Định Lượng Coliform Bằng Mpn.pptx

ĐỊNH LƯỢNG COLIFORM BẰNG PHƯƠNG PHÁP MPN NHÓM SINH VIÊN THỰC HIỆN 1 Nguyễn Thị Ngọc Giàu – 2005202025 2 Nguyễn Đoàn Thanh Hương – 2022208660 3 Nguyễn Thị Nữ 2022208672 4 Mai Ngọc Quyên – 2022208694 5[.]

ĐỊNH LƯỢNG COLIFORM BẰNG PHƯƠNG PHÁP MPN

NHÓM SINH VIÊN THỰC HIỆN:

1 Nguyễn Thị Ngọc Giàu – 2005202025

2 Nguyễn Đoàn Thanh Hương – 2022208660

3 Nguyễn Thị Nữ - 2022208672

4 Mai Ngọc Quyên – 2022208694

5 Nguyễn Đào Nguyên Thương – 2205212022

GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN: Đinh Thị Hải Thuận

Ngày 27 tháng 10 năm 2022

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM

TP HỒ CHÍ MINH KHOA: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM

BÁO CÁO TIỂU LUẬN HỌC PHẦN PHÂN TÍCH

VI SINH THỰC PHẨM

NHÓM 3

Môi trường và Hóa chất

KHÁI QUÁT VỀ COLIFORM

Trực khuẩn gram (-), hình que, được xem là nhóm VSV chỉ thị Không sinh bào tử

Có khả năng lên men đường lactose.

Phân bố nhiều trong nước hoặc thực phẩm

Tiêu chảy Rối loạn máu Suy thận Tử vong

MÔI TRƯỜNG

& HÓA CHẤT

( Liệt kê và Nêu vai trò thành phần)

Môi trường và hóa chất Mục đích Vai trò

SPW (Saline Peptone Water) Pha loãng mẫu Dùng để pha loãng mẫu và hóa chất

Lauryl Sulface Trytone Broth

(LSB) Nuôi cấy Coliforms Cung cấp chất dinh dưỡng

Brillant Green Lactose Bile Salt

(BGBL) Khẳng định Kiểm tra sự hiện diện VSV có trong mẫu

Thành phần của các môi trường

1) Môi trường SPW (Saline Peptone

Water)

Thành phần Vai trò

NaCl 1g Để duy trì sự cân bằng thẩm thấu của môi trường.

Peptone 8,5 g Cung cấp Nitơ và các dưỡng chất.

Nước cất 1 lít Giúp cho quá trình trao đổi chất, các phản ứng diễn ra thuận lợi.

2) Môi trường tăng sinh chọn lọc: Lauryl Sulface Trytone Broth ( LSB)

Thành phần a) MT nồng độ kép b) MT nồng độ đơn Vai trò

Dịch thủy phân protein

sữa và protein ĐV bằng

Cung cấp N, năng lượng.

Lactoza (C12H22O11.H2O) 10 g 5 g Nguồn cung cấp năng lượng; tăng tỷ lệ sinh

trưởng của VSV.

Hệ đệm ổn định pH cho MT, kiểm soát độ pH

trong lên men Lactose.

Natri clorua 10 g 5 g Cung cấp khoáng chất cần thiết cho MT nuôi

cấy, hệ đệm; duy trì pH ổn định cho MT Natri lauryl sulfat 0,2 g 0,1 g

Nước 1 000 ml 1 000 ml Giúp quá trình trao đổi chất, các phản ứng diễn ra thuận lợi.

3) MT khẳng định: Brilliant Green Lactose Bile Salt (BGBL)

Dịch thủy phân casein bằng

enzym 10 g Cung cấp N, năng lượng và các khoáng chất.

Lactoza (C 12 H 22 O 11 H 2 O) 10 g Cung cấp năng lượng; tăng tỷ lệ sinh trưởng của

VSV.

Mật bò khô 20 g Kích thích sự phát triển của hệ VSV trong MT

Lục sáng 0,0133 g Ức chế sự xuất hiện các VSV không mong muốn

Nước 1 000 ml Quá trình trao đổi chất, các phản ứng diễn ra thuận

lợi.

Quy định về tiêu chuẩn định lượng Coliform

bằng phương pháp MPN

Các bước tiến hành

Chuẩn bị mẫu thử,

huyền phù ban đầu và

dung dịch pha loãng

Cấy và ủ Phép thử khẳng định Tính & biểu thị kết quả

QUY TRÌNH TIẾN HÀNH

Chuẩn bị mẫu thử, huyền phù ban đầu

và dung dịch pha

loãng

Dung dịch pha loãng

SPW 90ml/225ml

Pha loãng

mẫu

• Phân lập Coliforms từ mẫu thí nghiệm.

• Cung cấp chất dinh dưỡng.

Vai trò của môi trường Saline Peptone Water (SPW) ở bước pha loãng mẫu

Cấy và ủ

mẫu

1<x<10 ml mẫu thử/

huyền phù ban đầu

x<1ml mẫu thử/

huyền phù ban đầu

10ml môi trường tăng

Thử nghiệm khẳng định

Vai trò của môi trường BGBL

ở Bước 3

• Góp phần vào việc nhận biết, xác định đặc trưng sinh khí.

• Môi trường để phản ứng sinh khí tiếp tục diễn ra.

(5)

(6)

Màu của khuẩn

lạc

Coliforms tạo ra các khuẩn lạc

có ánh kim loại màu xanh lục

Màu phản ứng trên môi trường khẳng định BGBL

Trở nên đục hơn

Diễn giải kết quả

Số ống dương

Chỉ

số MPN

Số VSV/

ml(g)

Số ống dương

Chỉ số MPN

Số VSV/

ml(g)

Số ống dương

Chỉ

số MPN

Số VSV/

ml(g)

Số ống dương

Chỉ số MPN

Số VSV/m l(g)

BẢNG TRA MPN TRONG NƯỚC DÀNH CHO LOẠT 5 ỐNG NGHIỆM Ở 3 NỒNG ĐỘ PHA LOÃNG LIÊN TIẾP

Mẫu sữa chua uống lên men không đạt yêu cầu

về chỉ tiêu Coliforms

CÂU HỎI TRẮC NGHIỆM CỦNG CỐ KIẾN THỨC

Câu 1: Câu nào sau đây đúng về Coliform? A Trực khuẩn gram(-), hình que, sinh bào tử

B Trực khuẩn gram (-), hình que, không sinh bào tử C Trực khuẩn gram (+), hình que, sinh bào tử D Trực khuẩn gram (+), hình que, không sinh bào tử

Câu 2: Các triệu chứng khi nhiễm Coliform? A Tiêu chảy, sốt, dị ứng B Sốt, rối loạn

máu, phát ban C Tiêu chảy, rối loạn máu, suy thận D Ho, sốt, tiêu chảy.

B Trực khuẩn gram (-), hình que, không sinh bào

tử

C Tiêu chảy, rối loạn máu, suy

thận

Câu 3: Mục đích của việc sử dụng của môi trường SPW(Saline Peptone Water)? A Pha

loãng mẫu.A Pha loãng mẫu.B Nuôi cấy C Khẳng định D Không có câu đúng

Câu 4: Vai trò của môi trường SPW(Saline Peptone Water)? A Phân lập Coliform B Góp

phần vào việc nhận biết, xác định đặc trưng C Hai câu trên đều đúng D Câu trên đều sai

30 C hoặc 35 C⁰C hoặc 37⁰C ⁰C hoặc 37⁰C D 37 C hoặc 40 C⁰C hoặc 37⁰C ⁰C hoặc 37⁰C

A Phân lập

Coliform

A 30 C hoặc ⁰C hoặc 37⁰C

37 C⁰C hoặc 37⁰C

Câu 6: Thành phần môi trường SPW(Saline Peptone Water) ? A Lactoza, pepton, nước

cất B NaCl, peptone, nước cất C Mật bò khô, lactoza, peptone, nước cất D Lactoza, NaCl,

nước cất

Câu 7: Mẫu thử của định lượng Coliform bằng phương pháp MPN ở dạng nào? A Mẫu

lỏng B Huyền phù C Cả A và B đều sai D Cả A và B đều đúng

Câu 8: Sử dụng 3 ống nghiệm cho mỗi độ pha loãng trong phương pháp MPN là sử

B NaCl, peptone, nước

cất

D Cả A và B đều đúng

B

9

Câu 9: Mục đích của môi trường LSB trong định lượng Coliform bằng phương pháp

Khẳng định

B Nuôi cấy Coliforms

Câu 10: Đâu không phải là một trong các bước tiến hành trong định lượng Coliform

mẫu D Chuẩn bị mẫu thử và huyền phù ban đầu

Câu 11: Ở bước khẳng định trong định lượng Coliform bằng phương pháp MNP,

Màu vàng D Màu đỏ

A Đếm khuẩn lạc

B Màu xanh lục

Câu 12: Ở bước tính toán kết quả của phương pháp MPN, không áp dụng cách tính nào? A Sử dụng công thức toán học B Sử dụng các chương trình máy tính cụ thể C Đối

chiếu với bảng MPN D Đếm số khuẩn lạc

Câu 13: Tiến hành định lượng Coliforms bằng phương pháp MPN theo nguyên tắc gì ?

A Lặp lại tối thiểu 3 lần ở 3 nồng độ bậc 10 liên tiếp B Lặp lại 3 lần ở 2 nồng độ bậc 10 liên tiếp C Lặp lại từ 2-4 lần ở 3 nồng độ bậc 10 liên tiếp D Lặp lại tối đa 5 lần ở 3 nồng độ bậc

10 liên tiếp

D Đếm số khuẩn lạc

A Lặp lại tối thiểu 3 lần ở 3 nồng độ bậc 10 liên

tiếp

Câu 14: Môi trường được sử dụng cho việc định lượng Coliform bằng phương pháp

BGBL, PCAC PCA, SPW,

LSB

Câu 15: Một trong những loại thuốc thử được sử dụng để tiến hành định lượng

xanh D Amoni sắt (III) xitrat B Kovacs

Câu 16: Hệ thống ống nghiệm sử dụng cho định lượng Coliform bằng phương pháp

A&B đều saiC A&B đều

đúng

Câu 17: Đối với khuẩn lạc được cấy trên môi trường Tryptone, các dấu hiệu nhận biết

là gì? A Dương tính với indole, xuất hiện màu đỏ trong thuốc thử Kovacs, tạo thành một lớp

màng trên pha nước của môi trường B Nổi bọt khí, khuẩn lạc ánh kim loại màu xanh lá cây

C Môi trường đục và có màu đỏ tía D Nổi bọt khí, khuẩn lạc xuất hiện màu đen hoặc sẫm màu

Câu 18: Sử dụng phương pháp MPN để định lượng Coliform đối với: A Thực phẩm,

mẫu môi trường trong khu vực sản xuất và xử lý B Phụ gia thực phẩm C Thực phẩm, nước

uống, nước sinh hoạt, nước thải

A Dương tính với indole, xuất hiện màu đỏ trong thuốc thử Kovacs, tạo thành một lớp màng trên pha nước của môi trường

C Thực phẩm, nước uống, nước sinh hoạt, nước

thải

C

6

Câu 20: Các nhóm giống của Coliform là: A Escherichia (E coli), Citrobacter, Klebsiella,

Enterobacter B Lactobacillus, Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter C Lactobacilluas,

Enterococcus, Campylobacter Enterobacter

90ml/225ml C 70ml/225ml D 100ml/225ml

Câu 22: Đâu là quy trình định lượng coliform bằng phương pháp MPN? A Chuẩn bị và

pha loãng mẫu → Cấy và ủ → Thử khẳng định →Kết quả B Chuẩn bị và pha loãng mẫu → Cấy và ủ → Thử sinh hóa → Kết quả C Chuẩn bị và pha loãng mẫu → Cấy và ủ → Làm lạnh → Kết quả

A Escherichia (E coli), Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter

B 90ml/225ml

A Chuẩn bị và pha loãng mẫu → Cấy và ủ → Thử khẳng định →Kết

quả

Câu 24: Pha chế mẫu được phép sai số là bao nhiêu ? A ±6% B ±5% C

Câu 25: Coliforms được áp dụng đầu tiên ở nước nào và từ năm bao nhiêu? A Nước Mỹ từ

năm 1920 B Nước Pháp từ năm 1920 C Nước Mỹ từ năm 1930 D Nước Pháp từ năm 1930

Câu 27: Các bước kiểm tra MPN gồm : A Kiểm tra giả định B Kiểm tra xác nhận

C Hoàn thành thử nghiệm D Tất cả đáp án trên đều đúng

Câu 28: Định lượng Coliforms bằng phương pháp MPN khi ống đã được sinh khí (mờ

lọc B Khẳng định C Phân lập D Tiền tăng sinh

D Tất cả đáp án trên đều đúng

B Khẳng định

Câu 26: Phương pháp MPN còn được gọi là phương pháp gì?

A Phương pháp chuẩn độ B Phương pháp pha loãng tới hạn

C A&B đều đúngC A&B đều D A&B đều sai

đúng

Câu 29: Dấu hiệu nhận biết ống nghiệm dương tính trên môi trường khẳng định

BGBL là gì? A Có sinh khí B Có kết tủa C Có mùi hôi D Có sinh khí và làm mờ đục ống

nghiệm

Lactose C NaCl D Sodium lauryl sulphateB

Lactose

D Có sinh khí và làm mờ đục ống

nghiệm

T H A N K Y O U