IAA lên quá trình phát sinh mô sẹo ở nụ hoa (tính theo tỷ lệ %)
2,4D là một chất điều hoà sinh trưởng thuộc nhóm auxin có tác dụng phản biệt hóa. Hàm lượng Auxin cao sẽ kích thích mô sẹo rất hiệu quả, nồng
độ thấp lại kích thích phân hoá tạo rễ (Đỗ Năng Vịnh, 2005; Nguyễn Quang Thạch, 2006). Mẫu sau khi bật chồi được cắt thành từng lát mỏng và cấy vào môi trường Vacin có bổ xung 2,4D nồng độ từ (0,1-1) mg/l + 0,1 mg/l IAA + 30 g/l đường + 6,5g Agar. Thí nghiệm được đặt trong tủ tối theo dõi, kết quả
theo dõi được thể hiện ở bảng 3.
Bảng 3. Ảnh hưởng 2,4D ở các nồng độ khác nhau kết hợp với 0,1mg/l IAA lên quá trình phát sinh mô sẹo ở nụ hoa
Số mẫu phát sinh mô sẹo của nụ hoa CT
Nồng độ
2,4D (mg/l)
Số mẫu
cấy Sau 2 tuần nuôi cấy Sau 4 tuần nuôi cấy
TD1 0 100 0 0 TD2 0,1 100 19 19 TD3 0,2 100 21 23 TD4 0,3 100 37 42 TD5 0,4 100 43 59 TD6 0,5 100 82 86 TD7 1,0 100 65 74
Kết quả bảng 3 cho thấy: Các CT có bổ sung 2,4D vào môi trường nuôi cấy đều cho kết quả phát sinh mô sẹo tốt hơn so với CT TD1. Khi nồng độ
2,4D tăng dần từ 0,1-0,5 mg/l thì số mẫu phát sinh mô sẹo cũng tăng theo từ
19% lên 86% sau 4 tuần nuôi cấy.
Tiếp tục tăng nồng độ 2,4D lên 1,0 mg/l thì số mẫu phát sinh chồi lại giảm đi, chỉ còn 65% sau 2 tuần nuôi cấy và 74% sau 4 tuần nuôi cấy.
Qua nhiều lần thí nghiệm cho thấy: Ở nồng độ 2,4D bằng 1,0 cho kết quả mẫu phát sinh mô sẹo là tối ưu nhất đạt 82% sau 2 tuần nuôi cấy và 86% sau 4 tuần nuôi cấy. Từ đó chúng tôi rút ra kết luận môi trường thích hợp cho việc phát sinh mô sẹo của nụ hoa là: MS + 0,5 mg/l 2,4D + 0,1 mg/l IAA + 30 g/l đường + 6 g/l Agar
Hình 4.4. Mô sẹo từ lát cắt nụ hoa sau 4 tuần nuôi cấy