm ăn ................................................................... 11 1.2.2. Tác dụng làm thuốc của nấm dƣợc liệu ..................................................... 13 1.3. Đặc điểm sinh học của nấm sò, nấm rơm và nấm linh chi ........................... 14 1.3.1 .Đặc điểm sinh học của nấm sò ................................................................... 15 1.3.2. Đặc điểm sinh học của nấm rơm ................................................................ 15 1.3.3. Đặc điểm sinh học của nấm linh chi .......................................................... 16 1.4. Ảnh hƣởng của các điều kiện lên sự sinh trƣởng và phát triển của nấm ...... 17 1.5. Quy trình chung để nuôi trồng nấm ăn và nấm dƣợc liệu. ............................ 19 Chƣơng 2. VẬT LIỆU VÀ PHƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ........................... 21 2.1. Vật liệu .......................................................................................................... 21 2.1.1. Giống nấm .................................................................................................. 21 2.1.2. Phế phụ phẩm ............................................................................................. 21 2.1.3. Môi trƣờng ................................................................................................. 21 2.1.4. Hóa chất ..................................................................................................... 21 2.2. Phƣơng pháp nghiên cứu ............................................................................... 22 2.2.1. Phƣơng pháp lý, hóa sinh ........................................................................... 22 2.2.1.1. Phƣơng pháp xác định độ ẩm trong bã sắn ............................................. 22 2.2.1.2. Phƣơng pháp xác định lƣợng đƣờng khử theo Bertrand ......................... 22 Trang 6 2.2.1.3. Phƣơng pháp định lƣợng tinh bột ........................................................... 24 2.2.1.4. Phƣơng pháp xác định hàm lƣợng Cenllulose ........................................ 25 2.2.1.5 Xác định khả năng sinh enzyme (amylase, cellulase, chitinase, protease) bằng phƣơng pháp khuếch tán trên môi trƣờng thạch. ........................................ 26 2.2.2. Phƣơng pháp trồng nấm ............................................................................. 26 2.2.2.1. Phƣơng pháp trồng nấm sò...................................................................... 26 2.2.2.2. Phƣơng pháp trồng nấm rơm................................................................... 28 2.2.2.3. Phƣơng pháp trồng nấm linh chi ............................................................ 30 Chƣơng 3. KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN ............................................................. 31 3.1. Phân tích thành phần hóa học của bã sắn ...................................................... 31 3.2. Quy trình trồng nấm sò, nấm linh chi và nấm rơm trên bã sắn ..................... 31 3.2.1. Trồng nấm sò.............................................................................................. 31 3.2.1.1 Phƣơng pháp xử lý nguyên liệu trồng ...................................................... 32 3.2.1.2. Phƣơng pháp thí nghiệm ......................................................................... 33 3.2.2. Trồng nấm linh chi ..................................................................................... 38 3.2.2.1. Phƣơng pháp xử lý nguyên liệu trồng ..................................................... 38 3.2.2.2. Phƣơng pháp thí nghiệm ......................................................................... 39 3.2.3. Trồng nấm rơm........................................................................................... 42 3.2.3.1. Phƣơng pháp xử lý nguyên liệu .............................................................. 42 3.2.3.2. Phƣơng pháp thí nghiệm ......................................................................... 42 3.3. Thành phần dinh dƣỡng của hệ sợi nấm sau khi trồng trên cơ chất là bã sắn .............................................................................................................................. 44 3.4. Hoạt tính enzyme trong bã sắn sau khi trồng nấm ........................................ 44 Phần 3. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ ..................................................................... 46 3.1. Kết luận ......................................................................................................... 46 3.2. Đề nghị .......................................................................................................... 46 Phần 4. TÀI LIỆU THAM KHẢO ....................................................................... 47 PHỤ LỤC Trang 7 Phần 1. MỞ ĐẦU 1.1. Lý do chọn đề tài Cây sắn (khoai mì) có tên khoa học Manihot esculenta Crantz , thuộc họ Đại kích (Euphorbiaceae), tiếng Anh là Cassara. Là cây lƣơng thực củ có nguồn gốc từ vùng nhiệt đới của châu Mỹ La tinh đang đƣợc trồng phổ biến trên 100 nƣớc của vùng nhiệt đới trên thế giới. Cây sắn du nhập vào Việt Nam khoảng giữa thế kỷ 18 đƣợc trồng nhiều ở vùng Đông Nam Bộ, vùng Tây Nguyên, vùng núi và trung du phía Bắc, vùng ven biển Nam Trung Bộ và Bắc Trung Bộ. Sắn không những là nguồn lƣơng thực, thực phẩm cho ngƣời và chế biến thức ăn cho gia súc mà còn là nguồn nguyên liệu quan trọng có giá trị cho các ngành công nghiệp khác nhƣ: dệt, dƣợc, chế biến nƣớc giải khát, cồn... Sắn là cây công nghiệp tiêu thụ trong nƣớc và có giá trị xuất khẩu cao, sắn thích hợp với nhiều loại đất và địa hình, nông dân trồng sắn hầu nhƣ không phải đầu tƣ nhiều nên nó đƣợc xem nhƣ là cây “xóa đói giảm nghèo” cho nông dân. Những năm gần đây diện tích sắn ở nƣớc ta ngày càng mở rộng. Theo thống kê của Bộ Nông nghiệp và Phát Triền Nông thôn, năm 2006 diện tích trồng sắn cả nƣớc đạt 270.000 ha, với sản lƣợng đó ƣớc tính khoảng 3 triệu tấn củ sắn tƣơi, thì hiện nay diện tích trồng sắn cả nƣớc đã vọt lên hơn 510.000 ha, tăng gần gấp đôi so với 3 năm trƣớc và vƣợt hơn cả trăm nghìn ha so với quy hoạch phát triển sắn tới năm 2010 của Bộ. Bộ Công Thƣơng thống kê trong 6 tháng đầu năm 2009, cả nƣớc xuất khẩu hơn 2,4 triệu tấn sắn và các sản phẩm làm từ sắn, đạt kim ngạch là 368 triệu USD. Nƣớc ta có hàng chục dự án sản xuất tinh bột sắn với công nghệ hiện đại và hàng loạt các dự án sẽ đƣợc thực hiện trong tƣơng lai. 1 Nhƣng quá trình chế biến sắn thu tinh bột đã tạo ra một lƣợng lớn bã sắn phế thải. Trung bình cứ một nhà máy sắn sản xuất 100 tấn tinh bộtngày sẽ thải ra 300-400 tấn bã tƣơi. Theo báo cáo của nhiều nhà nghiên cứu thành phần hoá học của bã sắn phơi khô có khoảng 61- 63 tinh bột; 13- 15 cellulose; 1,5- 2,0 protein thô; 0,009 HCN. Nhƣ vậy, trong bã sắn phế thải còn một lƣợng khá lớn tinh bột và cellulose, song các chất dinh dƣỡng lại khá nghèo nàn đạm. Ở nƣớc ta, một phần nhỏ bã sắn đƣợc sử dụng trực tiếp cho chăn nuôi, ủ chua hay phơi khô Trang 8 nhƣng chất lƣợng không cao, còn phần lớn là vứt bỏ thành phân và rác ra môi trƣờng bên ngoài gây ô nhiễm trầm trọng và chƣa có các biện pháp xử lý triệt để. Nhƣ vậy, một trong những biện pháp tích cực để giải quyết nạn ô nhiễm môi trƣờng do bã sắn thải ra là tận dụng nguồn chất thải giàu tinh bột và cellulose này làm cơ chất cho các quá trình chuyển hoá sinh học thành các sản phẩm có giá trị nhƣ thu protein, các acid amin, kháng sinh và enzyme bằng con đƣờng vi sinh vật để làm thức ăn cho chăn nuôi. Tuy nhiên, các quá trình xử lý đó đều tạo ra một lƣợng bã thải lớn hơn ban đầu, gây ô nhiễm môi trƣờng nghiêm trọng. Chính vì thế, trong những năm gần đây việc nghiên cứu xử lý bã sắn thải ra từ các nhà máy đƣợc nhiều ngƣời quan tâm. Với mục đích xử lý triệt để và có hiệu quả hơn với một lƣợng lớn bã sắn phế thải để từ đó trồng nấm ăn và nấm dƣợc liệu đã giải quyết đƣợc phần lớn nạn ô nhiễm môi trƣờng. Xuất phát từ lý do trên, tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu sử dụng bã sắn phế thải để nuôi trồng nấm ăn và nấm dược liệu”. 1.2. Mục tiêu của đề tài Trên cơ sở sử dụng bã sắn phế thải để nuôi trồng nấm ăn và nấm dƣợc liệu từ đó giải quyết đƣợc tình trạng gây ô nhiễm môi trƣờng do lƣợng lớn bã sắn này gây ra. 1.3. Đối tƣợng và phạm vi nghiên cứu - Đối tƣợng nghiên cứu: bã sắn phế thải từ các nhà máy sản xuất tinh bột sắn - Phạm vi nghiên cứu: sử dụng bã sắn phế thải từ các nhà máy sản xuất tinh bột sắn để trồng nấm tại thành phố Tam Kỳ - Tỉnh Quảng Nam 1.4.Phƣơng pháp nghiên cứu - Phƣơng pháp xử lý số liệu. - Phƣơng pháp thực nghiệm (làm thí nghiệm tại phòng thí nghiệm sinh học trƣờng Đại Học Quảng Nam). - Phƣơng pháp nghiên cứu, tổng hợp tài liệu (sách, báo, internet…) Trang 9 Phần 2. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. Tình hình xử lý bã sắn phế thải Theo ƣớc tính một nhà máy chế biến tinh bột sắn có công suất 30-100 tấnngày sẽ sản xuất 7,5-25 tấn tinh bột, kèm theo đó là 12- 48 tấn bã. Quá trình sản xuất tinh bột sắn thải ra một lƣợng lớn nƣớc thải và hai loại bã thải: - Loại thứ nhất là: bã thải do quá trình rửa và bóc vỏ gỗ, chiếm tỉ trọng ít và thành phần chủ yếu là cellulose, hemicellulose và cát, sạn. Loại này thƣờng đƣợc chôn lấp hợp vệ sinh hoặc ủ làm phân bón.1 - Loại thứ hai là: phần bã còn lại sau khi tách tinh bột sắn và đƣợc gọi là bã sắn. Bã sắn có độ ẩm khoảng 75- 85 và lƣợng tinh bột trong bã sắn chiếm khoảng 50-60 theo khối lƣợng khô (bảng 1- 1), phần nhỏ bã sắn đƣợc sử dụng làm thức ăn gia súc, còn phần lớn bị vứt bỏ, gây ô nhiễm môi trƣờng nghiêm trọng. 1 Thành phần các chất chứa trong bã sắn thải ra từ các cơ sở sản xuất nhỏ cao hơn trong các mẫu bã sắn lấy từ các cơ sở sản xuất lớn cho thấy phƣơng pháp thu chiết tinh bột của các cơ sở sản xuất công nghiệp quy mô lớn hiệu quả hơn. Điều đáng lƣu ý là thông thƣờng bã sắn chứa 7,5 -8,5 mg HCN. Các phƣơng pháp xử lý bã sắn: Phƣơng án xử lý bã sắn có hiệu quả nhất là tận dụng bã sắn để sản xuất ra những sản phẩm có giá trị, vì nhƣ vậy có thể tiết kiệm đƣợc toàn bộ hoặc đáng kể chi phí xử lý bã sắn, mang lại hiệu quả kinh tế cao hơn cho các cơ sở sản xuất. Ghildal và Losane (1990) đã xem xét, phân tích lợi ích, tính khả thi của các phƣơng án xử lý bã sắn nhƣ sau: - Làm thức ăn cho động vật: Bã sắn sau khi phơi nắng hoặc sấy khô thƣờng đƣợc làm thức ăn cho gia súc, có thể cho ăn trực tiếp hoặc trộn lẫn với các chất dinh dƣỡng khác. 2, 3. - Làm phân bón : Ngoài tinh bột và cellulose, bã sắn còn có một ít nitơ, phospho, kali và các chất khoáng khác nên làm phân bón rất tốt. Trang 10 - Sản xuất xirô glucose: Đã có các nghiên cứu sử dụng kỹ thuật acid – enzyme và enzyme – enzyme ở mức độ phù hợp để chuyển đƣợc 98- 99 tinh bột có trong bã sắn thành sirô chứa lƣợng glucose cao (70 lƣợng đƣờng khử). 4. - Sản xuất rƣợu Etylic: Sau khi thuỷ phân tinh bột có trong bã sắn theo quy trình acid – enzyme, cô đặc để đạt lƣợng đƣờng 15, lên men rƣợu bằng cách sử dụng nấm men Saccharomyces cerevisiae FT-18. 2. - Làm cơ chất cho quá trình lên men ở trạng thái rắn: Đã có một số công trì nh nghiên cứu sử dụng bã sắn thay thế cho cám lúa mì trong quá trình lên men VSV ở trạng thái rắn nếu bã sắn đƣợc bổ sung thêm nguồn nitơ. 5. Trong những năm gần đây trên thế giới và ở Việt Nam đã có một số nghiên cứu về sử dụng bã sắn làm cơ chất lên men thu sinh khối và enzyme vi sinh vật. 1.2. Công nghệ trồng nấm ăn và nấm dƣợc liệu từ các phế phụ phẩm nông nghiệp 1.2.1. Sơ lược về ngành sản suất nấm ở Việt Nam Kể từ năm 1990, ở Việt Nam sản xuất nấm đƣợc xem là ngành mang lại hiệu quả kinh tế cao thu hút sự tham gia của nhiều bà con nông dân. Các loài nấm chính đƣợc sản xuất tại các trang trại nấm ở miền Nam là nấm Sò và nấm rơm, còn ở miền Bắc bao gồm các loài nấm nhƣ nấm hƣơng, nấm tai mèo, nấm Linh chi (Ganoderma lucidum) - một loài nấm đƣợc dùng làm thuốc và nấm Hƣơng (Lentinus edodes). Trong những năm qua, sản xuất nấm hàng năm đạt 150.000 tấn nấm tƣơi. Các vùng sản xuất nấm chính ở Việt Nam là Nam Định, Ninh Bình, Thái Bình, Hƣng Yên và Hà Nam (vùng đồng bằng sông Hồng có số lƣợng lớn nấm Hƣơng), Đồng Tháp, Tây Ninh và Sóc Trăng có quy mô lớn về sản xuất nấm Rơm. Vùng sản xuất nấm Tai Mèo chính là Long Khánh, tỉnh Đồng Nai. Khoảng 60 số lƣợng nấm đƣợc bán cho thị trƣờng trong nƣớc chủ yếu là sản phẩm nấm tƣơi, 40 còn lại đƣợc xuất khẩu sang thị trƣờng nƣớc ngoài với giá trị hàng năm đạt 40 triệu USD. Các sản phẩm nấm xuất khẩu chủ yếu đƣợc đóng hộp và xuất khẩu bằng đƣờng biển sang thị trƣờng các nƣớc Hoa Kỳ, Nhật Bản và Ý. Trang 11 Định hƣớng và chiến lƣợc của Việt Nam đối với ngành hàng nấm đến năm 2010 là tận dụng 10 rơm rạ từ việc sản xuất lúa, mùn cƣa từ chế biến gỗ và các bã mía (khoảng 4 triệu tấn nguyên liệu thô) để sản xuất nấm với chỉ tiêu đạt 1 triệu tấn nấm tƣơi (trong đó 50 cho tiêu thụ trong nƣớc và 50 cho xuất khẩu). 1.2.2. Giá trị dinh dưỡng của nấm ăn Từ lâu nhân dân ta thƣờng dùng nấm trong thực phẩm hàng ngày gồm các loại nấm truyền thống nhƣ: nấm rơm, nấm mèo, nấm đông cô, nấm hƣơng, nấm mối, nấm tràm… Và thời gian gần đây, ở nƣớc ta có thêm một số loại nấm đƣợc trồng, hoặc đƣợc sử dụng nhƣ: nấm mỡ, nấm bào ngƣ, nấm kim châm, nấm ngân nhĩ, nấm hầm thủ, nấm cẩm thạch. Đây là loại thực phẩm bổ dƣỡng và phù hợp với mọi lứa tuổi. Nấm là sinh vật không thể thiếu trong đời sống, không có nấm chu trình tuần hoàn vật chất sẽ bị mất một mắt xích quan trọng và cả thế giới sẽ ngổn ngang những chất bã hữu cơ phân hủy. Nấm còn đem lại nguồn thực phẩm giàu đạm, đầy đủ các acid amin thiết yếu, hàm lƣợng chất béo ít và là những acid béo chƣa bão hòa. Do đó tốt cho sức khỏe, giá trị năng lƣợng cao, giàu khoáng chất và các vitamin. Ngoài ra, trong nấm còn chứa nhiều hoạt chất có tính sinh học, góp phần ngăn ngừa và điều trị bệnh cho con ngƣời, vì hầu nhƣ các loài nấm ăn đều có tác dụng phòng ngừa chống u bƣớu. Việt Nam bắt đầu có những căn bệnh của xã hội công nghiệp nhƣ stress, béo phì, xơ mỡ động mạch, huyết áp, ung thƣ... nếu mỗi tuần chúng ta đều ăn nấm ít nhất một lần thì cơ thể sẽ chậm lão hóa hơn và ngăn ngừa đƣợc những bệnh nêu trên. Từ đó cho thấy, nấm còn là nguồn thực phẩm chức năng của thế kỷ 21.7 Một số thành phần cơ bản trong nấm: - Chất béo: Có trong các loại nấm chiếm từ 1 - 10 trọng lƣợng khô của nấm, bao gồm các acid béo tự do, monoflycerid, diglycerid và triglyceride, serol, sterol ester, phos - phor lipid và có từ 72 - 85 acid béo thiết yếu chiếm từ 54 -76 tổng lƣợng chất béo, ở nấm mỡ và nấm rơm là 69 -70. ở nấm mèo là 40,39, ở bào ngƣ mỏng là 62,94; ở nấm kim châm là 27,98. Trang 12 - Carbohydrat và sợi: Tổng lƣợng Carbohydrat và sợi: chiếm từ 51 - 88 trong nấm tƣơi và khoảng 4 - 20 trên trọng lƣợng nấm khô, bao gồm các đƣờng pentose, methyl pentos, hexose, disaccharide, đƣờng amin, đƣờng rƣợu, đƣờng acid. Thành phần chính của sợi nấm ăn là chitin, một polymer của n– acetylglucosamin, cấu tạo nên vách của tế bào nấm. - Vitamin: nấm ăn có nguồn vitamin phong phú, nhất là B1, B2, C, PP, B6, acid folic B12; caroten dƣới các dạng hợp chất thiamine, riboflavin, niacin, biotin, axit ascorbic. - Khoáng chất: Nấm ăn là nguồn cung cấp chất khoáng cần thiết cho cơ thể. Nguồn này lấy từ cơ chất trồng nấm, thành phần chủ yếu là kali, kế đến là phosphor, natri, calci và magnesium, các nguyên tố khoáng này chiếm từ 56 - 70 lƣợng tro. Phosphor và calcium trong nấm luôn luôn cao hơn một số loại trái cây và rau cải. Ngoài ra còn có các khoáng khác nhƣ sắt, đồng, kẽm, mangan, cobalt... - Cellulose: trong nấm ăn bình quân là 8. Cellulose của nấm có tác dụng chống lại sự lắng kết của muối mật và làm giảm hàm lƣợng cholesterol trong máu, nhờ thế mà phòng đƣợc sỏi thận và huyết áp cao. -Giá trị năng lƣợng của nấm: Đƣợc tính trên 100 g nấm khô. Phân tích của Crisan Sands; Bano Rajarathnam cho kết quả sau: Nấm mỡ: 328 - 381Kcal; Nấm Hƣơng: 387 - 392 Kcal; nấm bào ngƣ xám 345 - 367 Kcal; nấm bào ngƣ mỏng 300 - 337 Kcal; Bào ngƣ trắng 265 - 336 Kcal; nấm rơm 254 - 374 Kcal; Nấm kim châm 378 Kcal; nấm mèo 347 - 384 Kcal; nấm hầm thủ 233 kcal. - Giá trị dinh dƣỡng của một số nấm ăn phổ biến. Bảng 1.1. Thành phần dinh dưỡng của nấm ( chất khô) Độ ẩm () Protein Lipid Carbohydrate Tro Năng lƣợng (Calo) Trứng 74 13 11 1 0 156 Nấm mỡ 89 24 8 60 8 381 Nấm hƣơng 92 13 5 78 7 392 Nấm sò 91 30 2 58 9 345 Nấm rơm 90 21 10 59 11 369 Trang 13 Bảng 1.2. Hàm lƣợng vitamin và chất khoáng trong nấm (Đơn vị tính : mg100g chất khô) Acid nicotinic Riboflavin Thiamine Acid ascorbic Sắt Canxi Phospho Trứng 0,1 0,31 0,4 0 2,5 50 210 Nấm mỡ 42,5 3,7 8,9 26,5 8,8 71 912 Nấm hƣơng 54,9 4,9 7,8 0 4,5 12 171 Nấm sò 108,7 4,7 4,8 0 15,2 33 1348 Nấm rơm 91,9 3,3 1,2 20,2 172, 71 677 1.2.3. Tác dụng làm thuốc của nấm dược liệu Từ ngàn năm nay, nấm linh chi đã đƣợc đánh giá là loại thuốc quí, hiếm và đắt tiền hàng đầu trong nền y học cổ truyền của nhiều nƣớc phƣơng Đông, trong đó có Việt Nam. Các thầy thuốc Trung Hoa gọi linh chi là thuốc thần tiên, nấm Trƣờng thọ... Tác dụng phòng và chữa bệnh của linh chi liên quan đến nhiều hệ thống và cơ quan của cơ thể. Hầu hết các nghiên cứu khoa học đều đƣa đến kết luận về vai trò của linh chi nhƣ là chất làm bình thƣờng hoá các cơ quan và tổ chức của cơ thể thông qua khả năng tự điều chỉnh của nó. 8, 24 Dƣới đây là một số công dụng chữa bệnh phổ biến của nấm linh chi 1) Chữa các bệnh về hệ tim mạch và đƣờng huyết: Nấm linh chi làm giảm cholesterol, giảm lƣợng đƣờng trong máu, điều hoà và ổn định huyết áp, chống xơ vữa động mạch, chống tụ máu, chữa bệnh giảm bạch cầu, tiểu đƣờng...1, 9, 10 2) Điều trị u bƣớu, ung thƣ: Nguyên nhân chính gây ra sự phát triển của u bƣớu là sự rối loạn hay giảm chức năng miễn dịch của cơ thể, G.lucidum điều chỉnh, hoạt hoá hệ thống miễn dịch và ngăn chặn sự phát triển các u bƣớu. 3) Điều trị HIV Nấm linh chi đƣợc sử dụng để hỗ trợ các loại thuốc điều trị HIV khác (ví dụ thuốc AVR) cho kết quả khả quan hơn khi chỉ dùng riêng các loại thuốc ấy. 19 Trang 14 4) Bảo vệ gan thận và chữa các tổn thƣơng về gan Nấm linh chi có tác dụng bảo vệ gan khỏi các tổn thƣơng do nhiều nhân tố, hiệu quả thu đƣợc ngay cả trƣớc và sau khi có tổn thƣơng. Nó đẩy mạnh sự chuyển hoá các chất độc và thuốc trong gan để hồi sinh các tế bào gan bị nhiễm độc. 5) Chữa các bệnh về đƣờng hô hấp nhƣ hen, viêm phế quản mãn tính và các bệnh dị ứng thông thƣờng Bằng cách chặn đứng các chất gây nên chứng viêm và tăng cƣờng hệ thống miễn dịch, các triệu chứng hen và cảm cúm sẽ giảm, bệnh hen vì thế mà đỡ trầm trọng. Các sản phẩm của nấm linh chi đƣợc sử dụng làm chất chống ho và chất long đờm. Nấm linh chi cũng tăng cƣờng sự tái tạo các tế bào khí quản, đặc biệt quan trọng với các bệnh nhân nghiện thuốc lá (lào) và bị viêm phế quản mãn tính. 11, 20 6) Chữa bệnh về đƣờng tiêu hoá: Nấm linh chi có tác dụng làm giảm lƣợng acid trong dạ dày 7) Chữa các bệnh về suy nhƣợc thần kinh, mệt mỏi G.lucidum đƣợc sử dụng để điều trị chứng suy nhƣợc thần kinh và mất ngủ vì nó tác động lên hệ thần kinh trung ƣơng, làm ổn định hoạt động của cơ thể. 8) Hỗ trợ các quá trình hoá trị liệu và xạ trị liệu làm giảm các tác dụng phụ nhƣ sự mệt mỏi, sự chán ăn, sự chèn tuỷ xƣơng, rụng tóc, buồn nôn, viêm miệng, mất ngủ... 9) Chăm sóc sắc đẹp G.lucidum đƣợc gọi là “thuốc trƣờng sinh”, giúp bảo vệ da và ngăn ngừa sự lão hoá. G.lucidum duy trì và điều chỉnh lƣợng nƣớc trong da, giữ da mềm, mịn, sáng. Nó cũng ức chế sự hình thành và phá huỷ của sắc tố melamin. G.lucidum cũng có tác dụng chống rụng tóc. Ngoài các tác dụng kể trên, nấm linh chi còn đƣợc sử dụng để điều trị các triệu chứng viêm da, xơ cứng bì...8, 11 1.3. Đặc điểm sinh học của nấm sò, nấm rơm và nấm linh chi Trang 15 1.3.1. Đặc điểm sinh học của nấm sò Nấm sò (Pleurotus spp.) là một nhóm nấm ăn quý không những có tác dụng về mặt dinh dƣỡng mà còn có tác dụng chữa bệnh, hiện đƣợc nghiên cứu tập trung ở nhiều nƣớc trên thế giới, đặc biệt là ở các nƣớc Đông Á. Ở Việt Nam, việc nuôi trồng nấm ăn nói chung và nấm sò nói riêng đang đƣợc đẩy mạnh trong cả nƣớc và là nguồn thu nhập đáng kể trong quá trình chuyển đổi cơ cấu cây trồng và vật nuôi. Tuy nhiên, chất lƣợng của nấm phụ thuộc nhiều vào chủng loại, trong đó các đại diện thuộc phân chi Pleurotus sinh bào tử vô tính (Coremiopleurotus Hilber) có nhiều đặc tính quý báu, đặc biệt là hàm lƣợng đạm rất cao. Chính vì thế việc nghiên cứu kỹ phân chi này có ý nghĩa khoa học và thực tiễn lớn. Nấm sò là tên dùng chung cho các loài nấm ăn thuộc giống Pleurotus. Ở Việt Nam, nấm sò còn có các tên gọi khác nhƣ: nấm tai lệch, nấm xoè, nấm bào ngƣ, nấm bèo, nấm dai…12, 22 Nấm sò có đặc điểm chung là tai nấm dạng phễu lệch, mọc thành cụm tập trung, mỗi cánh nấm bao gồm 3 phần: mũ, phiến và cuống. 13 Nấm sò đƣợc chia làm hai nhóm lớn: + Nhóm chịu lạnh: hình thành quả thể ở nhiệt độ 10 –200C + Nhóm ƣa nhiệt: hình thành quả thể ở nhiệt độ 25 – 300C Có đến 50 loài nấm sò, nhƣng cho đến nay chỉ có 10 loại nấm sò đƣợc trồng phổ biến. Ở Việt Nam, chủ yếu trồng các loại nấm sò ƣa nhiệt nhƣ: nấm sò xám, nấm sò trắng. Vì vậy, nƣớc ta có thể trồng nấm sò quanh năm nhƣng thuận lợi nhất từ tháng 9 đến tháng 4 (dƣơng lịch) năm sau. 1.3.2. Đặc điểm sinh học của nấm rơm Nấm rơm hay nấm mũ rơm (danh pháp hai phần: volvariella volvacea) là một loài nấm trong họ nấm lớn sinh trƣởng và phát triển từ các loại rơm rạ. Nấm gồm nhiều loài khác nhau, có đặc điểm hình dạng khác nhau nhƣ có màu xám trắng, xám, xám đen… Nấm rơm có tên khoa học là Volvariella volvacea , thuộc ngành Basidiomycota, lớp Agaricales, Họ Pluteaceae, chi Volvariella, loài V. Trang 16 Volvacea.12, 22 Cấu tạo: - Bao gốc: dài và cao lúc nhỏ, bao lấy tai nấm. Khi tai nấm trƣởng thành, nó chỉ còn lại phần trùm lấy phần gốc chân cuống nấm, bao nấm là hệ sợi nấm chứa sắc tố melanin tạo ra màu đen ở bao gốc. Độ đậm nhạt tùy thuộc vào ánh sáng. Ánh sáng càng nhiều thì bao gốc càng đen. - Cuống nấm: là bó hệ sợi xốp, xếp theo kiểu vòng tròn đồng tâm. Khi còn non thì mềm và giòn. Nhƣng khi già xơ cứng và khó bẽ gãy. - Mũ cấm: hình nón, cũng có melanin, nhƣng nhạt dần từ trung tâm ra rìa mép. Sinh trƣởng: Ở các quốc gia vùng nhiệt đới rất thích hợp để nấm rơm sinh trƣởng và phát triển. Nhiệt độ thích hợp để nấm phát triển từ 30-320C, độ ẩm nguyên liệu (cơ chất) 65-70, độ ẩm không khí: 80, pH=7, thoáng khí. Nấm rơm sử dụng dinh dƣỡng cellulose trực tiếp từ nguyên liệu trồng. Nấm rơm dễ trồng, mau thu hoạch, cho kinh tế cao. Nấm mọc trên gỗ mục của các cây lá rộng, thƣờng hình thành từng búi. Nấm mọc nhiều vào mùa nóng ẩm. Đây là loài nấm ăn, quý nhất khi chƣa già. Đã đƣợc nuôi trồng chủ động ở nhiều nƣớc và ở nƣớc ta cũng đã nuôi trồng trên qiu mô công nghiệp. 15 1.3.3. Đặc điểm sinh học của nấm linh chi Tên gọi: Nấm linh chi, nấm lim, nấm trƣờng thọ, nấm lão thảo, thụy thảo, tiên thảo…14, 21, 23 -Tên khoa học: Ganoderma lucidum. - Phân bố ở vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới. - Linh chi thuộc họ Ganodermataceae, bộ Ganodermatales, lớp phụ Hymenomycetidae, lớp Hymenomycetes, ngành phụ: Basidiomycotina, ngành nấm thật-Eumycota, giới nấm Fungi. Chi Ganoderma trên thế giới có trên 50 loài, riêng Trung Quốc đã có tới 48 loài khác nhau. Ở Việt Nam, có khoảng 37 loài linh chi phân bố ở các rừng có nhiều loại cây lá rộng, nhất là rừng gỗ lim nên còn gọi là nấm lim. Đặc tính sinh học: Trang 17 - Nấm linh chi có quả thể (cây nấm) gồm 2 phần cuống nấm và mũ nấm. - Cuống nấm dài hoặc ngắn, có hình trụ đƣờng kính từ 0,5-3cm. - Cuống nấm ít phân nhánh, đôi khi có uốn khúc cong queo, lớp vỏ cuống màu đỏ, nâu đỏ, nâu đen, bóng, không có lông, phủ suốt lên mặt tán nấm.8 - Mũ nấm: Khi non có hình trứng, lớn dần có hình quạt. Trên mặt mũ có vân gạch đồng tâm màu sắc từ vàng chanh - vàng nghệ - vàng nâu - vàng cam - đỏ nâu - nâu tím nhẵn bóng nhƣ láng vecni. Mũ nấm thƣờng có đƣờng kính từ 2-15cm, dày 0,8-1,2cm, có loài linh chi đƣờng kính lớn tới 100cm phần đỉnh cuống thƣờng lồi lên hay hơi lõm. Nấm linh chi mọc trong tự nhiên rất hiếm. Hơn thế nữa, nấm tìm đƣợc không mấy khi nguyên vẹn mà hay bị sâu bọ cắn nát. Trong lịch sử không biết bao nhiêu ngƣời đã tìm cách cấy giống và trồng loại nấm này nhƣng đều thất bại. Mãi tới năm 1971, hai nhà khoa học ngƣời Nhật tên là Yukio Naoi và Zenzaburo Kasai, Giáo sƣ của phân khoa Nông nghiệp, Đại học Kyoto mới thành công trong việc gây giống và ngƣời ta mới sản xuất đƣợc loại nấm một cách qui mô. Từ đó linh chi đƣợc trồng và sử dụng trong việc bào chế theo qui mô công nghiệp. 13 1.4. Ảnh hƣởng của các điều kiện lên sự sinh trƣởng và phát triển của nấm - Giống nấm: Muốn nâng năng suất nấm, trƣớc tiên phải có nguồn giống cung cấp tin cậy, còn lại là tuỳ thuộc kỹ thuật ngƣời trồng. - Dinh dƣỡng cho nấm: Liên quan đến loại mùn cƣa (loại gỗ) và thành phần thêm vào. Thành phần này có thể cung cấp ngay từ lúc trộn nguyên liệu, nhƣng cũng có thể bổ sung thêm vào giai đoạn phát triển của quả thể. Dinh dƣỡng trộn thêm vào nguyên liệu có thể là cám gạo, cám ngô hoặc phân bón hoá học hoặc 1 đƣờng ăn hoặc khoáng nhƣ Kali, Phosphate, Magiê.... Ngoài ra, nhiều loại phân bón, nhƣ N-P- K, Komix, Bimix... đều có thể dùng để tƣới bổ sung cho nấm. Urê dùng tƣới nấm rất tốt, nhƣng khi phát sinh bệnh, nhất là mốc, phải ngƣng ngay. Tuy nhiên, quan trọng vẫn là khâu chế biến và ủ nguyên liệu. Nguyên liệu chuẩn bị tốt năng suất chắc chắn sẽ cao. - Điều kiện nuôi ủ Trang 18 Góp phần đáng kể trong việc nâng năng suất nấm. Nếu trong thời gian ƣơm sợi, nhiệt độ lên cao hoặc xuống thấp quá, cũng làm ảnh hƣởng đến kết quả nuôi trồng, đặc biệt trong tình trạng thiếu oxy, năng suất giảm nhanh. Do đó, bịch nuôi ủ nên để thoáng, mật độ vừa phải, có cửa sổ để gió lùa vào phòng làm giảm nhiệt độ, nhƣng tránh nắng rọi trực tiếp. Khi sợi đã ăn kín bịch, bắt đầu chuyển sang giai đoạn tƣới đón nấm. Giai đoạn này có nhiều vấn đề phải giải quyết nhƣ: Nên treo bịch hay xếp kệ? Rạch bịch nhƣ thế nào? Lúc nào bắt đầu tƣới và tƣới ra sao? Nấm nhƣ thế nào thì thu hái đƣợc? Phổ biến hiện nay ngƣời nuôi trồng vẫn thích treo hơn để dàn kệ, vì đỡ tốn kém và dễ vệ sinh. Bịch treo thành từng xâu 8- 10 bịch theo kiểu nằm ngang . Bịch treo hoặc xếp kệ xong cần tƣới nƣớc ƣớt xung quanh thành bịch để kích thích tơ nấm. Khi tơ nấm đã trắng đều là lúc bắt đầu mở miệng bịch để cho nấm “có chỗ chui ra”. Dùng dao lam hoặc dao rọc giấy, rạch thành đƣờng dài khoảng 10cm hai hông bịch, mỗi bên 2 đƣờng. Đƣờng rạch cần đủ rách bao nylon, không phạm sâu vào khối mạt cƣa có tơ nấm. Ngoài ra, cũng có thể tháo nút bông để nấm ra từ cổ bịch. Sau khi rạch khoảng sáu giờ là có thể tƣới nƣớc. Lúc này vết thƣơng của sợi nấm ở các vết rạch đã lành lặn. Đồng thời, nƣớc tƣới sẽ làm tăng ẩm độ và giảm nhiệt độ, kích thích nấm kết quả thể tốt hơn. Khi nấm đã hình thành ở các lỗ rạch dạng cọng trắng nhỏ, cần giữ ẩm tốt để quả thể phát triển bình thƣờng. Nấm sẽ chuyển qua các giai đoạn của quá trình phá t triển và trƣởng thành. Nếu giai đoạn này nhiệt độ lên cao hoặc xuống quá thấp nấm sẽ bị chết. - Phòng bệnh Là vấn đề lớn hiện nay, nhất là khi phong trào nhà nhà trồng nấm. Với số lƣợng bịch nuôi trồng lớn và trồng quanh năm, nếu không có biện pháp phòng bệnh tốt, thì khó đạt đƣợc kết quả. Việc phòng bệnh bao gồm: Chọn giống khoẻ, xử lý và khử trùng tốt nguyên liệu, giữ môi trƣờng nơi nuôi trồng thật vệ sinh, hạn chế sử dụng thuốc sát trùng trực tiếp lên nấm, chỉ nên phun Trang 19 thuốc trừ sâu bệnh trƣớc và sau khi nuôi trồng, nên phân lô (bịch tốt, bịch xấu) để tiện chăm sóc. 1.5. Quy trình chung để nuôi trồng nấm ăn và nấm dƣợc liệu. Quy trình chung trong trồng nấm ăn và nấm dƣợc liệu trên các nguồn nguyên liệu truyền thống nhƣ mùn cƣa, bông và rơm rạ đƣợc mô tả tóm tắt theo hình 1.1 dƣới đây: Nguồn nguyên liệu phổ biến để trồng nấm từ trƣớc tới nay đƣợc biết tới vẫn là rơm rạ, mùn cƣa, cây gỗ, bông phế thải, ngoài ra có thể sử dụng các nguồn nguyên liệu khác nhƣ: bã mía, bụi xơ dừa, bã sắn, vỏ hạt cafe, lõi ngô, bột cỏ nghiền... là các nguyên liệu có hàm lƣợng cellulose tƣơng đối cao. Theo kết quả nghiên cứu từ ngành chức năng ở nhiều địa phƣơng, nấm sò trồng trên rơm rạ, bã mía, mạt cƣa, bông phế liệu dễ xử lý, đều đạt hiệu suất sinh học. 7,12,13, + Sử dụng bã mía: Bã mía là phế liệu của nhà máy đƣờng, số lƣợng thải ra hàng năm rất lớn, nếu sử dụng cho trồng nấm sò sẽ tạo ra một lƣợng sản phẩm không nhỏ cho xã hội và cho xuất khẩu. Mới đây, các nhà khoa học và kỹ sƣ thuộc Trung tâm Công nghệ Sinh học Thực vật, Viện Di truyền Nông nghiệp, đã nghiên cứu và thử nghiệm thành công nguồn nguyên liệu bã mía sẵn có có thể dùng để nuôi trồng nấm rơm, nấm sò, mộc nhĩ, nấm mỡ, nấm hƣơng và nấm linh chi với năng suất khá cao... năng suất trung bình của nấm rơm trên bã mía khô đạt 12,8. Trong khi một tấn mùn cƣa giá 600.000 – 700.000 đtấn thì đó bã mía hầu nhƣ cho không, dân chỉ mất chi phí vận chuyển. + Sử dụng mùn cƣa: Nguyên liệu sử dụng chính là mùn cƣa cao su của các loại gỗ không có tinh dầu, nhiều nơi cũng có thể dùng mùn cƣa tạp của các cây lá rộng, gỗ mềm, nhƣ xoài, mít, sung, điều, điệp... Nuôi trồng nấm sò trên mùn cƣa cho năng suất từ 60-70. + Sử dụng rơm rạ: Nuôi trồng nấm sò trên mùn cƣa thích hợp cho nuôi trồng công nghiệp, nhƣng để phổ biến rộng rãi trong dân, nhất là giải quyết xoá đói giảm nghèo, thì việc đầu tƣ khá tốn kém. Vì vậy nếu ở những vùng có rơm rạ, có thể có phƣơng pháp đơn giản hơn để trồng nấm sò với nguyên liệu là rơm Trang 20 rạ. Ngoài ra, ở các vùng trồng lúa lại khan hiếm mùn cƣa, nên sử dụng rơm rạ làm nguyên liệu trồng nấm sò, vừa hạ giá thành, vừa thu đƣợc năng suất cao. Nấm sò trồng trên rơm rạ cho năng suất trung bình 50-70 (500-700kg nấm1tấn nguyên liệu). + Sử dụng xơ dừa: Tại Kiên Giang, sau một năm thử nghiệm, cho thấy nấm sò đƣợc trồng trên bụi xơ dừa cho kết quả tốt. Ngành Nông nghiệp huyện Châu Thành, tỉnh Kiên Giang đã sản xuất thử 1.000 bịch, trong thời gian này, nhiệt độ và độ ẩm không khí trong nhà trồng đƣợc giữ ổn định bằng cách tƣới và phun liên tục (khoảng 4-6 lầnngày). Thời gian thu hoạch từ 7- 10 ngàyđợt, mỗi vụ thu hoạch từ 3- 4 đợt. Trong 1.000 bịch phôi, có 828 bịch cho ra nấm với tổng lƣợng thu 124 kg, năng suất trung bình 150g nấmbịch. + Sử dụng bã sắn: để nuôi trồng nấm sò và nấm linh chi mới đây cũng đã đƣợc nghiên cứu. Barbasova M.C.S và cộng sự năm 1996 đã dùng bã sắn để nuôi cấy nấm sò Pleurotus sajorcaju thu đƣợc kết quả tốt. Nấm sẽ phát triển mạnh khi bổ sung thêm vào bã sắn 0,8gkg cao nấm men. M.R Beux và cộng sự năm 1996 cũng thông báo họ đã sử dụng bã sắn và bã mía để nuôi nấm linh chi (Lentinula edodes). Sử dụng bã sắn để nuôi trồng nấm cho năng suất cao hơn các nguồn nguyên liệu kể trên, tuy nhiên giá thành nguyên liệu bã sắn bán trên thị trƣờng cao hơn (1000 - 1.200đkg). Mặt khác, khâu xử lívà bảo quản nguyên liệu trong quá trình nuôi trồng rất phức tạp vì bã sắn rất dễ bị nhiễm các loại nấm mốc do trong bã sắn hàm lƣợng tinh bột còn lại tƣơng đối cao. Trang 21 Chƣơng 2. VẬT LIỆU VÀ PHƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. Vật liệu 2.1.1. Giống nấm - Nấm sò, nấm rơm, nấm linh chi mua tại Trung tâm giống nấm tại Điện Bàn-Quảng Nam 2.1.2. Phế phụ phẩm - Bã sắn mua tại Công ty Sắn Quế Sơn, huyện Thăng Bình, tỉnh Quảng Nam 2.1.3. Môi trường - Cơ chất trồng nấm: bã sắn đƣợc làm ẩm đến 70 bằng dung dịch khoáng có thành phần gồm: + 200g CaCO3 + 45g NaNO3 + 7,5g MnSO4 + 0,5g FeSO4 + 7,5g KCl + 12,5l lít nƣớc máy. Cho 10kg nguyên liệu bã sắn. 2.1.4. Hóa chất Các hóa chất thông dụng đƣợc mua của Trung Quốc và tại Việt Nam: - CaCO3 - MgSO4.7H2O - FeSO4.7H2O - HCl - NaOH - H2SO4 - HNO3 - CuSO4.5H2O - Muối NaKC4H4O6 - Fe2(SO4)3 Trang 22 - C2H5OH - Nƣớc cất 1lần. - Agar 2.1.5. Thiết bị - Tủ ấm, tủ sấy, tủ cấy (Binder, Đức) - Nồi hấp thanh trùng (Tomy, Nhật) - Cân phân tích (Precisa XT 320M, Thụy Sĩ) - Máy cất nƣớc 1 lần (Hamilton, Anh) - Máy PC Multi Direct (Aqualytic, Đức) - Micropipet (Gilson, Pháp) - Dụng cụ chuẩn độ (Trung Quốc) - Máy khuấy từ. - Các dụng cụ thông thƣờng khác 2.2. Phƣơng pháp nghiên cứu 2.2.1. Phương pháp lý, hóa sinh 2.2.1.1. Phương pháp xác định độ ẩm trong bã sắn 17 Cân 100g bã sắn, sấy ở 105O C trong máy sấy khô trong một đêm cho đến khối lƣợng không đổi, giảm dần nhiệt độ và tiến hành cân xác định độ ẩm trong bã sắn theo công thức: Dd() = (W1 - W2) W1 100 Trong đó: W1: Trọng lƣợng mẫu ban đầu W2: Trọng lƣợng mẫu sấy khô 2.2.1.2. Phương pháp xác định lượng đường khử theo Bertrand16,17 Nguyên tắc: Trong môi trƣờng kiềm, các đƣờng khử (mantozơ, fructozơ, glucozơ…) có thể dễ dàng khử đồng II oxit thành đồng I oxit, kết tủa đồng I oxít có màu đỏ gạch. Đồng I oxit khử Fe 3+ thành Fe 2+. Định lƣợng Fe 2+ bằng dung dịch KMnO4 0,1N. Từ lƣợng KMnO4 chuẩn độ tính ra lƣợng Cu 2+ bị khử. Cứ 1ml Trang 23 KMnO4 0.1N tƣơng đƣơng 6,36mg Cu. Từ lƣợng Cu đối chiếu với bảng tính đƣợc lƣợng đồng tƣơng ứng. Nguyên liệu và hóa chất: - Nguyên liệu là mẫu thí nghiệm cần định lƣợng đƣờng khử. - Hóa chất: + HCl 25 + NaOH 10 + Dung dịch Fehling gồm : Fehling A + Fehling B theo tỉ lệ thể tích 1:1. Dung dịch Fehling A: 40g CuSO4.5H2O hòa tan trong 1lít nƣớc cất. Dung dịch Fehling B: hòa tan 200g muối Seignet( NaKC4H4O6) với150g NaOH trong 1lít nƣớc cất. + Dung dịch KMnO4 0,1N:...

NỘI DUNG NGHIÊN CỨU

Theo ƣớc tính một nhà máy chế biến tinh bột sắn có công suất 30-100 tấn/ngày sẽ sản xuất 7,5-25 tấn tinh bột, kèm theo đó là 12-48 tấn bã Quá trình sản xuất tinh bột sắn thải ra một lượng lớn nước thải và hai loại bã thải:

- Loại thứ nhất là: bã thải do quá trình rửa và bóc vỏ gỗ, chiếm tỉ trọng ít và thành phần chủ yếu là cellulose, hemicellulose và cát, sạn Loại này thường đƣợc chôn lấp hợp vệ sinh hoặc ủ làm phân bón.[1]

- Loại thứ hai là: phần bã còn lại sau khi tách tinh bột sắn và đƣợc gọi là bã sắn Bã sắn có độ ẩm khoảng 75-85% và lƣợng tinh bột trong bã sắn chiếm khoảng 50-60% theo khối lƣợng khô (bảng 1-1), phần nhỏ bã sắn đƣợc sử dụng làm thức ăn gia súc, còn phần lớn bị vứt bỏ, gây ô nhiễm môi trường nghiêm trọng [1]

Thành phần các chất chứa trong bã sắn thải ra từ các cơ sở sản xuất nhỏ cao hơn trong các mẫu bã sắn lấy từ các cơ sở sản xuất lớn cho thấy phương pháp thu chiết tinh bột của các cơ sở sản xuất công nghiệp quy mô lớn hiệu quả hơn Điều đáng lưu ý là thông thường bã sắn chứa 7,5-8,5 mg

Các phương pháp xử lý bã sắn:

Phương án xử lý bã sắn có hiệu quả nhất là tận dụng bã sắn để sản xuất ra những sản phẩm có giá trị, vì nhƣ vậy có thể tiết kiệm đƣợc toàn bộ hoặc đáng kể chi phí xử lý bã sắn, mang lại hiệu quả kinh tế cao hơn cho các cơ sở sản xuất Ghildal và Losane (1990) đã xem xét, phân tích lợi ích, tính khả thi của các phương án xử lý bã sắn như sau:

- Làm thức ăn cho động vật: Bã sắn sau khi phơi nắng hoặc sấy khô thường được làm thức ăn cho gia súc, có thể cho ăn trực tiếp hoặc trộn lẫn với các chất dinh dƣỡng khác [2, 3]

- Làm phân bón: Ngoài tinh bột và cellulose, bã sắn còn có một ít nitơ, phospho, kali và các chất khoáng khác nên làm phân bón rất tốt.

VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Vật liệu

- Nấm sò, nấm rơm, nấm linh chi mua tại Trung tâm giống nấm tại Điện Bàn-Quảng Nam

- Bã sắn mua tại Công ty Sắn Quế Sơn, huyện Thăng Bình, tỉnh Quảng Nam

- Cơ chất trồng nấm: bã sắn đƣợc làm ẩm đến 70% bằng dung dịch khoáng có thành phần gồm:

Cho 10kg nguyên liệu bã sắn

Các hóa chất thông dụng đƣợc mua của Trung Quốc và tại Việt Nam:

- Tủ ấm, tủ sấy, tủ cấy (Binder, Đức)

- Nồi hấp thanh trùng (Tomy, Nhật)

- Cân phân tích (Precisa XT 320M, Thụy Sĩ)

- Máy cất nước 1 lần (Hamilton, Anh)

- Máy PC Multi Direct (Aqualytic, Đức)

- Dụng cụ chuẩn độ (Trung Quốc)

- Các dụng cụ thông thường khác

Phương pháp nghiên cứu

2.2.1 Phương pháp lý, hóa sinh

2.2.1.1 Phương pháp xác định độ ẩm trong bã sắn [17]

Cân 100g bã sắn, sấy ở 105 O C trong máy sấy khô trong một đêm cho đến khối lƣợng không đổi, giảm dần nhiệt độ và tiến hành cân xác định độ ẩm trong bã sắn theo công thức:

W1: Trọng lƣợng mẫu ban đầu

W2: Trọng lƣợng mẫu sấy khô

2.2.1.2 Phương pháp xác định lượng đường khử theo Bertrand[16,17]

Trong môi trường kiềm, các đường khử (mantozơ, fructozơ, glucozơ…) có thể dễ dàng khử đồng II oxit thành đồng I oxit, kết tủa đồng I oxít có màu đỏ gạch Đồng I oxit khử Fe 3+ thành Fe 2+ Định lƣợng Fe 2+ bằng dung dịch KMnO 4 0,1N Từ lƣợng KMnO 4 chuẩn độ tính ra lƣợng Cu 2+ bị khử Cứ 1ml

KMnO 4 0.1N tương đương 6,36mg Cu Từ lượng Cu đối chiếu với bảng tính được lượng đồng tương ứng

* Nguyên liệu và hóa chất:

- Nguyên liệu là mẫu thí nghiệm cần định lượng đường khử

+ Dung dịch Fehling gồm : Fehling A + Fehling B theo tỉ lệ thể tích 1:1 Dung dịch Fehling A: 40g CuSO 4 5H 2 O hòa tan trong 1lít nước cất Dung dịch Fehling B: hòa tan 200g muối Seignet( NaKC4H 4 O 6 ) với150g NaOH trong 1lít nước cất

+ Dung dịch KMnO 4 0,1N: cân 1,06g KMnO4 hòa tan trong 1 lít nước cất

+ Dung dịch Fe 2 (SO 4 ) 3 trong H 2 SO 4 : Hòa tan 50g Fe2(SO 4 ) 3 vào 108,7ml

H 2 SO 4 đặc( d =1,84) khuấy cho tan, sau đó dẫn thể tích tới 1000ml bằng nước cất ta đƣợc hỗn hợp cần pha chế

+ Cho vào bình tam giác 5ml (Vp) dịch lọc và 20ml dung dịch Fehling, đậy bình bằng đĩa đồng hồ Đặt bình trên đèn cồn có lót lưới Amian, đun sôi 3 phút kể từ khi xuất hiện bọt khi đầu tiền, xuất hiện kết tủa đỏ gạch Để bình nguội, dồn kết tủa về một phía, lƣa ý không để kết tủa tiếp xúc với không khí bằng cách luôn để kết tủa ngập trong dung dịch

+ Chắt từ từ dung dịch Fehling qua phễu Bucne Dùng nước nóng rửa kết tủa nhiều lần cho tới khi dung dịch không có phản ứng với giấy quỳ nữa thì dừng lại

- Hòa tan kết tủa Cu 2 O:

+ Đặt phễu Bucne trên bình tam giác có chứa tủa Cu 2 O, đổ 10ml dung dịch

Fe 3+ sunphat trong axit sunfuaric qua phễu lọc xuống bình tam giác, lắc nhẹ để Cu2O tan hoàn toàn Dùng nước nón rửa trên phễu cho đến khi nước rửa phễu không còn phản ứng với giấy quỳ, kết thúc hòa tan kết tủa

Chuẩn độ dung dich FeSO 4 bằng dung dịch KMnO 4 0,1N đến khi xuất hiện màu hồng bền trong 30s (Vc)

+ Khối lƣợng Cu trong dung dịch phân tích: g 1 = Vc * 6.36 Trong đó:

+ Vc: số ml KMnO 4 chuẩn độ

+ g 1 : số mg Cu trong dung dịch phân tích

+ Từ g 1 tra bảng xác định được khối lượng đường khử mg trong 5ml dung dịch mẫu phân tích, đổi mg thành g đƣợc (g2)

+ Tỉ lệ phần trăm đường có trong nguyên liệu (X)

+ V: số ml dung dịch mẫu pha loãng = 100ml

+ Vp: số ml dung dịch mẫu đem phân tích = 5ml

+ g: số gam mẫu đem phân tích

2.2.1.3 Phương pháp định lượng tinh bột [16]

Phương pháp dựa trên cơ sở:

Tinh bột bị thủy phân thành đường khử dưới tác động của axit HCl và nhiệt độ, qua đó định lượng đường khử sẽ định lượng được tinh bột

- Loại bỏ đường có sẵn thu tinh bột.:

+ Cân 2g nguyên liệu đã nghiền nhỏ, trộn đều, chuyển sang cốc Cho vào cốc 100ml nước cất, khuấy đều bằng máy khuấy từ trong khoảng 45-60 phút Sau đó, lọc tinh bột bằng phễu và giấy lọc Tráng lại cốc nhiều lần và rủa tinh bột nhiều lần bằng nước để loại bỏ tối đa lượng đường còn bám vào tinh bột

+ Chuyển phễu lọc chứa tinh bột sang bình tam giác 250ml, dùng đũa thủy tinh nhỏ chọc thủng giấy lọc, dồn tinh bột xuống bình tam giác bằng nước cất( khoảng 80-100ml)

- Chiết rút đường từ nguyên liệu:

+ Cho 125ml HCl 25% vào bình tam giác, đun cách thủy 2,5-3h, thỉnh thoảng lắc nhẹ bình để thủy phân hoàn toàn lƣợng tinh bột có trong mẫu thành các dạng đường khử Sau kết thúc, làm nguội bình, trung hòa dịch chiết băng dung dịch NaOH 10% Chuyển toàn bộ dung dịch trong bình sang bình định mức 250ml, dùng nước cất dẫn đến dung tích bình Khuấy đều dung dich và lọc qua giấy lọc thu được dung dịch trong suốt để định lượng đường khử

+ G: số g tinh bột có trong mẫu phân tích

+ g 2 : số g đường khử có trong mẫu phân tích

+ 0,9: hệ số tính chuyển từ gluco sang tinh bột

2.2.1.4 Phương pháp xác định hàm lượng Cenllulose[18]

Phương pháp định lượng xenlulozơ dựa vào tính chất của nó là một hợp chất bền đối với tác dụng của axít mạnh và kiềm mạnh

- Dung dịch axit axetic đặc

- Nguyên liệu là mẫu cần phân tích

Nghiền 2g nguyên liệu cho vào bình tam giác dung tích 100ml, cho thêm 20ml HNO 3 đặc và 2ml axit axetic đặc, đun nhẹ trong 30 phút

Lọc lấy kết tủa, rửa kết tủa bằng nước nóng 2 lần, rửa bằng cồn 90 0 hai lần, sau đó sấy khô và đem cân, khối lƣợng thu đƣợc là khối lƣợng cellulose trong 2g, từ đó xác định đƣợc hàm lƣợng % cellulose trong mẫu

Hàm lƣợng xelulozơ tính bằng công thức:

+ X: hàm lƣợng xenlulozơ tính bằng phần trăm

+ W: khối lƣợng mẫu thí nghiệm (g)

2.2.1.5 Xác định khả năng sinh enzyme (amylase, cellulase, chitinase, protease) bằng phương pháp khuếch tán trên môi trường thạch

Dựa theo phương pháp của Williams, (1983) [14, 59]

* Chuẩn bị cơ chất cho từng loại enzyme: Môi trường gồm 2% thạch có bổ sung 1% tinh bột tan hoặc 1% chitin hoặc 0.5% CMC hoặc 1% gelatin Thanh trùng ở 121 0 C trong 15 phút, đổ vào các đĩa petri, mỗi đĩa khoảng 25ml sau đó để nguội

* Chuẩn bị dịch thử enzyme: Bã sắn trồng nấm sò và nấm linh chi sau khi thu hái quả thể đem nghiền với nước bằng máy nghiền đồng thể tỉ lệ 1g cơ chất/5 ml nước, lọc bỏ sợi bằng giấy lọc, li tâm thu dịch trong để thử hoạt tính

* Thử hoạt tính: Dùng khoan nút chai khoan 2 lỗ trên đĩa thạch Nhỏ 100àl dịch trong thu đƣợc vào mỗi lỗ Đặt vào tủ lạnh 4 0 C từ 8 -12h để enzyme khuếch tán vào thạch, sau đó chuyển sang tủ ấm 30 0 C khoảng 24h Hoạt tính enzyme được hiện hình bằng vòng phân giải khi sử dụng các thuốc thử tương ứng Hoạt tính Amylase và chitinase đƣợc hiện hình bằng dung dịch liugol (1g

KI với 2g I2 trong 300ml nước) Hoạt tính cellulase được hiện hình bằng dung dịch công gô đỏ 1% Hoạt tính Protease đƣợc hiện hình bằng dung dịch Amonisunfat bão hoà Hoạt tính các enzyme đƣợc đánh giá sơ bộ bằng độ lớn vòng phân giải (D-d, mm), trong đó D là đường kính vòng phân giải, d là đường kớnh lỗ thạch (ỉ = 8mm)

2.2.2.1 Phương pháp trồng nấm sò

* Đặc điểm sinh học của nấm Sò [12]

Nấm sò có thể trồng quanh năm nhƣng thuận lợi nhất là từ tháng 9 năm trước đến tháng 4 năm sau Nhiệt độ thích hợp nhất với nấm sò:

- Nhóm chịu nhiệt độ cao 24-28 O C

- Độ ẩm cơ chất trồng nấm từ 65% - 75%, độ ẩm không khí ≥ 80%

- Cơ chất trồng nấm và nước tưới cần pH = 6,5 - 7,0

- Ánh sáng không cần thiết trong quá trình nuôi sợi nấm, tới khi nấm hình thành thể quả thì cần ánh sáng khuếch tán

- Độ thông thoáng : cần thiết trong giai đoạn nuôi sợi

- Dinh dƣỡng: sợi nấm sò sử dụng trực tiếp nguồn Xenlulozơ từ cơ chất, ngoài ra là các chất khoáng và đạm

Nguyên liệu trồng nấm sò: bao gồm tất cả các nguyên liệu có chứa xenlulozơ nhƣ: bông, bã mía, mùn cƣa, rơm, rạ… Trong giới hạn này của đề tài chúng tôi nghiên cứu để sử dụng thêm một loại cơ chất mới để trồng nấm sò đó là bã sắn, nghiên cứu cách xử lý tối ƣu với loại cơ chất này để trồng nấm sò có hiệu quả cao nhất

* Xử lý bã sắn nuôi trồng nấm sò:

KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN

Phân tích thành phần hóa học của bã sắn

Bã sắn đƣợc sấy khô đến trọng lƣợng không đổi rồi đem phân tích theo nhƣ trình bày ở phần phương pháp Kết quả phân tích hàm lượng các chất được thể hiện trong bảng 3.1

Bảng 3.1 Hàm lượng các chất có trong bã sắn

STT Các chỉ tiêu phân tích Bã sắn trước khi trồng nấm

Bã sắn sau khi ủ để trồng nấm

Từ bảng trên ta thấy, hàm lƣợng cellulose tăng và hàm lƣợng tinh bột giảm đi đáng kể, điều này có ý nghĩa rất quan trọng trong việc tận dụng nguồn bã sắn phế thải để nuôi trồng nấm ăn và nấm dƣợc liệu Vì nấm ăn và nấm dƣợc liệu không có nhu cầu cao về tinh bột nhưng lại cần rất nhiều cellulose để sinh trưởng và phát triền, đặc biệt là nấm sò Chính vì thế, mà nguồn nguyên liệu phổ biến và chủ yếu hiện nay để tròng nấm vẫn là rơm rạ, mùn cƣa của các loại gỗ không có tinh dầu Do đó, việc sử dụng bã sắn là 1 hướng nghiên cứu mới

Theo các tài liệu nghiên cứu trước đây, trong bã sắn hàm lượng HCN trong bã sắn tươi khá cao (162,4mg/kg), có thể gây ngộ độc cho trâu, bò, lợn khi ăn Nhƣng hàm lƣợng HCN còn lại trong bã sắn khô là rất ít, không đáng kể chỉ chứa 7,5-8,5mg% Đây là hàm lượng rất nhỏ nằm dưới ngưỡng gây độc rất nhiều Tôi đã sử dụng bã sắn tươi, rửa bằng nước nóng sau đó vắt khô nhiều lần rồi phơi khô thì hàm lƣợng HCN hầu nhƣ không còn nữa, nên không cần xử lý gì thêm và hoàn toàn yên tâm khi sử dụng để trồng nấm.

Quy trình trồng nấm sò, nấm linh chi và nấm rơm trên bã sắn

Tôi tiến hành nghiên cứu để nâng cao năng suất nấm sò bằng cách bổ sung thêm nguồn cellulose vào nguyên liệu trồng nấm Nguyên liệu tôi chọn để bổ sung là rơm rạ vì theo kết quả nghiên cứu cho thấy rằng hàm lƣợng xenlulozơ trong rơm chiếm từ 35-37%, và đây là thành phần chính của rơm So với bã sắn, trong rơm có hàm lƣợng xenlulozơ cao hơn gấp xấp xỉ 1,56 lần Vì vậy quá trình bổ sung rơm vào bã sắn để trồng nấm thực chất là làm tăng hàng lƣợng xenlulozơ trong bã sắn Vì vậy, khi tiến hành trồng nấm sẽ cho hiệu quả cao hơn Và hơn nữa rơm rạ lại rẻ tiền, dễ kiếm và vùng phổ biến ở các vùng nông thôn nước ta

Vì phần lớn rơm rạ sau khi thu hoạch ở một số địa phương đều bị đốt bỏ ngoài đồng ruộng hoặc ném xuống kênh rạch, sông ngòi gây tắc nghẽn dòng chảy, ô nhiễm môi trường Do đó, phối trộn rơm rạ vào bã sắn làm cơ chất trồng nấm sò góp phần tăng hàm lƣợng cellulose trong cơ chất, đồng thời tạo sự thông thoáng trong cơ chất, tăng khả năng sinh trưởng và phát triển của hệ sợi nấm, rút ngắn đƣợc thời gian nuôi sợi

3.2.1.1 Phương pháp xử lý nguyên liệu trồng

Bã sắn thu mua tại nhà máy đem rửa ngâm với nước nóng, sau đó phơi khô, bổ sung thêm cám gạo (5%), cám ngô (5%), CaCO 3 (bột nhẹ 5%) trộn đều, sau đó đƣợc bổ sung thêm dung dịch khoáng để đƣợc độ ẩm 70% Có thể kiểm tra nguyên liệu bằng cách: nắm nguyên liệu vào tay, sau đó bỏ tay ra nếu nguyên liệu tự rời nhau là được Trong trường hợp độ ẩm cao quá hoặc thấp quá thì cần phải chỉnh lại độ ẩm cho thật chuẩn Nếu độ ẩm cao quá, lƣợng tinh bột còn lại trong bã tương đối lớn, sau khi thanh trùng tinh bột sẽ bị hồ hoá hoàn toàn, tăng độ nhớt, khả năng lưu thông khí trong bịch giảm, làm sợi nấm phát triển kém và khả năng bị nhiễm nấm cao Nếu độ ẩm thấp quá, hệ sợi nấm phát triển nhanh nhƣng ra quả thể kém, chất lƣợng quả thể không tốt biểu hiện quả thể bé, cuống quả thể dài, khi ăn rất dai, và hệ sợi nhanh bị lão hoá ảnh hưởng đến năng suất và chất lƣợng quả thể nấm ở những lần ra sau Bã sắn sau đó đƣợc đem đi ủ khoảng 12-12 ngày Đối với rơm rạ: chặt ngắn 10 - 15cm, ngâm trong nước vôi 15 - 20 phút vớt ra để ráo nước, ủ lại 1 - 2 ngày, sao cho độ ẩm đạt khoảng 65%, khi đó rơm rạ có màu vàng tươi là được

Bã sắn sau khi tạo ẩm và rơm rạ sau khi ủ đƣợc phối trộn rơm rạ và bã sắn theo những tỷ lệ nhất định Đóng bịch vào túi nilon chịu nhiệt kích thước 25 ×

35cm, trọng lƣợng mỗi bịch 1,2 - 1,5kg, đem hấp khử trùng ở áp suất 1 atm,

121 o C thời gian là 3 tiếng đồng hồ Sau khi hấp xong lấy bịch nấm ra để nguội và cấy giống trong phòng cấy giống vô trùng

Phương pháp bố trí thí nghiệm Để tiến hành thí nghiệm này tôi phối trộn rơm rạ vào bã sắn theo các tỷ lệ khác nhau nhằm tìm ra một tỷ lệ phù hợp cho sự sinh trưởng và phát triển của nấm sò trên cơ chất là bã sắn là chủ yếu, chứ không phải trên rơm rạ Do đó, tôi tiến hành phối trộn tỷ lệ rơm rạ/bã sắn từ 10-30% với khoảng cách là 10% nhƣ trình bày dưới đây:

Lô 1: 100% cơ chất là bã sắn chƣa xử lý

Lô 2: 90% bã sắn xử lý loại bỏ tinh bột và 10% rơm rạ

Lô 3: 80% bã sắn bã sắn xử lý loại bỏ tinh bột và 20% rơm rạ

Lô 4: 70% bã sắn bã sắn xử lý loại bỏ tinh bột và 30% rơm rạ

Mỗi lô có 6 bịch, mỗi bịch có trọng lƣợng 1,2 – 1,5kg Các bịch đƣợc cấy giống đều trên bề mặt và đƣợc nuôi trồng trong cùng điều kiện

Bảng 3.2 Phối trộn nguyên liệu khi trồng nấm sò Loại nấm

Mẫu bã sắn Nấm Sò

Bã sắn chƣa xử lý

90%Bã sắn xử lý loại bỏ tinh bột +10% rơm rạ

80% Bã sắn xử lý loại bỏ tinh bột +20% rơm rạ

70% Bã sắn xử lý loại bỏ tinh bột + 30% rơm rạ

6 bịch nấm Đánh giá thí nghiệm dựa trên các kết quả theo dõi về: sinh trưởng và phát triển của hệ sợi nấm qua các khoảng thời gian khác nhau cho đến khi xuất hiện tính toán đến năng suất và hiệu quả kinh tế… Và kết quả thí nghiệm đƣợc ghi lại tóm tắt ở bảng 3.3

Bảng 3.3 Sự sinh trưởng của nấm sò qua các khoảng thời gian

Sự sinh trưởng và phát triển của nấm sò qua những khoảng thời gian nuôi trồng

Số lƣợng quả thể trong 1 vết rạch bịch

1 Hệ sợi lên chậm, thƣa

Sợi nấm ăn theo tia đồng đều

Sợi nấm hầu hết ăn chƣa kín bịch (không ăn xuống tới đáy bịch)

Quả thể ra rất ít, nhỏ, 1 số bịch không ra quả thể

2 Hệ sợi lên đều, thƣa

Sợi nấm ăn theo tia , ăn đều và ăn sâu gần ẵ bịch

Sợi nấm ăn tới đáy bịch

Quả thể ra lần đầu nhiều và sau đó giảm dần, cuống dài và gầy

3 Hệ sợi lên đều, thƣa

Sợi nấm ăn theo tia đồng đều, ăn sâu 2/3 bịch

Sợi nấm ăn hết bịch, bắt đầu ra quả thể

Số lƣợng quả thể nhiều, 7-12 quả thể, quả thể to mập

4 Hệ sợi lên đều, thƣa

Sợi nấm ăn gần hết bịch

Sợi nấm ăn kín bịch, bịch rắn chắc và có thể rạch bịch, bắt đầu ra quả thể

Số lƣợng quả thể nhiều, 15-20 quả thể, có 10-15 quả thể trưởng thành

Hình 3.1 Sự sinh trưởng của nấm sò qua các khoảng thời gian

Trên cơ chất là bã sắn, tôi tiến hành chăm sóc và thu hái nấm trong 65 ngày kể từ ngày nuôi và hiệu quả đƣợc ghi lại ở bảng 3.4

Bảng 3.4 Hiệu quả nấm sò thu được qua các khoảng thời gian

Lô TN Khối lƣợng nấm (g/bịch) sau các khoảng thời gian thu hái

20 ngày 45 ngày 70 ngày Tổng đợt

Qua bảng trên ta thấy, ta thấy hiệu quả ở lô 3 và lô 4 cao hơn so với lô 1 và lô 2 đồng thời quả thể ở các lô này tương đối đồng đều ở các lần thu hái, cuống quả thể to và mập Tuy nhiên ở tất cả các lô, sau 70 ngày thu hái bịch nấm đã teo đi rất nhiều, mặc dù vẫn có thể thu hái rải rác và rất ít ở các bịch, nên tôi quyết định ngừng thu hái ở ngày 70 Nhƣ vậy, bổ sung lƣợng rơm rạ làm cơ chất trồng nấm sò mang lại hiệu quả kinh tế cao hơn khi trồng trên bã sắn đơn lẻ Hơn nữa, thời gian ra quả thể đƣợc rút ngắn rất nhiều Nồng độ bổ sung ở đây tôi chọn là 30% rơm rạ và 70% bã sắn thu hồi đƣợc hiệu suất nấm cao

Hình 3.2 Biểu đồ hiệu quả nấm sò sau một đợt thu hái

Tỷ lệ nhiễm của các bịch nấm thể hiện ở bảng 3.4

Bảng 3.5 Tỷ lệ nhiễm của các bịch nấm

Nguyên liệu Số bịch bị nhiễm

Theo tính toán của nhóm các tác giả: Đinh Xuân Linh, Thân Đức Nhã, Nguyễn Hữu Đống, Nguyễn Thị Sơn chi phí và lợi nhuận thu đƣợc khi nuôi trồng nấm sò trên các cơ chất rơm rạ và mùn cƣa nhƣ sau:

Rơm rạ khô 1.000kg × 300đ/kg = 300.000đ

Vôi bột, chun nịt, cám, bột nhẹ = 200.000đ

Khấu hao nhà xưởng + dây buộc

= 300.000đ Điện nước + năng lượng sấy = 500.000đ

Tổng chi phí cho 1 tấn rơm rạ = 4.570.000đ

Năng suất thấp nhất 50% = 500 kg

Cách tính toán tương tự như cơ chất là rơm rạ, chỉ khác ở 2 điểm là: chi phí cho nguyên liệu và năng suất nấm thu đƣợc Đối với mùn cƣa chi phí cho 1kg mùn cƣa khô là 500đ/kg, nên chi phí cho 1.000kg là 500.000đ và tổng chi phí cho 1tấn nguyên liệu là 4.770.000đ Năng suất nấm thu đƣợc 600kg, tổng thu đƣợc là 600kg × 30.000đ = 18.000.000đ Lợi nhuận thu đƣợc/1tấn nguyên liệu là: 18.000.000đ – 4.770.000đ = 13.230.000đ

Theo tính toán của tôi thì chi phí trên bã sắn:

- Chi phí cho 1 tấn nguyên liệu: 5.410.000đ (gồm nguyên liệu, cám gạo, cám ngô, vôi bột, túi nilong, dây treo, giống nấm, điện)

- Hiệu quả thu đƣợc: 810kg nấm ; giá thành 1kg nấm: 30.000đ

Bảng 3.6 Hiệu quả kinh tế của nấm sò trong các nguồn cơ chất khác nhau

Cơ chất Chi phí 1 tấn nguyên liệu

Sản lƣợng nấm thu đƣợc (kg)

Giá trị bán ra Lợi nhuận

Nhƣ vậy, lợi nhuận thu từ cơ chất bã sắn kết hợp với rơm rạ là cao hơn nhiều so với các cơ chất khác, từ đó nâng cao đƣợc giá trị kinh tế từ mô hình này

3.2.2.1 Phương pháp xử lý nguyên liệu trồng

Nguyên liệu là bã sắn, đƣợc phối trộn với các phụ gia và tạo ẩm đầy đủ Đem đóng vào các túi nilon kích thước 25×35 cm sao cho khối lượng mỗi túi đạt 1,1- 1,4 kg rồi đƣa vào thanh trùng ở nồi áp suất 1 atmotphe, nhiệt độ 121 0 C, thời gian 3 tiếng Sau đó đem để trong phòng chiếu tia cực tím và bật quạt gió, để nguội và sau đó vận chuyển các bịch vào nhà cấy giống đã đƣợc vô trùng để chuẩn bị cấy giống Không nên kéo dài thời gian thanh trùng, vì tinh bột bị hồ hoá, khả năng lưu thông khí trong bịch kém, hệ sợi phát triển chậm và khả năng bị nhiễm nấm mốc cao

Trên cơ chất là bã sắn, tôi tiến hành phối trộn nhƣ sau:

Lô 1: Nguyên liệu bã sắn, bổ sung 200g CaCO 3 , 12,5kg nước cho 10kg nguyên liệu Đóng bịch, thanh trùng 121 0 C trong 3 tiếng, để nguội, cấy giống và theo dõi sự phát triển của hệ sợi

Lô 2: Nguyên liệu là bã sắn, bổ sung 200g CaCO 3 , 45g NaNO 3 , 7,5g MnSO 4 , 0,5g FeSO 4 , 7,5g KCl, 12,5kg nước cho 10kg nguyên liệu Đóng bịch, thanh trùng 121 0 C trong 3 tiếng, để nguội, cấy giống và theo dõi sự phát triển của hệ sợi Kết quả đƣợc ghi lại ở bảng 3.5

Bảng 3.7 Sự sinh trưởng của nấm linh chi qua các khoảng thời gian

Sự sinh trưởng và phát triển của nấm linh chi qua các khoảng thời gian

1 Hệ sợi ăn chậm, thƣa, ăn theo tia đồng đều

Hệ sợi ăn 2/3 bịch, sợi nấm ăn trắng bịch và có sự hình thành quả thể ở miệng nút bông

Ra quả thể Quả thể chuyển sang màu cánh gián, sinh trưởng yếu và sau đó tự teo đi

2 Hệ sợi ăn nhanh, ăn theo tia đồng đều và ăn sâu 1/3 bịch

Hệ sợi ăn xuống đáy bịch, có sự hình thành quả thể ở miệng nút bông

Ra quả thể, định hình cuống và mũ nấm rất rõ

Quả thể sinh trưởng bình thường, có hình đặc trƣng

Hình 3.3 Sự sinh trưởng của nấm linh chi qua các khoảng thời gian

Nhận xét: Ở lô 1, quả thể sinh trưởng kém, mũ quả thể không phát triển đƣợc và tự teo đi, vì vậy tôi không tính toán năng suất ở lô này Ở lô 2, sau 60 ngày kể từ lúc cấy giống, tôi tiến hành chăm sóc và thấy quả thể phát triển bình thường, năng suất đạt 55g/bịch vì do ở lô này có bổ sung thêm thành phần khoáng là chất dinh dƣỡng để hệ sợi nấm phát triển

Theo tính toán của nhóm các tác giả: Đinh Xuân Linh, Thân Đức Nhã, Nguyễn Hữu Đống, Nguyễn Thị Sơn chi phí và lợi nhuận thu đƣợc khi nuôi trồng nấm sò trên các cơ chất rơm rạ và mùn cƣa nhƣ sau:

Mùn cƣa khô 1.000kg × 500/kg = 500.000đ

Khấu hao nhà xưởng, dụng cụ = 200.000đ

Tổng chi phí cho 1 tấn mùn cƣa = 6.490.000đ

Năng suất linh chi tươi = 60kg

Tương ứng linh chi khô = 20kg

Chi phí trên bã sắn đƣợc tính toán nhƣ sau:

Thành phần dinh dƣỡng của hệ sợi nấm sau khi trồng trên cơ chất là bã sắn

Trên cơ chất là bã sắn, tôi tiến hành phân tích 1 số chỉ tiêu trong bã nấm sau khi thu hoạch quả thể và kết quả đƣợc ghi lại ở bảng 3.8

Bảng 3.10 Thành phần dinh dưỡng của hệ sợi nấm trên cơ chất là bã sắn

Sau khi trồng nấm sò

Sau khi trồng nấm linh chi

Sau khi trồng nấm rơm

Qua bảng số liệu trên ta thấy hàm lượng tinh bột, xellulose, đường khử có trong bã sắn giảm đi đáng kể do trong quá trình sinh trưởng hệ sợi nấm đã sử dụng cũng nhƣ trong quá trình hình thành quả thể.

Hoạt tính enzyme trong bã sắn sau khi trồng nấm

Khi phân tích thành phần thì tôi thấy trong bã sắn sau khi trồng nấm đều có mặt của các loại enzyme nhƣ: amylase, cellulose, protease Sự có mặt 3 loại enzyme này tạo nên các chế phẩm enzyme giúp vật nuôi tiêu hóa tốt hơn, tăng khả năng hấp thu các chất Vì vậy mà sau khi trồng nấm ta có thể sử dụng bã sắn này để làm thức ăn cho vật nuôi ăn Nhƣng do điều kiện thời gian có hạn, nên tôi chỉ nghiên cứu tới đây Kết quả kiểm tra sự có mặt của các loại enzyme đƣợc tiến hành trong môi trường thạch và được ghi hình lại trong hình 3.8

Hình 3.5 Hoạt tính enzyme có trong bã sắn sau khi trồng nấm.