Phân lập, tuyển chọn và khảo sát ảnh hưởng của điều kiện lý hóa lên khả năng kháng neoscytalidium dimidiatum của dịch nuôi cấy xạ khuẩn được phân lập từ đất

BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH MÃ THỊ ANH THƯ PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN VÀ KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA ĐIỀU KIỆN LÝ HĨA LÊN KHẢ NĂNG KHÁNG Neoscytalidium dimidiatum CỦA DỊCH NI CẤY XẠ KHUẨN ĐƯỢC PHÂN LẬP TỪ ĐẤT Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Mã ngành: 8420201 LUẬN VĂN THẠC SĨ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2022 Cơng trình hồn thành Trường Đại học Cơng nghiệp TP Hồ Chí Minh Người hướng dẫn khoa học: TS Nguyễn Thị Diệu Hạnh Luận văn thạc sĩ bảo vệ Hội đồng chấm bảo vệ Luận văn thạc sĩ Trường Đại học Cơng nghiệp thành phố Hồ Chí Minh ngày 03 tháng 01 năm 2023 Thành phần Hội đồng đánh giá luận văn thạc sĩ gồm: TS Nguyễn Thị Kim Anh - Chủ tịch Hội đồng TS Nguyễn Thành Luân - Phản biện TS Bùi Hồng Quân - Phản biện TS Hoàng Quốc Khánh - Ủy viên TS Nguyễn Thị Lan Hương - Thư ký (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị Hội đồng chấm bảo vệ luận văn thạc sĩ) CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG TRƯỞNG VIỆN CNSH&TP BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CƠNG NGHIỆP THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc NHIỆM VỤ LUẬN VĂN THẠC SĨ Họ tên học viên: Mã Thị Anh Thư MSHV: 19630441 Ngày, tháng, năm sinh: 05/04/1989 Nơi sinh: Bà Rịa Vũng Tàu Ngành: Công nghệ Sinh học Mã ngành: 8420201 I TÊN ĐỀ TÀI: Phân lập, tuyển chọn khảo sát ảnh hưởng điều kiện lý hóa lên khả kháng Neoscytalidium dimidiatum dịch nuôi cấy xạ khuẩn phân lập từ đất NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG: Nhiệm vụ: Phân lập, tuyển chọn khảo sát ảnh hưởng điều kiện lý hóa lên khả kháng Neoscytalidium dimidiatum dịch nuôi cấy xạ khuẩn phân lập từ đất Nội dung nghiên cứu luận văn tốt nghiệp: - Phân lập, tuyển chọn định danh chủng xạ khuẩn có khả đối kháng mạnh với chủng nấm mốc Neoscytalidium dimidiatum gây bệnh đốm nâu long - Khảo sát ảnh hưởng một số điều kiện lý hóa lên khả kháng nấm bệnh dịch nuôi cấy xạ khuẩn II NGÀY GIAO NHIỆM VỤ: 09/05/2022 III NGÀY HOÀN THÀNH NHIỆM VỤ: 09/11/20222 IV NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Nguyễn Thị Diệu Hạnh Tp Hồ Chí Minh, ngày … tháng … năm 20 … NGƯỜI HƯỚNG DẪN CHỦ NHIỆM BỘ MÔN ĐÀO TẠO (Họ tên chữ ký) (Họ tên chữ ký) TRƯỞNG VIỆN CNSH&TP (Họ tên chữ ký) LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Viện Công nghệ sinh học Thực phẩm; Quý thầy cô Trường Đại học Công nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh, Viện Đào tạo Quốc tế Sau đại học tạo điều kiện thuận lợi cho thực luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Thị Diệu Hạnh đồng hành, tận tâm bảo tạo điều kiện hỗ trợ tơi q trình thực khóa luận Bên cạnh đó, tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến TS Phạm Tấn Việt, TS Nguyễn Ngọc Ẩn ln cho tơi lời khun, lời góp ý hữu ích giúp cho tơi tích lũy thêm nhiều kiến thức, để tơi có nhìn sâu sắc vấn đề nghiên cứu giúp tơi hồn thành tốt khóa luận Tơi xin chân thành cảm ơn bạn bè thành viên Lab Vi sinh với gia đình, đồng nghiệp ln đợng viên, khích lệ tạo điều kiện giúp đỡ tơi suốt q trình thực để tơi hồn thành khố luận mợt cách tốt nhất Mặc dù khóa luận khơng tránh khỏi thiếu sót, tơi rất mong nhận ý kiến đóng góp q báu q thầy để giúp khóa luận hoàn thiện Học viên thực Mã Thị Anh Thư i TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ Bệnh đốm nâu long nấm mốc Neoscytalidium dimidiatum làm giảm sản lượng ảnh hưởng nghiêm trọng đến kinh tế Việc lạm dụng loại thuốc bảo vệ thực vật hóa học để hạn chế bệnh đốm nâu gây ảnh hưởng tiêu cực tới hệ sinh thái, môi trường sức khỏe người Chính vậy, để hạn chế tác hại bệnh đảm bảo an tồn cho hệ sinh thái, mơi trường sức khỏe người việc tìm chủng xạ khuẩn đối kháng Neoscytalidium dimidiatum rất cần thiết Trong nghiên cứu này, 36/50 chủng xạ khuẩn phân lập từ mẫu đất thu thập từ tỉnh khác cho thấy có khả đối kháng với nấm mốc N dimidiatum Trong đó, chủng CNXK 121 có khả đối kháng mạnh nhất, xác định tḥc chi Streptomyces có mối quan hệ gần gũi với loài Streptomyces plicatus NBRC 13071 dựa phân tích đại thể, vi thể 16S-rRNA Mơi trường Gauze II với pH ban đầu 7,0, bổ sung 1,5% D-glucose làm nguồn carbon 1,5% peptone làm nguồn nitrogen nhiệt độ nuôi cấy 30℃ điều kiện ni cấy thích hợp cho chủng CNXK121 sinh tổng hợp hợp chất kháng N dimidiatum Streptomyces CNXK 121 thể khả ức chế nảy mầm bào tử nấm phát triển hệ sợi nấm, khả sinh tổng hợp chitinase ngoại bào, protease, hợp chất dễ bay Tác dụng kháng nấm chủng CNXK121, bị ảnh hưởng nhiều nhiệt độ cao 50℃, ổn định khoảng pH rộng 1,0-8,0 Ngoài ra, thử nghiệm in vivo cho thấy chủng CNXK121 có khả làm giảm mức đợ bệnh đốm nâu mơ hình thân long Tóm lại, chủng CNXK121 cho thấy tiềm lớn việc ứng dụng sản xuất chế phẩm vi sinh để kiểm soát nấm N dimidiatum gây bệnh long nhằm phục vụ cho ngành nông nghiệp nước ta ii ABSTRACT Brown spot disease on dragon fruit is caused by Neoscytalidium dimidiatum The misuse of chemical pesticides to limit brown spot disease in recent years has negatively affected the ecosystem, environment, and human health In order to both fight the disease and ensure the safety of the ecosystem, the environment and human health, it is necessary to search for antagonistic bacterial strains of Neoscytalidium dimidiatum In this study, 36/50 actinomycetes strains isolated from soil samples from Ho Chi Minh city, Ben Tre, Tien Giang, Tay Ninh, Binh Thuan, Ninh Thuan provinces were shown to have antifungal activity against N dimidiatum Among them, the CNXK 121 strain possesses the strongest antagonistic activity and was identified to belong to the genus of Streptomyces based on macroscopic, microscopic, and 16S-rRNA analysis Gauze II medium supplemented with 1.5% D-glucose as carbon source, 1.5% peptone as nitrogen source, initial pH 7.0, and days cultivation at 30℃ in 150 rpm shaking condition were proved to be suitable for antifungal effect of CNXK121 against N dimidiatum Streptomyces CNXK 121 has displayed the ability to inhibit the germination of fungal spores as well as the growth of mycelia, probably due to the ability to biosynthesize extracellular chitinase, protease, as well as volatile compounds The antifungal effect of CNXK121 culture, although was highly affected at temperature higher than 50℃, was stable in a wide pH range 1.08.0 Additionally, in vivo test has shown a promising potential of CNXK121 in controlling brown spot disease as the culture has well-reduced the disease severity on both the stem and fruit models iii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu thân tơi Các kết nghiên cứu kết luận luận văn trung thực, không chép từ bất kỳ mợt nguồn bất kỳ hình thức Việc tham khảo nguồn tài liệu (nếu có) thực trích dẫn ghi nguồn tài liệu tham khảo quy định Học viên Mã Thị Anh Thư iv MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ ii ABSTRACT iii LỜI CAM ĐOAN iv MỤC LỤC v DANH MỤC HÌNH ẢNH ix DANH MỤC BẢNG BIỂU xi DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT xii MỞ ĐẦU .1 Đặt vấn đề .1 Mục tiêu nghiên cứu Đối tượng phạm vi nghiên cứu Cách tiếp cận phương pháp nghiên cứu .3 Ý nghĩa thực tiễn đề tài .5 CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan xạ khuẩn .6 1.1.1 Đặc điểm hình thái xạ khuẩn 1.1.2 Đặc điểm sinh lý - sinh hóa 1.1.3 Vai trò ứng dụng xạ khuẩn .9 1.1.4 Tình hình nghiên cứu chất đối kháng từ xạ khuẩn 12 1.1.5 Streptomyces ứng dụng kháng nấm Streptomyces spp 15 1.2 Thanh long loại bệnh long 17 1.2.1 Một số loại bệnh hại long 17 1.2.2 Bệnh đốm nâu long 19 1.2.3 Tình hình bệnh đốm nâu long Việt Nam giới 20 1.3 Tổng quan nấm mốc Neoscytalidium dimidiatum .21 1.3.1 Sơ lược nấm mốc Neoscytalidium dimidiatum 21 1.3.2 Một số nghiên cứu Neoscytalidium dimidiatum 22 v 1.3.2.1 Một số nghiên cứu nước 22 1.3.2.2 Một số nghiên cứu nước 23 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .26 2.1 Vật liệu 26 2.2 Phương pháp nghiên cứu 28 2.2.1 Phương pháp lấy mẫu 28 2.2.2 Phương pháp phân lập xạ khuẩn từ mẫu đất 28 2.2.3 Phương pháp bảo quản giống vi sinh vật 28 2.2.4 Phương pháp hoạt hóa giống vi sinh vật .28 2.2.5 Phương pháp quan sát hình thái chủng xạ khuẩn 29 2.2.6 Phương pháp thu nhận dịch nuôi cấy xạ khuẩn 29 2.2.7 Phương pháp khảo sát đối kháng Neoscytalidium dimidiatum dịch nuôi cấy xạ khuẩn 29 2.2.7.1 Phương pháp khảo sát tác động thành phần khác dịch nuôi cấy xạ khuẩn lên sinh trưởng phát triển nấm mốc 29 2.2.7.2 Phương pháp khuếch tán giếng thạch 30 2.2.8 Định danh chủng xạ khuẩn nghiên cứu .30 2.2.9 Các điều kiện ni cấy thích hợp cho sinh tổng hợp hợp chất đối kháng nấm mốc Neoscytalidium dimidiatum chủng xạ khuẩn CNXK121 .31 2.2.9.1 Phương pháp khảo sát mơi trường ni cấy thích hợp cho khả kháng Neoscytalidium dimidiatum dịch nuôi cấy xạ khuẩn 31 2.2.9.2 Phương pháp khảo sát ảnh hưởng nguồn carbon khác lên khả kháng nấm Neoscytalidium dimidiatum dịch nuôi cấy xạ khuẩn 31 2.2.9.3 Phương pháp khảo sát ảnh hưởng nồng độ carbon khác lên khả đối kháng nấm mốc Neoscytalidium dimidiatum dịch nuôi cấy xạ khuẩn 31 2.2.9.4 Phương pháp khảo sát ảnh hưởng nguồn nitrogen khác lên khả đối kháng nấm mốc Neoscytalidium dimidiatum dịch nuôi cấy xạ khuẩn 32 2.2.9.5 Phương pháp khảo sát ảnh hưởng nồng độ nitrogen khác lên khả đối kháng nấm mốc Neoscytalidium dimidiatum dịch nuôi cấy xạ khuẩn 32 2.2.9.6 Phương pháp khảo sát ảnh hưởng pH nuôi cấy lên khả kháng nấm Neoscytalidium dimidiatum dịch nuôi cấy xạ khuẩn 32 vi 2.2.9.7 Phương pháp khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ nuôi cấy lên khả kháng nấm Neoscytalidium dimidiatum dịch nuôi cấy xạ khuẩn 32 2.2.10 Phương pháp khảo sát một số đặc tính dịch ni cấy xạ khuẩn lên khả kháng nấm mốc Neoscytalidium dimidiatum .33 2.2.10.1 Phương pháp khảo sát khả bền nhiệt bền pH dịch nuôi cấy xạ khuẩn có hoạt tính kháng mốc 33 2.2.10.2 Phương pháp khảo sát khả sinh tổng hợp hợp chất bay có khả kháng mốc dịch nuôi cấy xạ khuẩn 33 2.2.10.3 Phương pháp khảo sát khả sinh enzyme ngoại bào từ chủng xạ khuẩn nghiên cứu 34 2.2.11 Khảo sát tác động dịch nuôi cấy lên nảy mầm bào tử hệ sợi tơ mốc N dimidiatum gây bệnh long .36 2.2.12 Kiểm tra khả đối kháng nấm mốc N dimidiatum chủng xạ khuẩn nghiên cứu điều kiện in vivo long 36 2.2.13 Phương pháp thống kê, xử lý số liệu 37 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN 38 3.1 Tuyển chọn định danh chủng xạ khuẩn có khả đối kháng mạnh với chủng nấm mốc Neoscytalidium dimidiatum gây bệnh đốm nâu long 38 3.1.1 Phân lập chủng xạ khuẩn .38 3.1.2 Khả đối kháng dịch nuôi cấy xạ khuẩn với nấm mốc Neoscytalidium dimidiatum gây bệnh đốm nâu long 46 3.1.3 Định danh chủng xạ khuẩn nghiên cứu CNXK 121 48 3.1.3.1 Đặc điểm hình thái chủng xạ khuẩn nghiên cứu CNXK121 .48 3.1.3.2 Định danh phương pháp sinh học phân tử 48 3.2 Ảnh hưởng thành phần khác dịch nuôi cấy xạ khuẩn lên hoạt tính ức chế nấm mốc N dimidiatum 50 3.3 Các điều kiện ni cấy thích hợp cho sinh tổng hợp hợp chất đối kháng nấm mốc Neoscytalidium dimidiatum chủng xạ khuẩn CNXK121 52 3.3.1 Ảnh hưởng mơi trường ni cấy lên hoạt tính kháng mốc dịch nuôi cấy xạ khuẩn 52 3.3.2 Ảnh hưởng nguồn carbon khác lên hoạt tính kháng mốc dịch nuôi cấy xạ khuẩn 53 vii Phụ lục 11: Khả bền nhiệt Bảng Khả bền nhiệt dịch nuôi cấy chủng CNXK12 lên khả kháng nấm N dimidiatum MIN Độ dài tơ lan (cm) C 50 60 70 80 90 100 121 1.35 1.3 2.3 2.3 2.3 2.3 2.3 2.3 1.35 1.35 2.3 2.3 2.3 2.3 2.3 2.3 1.3 1.4 2.3 2.3 2.3 2.3 2.3 2.3 41.30435 43.47826 0 0 0 41.30435 41.30435 0 0 0 43.47826 39.13043 0 0 0 0 0 0 1.25 1.35 1.55 Tỷ lệ ức chế (%) 45.65217 41.30435 32.6087 TB Ti le 40.94203 41.30435 uc che (%) SD 5.309735 0 0 0 100 106.1947 0 0 0 100 100.885 0 0 0 100 95.57522 0 0 0 TB Hoạt tính lại 100 100.885 0 0 0 ER 5.309735 0 0 0 Hoat tinh lai 122 10 MIN Độ dài tơ lan (cm) C 50 60 70 80 90 100 121 1.25 1.45 2.3 2.3 2.3 2.3 2.3 2.3 1.25 1.25 2.3 2.3 2.3 2.3 2.3 2.3 1.25 1.25 2.3 2.3 2.3 2.3 2.3 2.3 45.65217 36.95652 0 0 0 45.65217 45.65217 0 0 0 45.65217 45.65217 0 0 0 0 0 0 1.25 1.45 1.55 Tỷ lệ ức chế (%) 45.65217 36.95652 32.6087 TB Ti le 42.02899 42.75362 uc che (%) SD 5.020437 0 0 0 Hoat tinh lai 100 100 100 87.93103 108.6207 108.6207 0 0 0 0 0 0 0 0 0 TB Hoạt tính cịn lại 100 101.7241 0 0 0 ER 11.94518 0 0 0 123 15 MIN C 50 60 70 80 90 100 121 1.15 1.4 2.3 2.3 2.3 2.3 2.3 2.3 1.4 1.45 2.3 2.3 2.3 2.3 2.3 2.3 1.45 1.55 2.3 2.3 2.3 2.3 2.3 2.3 39.13043 0 0 0 39.13043 36.95652 0 0 0 36.95652 32.6087 0 0 0 TB Ti le 38.04348 36.23188 uc che (%) 0 0 0 Độ dài tơ lan (cm) 1.45 1.45 1.65 50 Tỷ lệ ức chế (%) 36.95652 36.95652 28.26087 SD 8.728716 0 0 0 100 102.8571 0 0 0 100 97.14286 0 0 0 100 85.71429 0 0 0 TB Hoạt tính cịn lại 100 95.2381 0 0 0 ER 8.728716 0 0 0 Hoat tinh lai 124 Hình Khả bền nhiệt dịch ni cấy chủng xạ khuẩn CNXK121 theo thời gian 125 Phụ lục 12: Khả bền pH Bảng Khả bền pH dịch nuôi cấy chủng CNXK12 lên khả kháng nấm N dimidiatum Độ dài lan tơ (cm) % Ức chế TBC Hoạt tính cịn lại C 10 11 12 1.8 1.95 1.95 1.8 1.6 1.65 1.7 1.8 1.8 2.3 2.3 2.3 2.3 1.85 1.95 1.85 1.6 1.65 1.7 1.8 1.8 2.3 2.3 2.3 2.3 1.9 2 1.85 1.65 1.7 1.7 1.85 1.85 2.3 2.3 2.3 2.3 1.9 1.95 1.95 1.8 1.65 1.65 1.7 1.8 1.8 2.3 2.3 2.3 2.3 2.1 1.95 1.85 1.65 1.65 1.7 1.8 1.8 2.3 2.3 2.3 2.3 2.1 2 1.85 1.65 1.7 1.7 1.85 1.85 2.3 2.3 2.3 2.3 21.73913 15.21739 15.21739 21.73913 30.43478 28.26087 26.08696 21.73913 21.73913043 0 0 19.56522 15.21739 13.04348 19.56522 30.43478 28.26087 26.08696 21.73913 21.73913043 0 0 17.3913 13.04348 13.04348 19.56522 28.26087 26.08696 26.08696 19.56522 19.56521739 0 0 17.3913 15.21739 15.21739 21.73913 28.26087 28.26087 26.08696 21.73913 21.73913043 0 0 8.695652 15.21739 13.04348 19.56522 28.26087 28.26087 26.08696 21.73913 21.73913043 0 0 8.695652 13.04348 13.04348 19.56522 28.26087 26.08696 26.08696 19.56522 19.56521739 0 0 15.57971 14.49275 13.76812 20.28986 28.98551 27.53623 26.08696 21.01449 21.01449275 0 0 100 97.67442 97.67442 139.5349 195.3488 181.3953 167.4419 139.5349 139.5348837 0 0 100 97.67442 83.72093 125.5814 195.3488 181.3953 167.4419 139.5349 139.5348837 0 0 100 83.72093 83.72093 125.5814 181.3953 167.4419 167.4419 125.5814 125.5813953 0 0 100 97.67442 97.67442 139.5349 181.3953 181.3953 167.4419 139.5349 139.5348837 0 0 100 97.67442 83.72093 125.5814 181.3953 181.3953 167.4419 139.5349 139.5348837 0 0 100 83.72093 83.72093 125.5814 181.3953 167.4419 167.4419 125.5814 125.5813953 0 0 TB hoạt tính lại 100 93.02326 88.37209 130.2326 186.0465 176.7442 167.4419 134.8837 134.8837209 0 0 SD 7.20555 7.20555 7.20555 7.20555 7.20555 3.11E-14 7.20555 7.205550412 0 0 Hình Khả bền pH dịch nuôi cấy chủng xạ khuẩn CNXK121 126 Phụ lục 13: Khả sinh tổng hợp hợp chất bay Bảng 10 Khả sinh tổng hợp hợp chất bay có khả kháng nấm mốc Neoscytalidium dimidiatum Đối chứng Đường kính khuẩn lạc (cm) TB Thí nghiệm Đường kính khuẩn lạc (cm) TB D1 1.9 1.9 1.933333 D2 5.95 5.95 5.9 5.933333 D3 7 7 D1 1.9 1.9 1.933333 D2 5.2 5.5 5.4 5.366667 D3 5.5 5.9 5.7 5.7 Phụ lục 14 Hiệu ngăn ngừa bệnh đốm nâu nấm mốc Neoscytalidium dimidiatum dịch nuôi cấy chủng xạ khuẩn CNXK121 long 127 Phụ lục 15: Kết phân tích Anova Bảng 11 Analysis of Variance for Hoat tinh - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value A:Medium 7061.9 1765.48 269.58 0.0000 B:Time 1311.19 218.532 33.37 0.0000 RESIDUAL 615.595 94 6.54889 TOTAL (CORRECTED) 8988.69 104 MAIN EFFECTS Method: 95.0 percent LSD Bảng 12 Multiple Range Tests for Hoat tinh by Medium Medium Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups ISP9 21 0.0 0.558437 X LB 21 19.2857 0.558437 X ISP4 21 19.881 0.558437 X Gauze I 21 20.4762 0.558437 XX Gauze II 21 21.9048 0.558437 X Method: 95.0 percent LSD Bảng 13 Multiple Range Tests for Hoat tinh by Time Time Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups 15 11.3333 0.660751 X 15 12.6667 0.660751 X 15 15.3333 0.660751 X 15 16.5 0.660751 X 15 16.8333 0.660751 XX 15 18.6667 0.660751 X 15 22.8333 0.660751 X Method: 95.0 percent LSD 128 Bảng 14 Analysis of Variance for Hoat tinh - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value A:Time 4064.94 812.987 21.86 0.0000 B:C source 3841.16 548.737 14.75 0.0000 RESIDUAL 4872.06 131 37.1913 TOTAL (CORRECTED) 12778.2 143 MAIN EFFECTS Method: 95.0 percent LSD Bảng 15 Multiple Range Tests for Hoat tinh by C source C source Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups Dau nanh 18 6.76329 1.43742 X Mi 18 9.17874 1.43742 XX Bap 18 11.715 1.43742 XX Gao 18 12.4396 1.43742 XX Soluble starch 18 15.7005 1.43742 XX Sucrose 18 18.2367 1.43742 XX Maltodextrin 18 18.2367 1.43742 XX Glucose 18 22.5242 1.43742 X Method: 95.0 percent LSD Bảng 16 Multiple Range Tests for Hoat tinh by Time Time Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups 24 6.79348 1.24484 X 24 9.64674 1.24484 X 24 13.4511 1.24484 X 24 15.8514 1.24484 X 24 20.471 1.24484 X 24 21.4221 1.24484 X Method: 95.0 percent LSD 129 Bảng 17 Analysis of Variance for Hoat tinh - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value A:Time 6550.03 1091.67 102.23 0.0000 B:%C 622.404 103.734 9.71 0.0000 RESIDUAL 1430.89 134 10.6783 TOTAL (CORRECTED) 8603.32 146 MAIN EFFECTS Method: 95.0 percent LSD Bảng 18 Multiple Range Tests for Hoat tinh by %C %C Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups 2.5 21 16.5631 0.713084 X 21 18.2195 0.713084 XX 21 19.5652 0.713084 XX 21 20.2899 0.713084 XX 3.5 21 20.3934 0.713084 XX 21 21.8427 0.713084 1.5 21 25.2919 Method: 95.0 percent LSD 0.713084 XX X Bảng 19 Multiple Range Tests for Hoat tinh by Time Time Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups 21 7.55694 0.713084 X 21 12.5259 0.713084 X 21 21.118 0.713084 X 21 22.5673 0.713084 XX 21 24.4306 0.713084 XX 21 24.9482 0.713084 X 21 27.0186 Method: 95.0 percent LSD 0.713084 X 130 Bảng 20 Analysis of Variance for Hoat tinh - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value A:Time 4320.97 720.162 35.65 0.0000 B:N source 12956.7 10 1295.67 64.13 0.0000 RESIDUAL 3899.18 193 20.203 TOTAL (CORRECTED) 21176.9 209 MAIN EFFECTS Method: 95.0 percent LSD Bảng 21 Multiple Range Tests for Hoat tinh by N source N source Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups NH4NO3 21 1.44928 0.980841 X Ca 21 2.58799 0.980841 X NaNO3 21 3.51967 0.980841 XX NH4Cl 21 3.62319 0.980841 XX Urea 14 6.36646 1.20128 XX Tryp 21 7.66046 0.980841 X Ures 7.76398 1.69887 X YE 21 13.0435 0.980841 X ME 21 15.5238 0.980841 X C 21 23.1884 0.980841 X Pep 21 23.2919 0.980841 X Method: 95.0 percent LSD Bảng 22 Multiple Range Tests for Hoat tinh by Time Time Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups 30 4.34783 0.827385 X 30 5.33816 0.827385 XX 30 7.36135 0.827385 XX 30 9.43382 0.827385 X 30 9.57295 0.827385 X 30 15.1894 0.827385 X 30 17.4957 0.827385 X Method: 95.0 percent LSD 131 Bảng 23 Analysis of Variance for Hoat tinh - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value A:Time 4811.16 801.859 85.79 0.0000 B:%N 988.131 164.688 17.62 0.0000 RESIDUAL 1252.4 134 9.34623 TOTAL (CORRECTED) 7051.68 146 MAIN EFFECTS Method: 95.0 percent LSD Bảng 24 Multiple Range Tests for Hoat tinh by %N %N Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups 2.5 21 16.3561 0.667127 X 3.5 21 16.7702 0.667127 X 21 16.8737 0.667127 X 21 16.8737 0.667127 X 21 18.2195 0.667127 X 1.5 21 22.2567 0.667127 X 21 22.9814 0.667127 X Method: 95.0 percent LSD Bảng 25 Multiple Range Tests for Hoat tinh by Time Time Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups 21 8.79917 0.667127 X 21 13.2505 0.667127 X 21 16.5631 0.667127 X 21 19.2547 0.667127 X 21 22.0497 0.667127 X 21 24.6377 0.667127 X 0.667127 X 21 25.7764 Method: 95.0 percent LSD 132 Bảng 26 Analysis of Variance for Hoat tinh - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value A:Time 1499.76 249.959 20.40 0.0000 B:t 5320.81 1330.2 108.55 0.0000 RESIDUAL 1151.88 94 12.254 TOTAL (CORRECTED) 7972.45 104 MAIN EFFECTS Method: 95.0 percent LSD Bảng 27 Multiple Range Tests for Hoat tinh by t t Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups 45 21 1.78054 0.763888 X 40 21 3.97516 0.763888 X 35 21 8.53002 0.763888 X 25 21 8.75776 0.763888 X 30 21 22.2567 0.763888 X Method: 95.0 percent LSD Bảng 28 Multiple Range Tests for Hoat tinh by Time Time Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups 15 4.63768 0.903844 X 15 4.78261 0.903844 X 15 6.28986 0.903844 XX 15 8.26087 0.903844 X 15 11.5942 0.903844 X 15 13.8551 0.903844 X 0.903844 X 15 14.0 Method: 95.0 percent LSD Bảng 29 Analysis of Variance for Hoat tinh - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value A:Time 2609.08 434.847 22.75 0.0000 B:pH 9622.76 1603.79 83.91 0.0000 RESIDUAL 2561.05 134 19.1123 TOTAL (CORRECTED) 14792.9 146 MAIN EFFECTS Method: 95.0 percent LSD 133 Bảng 30 Multiple Range Tests for Hoat tinh by pH pH Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups 21 0.0 0.953997 X 21 0.0 0.953997 X 21 0.0 0.953997 X 21 10.559 0.953997 X 21 12.94 0.953997 XX 21 14.0787 0.953997 X 21 22.1532 0.953997 X Method: 95.0 percent LSD Bảng 31 Multiple Range Tests for Hoat tinh by Time Time Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups 21 2.17391 0.953997 X 21 3.83023 0.953997 X 21 7.45342 0.953997 X 21 9.42029 0.953997 XX 21 9.73085 0.953997 XX 21 11.5942 0.953997 X 21 15.528 0.953997 X Method: 95.0 percent LSD Bảng 32 Analysis of Variance for Hoat tinh - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value A:t 134035 19147.9 2121.96 0.0000 B:Time 9.3325 4.66625 0.52 RESIDUAL 559.47 62 9.0237 TOTAL (CORRECTED) 134604 71 MAIN EFFECTS 0.5988 Method: 95.0 percent LSD Bảng 33 Multiple Range Tests for Hoat tinh by t t 70 90 121 80 100 60 Count 9 9 9 LS Mean 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 134 LS Sigma 1.00132 1.00132 1.00132 1.00132 1.00132 1.00132 Homogeneous Groups X X X X X X 50 C 9 99.2824 100.0 1.00132 1.00132 X X Method: 95.0 percent LSD Bảng 34 Multiple Range Tests for Hoat tinh by Time Time Count LS Mean LS Sigma Homogeneous Groups 15 24 24.4048 0.613178 X 24 25.1106 0.613178 X 10 24 25.2155 0.613178 X Method: 95.0 percent LSD Bảng 35 ANOVA Table for Hoat tinh by pH Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 182319 12 15193.2 1217.33 0.0000 Within groups 324.5 26 12.4808 Total (Corr.) 182643 38 Method: 95.0 percent LSD Bảng 36 Multiple Range Tests for Hoat tinh by pH pH Count Mean Homogeneous Groups 10 0.0 X 12 0.0 X 0.0 X 11 0.0 X 88.3721 X 93.0233 X C 100.0 X 3 130.233 X 134.884 X 134.884 X 167.442 X 176.744 X 186.047 X Method: 95.0 percent LSD 135 LÝ LỊCH TRÍCH NGANG CỦA HỌC VIÊN I LÝ LỊCH SƠ LƯỢC: Họ tên: Mã Thị Anh Thư Giới tính: Nữ Ngày, tháng, năm sinh: 05/04/1989 Nơi sinh: Bà Rịa – Vũng Tàu Email: ngocthuytinhvt89@gmail.com Điện thoại: 0907.823.189 II QUÁ TRÌNH ĐÀO TẠO: - Năm 2007- 2011: học Đại học trường Đại học Công nghiệp Tp.HCM - Năm 2019 đến nay: học Thạc Sĩ trường Đại học Cơng nghiệp Tp.HCM III Q TRÌNH CƠNG TÁC CHUN MƠN: Thời gian Nơi cơng tác Cơng việc đảm nhiệm Từ năm Trung tâm Ứng dụng khoa học Nhân viên phịng Cơng 2012 – năm cơng nghệ - trực thuộc Sở Khoa học nghệ sinh học 2019 Công nghệ tỉnh Bà Rịa-Vũng Tàu Từ 2019 năm Trung tâm Thông tin Ứng dụng Phụ trách phịng Cơng nghệ đến khoa học cơng nghệ - trực thuộc Sở sinh học Khoa học Công nghệ tỉnh Bà RịaVũng Tàu Tp HCM, ngày tháng Năm 20 Người khai (Ký tên) 136