nghiên cứu xây dựng qui trình nhân nhanh in vitro giống lan hồ điệp nhập nội (phalaenopsis)

Viện Đại Học Mở Hà Nội Khoa Công nghệ Sinh Học Hoàng Thu Thu ỷ Lớp: KS.CNSH 0601 1 PHẦN 1. MỞ ĐẦU Cùng với sự phát triển trong đời sống vật chất, đời sống tinh thần và nhu cầu thưởng thức cái đẹp của con người cũng không ngừng tăng lên. Trong cuộc sống, hoa là một trong những vẻ đẹp đến từ thiên nhiên mà con người dễ dàng thưởng thức nhất, luôn là tâm điểm của mọi sự chú ý, nhất là vào những dịp lễ Tết và các hoạt động văn hoá. Ngày nay, việc trồng hoa không chỉ mang ý nghĩa xã hội mà còn mang ý nghĩa lớn về mặt kinh tế, nhất là xuất khẩu. Vì vậy ngành sản xuất hoa đã và đang đóng vai trò quan trọng trong các ngành sản xuất nông nghiệp nói riêng và trong nền kinh tế nói chung. Hoa mang lại lợi nhuận lớn cho những người tham gia sản xuất và kinh doanh. Hoa góp phần mang lại vẻ đẹp cho cảnh quan, hệ sinh thái và môi trường sống của con người. Trong vườn hoa muôn màu muôn vẻ của thế giới tự nhiên, có lẽ hiếm có loài hoa nào lại phong phú, tập hợp trong mình nhiều họ, nhiều chủng loại, màu sắc, dáng nét và giàu sức quyến rũ, mê hoặc con người một cách kỳ lạ cho bằng hoa Lan. Hoa Lan không chỉ mang vẻ đẹp đài các, sang trọng nhưng ấm áp, gần gũi mà nó còn chất chứa trong mình những giá trị tiềm ẩn, luôn mới lạ, luôn hấp dẫn và mời gọi lòng say mê, khám phá của những ai trót nặng lòng với loài hoa vương giả này. Trong số những loài hoa Lan được nuôi trồng chủ yếu ở nước ta, bên cạnh những loại hoa tương đối dễ chăm sóc như Mokara, Dendro, Lan vũ nữ… thì vẫn có những loài hoa Lan chỉ thích hợp với một số khu vực địa lý nhất định mà cụ thể nhất là địa Lan, loài hoa chỉ có thể nuôi trồng trong điều kiện lí tưởng của Đà Lạt… Không quá kén chọn và hạn chế nơi trồng như địa Lan song Lan Hồ điệp cũng là một trong những giống Lan quý mà qui trình chăm sóc, thuần dưỡng cũng đòi hỏi lắm công phu, tâm huyết của người trồng. Lan Hồ Điệp là một loài Lan rất khó nhân giống, thường cho hệ số nhân thấp trong điều kiện vườn ươm. Để có được số lượng lớn cây giống, Viện Đại Học Mở Hà Nội Khoa Công nghệ Sinh Học Hoàng Thu Thu ỷ Lớp: KS.CNSH 0601 2 đồng đều, ổn định về mặt di truyền đáp ứng nhu cầu thị trường thật nan giải. Trong những năm gần đây, công nghệ lai giống kết hợp gieo hạt trong ống nghiệm cho tỷ lệ nẩy mầm cao, chất lượng cây con tương đối ổn định. Tuy nhiên nhân giống bằng phương pháp gieo hạt mang tính ngẫu nhiên không đảm bảo thu được cây có tính trạng như mong muốn. Do đó, việc nâng cao chất lượng giống và nhân giống chủ động bằng cách áp dụng công nghệ sinh học mới trong sản xuất đang là vấn đề quan trọng cho phát triển ngành sản xuất hoa Lan ở nước ta. Từ thực tế trên, chúng tôi đã tiến hành thực hiện đề tài : “ Nghiên cứu xây dựng qui trình nhân nhanh in vitro giống Lan Hồ Điệp nhập nội (Phalaenopsis)” Với mục tiêu cụ thể là: Nghiên cứu quy trình nhân giống bằng phương pháp in vitro nhằm cung cấp nhanh giống đã được tuyển chọn cho sản xuất, đồng thời chủ động khâu giống cây vốn lâu nay phụ thuộc nguồn ngoại nhập. - Xây dựng qui trình kỹ thuật nhân giống Lan Hồ Điệp bằng in vitro. - Duy trì và nhân nhanh giống Lan Hồ Điệp để cung cấp giống tốt, khoẻ, sạch bệnh, cho sản xuất. Viện Đại Học Mở Hà Nội Khoa Công nghệ Sinh Học Hoàng Thu Thu ỷ Lớp: KS.CNSH 0601 3 PHẦN 2. TỔNG QUAN 2.1. Giá trị kinh tế của hoa Lan 2.1.1. Trên thế giới Hoa Lan là một loài hoa rất đa dạng về kích thước, hình dáng, màu sắc, cấu trúc, số lượng và hương thơm. Trong số các loại hoa thương phẩm lớn hiện nay, hoa Lan là một loài có triển vọng kinh tế hết sức cao. Ngay từ năm 1957, James Shoemaker đã cho rằng “Nuôi trồng Lan sẽ không chỉ là một sở thích mà còn hướng tới trở thành một ngành công nghiệp”. Và quả vậy, ngành trồng Lan đang ngày càng phát triển mạnh mẽ. Từ thời xưa cho đến nay, hoa Lan luôn được con người ngưỡng mộ và được xem như là nữ hoàng của các loài hoa, loài hoa vương giả hay vua của những loài cỏ cây có hoa. Do có vẻ đẹp rực rỡ, quý phái, ngào ngạt hương thơm, thanh nhã cao sang và trước đây hoa Lan được xem là loài quý hiếm, nên thời gian trước thú chơi hoa Lan thường chỉ dành cho giới vua chúa, thượng lưu. Ngày nay, thú chơi hoa Lan đã được nâng lên thành nghệ thuật, nghề trồng Lan đã được phát triển thành ngành công nghiệp có lợi nhuận cao ở một số nước như Thái Lan, Đài Loan,… Hơn nữa, nhờ quá trình sưu tầm các loài hoa Lan đẹp, lạ mắt và các kỹ thuật lai tạo ra các hoa Lan mới tuyệt đẹp, nên số loài hoa Lan hiện nay trên thế giới có thể đã lên đến 100000 loài. Vì thế trong thời gian gần đây, trên thế giới cũng như ở Việt Nam ta, thú chơi hoa Lan đã trở thành thông dụng và có điều kiện hơn, không phân biệt địa vị, tuổi tác, hoàn cảnh kinh tế nữa, số người chơi và yêu chuộng hoa Lan ngày càng tăng nhanh, hay nói cách khác nhu cầu sử dụng các chủng loại hoa Lan đã và đang tăng. Hoa Lan hiện đang được trồng và kinh doanh với 03 kiểu dáng phổ biến trên thị trường: hoa cắt cành, cây đã thành thục trong chậu treo hay bám trên giá thể và cây Lan con từ 10-15cm (http://dost.danang.gov.vn/default.php?Action=news_detail&idx=153) Viện Đại Học Mở Hà Nội Khoa Công nghệ Sinh Học Hoàng Thu Thu ỷ Lớp: KS.CNSH 0601 4 Khu vực Đông Nam Á ngày nay hoa kiểng cũng phát triển rất mạnh; Singapore năm 1991 xuất khẩu đạt 13 triệu USD, nay đã đạt trên 20 triệu USD; Thái Lan năm 1991 đạt 80 triệu USD thì nay đã đưa doanh số xuất khẩu lên 200 triệu USD/năm. Theo đánh giá của các nhà nghiên cứu về Lan, Thái Lan có hơn 1.000 giống hoa Lan, thậm chí Lan đã trở thành biểu tượng của vương quốc. Tại Malaysia, chính phủ đã quy hoạch 300 ha ở bang Zohor và giao cho Hiệp hội hoa Lan tổ chức ở đây thành khu Trung tâm sản xuất Hoa kiểng xuất khẩu. Ngành trồng hoa của Đài Loan cũng đang tăng nhanh tốc độ 15 – 20%. Hiện nay, Đài Loan đã có diện tích trồng hoa là 10.172ha, đạt doanh thu hàng năm 293 triệu USD (http://www.tuvannongnghiep.com.vn/tintuc/default.aspx?cat_id=772& news_id=1847) 2.1.2. Ở Việt Nam Theo các chuyên gia về hoa của trường Đại học Nông nghiệp 1, với khoảng 755 loài hoa Lan hiện có, khí hậu thích hợp và nhiều nguyên liệu làm giá thể tốt cho cây sinh trưởng, Việt Nam có thể trở thành một nước sản xuất hoa Lan lớn trong khu vực. Tuy nhiên hàng năm Việt Nam ta vẫn phải nhập một lượng lớn cây giống và cả lan cắt cành từ Thái Lan về để phục vụ nhu cầu trong nước. Hiện nay, mới chỉ có một số công ty lớn, trong đó có những công ty nước ngoài trồng hoa Lan tại Đà Lạt, TP Hồ Chí Minh, Đồng Nai với diện tích khoảng 50-60 ha/một doanh nghiệp. Một vài địa phương khác hoa Lan chỉ mới trồng ở quy mô gia đình, trên diện tích từ vài m 2 đến vài nghìn m 2 , cá biệt mới có vài hộ trồng trên 1-2 ha. Viện Di truyền Nông nghiệp Việt Nam bước đầu cũng đã có những thành công trong việc nuôi cấy mô tạo giống phong lan theo công nghệ được chuyển giao từ Thái Lan. Một số địa phương Viện Đại Học Mở Hà Nội Khoa Công nghệ Sinh Học Hoàng Thu Thu ỷ Lớp: KS.CNSH 0601 5 khác như Sa Pa, Phú Yên bước đầu đã khảo sát và nghiên cứu phương pháp nhân giống, hoàn thiện quy trình sản xuất hoa Lan. Theo tính toán của Bộ Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn, nếu trồng hoa Lan cắt cành là loài Dendrobium và Mokara, mỗi ha đất trồng có thể cho thu nhập 500 triệu đến 1 tỷ đồng/năm, cao hơn nhiều lần so với trồng lúa và một số hoa màu khác. Hiện nay, mỗi năm Việt Nam vẫn phải chi hàng tỷ đồng để nhập hoa Lan từ các nước láng giềng cho nhu cầu nội địa. Chỉ tính riêng tại thành phố Hồ Chí Minh, năm 2003 doanh số kinh doanh hoa Lan và cây cảnh mới đạt 200 - 300 tỷ đồng, nhưng chỉ trong quý I năm 2006, doanh số này đã đạt 400 tỷ đồng; các cơ sở kinh doanh hoa Lan, cây cảnh tăng nhanh từ 264 cơ sở năm 2003 lên trên 1.000 cơ sở. Riêng hoa Lan mỗi năm ở thành phố này lượng tiêu thụ cũng đã lên đến hàng triệu cây (http://www.longdinh.com/default.asp?act=chitiet&ID=4705&catID=6) 2.1.3. Tầm quan trọng đối với việc duy trì và bảo vệ nguồn giống Khí hậu ở Việt Nam nóng ẩm rất phù hợp với sự sinh trưởng và phát triển của các loài lan. Theo giáo sư Phạm Hoàng Hộ, hoa Lan Việt Nam rất đa dạng và phong phú với số lượng lên tới 755 loài (Phạm Hoàng Hộ, 2000). Theo nguồn tài liệu ngiên cứu mới nhất về hoa Lan ở Việt Nam năm 2003, đã biết được 897 loài thuộc 152 chi của họ Lan (Trần Duy Quý, 2005). Hoa Lan là một loại cây cảnh rất được ưa chuộng trên thị trường. Tuy nhiên, do các mục đích kinh tế, con người đã không quan tâm tới sự bảo tồn thiên nhiên nói chung cũng như bảo vệ các nguồn giống quý nói riêng. Lan được khai thác từ rừng và vận chuyển tới các thành phố lớn trong nước và nước ngoài, đặc biết những giống đặc hữu và quý hiếm. Nguồn tài nguyên này đang ngày càng cạn kiệt (http://www.monre.gov.vn) mà không có cách gì bù đắp. Hiện nay, ở nước ta nuôi cấy mô tế bào đã được ứng dụng rộng rãi trong việc nhân nhanh nhiều giống cây cảnh, cây lâm nghiệp, cây lương thực Viện Đại Học Mở Hà Nội Khoa Công nghệ Sinh Học Hoàng Thu Thu ỷ Lớp: KS.CNSH 0601 6 thực phẩm… và đã thu được những thành công nhất định. Không chỉ vậy, nuôi cấy mô tế bào cũng được áp dụng trong việc bảo tồn nguồn gen của các giống cây quý. Tuy nhiên, kết quả nghiên cứu và ứng dụng so với yêu cầu thực tiễn còn một khoảng cách khá lớn và đòi hỏi sự nỗ lực và quyết tâm của các nhà khoa học cũng như các chuyên gia kinh tế trong lĩnh vực này. 2.2. Giới thiệu về giống lan Hồ Điệp Phalanopsis 2.2.1. Giới thiệu chung về họ Lan Về phân loại học, họ Lan Orchidaceae là họ lớn nhất trong giới thực vật một lá mầm, với khoảng 800 chi và 25000-35000 loài (Arrditti, 1979; Garay, 1960). Đặc tính khác thường về khả năng thụ phấn và lai xa tự nhiên của họ thực vật này đã khiến chúng trở nên phong phú về loài và phân bố rộng rãi. Bên cạnh đó, người ta tiến hành lai tạo và đạt được nhiều thành công càng làm tăng nhanh số giống mới. Hiện nay có hơn 9000 giống Lan lai mới đã được đăng ký bản quyền tại Royal Horticulture Society, Anh (Phạm Hoàng Hộ, 2000). Cây Lan thường sống ở những nơi hoang dã, tại các địa hình rất khác nhau với các điều kiện môi trường đa dạng. Chính cấu trúc đặc biệt của Lan đã tạo cho chúng khả năng thích nghi phong phú trong các môi trường hoàn toàn trái ngược. 2.2.2. Giới thiệu về giống Lan Hồ Điệp Phalanopsis 2.2.2.1. Tên và nguồn gốc Lan Hồ Điệp có tên khoa học là Phalaenopsis là loài có hoa lớn, bền, đẹp. Có tên từ chữ grec Phalaina nghĩa là bướm và opsis có nghĩa là sự giống nhau. Lan Hồ Điệp là loài Lan có hoa giống bươm bướm phất phơ rất đẹp. Viện Đại Học Mở Hà Nội Khoa Công nghệ Sinh Học Hoàng Thu Thu ỷ Lớp: KS.CNSH 0601 7 Lan Hồ Điệp được khám phá năm 1750, đầu tiên được ông Rumphius đặt tên là Angraecum album. Năm 1753 Linne đổi tên thành Epidendrum. Năm 1825 nhà thực vật Hà Lan định danh lại là Phalaenopsis. Chi Phalaenopsis Họ Orchidendrodeae Bộ Asparagales Lớp Liliopsida Ngành Magnoliophyta Giới Thực vật Hình 2.1. Phalaenopsis amabilis Lan Hồ Điệp phân bố chủ yếu ở: Malaysia, Indonexia, Philipin, phía đông Ấn Độ và Úc. Ở Việt nam cũng có một số loài vì có hoa nhỏ nên được gọi là tiểu Hồ Điệp (phalaenopsis manni, gibbosa, lobbi, fuscata, cornucervi). Lan Hồ Điệp có thể mọc ở khí hậu nhiệt đới và đồi núi cao 2000m nên vừa chịu được khí nóng ẩm vừa chịu được khí hậu mát. Lan Hồ Điệp có chừng 44 loại nguyên giống, cây có thể mọc ở xứ nhiệt đới và đồi núi cao 2000 mét nên vừa chịu khí hậu nóng ẩm lại vừa chịu khí hậu mát, nhiệt độ trung bình từ 20 0 C đến 30 0 C. Việt Nam có chừng 7-8 giống. Vào năm 1750 G.E. Rumphius đã tìm ra cây Lan Hồ Điệp nhưng lầm tưởng là một loại Angraecum và sau này Carl Blume mới tìm ra cây Phalaenopsis amabilis vào năm 1825. Lan Hồ điệp là một loại Lan thân đơn, ngắn, lá to và cứng, rễ dài. Những cây nguyên giống thường nở hoa vào mùa đông xuân, các cây lai giống hoa nở quanh năm. Nếu nuôi đúng cách Lan Hồ điệp có thể sống rất lâu. Viện Đại Học Mở Hà Nội Khoa Công nghệ Sinh Học Hoàng Thu Thu ỷ Lớp: KS.CNSH 0601 8 2.2.2.2. Đặc điểm Lan Hồ Điệp là loài Lan đơn thân, mập, ngắn lá to, dày mọc sát vào nhau. Đây là giống gồm các loài có hoa lớn, đẹp. Phát hoa mọc từ nách lá, dài, đơn hay phân nhánh, cánh hoa phẳng, trải rộng, hoa nở từng cái, 3 đài to tròn, 2 cánh xòa rộng kín. Môi cong, dẹp có 2 râu dài. Trụ có hình bán nguyệt với 2 phần khối u nên chứa đầy phấn hoa. Ngày nay, Lan Hồ Điệp được lai tạo với nhiều màu sắc và kích thướt đa dạng: trắng, tím, đỏ, vàng, hồng. Hình 2.2. Một số loài Lan Hồ Điệp Cách trồng - Nhiệt độ: Lan Hồ Điệp là một loại Lan không chịu được quá nóng hay quá lạnh, lại không cần nhiều ánh sáng cho nên thích hợp trồng trong nhà hay trong nhà kính. Nhiệt độ thích hợp nhất là từ 22 – 27 0 C. Khi cây đang ra nụ, nhiệt độ hay độ ẩm thay đổi bất thường sẽ làm cho nụ hoa héo rụng. - Ánh sáng: Trong nhà kính phải dùng lưới che bớt ánh sáng vì hoa Lan chỉ cần từ 1000 cho đến 1500 ánh nến. Nuôi trong nhà, cần để lan ở gần cửa Viện Đại Học Mở Hà Nội Khoa Công nghệ Sinh Học Hoàng Thu Thu ỷ Lớp: KS.CNSH 0601 9 sổ có ánh nắng hoặc không cũng được. Có thể dùng 4 chiếc đèn ống 40W và 2 bóng đèn thường, cách ngọn cây Lan khoảng 6-10" từ 12-16 giờ mỗi ngày: 12 giờ cho cây lớn và 16 giờ cho cây nhỏ. - Tưới nước: Không bao giờ để Lan quá khô, mùa hè nên tưới thật đẫm 2 lần một tuần. Mùa đông 10 ngày tưới một lần. Nên tưới vào buổi sáng để lá cây sẽ khô trước khi đêm xuống. Nếu để nước đọng vào ngọn, lá non dễ bị thối và cây sẽ chết. - Độ ẩm: Hoa Lan cần độ ẩm từ 50-80%. Để chậu Lan trên khay nước có xếp đá sỏi cho có đủ độ ẩm cần thiết. - Phân bón: Khi cây đang mọc bón phân 30-10-10 mỗi tuần một lần, chỉ nên bón 1/4 hay ½ thìa cà phê gạt cho 1 gallon nước. Khi cây sắp ra nụ bón phân 10-30-20 hoặc dùng một thứ 15-15-15. Mùa đông bớt bón phân 2 tuần 1 lần, khi cây không mọc nên ngưng bón. - Thay chậu: Thời gian thay chậu tốt nhất là vào muà xuân hay khi hoa vừa tàn, tối thiểu 3 năm một lần. Nếu vỏ cây bị mục nát sẽ làm thối rễ. Vỏ cây nuôi Lan Hồ điệp cần phải thoáng và dóc nước, thông thường dùng vỏ cây cỡ ½" trộn với 1/10 perlite hoặc vỏ cây cở 1/8-1/4" và perlite cho những cây lan còn nhỏ. Khi trồng lại, cắt bỏ các rễ thối, giữ cho cuống rễ gần ngang miệng chậu rồi bỏ vỏ cây vào. Dùng ngón tay ấn quanh miệng chậu cho chặt. Tưới bằng 1 thìa súp B1 pha với 1 gallon nước. Khi hoa tàn, cắt bỏ dò hoa chừa lại 3 đốt cuối, cây Lan sẽ tiếp tục ra hoa. Nếu cây không được khỏe, lá mềm rũ xuống nên cắt bỏ hẳn dò hoa để cho cây được mạnh. Đôi khi Lan cũng mọc cây con (keiki) ở gốc hoặc trên các đốt trên dò hoa, trường hợp này đợi cây non ra rễ sẽ tách ra trồng lại. Có những loại thuốc có chất hormone để tạo ra những cây con ở các đốt hoa. Thuốc này có bán tại các nhà trồng Lan. Những cây lai giống từ các cây kể trên phần đông đều có hương thơm di truyền từ cây cha hoặc cây mẹ. Viện Đại Học Mở Hà Nội Khoa Công nghệ Sinh Học Hoàng Thu Thu ỷ Lớp: KS.CNSH 0601 10 2.3. Các phương pháp nhân giống hoa Lan 2.3.1. Phương pháp nhân giống hữu tính Nhân giống hữu tính là biện pháp thụ phấn để tạo quả có hạt. Sử dụng hạt đó kích thích nảy mầm để hình thành cây con. Song thực tế do cấu trúc của hạt Lan chỉ là khối tế bào chưa phân hoá vì vậy mà khả năng nảy mầm của hạt trong điều kiện tự nhiên là cực thấp. Chỉ trong những điều kiện khá tối ưu như: ẩm ướt, có nấm cộng sinh thì cũng chỉ có tỷ lệ khoảng một phần triệu hạt Lan có thể nảy mầm được. Song trong điều kiện hiện nay nhờ có kỹ thuật nuôi cấy in vitro mà người ta có thể điều khiển sự nảy mầm của hạt Lan trong điều kiện nhân tạo khá dễ dàng. Thụ phấn có 2 cách: + Nhờ vào côn trùng hoặc bằng chính bàn tay con người + Sự tự thụ phấn: hiện tượng này hầu như không xảy ra trên đối tượng hoa Lan do cấu trúc của hoa và phần sinh dục đực và cái chín lệch pha nhau. Trong tự nhiên sự thụ phấn cho được nhờ vào côn trùng hoặc bằng chính bàn tay con người thực hiện. Chính vì vậy mà ngày nay đã xuất hiện một số lượng rất lớn các giống hoa lai và chính những giống này được phát triển rất mạnh mẽ trong đời sống. Các nghiên cứu về phương pháp lai giống: năm 1953 Dominy đã thành công trong việc lai giống Lan ở nước Anh. Cây lai đầu tiên ra hoa là Calamthe Dominu (tổ hợp lai là Calamthe masuca * Calamthe furcata). Việc lấy phấn và thụ phấn được thực hiện tốt nhất từ ngay sau khi hoa nở 3-4 ngày vào lúc buổi sáng sớm. Qua kết quả chọn lọc và lai tạo các nhà chọn giống và trồng Lan đã bổ sung thêm 75000 loài Lan mới (Saprorhx- teahultum, 1953; Camphell, 1964). 2.3.2. Phương pháp nhân giống vô tính + Phương pháp nhân giống vô tính bằng cách tách chiết (phương pháp truyền thống) [...]... 3 : VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Vật liệu Đối tượng nghiên cứu là giống Lan Hồ Điệp hoa trắng tuyền (Phalaenopsis amabilis) Nguyên liệu được sử dụng trong nghiên cứu giống Lan Hồ Điệp: ngồng hoa và nụ hoa non 3.2 Nội dung và phương pháp nghiên cứu Để xây dựng qui trình nhân nhanh giống Lan Hồ Điệp, chúng tôi đã tiến hành các thí nghiệm in vitro Qui trình nhân giống gồm 5 giai đoạn: - Giai... đoạn 2: Tạo thể nhân nhanh in vitro Giai đoạn 3: Nhân nhanh in vitro Giai đoạn 4: Tái sinh cây in vitro hoàn chỉnh Giai đoạn 5: Chuyển cây con in vitro ra vườn ươm 1 2 3 5 Hoàng Thu Thuỷ 4 22 Lớp: KS.CNSH 0601 Khoa Công nghệ Sinh Học Viện Đại Học Mở Hà Nội Các thí nghiệm này được thực hiện tại phòng thí nghiệm trọng điểm, Viện Di Truyền Nông Nghiệp Nội dung nghiên cứu bao gồm: - Nghiên cứu hiệu quả khử... Giai đoạn tạo thể nhân nhanh in vitro 4.2.1 Ảnh hưởng của nồng độ BAP đến khả năng tạo chồi từ mắt ngủ của giống Lan Hồ Điệp Mẫu sau khi được khử trùng được cấy vào môi trường tạo chồi BAP là một cytokinin có tác dụng kích thích sự phân bào và tái sinh chồi mạnh từ mô nuôi cấy (Đỗ Năng Vịnh, 2005) Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ BAP đến khả năng tạo chồi từ mắt ngủ của Lan Hồ Điệp được thể hiện... Khoa Công nghệ Sinh Học Viện Đại Học Mở Hà Nội Lan được tổ chức trên thế giới đặc biệt là các nước thuộc khu vực Châu Á Những nghiên cứu chi tiết cho từng loại, từng giống ở từng khu vực đã và đang được các nhà khoa học nghiên cứu đưa ra những quy trình những cải tiến ngày một hoàn chỉnh hơn + Các phương pháp nhân giống in vitro hoa Lan a Nuôi cấy in vitro hoa Lan bằng cách sử dụng chồi đỉnh Kết quả... 24 Lớp: KS.CNSH 0601 Khoa Công nghệ Sinh Học Viện Đại Học Mở Hà Nội Thí nghiệm 6: Ảnh hưởng của BAP đến quá trình nhân nhanh chồi của Lan Hồ Điệp B1: Vacin + 0 mg/l BAP + 30 g/l đường + 6 g/l Agar B2: Vacin + 0,5 mg/l BAP + 30 g/l đường + 6 g/l Agar B3: Vacin + 1,0 mg/l BAP + 30 g/l đường + 6 g/l Agar B4: Vacin + 1,5 mg/l BAP + 30 g/l đường + 6 g/l Agar B5: Vacin + 2,0 mg/l BAP + 30 g/l đường + 6 g/l... và kéo dài tế bào BAP thuộc nhóm Cytokinin có tác dụng kích thích phát sinh chồi nách Để tìm hiểu sự tác động của 2 chất này lên khả năng phát sinh hình thái của chồi Lan, chúng tôi tiến hành thí nghiệm đến khả năng tạo chồi của Lan Hồ Điệp Kết quả thí nghiệm được trình bày ở bảng 5: Hoàng Thu Thuỷ 35 Lớp: KS.CNSH 0601 Khoa Công nghệ Sinh Học Viện Đại Học Mở Hà Nội Bảng 5 Ảnh hưởng của nồng độ NAA và... hiện ở bảng 2 Hoàng Thu Thuỷ 30 Lớp: KS.CNSH 0601 Khoa Công nghệ Sinh Học Viện Đại Học Mở Hà Nội Bảng 2 Ảnh hưởng của nồng độ BAP đến khả năng tạo chồi từ mắt ngủ của giống Lan Hồ Điệp Công thức Nồng độ BAP (mg/l) Sau 2 tuần nuôi cấy Sau 4 tuần nuôi cấy Số lượng Tỷ lệ Số chồi Tỷ lệ Số chồi mẫu phát sinh hình phát sinh hình chồi (%) thành chồi (%) thành B1 0 100 84 93 92 123 B2 0,5 100 85 109 94 145 B3... KS.CNSH 0601 Khoa Công nghệ Sinh Học Viện Đại Học Mở Hà Nội Từ kết quả trên, môi trường được chọn cho sự phát sinh của chồi sẽ là môi trường có nồng độ BAP bằng 1,0 mg/l - cho khả năng tạo chồi từ mắt ngủ cao nhất cho số mẫu phát sinh chồi sau 2 tuần nuôi cấy đạt 92% và số chồi hình thành là 276 chồi, sau 4 tuần nuôi cấy số mẫu phát sinh chồi đạt 100% và số chồi hình thành là 302 chồi 4.2.2 Ảnh hưởng của... nghệ Sinh Học Viện Đại Học Mở Hà Nội - Đánh giá kết quả tạo và nhân chồi: ∑Số chồi thu được Hệ số tạo chồi (lần) = -∑Số mẫu cấy vào ∑Số chồi thu được Hệ số nhân chồi (lần) = -∑Số chồi cấy vào - Đánh giá kết quả phát sinh mô sẹo (callus): ∑Số mẫu tạo callus Tỷ lệ tạo callus (%) = - x 100 ∑Số mẫu cấy vào - Đánh giá kết quả nhân callus: ∑ Số callus tạo thành Hệ số nhân. .. sống tái sinh, sự tạo chồi, nhân chồi, tạo callus… Các số liệu nghiên cứu được tính toán theo phương pháp thống kê toán học Việc xử lý số liệu được thực hiện trên máy vi tính theo chương trình IRRISTAT Hoàng Thu Thuỷ 28 Lớp: KS.CNSH 0601 Khoa Công nghệ Sinh Học Viện Đại Học Mở Hà Nội PHẦN 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Ảnh hưởng của chất khử trùng; nồng độ và thời gian khử trùng đối với ngồng Lan Hồ Điệp Hình . tài : “ Nghiên cứu xây dựng qui trình nhân nhanh in vitro giống Lan Hồ Điệp nhập nội (Phalaenopsis) Với mục tiêu cụ thể là: Nghiên cứu quy trình nhân giống bằng phương pháp in vitro nhằm. cấp nhanh giống đã được tuyển chọn cho sản xuất, đồng thời chủ động khâu giống cây vốn lâu nay phụ thuộc nguồn ngoại nhập. - Xây dựng qui trình kỹ thuật nhân giống Lan Hồ Điệp bằng in vitro. . những quy trình những cải tiến ngày một hoàn chỉnh hơn. + Các phương pháp nhân giống in vitro hoa Lan a. Nuôi cấy in vitro hoa Lan bằng cách sử dụng chồi đỉnh Kết quả nuôi cấy đỉnh sinh trưởng