Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

70 8 0
Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

ỦY BAN NHÂN DÂN TP.HCM SỞ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ THÀNH ĐỒN TP HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO NGHIỆM THU Khảo sát khả kháng oxy hóa polysaccharide tách chiết từ Cordyceps sinensis nuôi cấy Chủ nhiệm đề tài: ThS Huỳnh Thư CƠ QUAN CHỦ TRÌ: TRUNG TÂM PHÁT TRIỂN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ TRẺ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THÁNG 05/ 2016 ỦY BAN NHÂN DÂN TP.HCM SỞ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ THÀNH ĐỒN TP HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO NGHIỆM THU Khảo sát khả kháng oxy hóa polysaccharide tách chiết từ Cordyceps sinensis nuôi cấy CHỦ NHIỆM ĐỀ TÀI CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG ThS Huỳnh Thư CƠ QUAN QUẢN LÝ CƠ QUAN CHỦ TRÌ (Ký tên/đóng dấu xác nhận) (Ký tên/đóng dấu xác nhận) THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THÁNG 05/ 2016 MỤC LỤC Trang Mục lục i Tóm tắt iii Abstract iv Danh mục ký hiệu, chữ viết tắt v Danh mục bảng vi Danh mục hình vẽ, đồ thị vii Phần mở đầu Đặt vấn đề Chương – Tổng quan tài liệu 1.1 Giới thiệu Cordyceps sinensis 1.1.1 Giới thiệu chung 1.1.2 Các hoạt chất 1.1.2.1 Cordycepin 1.1.2.2 Acid cordycepic 1.1.2.3 Nucleotide 1.1.2.4 Ergosterol 1.1.2.5 Protein acid amin 1.1.2.6 Polysaccharide 1.2 Tổng quan nghiên polysaccharide Cordyceps Chương – Vật liệu phương pháp nghiên cứu 12 2.1 Thiết bị - Hóa chất 12 2.1.1 Thiết bị 12 2.1.2 Hóa chất 12 2.2 Phương pháp nghiên cứu 12 2.2.1 Khảo sát quy trình tách chiết polysaccharide 12 2.2.1.1 Khảo sát quy trình chiết nước nóng 13 2.2.1.2 Khảo sát quy trình tách chiết exopolysaccharide thơ 13 2.2.2 Phương pháp phân tách phân đoạn polysaccharide sắc ký lọc gel 14 2.2.2.1 Phương pháp định lượng polysaccharide 15 2.2.2.2 Phương pháp định lượng protein 16 2.2.3 Phương pháp khảo sát khả bắt gốc tự ABTS 18 2.2.4 Phương pháp nuôi cấy tế bào 19 2.2.5 Phương pháp gây độc tế bào 19 Chương – Kết biện luận 22 3.1 Kết phân tách polysaccharide 22 3.1.1 Quy trình tách chiết polysaccharide thơ 22 3.1.1.1 Quy trình tách chiết polysaccharide thơ từ dịch ni cấy 24 3.1.1.2 Quy trình tách chiết polysaccharide thô từ sinh khối 25 3.1.2 Kết tách phân đoạn polysaccharide sắc ký lọc gel 25 3.2 Khả bắt gốc tự ABTS 28 3.3 Khả gây độc tế bào HepG2 30 Chương – Kết luận đề nghị 32 4.1 Kết luận 32 4.2 Đề nghị 32 Tài liệu tham khảo 33 Phụ lục TÓM TẮT Cordyceps sinensis loại dược liệu cổ truyền quý sử dụng để trị nhiều bệnh Nhiều nghiên cứu khoa học chứng minh Cordyceps sinensis chứa nhiều hoạt chất hoạt tính sinh học quý Trong đó, polysaccharide từ Cordyceps sinensis nghiên cứu sở hữu nhiều hoạt tính sinh học, đặc biệt khả kháng oxy hóa Vì thế, nghiên cứu nhằm xác định khả bắt gốc tự ABTS khả gây độc tế bào HepG2 IPS EPS tách chiết từ Cordyceps sinensis Kết cho thấy IPS EPS phức hợp polysaccharideprotein Đề tài đưa quy trình tách chiết polysaccharide với hiệu suất 12.7 %, tách chiết phân đoạn polysaccharide Từ hai polysaccharide thô EPS IPS thơ, nhóm nghiên cứu tách chiết phân đoạn gồm EPS-1, EPS-2 IPS-1, IPS-2 Hoạt tính kháng oxy hóa EPS cao IPS, giá trị IC50 EPS thô phân đoạn EPS-2 2.688,80 ± 19,83 µg/ml 1.885,90 ± 2,90 µg/ml Đồng thời, có EPS thơ có khả ức chế phát triển tế bào HepG2 (IC50 = 15,59 ± 0,17 µg/ml) Do đó, EPS từ Cordyceps sinensis có tiềm ứng dụng lĩnh vực thực phẩm, đặc biệt thực phẩm chức ABSTRACT Cordyceps sinensis is one of well-known traditional medicine for treatment of a wide variety of diseases Besides, researches demonstrated that polysaccharides isolated from Cordyceps sinensis have useful biological activities, especially the potential antioxidant Hence, this study demonstrated on ABTS free radical scavenging activity and HepG2 cytotoxicity of IPS and EPS isolated from Cordyceps sinensis Consequently, both EPSs and IPSs were mixtures of peptidepolysaccharide The research indicated two procedures of polysaccharide extraction From two crude polysaccharides including crude EPS and IPS, the research fractionated EPS-1, EPS-2 and IPS-1, IPS-2 The IC50 value of crude EPS and EPS2 fraction were 2,688.80 ± 19.83 µg/ml and 1,885.90 ± 2.90 µg/ml, respectively, which were lower than that of IPSs as well as EPS-1 fraction Furthermore, the only crude EPS exhibited HepG2 cell growth inhibitory ability (IC50 = 15.59 ± 0.17 µg/ml) among the samples Taken together, the EPSs exhibited greater antioxidant activity than the IPSs Thus, the EPSs could be considered as antioxidant food additives and functional feed DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT A Absorbance ABTS 2,2′-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt CS Cordyceps sinensis dd dung dịch DPPH 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl EDTA Ethylenediaminetetraacetic acid EPS Exopolysaccharide IC50 Inhibitory concentration IPS Endopolysaccharide OD Optical density PBS Phosphate-buffered saline RNS Reactive nitrogen species ROS Reactive oxygen species SRB Sulforhodamine B DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1 Thành phần monosaccharide polysaccharide tách chiết từ Cordyceps sinensis tự nhiên nuôi cấy nhân tạo 10 Bảng 2.1 Bố trí thí nghiệm thực sắc ký lọc gel Sephadex G–200 14 Bảng 2.2 Bố trí thí nghiệm dựng đường chuẩn saccharose 15 Bảng 2.3 Bố trí thí nghiệm dựng đường chuẩn albumin 17 Bảng 3.1 Khối lượng polysaccharide từ 100 ml dịch nuôi cấy tủa 22 Bảng 3.2 Kết đường chuẩn polysaccharide 26 Bảng 3.3 Kết đường chuẩn protein 26 Bảng 3.4 Bộ số liệu khả kháng oxy hóa polysaccharide tách chiết từ Cordyceps sinensis 28 Bảng 3.5 Tỷ lệ gây độc tế bào (%) polysaccharide nồng độ thử nghiệm 100 µg/ml lên dịng tế bào HepG2 30 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Trang Hình 1.1 Vịng đời Cordceps sinensis Hình 1.2 Cordyceps sinensis (trái) Cordyceps militaris (phải) Hình 1.3 Cấu tạo phân tử cordycepin Hình 2.1 Sơ đồ khảo sát quy trình tách chiết polysaccharide thơ 13 Hình 2.2 Phản ứng định lượng polysaccharide 15 Hình 2.3 Phản ứng định lượng protein 17 Hình 3.1 Đồ thị biểu diễn tương quan tuyến tính giá trị OD490 nồng độ saccharose chuẩn 26 Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn tương quan tuyến tính giá trị OD595 nồng độ albumin chuẩn 27 Hình 3.3 Phân đoạn polysaccharide: (a) Phân đoạn IPS; (b) Phân đoạn EPS 28 Hình 3.4 Biểu đồ thể khả bắt gốc tự ABTS 30 Biểu đồ 3.3 Khả gây độc tế bào 31 MỤC LỤC Trang Mục lục i Tóm tắt iii Abstract iv Danh mục ký hiệu, chữ viết tắt v Danh mục bảng vi Danh mục hình vẽ, đồ thị vii Phần mở đầu Đặt vấn đề Chương – Tổng quan tài liệu 1.1 Giới thiệu Cordyceps sinensis 1.1.1 Giới thiệu chung 1.1.2 Các hoạt chất 1.1.2.1 Cordycepin 1.1.2.2 Acid cordycepic 1.1.2.3 Nucleotide 1.1.2.4 Ergosterol 1.1.2.5 Protein acid amin 1.1.2.6 Polysaccharide 1.2 Tổng quan nghiên polysaccharide Cordyceps Chương – Vật liệu phương pháp nghiên cứu 12 2.1 Thiết bị - Hóa chất 12 2.1.1 Thiết bị 12 2.1.2 Hóa chất 12 2.2 Phương pháp nghiên cứu 12 2.2.1 Khảo sát quy trình tách chiết polysaccharide 12 2.2.1.1 Khảo sát quy trình chiết nước nóng 13 2.2.1.2 Khảo sát quy trình tách chiết exopolysaccharide thô 13 2.2.2 Phương pháp phân tách phân đoạn polysaccharide sắc ký lọc gel 14 i Quy trình tách chiết polysaccharide thơ từ sinh khối Sinh khối Chiết nhiều lần với nước cất (mỗi lần chiết với điều kiện 700C 3h) Dịch chiết nước Cô quay nhiệt độ 600C Dịch nuôi cấy sau quay (giảm 1/5 thể tích so với dịch nuôi cấy ban đầu) Tủa cồn với tỷ lệ 1:4 (ủ 24h 40C) Dịch sau tủa Lọc qua giấy lọc Đông khô, trữ 40C IPS Kết tăng 54,49% hiệu suất tách chiết so với kết từ nghiên cứu trước mà nhóm đạt - 40 - Kết tách polysaccharide phân đoạn EPS sắc ký lọc gel Bảng số liệu OD dùng để định lượng polysaccharide protein có 0,125g EPS thô từ dịch thu qua sắc ký học gel Ống thứ polysaccharide protein 0,052 0,095 0,042 0,088 0,039 0,085 0,042 0,084 0,060 0,083 0,047 0,091 0,050 0,090 0,044 0,091 0,060 0,094 10 1,026 0,126 11 2,567 0,190 12 2,980 0,207 13 2,870 0,193 14 2,462 0,180 15 1,786 0,124 16 0,902 0,105 17 0,712 0,098 18 0,690 0,106 19 0,707 0,111 20 0,723 0,117 21 0,721 0,103 22 0,706 0,103 23 0,702 0,095 24 0,679 0,103 25 0,620 0,106 26 0,589 0,113 27 0,550 0,126 28 0,530 0,147 29 0,508 0,186 30 0,615 0,300 31 0,653 0,428 32 0,756 0,583 33 0,775 0,670 34 0,671 0,615 35 0,332 0,439 36 0,147 0,276 - 41 - 37 0,072 0,194 38 0,038 0,147 39 0,034 0,119 40 0,029 0,108 41 0,020 0,097 42 0,020 0,083 43 0,020 0,081 44 0,020 0,081 45 0,020 0,077 46 0,020 0,084 47 0,020 0,075 48 0,020 0,085 49 0,020 0,088 50 0,020 0,083 Dựa vào phương trình chuẩn bài, ta tính hàm lượng polysaccharide protein có 0,125g EPS thơ sau: Hàm lượng EPS-1: 36,825 mg (chiếm 29,46%) Hàm lượng polysaccharide: 2,27 mg Hàm lương protein: 1,76 mg Hàm lượng EPS-2: 77,125mg (chiếm 61,70%) Hàm lượng polysaccharide: 0,84 mg Hàm lương protein: 4,46 mg 3.5 2.5 polysaccharides 1.5 proteins 0.5 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49 - 42 - Kết tách phân đoạn polysaccharide từ IPS sắc ký lọc gel Bảng số liệu OD dùng để định lượng polysaccharide protein có 0,125g IPS thơ từ dịch thu qua sắc ký học gel Ống thứ polysaccharide protein 0,058 0,087 0,051 0,085 0,041 0,074 0,046 0,101 0,043 0,101 0,047 0,081 0,040 0,179 0,042 0,112 0,043 0,088 10 0,045 0,085 11 0,047 0,099 12 0,049 0,085 13 0,076 0,162 14 0,346 0,526 15 0,709 0,867 16 1,202 1,093 17 1,546 1,162 18 1,278 1,073 19 1,007 0,849 20 0,719 0,604 21 0,648 0,395 22 0,532 0,294 23 0,356 0,206 24 0,352 0,174 25 0,354 0,186 26 0,341 0,203 27 0,347 0,185 28 0,321 0,193 29 0,346 0,238 30 0,356 0,223 31 0,342 0,216 32 0,344 0,235 33 0,347 0,261 34 0,351 0,304 35 0,387 0,462 36 0,411 0,539 37 0,438 0,831 - 43 - 38 0,497 0,908 39 0,527 1,149 40 0,671 1,417 41 0,835 1,507 42 1,128 1,800 43 1,273 1,968 44 0,937 1,721 45 0,490 1,547 46 0,395 1,327 47 0,365 0,974 48 0,283 0,864 49 0,220 0,579 50 0,160 0,379 51 0,105 0,304 52 0,084 0,196 53 0,115 0,137 54 0,090 0,147 55 0,031 0,087 56 0,045 0,085 57 0,034 0,085 58 0,035 0,084 59 0,033 0,085 60 0,030 0,083 Dựa vào phương trình chuẩn bài, ta tính hàm lượng polysaccharide protein có 0,125g EPS thơ sau: Hàm lượng IPS-1: 29,125 mg (chiếm 23,30%) Hàm lượng polysaccharide: 1,30 mg Hàm lượng protein: 8,41 mg Hàm lượng IPS-2: 8,525 mg (chiếm 6,86%) Hàm lượng polysaccharide: 1,29 mg Hàm lượng protein: 19,06 mg 2.5 1.5 polysaccharides proteins 0.5 11131517192123252729313335373941434547495153555759 - 44 - Bộ số liệu khả kháng oxy hóa polysaccharide tách chiết từ Cordyceps sinensis Phần trăm bắt gốc tự ABTS IPS (%) Nồng độ IPS thô IPS-1 IPS-2 Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 1000 15,53 10,89 14,38 4,31 4,14 4,13 20,03 19,35 20,88 2000 27,93 24,05 27,12 6,31 7,21 7,65 35,94 35,85 36,93 3000 34,60 33,52 35,07 10,00 10,89 10,86 49,72 48,79 49,72 4000 47,00 44,84 46,99 14,00 13,80 14,53 60,23 59,17 60,37 5000 55,18 54,46 56,16 17,38 17,79 18,04 75,43 74,40 75,14 [µg/ml] Phần trăm bắt gốc tự ABTS EPS (%) Nồng độ EPS thô EPS-1 EPS-2 Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 1000 24,43 24,29 22,03 5,49 5,60 5,87 31,95 31,37 33,03 2000 43,18 42,19 41,16 8,44 9,80 9,65 54,07 52,80 52,75 3000 57,10 58,38 56,81 13,92 15,27 15,94 82,80 80,59 78,29 4000 70,60 70,88 72,75 19,83 21,29 21,82 99,39 99,38 99,39 5000 84,80 85,37 84,49 25,60 27,45 27,97 99,85 99,84 100,00 [µg/ml] - 45 - Bộ số liệu ỷ lệ gây độc tế bào (%) polysaccharide nồng độ thử nghiệm 100 µg/ml lên dịng tế bào HepG2 Mẫu Lần Lần Lần Trung bình IPS thơ -1,15 6,39 -9,37 -1,38 ± 7,88 IPS-1 -7,31 -14,37 -6,83 -9,50 ± 4,22 IPS-2 -4,99 2,59 -13,80 -5,40 ± 8,20 EPS thô 100,00 100,00 100,00 100,00 ± 0,00 EPS-1 -6,66 4,49 -12,27 -4,81 ± 8,53 EPS-2 -5,89 -0,54 -9,37 -5,27 ± 4,45 - 46 - Quy trình tách chiết polysaccharide thô từ dịch nuôi cấy Dịch nuôi cấy Cô quay nhiệt độ 600C Dịch nuôi cấy sau quay (giảm 1/5 thể tích so với dịch nuôi cấy ban đầu) Tủa cồn với tỷ lệ 1:4 (ủ 24h 40C) Dịch sau tủa Lọc qua giấy lọc Đông khô, trữ 40C EPS Kết thu 1,27 g polysaccharide thô từ lit dịch nuôi cấy Quy trình tách chiết polysaccharide thơ từ sinh khối Sinh khối Chiết nhiều lần với nước cất (mỗi lần chiết với điều kiện 700C 3h) Dịch chiết nước Cô quay nhiệt độ 600C Dịch nuôi cấy sau quay (giảm 1/5 thể tích so với dịch nuôi cấy ban đầu) Tủa cồn với tỷ lệ 1:4 (ủ 24h 40C) Dịch sau tủa Lọc qua giấy lọc Đông khô, trữ 40C IPS Kết tăng 54,49% hiệu suất tách chiết so với kết từ nghiên cứu trước mà nhóm đạt Kết tách polysaccharide phân đoạn EPS sắc ký lọc gel Bảng số liệu OD dùng để định lượng polysaccharide protein có 0,125g EPS thơ từ dịch thu qua sắc ký học gel Ống thứ polysaccharide protein 0,052 0,095 0,042 0,088 0,039 0,085 0,042 0,084 0,060 0,083 0,047 0,091 0,050 0,090 0,044 0,091 0,060 0,094 10 1,026 0,126 11 2,567 0,190 12 2,980 0,207 13 2,870 0,193 14 2,462 0,180 15 1,786 0,124 16 0,902 0,105 17 0,712 0,098 18 0,690 0,106 19 0,707 0,111 20 0,723 0,117 21 0,721 0,103 22 0,706 0,103 23 0,702 0,095 24 0,679 0,103 25 0,620 0,106 26 0,589 0,113 27 0,550 0,126 28 0,530 0,147 29 0,508 0,186 30 0,615 0,300 31 0,653 0,428 32 0,756 0,583 33 0,775 0,670 34 0,671 0,615 35 0,332 0,439 36 0,147 0,276 37 0,072 0,194 38 0,038 0,147 39 0,034 0,119 40 0,029 0,108 41 0,020 0,097 42 0,020 0,083 43 0,020 0,081 44 0,020 0,081 45 0,020 0,077 46 0,020 0,084 47 0,020 0,075 48 0,020 0,085 49 0,020 0,088 50 0,020 0,083 Dựa vào phương trình chuẩn bài, ta tính hàm lượng polysaccharide protein có 0,125g EPS thô sau: Hàm lượng EPS-1: 36,825 mg (chiếm 29,46%) Hàm lượng polysaccharide: 2,27 mg Hàm lương protein: 1,76 mg Hàm lượng EPS-2: 77,125mg (chiếm 61,70%) Hàm lượng polysaccharide: 0,84 mg Hàm lương protein: 4,46 mg 3.5 2.5 polysaccharides 1.5 proteins 0.5 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49 Kết tách phân đoạn polysaccharide từ IPS sắc ký lọc gel Bảng số liệu OD dùng để định lượng polysaccharide protein có 0,125g IPS thơ từ dịch thu qua sắc ký học gel Ống thứ polysaccharide protein 0,058 0,087 0,051 0,085 0,041 0,074 0,046 0,101 0,043 0,101 0,047 0,081 0,040 0,179 0,042 0,112 0,043 0,088 10 0,045 0,085 11 0,047 0,099 12 0,049 0,085 13 0,076 0,162 14 0,346 0,526 0,709 15 0,867 16 1,202 1,093 17 1,546 1,162 18 1,278 1,073 19 1,007 0,849 20 0,719 0,604 0,648 21 0,395 22 0,532 0,294 23 0,356 0,206 24 0,352 0,174 25 0,354 0,186 26 0,341 0,203 0,347 27 0,185 28 0,321 0,193 29 0,346 0,238 30 0,356 0,223 31 0,342 0,216 32 0,344 0,235 0,347 33 0,261 34 0,351 0,304 35 0,387 0,462 36 0,411 0,539 37 0,438 0,831 38 0,497 0,908 39 0,527 1,149 40 0,671 1,417 0,835 41 1,507 42 1,128 1,800 43 1,273 1,968 44 0,937 1,721 45 0,490 1,547 46 0,395 1,327 0,365 47 0,974 48 0,283 0,864 49 0,220 0,579 50 0,160 0,379 51 0,105 0,304 52 0,084 0,196 0,115 53 0,137 54 0,090 0,147 55 0,031 0,087 56 0,045 0,085 57 0,034 0,085 58 0,035 0,084 0,033 59 0,085 60 0,030 0,083 Dựa vào phương trình chuẩn bài, ta tính hàm lượng polysaccharide protein có 0,125g EPS thô sau: Hàm lượng IPS-1: 29,125 mg (chiếm 23,30%) Hàm lượng polysaccharide: 1,30 mg Hàm lượng protein: 8,41 mg Hàm lượng IPS-2: 8,525 mg (chiếm 6,86%) Hàm lượng polysaccharide: 1,29 mg Hàm lượng protein: 19,06 mg 2.5 1.5 polysaccharides proteins 0.5 11131517192123252729313335373941434547495153555759 Bộ số liệu khả kháng oxy hóa polysaccharide tách chiết từ Cordyceps sinensis Phần trăm bắt gốc tự ABTS IPS (%) Nồng độ IPS thô IPS-1 IPS-2 Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 1000 15,53 10,89 14,38 4,31 4,14 4,13 20,03 19,35 20,88 2000 27,93 24,05 27,12 6,31 7,21 7,65 35,94 35,85 36,93 3000 34,60 33,52 35,07 10,00 10,89 10,86 49,72 48,79 49,72 4000 47,00 44,84 46,99 14,00 13,80 14,53 60,23 59,17 60,37 5000 55,18 54,46 56,16 17,38 17,79 18,04 75,43 74,40 75,14 [µg/ml] Phần trăm bắt gốc tự ABTS EPS (%) Nồng độ EPS thô EPS-1 EPS-2 Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 1000 24,43 24,29 22,03 5,49 5,60 5,87 31,95 31,37 33,03 2000 43,18 42,19 41,16 8,44 9,80 9,65 54,07 52,80 52,75 3000 57,10 58,38 56,81 13,92 15,27 15,94 82,80 80,59 78,29 4000 70,60 70,88 72,75 19,83 21,29 21,82 99,39 99,38 99,39 5000 84,80 85,37 84,49 25,60 27,45 27,97 99,85 99,84 100,00 [µg/ml] Bộ số liệu ỷ lệ gây độc tế bào (%) polysaccharide nồng độ thử nghiệm 100 µg/ml lên dòng tế bào HepG2 Mẫu Lần Lần Lần Trung bình IPS thơ -1,15 6,39 -9,37 -1,38 ± 7,88 IPS-1 -7,31 -14,37 -6,83 -9,50 ± 4,22 IPS-2 -4,99 2,59 -13,80 -5,40 ± 8,20 EPS thô 100,00 100,00 100,00 100,00 ± 0,00 EPS-1 -6,66 4,49 -12,27 -4,81 ± 8,53 EPS-2 -5,89 -0,54 -9,37 -5,27 ± 4,45 ... polysaccharide từ dịch môi trường sinh khối Cordyceps sinensis nuôi cấy - Phân tích thành phần polysaccharide có Cordyceps sinensis ni cấy - Khảo sát khả kháng oxy hóa polysaccharide ly trích Nội dung:... khả kháng oxy hóa polysaccharide tách chiết từ Cordyceps sinensis ni cấy phương -1- Đã hồn thành pháp bắt gốc tự ABTS Nội dung 4: Khảo sát khả gây độc tế bào HepG2 Đã hồn thành polysaccharide tách. .. VÀ CÔNG NGHỆ THÀNH ĐỒN TP HỒ CHÍ MINH BÁO CÁO NGHIỆM THU Khảo sát khả kháng oxy hóa polysaccharide tách chiết từ Cordyceps sinensis nuôi cấy CHỦ NHIỆM ĐỀ TÀI CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG ThS Huỳnh Thư CƠ

Ngày đăng: 11/10/2022, 07:13

Hình ảnh liên quan

Danh mục các bảng vi - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

anh.

mục các bảng vi Xem tại trang 3 của tài liệu.
Hình 1.1 Vịng đời của Cordceps sinensis [3] - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Hình 1.1.

Vịng đời của Cordceps sinensis [3] Xem tại trang 20 của tài liệu.
Hình 1.2. Cordyceps sinensis (trái) và Cordyceps militaris (phải) [4] - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Hình 1.2..

Cordyceps sinensis (trái) và Cordyceps militaris (phải) [4] Xem tại trang 21 của tài liệu.
Hình 1.3. Cấu tạo phân tử của cordycepin [4] - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Hình 1.3..

Cấu tạo phân tử của cordycepin [4] Xem tại trang 22 của tài liệu.
Bảng 1.1 Thành phần các monosaccharide của polysaccharide tách chiết từ - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Bảng 1.1.

Thành phần các monosaccharide của polysaccharide tách chiết từ Xem tại trang 26 của tài liệu.
Hình 2.1. Sơ đồ khảo sát quy trình tách chiết polysaccharide thơ - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Hình 2.1..

Sơ đồ khảo sát quy trình tách chiết polysaccharide thơ Xem tại trang 29 của tài liệu.
Bảng 2.1. Bố trí thí nghiệm thực hiện sắc ký lọc gel Sephadex G–200 - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Bảng 2.1..

Bố trí thí nghiệm thực hiện sắc ký lọc gel Sephadex G–200 Xem tại trang 30 của tài liệu.
Hình 2.2. Phản ứng định lượng polysaccharide - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Hình 2.2..

Phản ứng định lượng polysaccharide Xem tại trang 31 của tài liệu.
Bảng 2.2. Bố trí thí nghiệm dựng đường chuẩn saccharose - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Bảng 2.2..

Bố trí thí nghiệm dựng đường chuẩn saccharose Xem tại trang 31 của tài liệu.
Hình 2.3. Phản ứng định lượng protein - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Hình 2.3..

Phản ứng định lượng protein Xem tại trang 33 của tài liệu.
Bảng 2.3. Bố trí thí nghiệm dựng đồ thị chuẩn albumin - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Bảng 2.3..

Bố trí thí nghiệm dựng đồ thị chuẩn albumin Xem tại trang 33 của tài liệu.
Bảng 3.2 Kết quả đường chuẩn polysaccharide Nồng độ  - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Bảng 3.2.

Kết quả đường chuẩn polysaccharide Nồng độ Xem tại trang 42 của tài liệu.
Hình 3.1. Đồ thị biểu diễn sự tương quan tuyến tính giữa giá trị OD490 và nồng độ saccharose chuẩn  - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Hình 3.1..

Đồ thị biểu diễn sự tương quan tuyến tính giữa giá trị OD490 và nồng độ saccharose chuẩn Xem tại trang 42 của tài liệu.
Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn sự tương quan tuyến tính giữa giá trị OD595 và nồng độ albumin chuẩn  - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Hình 3.2.

Đồ thị biểu diễn sự tương quan tuyến tính giữa giá trị OD595 và nồng độ albumin chuẩn Xem tại trang 43 của tài liệu.
Hình 3.3. Phân đoạn polysaccharide: (a) Phân đoạn IPS; (b) Phân đoạn EPS - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Hình 3.3..

Phân đoạn polysaccharide: (a) Phân đoạn IPS; (b) Phân đoạn EPS Xem tại trang 44 của tài liệu.
Bảng 3.4. Bộ số liệu về khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ Cordyceps sinensis  - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Bảng 3.4..

Bộ số liệu về khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ Cordyceps sinensis Xem tại trang 44 của tài liệu.
Hình 3.4. Biểu đồ thể hiện khả năng bắt gốc tự do ABTS - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Hình 3.4..

Biểu đồ thể hiện khả năng bắt gốc tự do ABTS Xem tại trang 46 của tài liệu.
Bảng 3.5. Tỷ lệ gây độc tế bào (%) của polysaccharide ở nồng độ thử nghiệm 100 µg/ml lên dịng tế bào HepG2  - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Bảng 3.5..

Tỷ lệ gây độc tế bào (%) của polysaccharide ở nồng độ thử nghiệm 100 µg/ml lên dịng tế bào HepG2 Xem tại trang 46 của tài liệu.
Bảng số liệu OD dùng để định lượng polysaccharide và protein có trong 0,125g EPS thô từ dịch thu được qua sắc ký học gel  - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Bảng s.

ố liệu OD dùng để định lượng polysaccharide và protein có trong 0,125g EPS thô từ dịch thu được qua sắc ký học gel Xem tại trang 57 của tài liệu.
Bảng số liệu OD dùng để định lượng polysaccharide và protein có trong 0,125g IPS thô từ dịch thu được qua sắc ký học gel  - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Bảng s.

ố liệu OD dùng để định lượng polysaccharide và protein có trong 0,125g IPS thô từ dịch thu được qua sắc ký học gel Xem tại trang 59 của tài liệu.
Bảng số liệu OD dùng để định lượng polysaccharide và protein có trong 0,125g EPS thô từ dịch thu được qua sắc ký học gel  - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Bảng s.

ố liệu OD dùng để định lượng polysaccharide và protein có trong 0,125g EPS thô từ dịch thu được qua sắc ký học gel Xem tại trang 65 của tài liệu.
Bảng số liệu OD dùng để định lượng polysaccharide và protein có trong 0,125g IPS thô từ dịch thu được qua sắc ký học gel  - Khảo sát khả năng kháng oxy hóa của polysaccharide tách chiết từ cordyceps sinensis nuôi cấy

Bảng s.

ố liệu OD dùng để định lượng polysaccharide và protein có trong 0,125g IPS thô từ dịch thu được qua sắc ký học gel Xem tại trang 67 của tài liệu.