GIÁO TRÌNH DƯỢC LIỆU

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG CAO ĐẲNG KINH TẾ KỸ THUẬT MIỀN NAM KHOA DƯỢC GIÁO TRÌNH DƯỢC LIỆU TẬP 1 DÙNG CHO SINH VIÊN TRUNG CẤP DƯỢC (Lưu hành nội bộ) TP HỒ CHÍ MINH 2012 Tập.

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG CAO ĐẲNG KINH TẾ KỸ THUẬT MIỀN NAM KHOA DƯỢC GIÁO TRÌNH DƯỢC LIỆU TẬP DÙNG CHO SINH VIÊN TRUNG CẤP DƯỢC (Lưu hành nội bộ) -TP HỒ CHÍ MINH 2012- Tập PHẦN KỸ THUẬT CHUNG VỀ DƯỢC LIỆU: • Đại cương dược liệu • Kỹ thuật thu hái, phơi sấy, chế biến, bảo quản dược liệu • Thành phần, tác dụng nhóm hoạt chất thường có dược liệu • Kỹ thuật kiểm tra chất lượng dược liệu MỤC LỤC Bài 1: ĐẠI CƯƠNG VỀ DƯỢC LIỆU 1.1 Định nghĩa môn học 1.2 Sơ lược lịch sử phát triển dược liệu học 1.2.1 Sự phát triển dược liệu học phương Tây 1.2.2 Sự phát triển dược liệu học phương Đông 1.2.3 Sự phát triển dược học cổ truyền Việt Nam .3 1.3 Vị trí vai trị dược liệu Bài 2: KĨ THUẬT THU HÁI, CHẾ BIẾN, PHƠI SẤY, BẢO QUẢN DƯỢC LIỆU 2.1 Thu hái dược liệu 2.2 Chế biến sơ dược liệu 2.3 Ổn định dược liệu 10 2.4 Làm khô dược liệu 11 2.5 Bảo quản dược liệu 12 2.5.1 Độ ẩm .13 2.5.2 Nhiệt độ 13 2.5.3 Nấm mốc 13 2.5.4 Côn trùng 13 2.5.5 Bao bì đóng gói 14 Bài 3: THÀNH PHẦN VÀ TÁC DỤNG CỦA MỘT SỐ NHÓM HOẠT CHẤT CÓ TRONG DƯỢC LIỆU 15 3.1 Muối vô 15 3.2 Dược liệu chứa acid hữu 16 3.2.1 Khái niệm chung acid hữu .16 3.2.2 Định tính acid hữu dược liệu .17 3.2.3 Tác dụng công dụng dược liệu chứa acid hữu 17 3.3 Dược liệu chứa glucid 17 3.3.1 Khái niệm chung glucid .17 3.3.2 Những glucid thường gặp dược liệu 17 3.3.3 Tinh bột 18 3.3.4 Cellulose 21 3.3.5 Gôm, chất nhầy, pectin 22 3.4 Dược liệu chứa glycosid 23 3.4.1 Khái niệm glycosid 23 3.4.2 Glycosid trợ tim 24 3.4.3 Dược liệu chứa saponin 25 3.5 Dược liệu chứa anthraglycosid .27 3.5.1 Khái niệm chung anthraglycosid 27 3.5.2 Tính chất, định tính anthraglycosid dược liệu 28 3.5.3 Tác dụng, công dụng .29 3.5.4 Một số dược liệu chứa anthraglycosid 30 3.6 Dược liệu chứa flavonoid .30 3.6.1 Khái niệm chung flavonoid 30 3.6.2 Tính chất, định tính 31 3.6.3 Tác dụng, công dụng .31 3.6.4 Một số dược liệu chứa flavonoid .32 3.7 Dược liệu chứa coumarin 32 3.7.1 Khái niệm chung coumarin 32 3.7.2 Định tính 32 3.7.3 Tác dụng, công dụng .34 3.7.4 Một số dược liệu chứa coumarin 34 3.8 Dược liệu chứa tanin .34 3.8.1 Khái niệm chung tanin 34 3.8.2 Tác dụng, công dụng tanin 35 3.8.3 Một số dược liệu chứa tanin 35 3.9 Dược liệu chứa alkaloid 35 3.9.1 Khái niệm chung alkaloid 35 3.9.2 Tính chất định tính .36 3.9.3 Tác dụng, công dụng .39 3.9.4 Một số dược liệu chứa alkaloid .40 3.10 Dược liệu chứa tinh dầu .40 3.10.1 Khái niệm chung tinh dầu 40 3.10.2 Tính chất 42 3.10.3 Chiết xuất định lượng tinh dầu dược liệu 43 3.10.4 Tác dụng, công dụng .43 3.10.5 Một số dược liệu chứa tinh dầu .44 3.11 Nhựa .44 3.11.1 Khái niệm chung nhựa 44 3.11.2 Tác dụng, công dụng .45 3.11.3 Một số dược liệu chứa nhựa 45 3.12 Chất béo .45 3.12.1 Khái niệm chung chất béo 45 3.12.2 Tính chất lý hóa 46 3.12.3 Chiết xuất, định tính kiểm nghiệm 46 Bài 4: KỸ THUẬT KIỂM TRA CHẤT LƯỢNG DƯỢC LIỆU .48 4.1 Đại cương kiểm tra chất lượng dược liệu 48 4.2 Kỹ thuật kiểm tra chất lượng dược liệu 49 4.2.1 Kỹ thuật lấy mẫu kiểm nghiệm 49 4.2.2 Mơ tả đặc điểm bên ngồi 50 4.3 Một số ví dụ minh họa 56 4.3.1 Hòe (Nụ hoa) (Flos Styphnolobii jabonici imaturi) 57 4.3.2 Muồng trâu (Lá) (Folium Cassiae alatae) 60 4.3.3 Cam thảo (Rễ) (Radix Glycyrhizae) 64 Bài 1: ĐẠI CƯƠNG VỀ DƯỢC LIỆU MỤC TIÊU HỌC TẬP Trình bày định nghĩa môn học Kể sơ lược lịch sử phát triển dược liệu học giới nước ta Trình bày số ưu điểm xu hướng việc sử dụng thuốc có nguồn gốc từ dược liệu vị trí vai trị dược liệu ngành Y tế kinh tế nước ta Kể nội dung việc kế thừa phát huy Y Dược học cổ truyền chăm sóc bảo vệ sức khỏe nhân dân nước ta NỘI DUNG 1.1 Định nghĩa môn học Dược liệu học môn học nghiên cứu nguyên liệu làm thuốc có nguồn gốc tự nhiên từ thực vật động vật chủ yếu thuốc, vị thuốc 1.2 Sơ lược lịch sử phát triển dược liệu học Lịch sử môn dược liệu học gắn liền với lịch sử phát triển loài người Từ thời tiền sử, trình sinh sống, bên cạnh việc tìm kiếm thức ăn, người tìm hiểu, ghi nhận tác dụng, cơng dụng chữa bệnh cỏ độc như: cỏ làm dịu đau, làm lành vết thương, chữa bệnh chứng thông thường tác dụng bất lợi… Theo thời gian, kinh nghiệm kiểm chứng, sàng lọc, bổ sung, tích lũy đúc kết thành hệ thống lý luận lưu truyền cho đời sau 1.2.1 Sự phát triển dược liệu học phương Tây Vào khoảng 5000 năm trước công nguyên (TCN) người Ai cập cổ đại (Babilonians) biết sử dụng nhiều thuốc, vị thuốc Dược liệu ý nhiều đến hoạt chất chiết xuất tinh khiết hóa từ dược liệu như: berberin, rotundin, rutin, digitalin, reserpin vv… Những thầy thuốc Hy lạp cổ tiếng lịch sử tôn vinh như: Chú thích: Dược liệu tồn hay dùng vài phận hay vật Dược liệu bao gồm sản phẩm cỏ hay vật tiết như: gôm, nhựa, sáp, xạ hương… hay lấy từ cỏ động vật tinh dầu, dầu mỡ…Dược liệu học đề cập đến cỏ dùng làm gia vị, làm hương liệu mỹ phẩm, độc, nấm độc vv… • Hippocrate (460-377 TCN) tổ sư ngành y dược học giới Ông phổ biến kinh nghiệm sử dụng 200 thuốc vị thuốc nhiều cơng trình giải phẫu, sinh lý có giá trị • Aristoteles (384-322 TCN) Theophrast (370-287 TCN) nhà khoc học tự nhiên tiếng Những cơng trình ơng đặt móng cho nhà khoa học tự nhiên sau nghiên cứu động thực vật • Dioscorides (40-90 TCN), Ông viết tập sách “Dược liệu học” (De Materia medica) mơ tả 600 lồi có tác dụng chữa bệnh, có nhiều cịn sử dụng Y học đại ngày • Galen (129-199 SCN), Ơng mơ tả phương pháp bào chế thuốc có nguồn gốc động vật thực vật Galen cho chữa bệnh, thuốc mà phải quan tâm đến bệnh cảnh, tuổi, tình trạng sức khỏe người bệnh thời điểm dùng thuốc Ngày ngành Dược tơn Ơng bậc tiền bối ngành Trong nhiều kỷ, việc sử dụng thuốc phương Tây chủ yếu dựa kinh nghiệm Dioscorides, Galen v.v… ghi chép lưu truyền lại Đến kỷ thứ 15 (Thời phục hưng), Paracelus (1490-1541) nhận thấy tác dụng chữa bệnh thuốc phần tinh túy mà thơi, quan niệm sở cho việc nghiên cứu hoạt chất thuốc sau • Dale viết “Pharmocologia” vào năm 1700, đánh dấu thời điểm ngành Dược tách khỏi ngành Y • Linnaeus (1707-1778) đưa hệ thống phân loại danh pháp động thực vật • Cuối kỷ 18 Scheele – chiết xuất acid hữu chất khác từ cỏ Mở đầu cho việc nghiên cứu thành phần hóa học thuốc Friederich Serturner người chiết xuất Morphin từ nhựa thuốc phiện • Năm 1842 lần tổng hợp Diethyl ether chất gây mê, từ ngành Hóa tách dần khỏi ngành Dược liệu • Năm 1857 Schleiden phân biệt loại rễ Sarsaparilla khác cách quan sát so sánh khác cấu tạo tế bào nội bì chúng kính hiển vi mở đường cho việc kiểm nghiệm dược liệu kỹ thuật kính hiển vi • Năm 1929 Alexander Fleming chiết xuất Penicillin chất khác sinh từ nấm Penicillin notatum từ ngành vi sinh học hình thành Những tiến khoa học nửa cuối kỷ 20, làm cho dược liệu học phát triển mạnh mẽ đặc biệt khám phá thành phần hóa học tác dụng thuốc, vị thuốc 1.2.2 Sự phát triển dược liệu học phương Đơng Y học Trung hoa có lịch sử phát triển lâu đời, dựa sở lý luận triết học tôn giáo, tồn phát triển bền vững đến tận ngày Trong trình phát triển Y học Trung hoa chịu ảnh hưởng giao thoa văn hóa y học với nước láng giềng như: Triều tiên, Nhật bản, Việt nam, Tây tạng v.v… nước lớn khác như; Ấn độ, Ai cập, Ả rập Y học phương Tây Người Trung Hoa tiếp thu kinh nghiệm chữa bệnh, sử dụng dược liệu nước láng giềng Những kinh nghiệm dược liệu ngày trở thành phận Y học Trung hoa • Thời Hoàng Đế (2637 TCN), “Nội Kinh” sách tập hợp phương pháp chữa bệnh theo y lý Đơng phương • Lý Thời Trân (1518-1593) biên soạn “Bản thảo cương mục” vào năm 1596 phổ biến 12.000 thuốc phương thuốc có 1892 vị thuốc (1094 dược liệu, 444 động vật 354 khống vật), sách có giá trị khoa học thực bổ ích Y học Ấn Độ sớm phát triển, khoảng 4000-100 năm TCN kinh Vệ đà (Ayurveda) kiến thức y học sử dụng thuốc đề cập đến Ấn độ sử dụng nhiều dược liệu như: Ba gạc, tỏi, tiêu, gừng, thầu dầu, mè, đậu khấu, phụ tử, ngưu hoàng, rắn lục v.v… 1.2.3 Sự phát triển dược học cổ truyền Việt Nam Nền Y Dược học Nước ta có lịch sử phát triển lâu đời • Vào khoảng 4000 năm TCN, Thần Nông dạy cho dân sử dụng loại ngũ cốc, rau làm thực phẩm biết phân biệt, ghi nhận số cỏ có tác dụng chữa bệnh Chú thích: Thần nơng tổ tiên vua Hùng Thần Nông sinh Đế Minh, Đế Minh sinh Kinh Dương Vương, Kinh Dương Vương sinh Lạc Long Quân, Lạc Long Quân sinh vua Hùng • Vào thời Hồng Bàng (2879-257 TCN) tổ tiên ta biết nhuộm răng, nhai trầu để bảo vệ làm cho da dẻ hồng hào, uống chè vối giúp tiêu hóa dễ dàng, dùng gừng, hành, tỏi để làm gia vị để phòng chữa bệnh Cuối kỷ thứ III TCN, Nam Việt Giao Chỉ, nhiều vị thuốc ghi nhận như: Gừng, riềng, quế, trầm hương, hương bài, cánh kiến trắng, mật ong, sừng tê giác, cau, sử quân tử, ý dĩ, sắn dây, long nhãn, vải… • Từ 179 TCN đến 938 SCN thời kỳ Bắc thuộc, người Trung Hoa lấy nhiều thuốc Việt Nam trồng như: Ý dĩ, vải, nhãn, sử quân tử, nhục đậu khấu thu cống vật dược liệu như: Trầm hương, cánh kiến trắng, sừng tê giác v.v… thời kỳ Y học cổ truyền Việt Nam chịu nhiều ảnh hưởng y học cổ truyền Trung Hoa, kiến thức y học Việt Nam xâm nhập vào Y học Trung Hoa • Từ 938-1884 Nhà nước phong kiến Việt Nam độc lập trải qua triều đại: Ngô, Đinh, Lê, Lý, Trần, Hồ, Lê, Tây sơn, Nguyễn Các danh y có đóng góp to lớn cho y dược học cổ truyền nước ta như: • Minh Khơng thiền sư chữa khỏi bệnh điên cuồng, mọc đầy lơng, miệng la hét cho vua Lý Thần Tông (1136), cách tắm nước bồ hịn • Chu Văn An biên soạn “Y học yếu giải tập di biên” (1391) tổng kết 700 phương thuốc chữa bệnh • Tuệ Tĩnh chữa khỏi bệnh hậu sản cho hoàng hậu Tống Vương Phi nhà Minh phong “Đại y thiền sư” bị giữ lại quy y Trung Quốc không rõ năm Tuệ Tĩnh để lại tác phẩm có giá trị là: “Hồng Nghĩa giác tư y thư” “Nam Dược thần hiệu” Tư tưởng đạo Tuệ Tĩnh đường hướng Y học cổ truyền nước ta “Nam dược trị Nam nhân” Ông người mở đường xây dựng Y Dược học cổ truyền Việt Nam • Hải Thượng Lãn Ông (1720-1791), tên thật Lê Hữu Trác quê Hưng Yên, với “Hải thượng y tơng tâm lĩnh” 28 tập, 66 Ơng để lại kinh nghiệm quý báu, đúc rút qua nhiều hệ thầy thuốc cổ truyền nước ta Trung Hoa lưu truyền cho hậu Ông phát huy chủ trương “Nam dược trị Nam nhân” Tuệ Tĩnh, sưu tầm nhiều vị thuốc phổ biến cho nhân dân sử dụng Hải Thượng Lãn Ông coi “Đại y tôn” Việt Nam PHÁT HIỆN CÁC THÀNH PHẦN CỦA TẾ BÀO Hạt tinh bột: Thêm dung dịch iod (TT), xuất màu xanh lam hay xanh tím, đặt mẫu vật dung dịch glycerin – acid acetic, quan sát kính hiển vi phân cực thấy tượng phân cực chéo hạt tinh bột, tượng hạt tinh bột bị hóa hồ Hạt aleuron: Protid thường hòa tan dịch tế bào, ngâm vào hỗn hợp cồn – ether, protid kết tủa dạng aleuron Muốn xác định hạt aleuron cần phải loại chất béo ether (TT) hay ether dầu hỏa (TT) trước thử Thêm dung dịch iod (TT), hạt aleuron có màu nâu hay màu vàng nâu Thêm dung dịch thủy ngân (II) nitrat (TT), hạt aleuron có màu đỏ gạch Dầu béo, tinh dầu nhựa: Thêm thuốc thử Sudan III xuất màu đỏ da cam màu đỏ hay đỏ tía Tinh dầu hịa tan ethanol 90% (TT), dầu béo khơng hòa tan ethanol trừ dầu thầu dầu dầu Tinh thể inulin: Thêm dung dịch 1- naphthol 10% ethanol (TT), sau thêm acid sulfuric (TT), tinh thể inulin chuyển sang màu đỏ tía tan nhanh Tinh thể calci oxalat: Tinh thể oxalat calci có nhiều hình dạng khác như: hình kim (mạch mơn, rễ nhàu…), hình hạt cát (cà độc dược, vỏ canh ki na…), hình khối nhiều mặt (cam thảo, muồng trâu…), hình cầu gai (đại hồng, cà độc dược…) Tinh thể oxalat calci khơng hịa tan acid acetic lỗng (TT), tan acid hydrocloric lỗng (TT), khơng sủi bọt Hòa tan chậm acid sulfuric 50% (TT), sau để yên lúc xuất tinh thể calci sulfat có hình kim ngắn mập Tinh thể calci carbonat: Tinh thể calci carbonat hòa tan acid hydrocloric loãng (TT), sủi bọt Tinh thể silic: Silic khơng hịa tan dung dịch acid sulfuric 4.2.2.5 Định lượng độ ẩm, xác định độ tro, tỷ lệ tạp chất  ĐỊNH LƯỢNG ĐỘ ẨM TRONG DƯỢC LIỆU Tất dược liệu, sau phơi sấy khơ điều kiện bảo quản bình thường hấp phụ lượng nước định Tỷ lệ phần trăm lượng nước dược liệu gọi độ ẩm hay gọi độ thủy phần dược liệu Để bảo quản lâu, tránh mốc mọt biến đổi hoạt chất q trình bảo quản dược liệu 53 phải có độ ẩm khơng q giới hạn đó, khoảng độ ẩm gọi độ ẩm an tồn Với dược liệu thơng thường độ ẩm an tồn khoảng 12 – 13% Định lượng độ ẩm dược liệu để kiểm tra xem dược liệu có đạt tiêu chuẩn độ ẩm hay không Công việc cần thiết việc tính kết định lượng hay hiệu suất chiết xuất hoạt chất dược liệu Có thể xác định độ ẩm phương pháp: Phương pháp sấy Sấy phương pháp loại nước khỏi dược liệu cách làm cho nước bay điều kiện nhiệt độ áp suất định Thông thường, nước tách khỏi dược liệu cách sấy 105oC áp suất thường Phương pháp áp dụng với đa số dược liệu; nhiên khơng phù hợp với dược liệu có chứa hoạt chất dễ bay hơi, thăng hoa như: tinh dầu, coumarin,cafein… sấy nước tinh dầu bay dẫn tới không xác định xác lượng nước dược liệu Các dược liệu có chứa hoạt chất dễ bị phân hủy hay dễ chảy dính nhiệt độ cao (chất đường, gơm, nhựa, dầu béo…) Trong trường hợp này, ta sấy nhiệt độ thấp áp suất giảm dùng chất hút ẩm kết hợp cách kể Phương pháp chưng cất với dung môi Phương pháp chưng cất với dung môi thực hiên dụng cụ định lượng độ ẩm , nước tách khỏi dược liệu cách cất lôi với dung môi chọn lọc.Phương pháp áp dụng cho dược liệu, kể dược liệu có hoạt chất dễ bay thăng hoa Bộ dụng cụ định lượng độ ẩm - (A) Bình cầu dung tích 200 - 500ml - (B) Ống dẫn D - (C) Ống hứng đo nước có dung tích - 10ml khắc vạch tới 1/10ml - (D) Ống sinh hàn B C A  XÁC ĐỊNH ĐỘ TRO 54 Tro khối lượng chất vô cịn lại sau đốt cháy hồn tồn dược liệu Thường gặp tro nguyên tố K, Ca, Na, Si Các nguyên tốc khác Mg, Cu, Zn, Fe, Mn… thường gặp Trong dược liệu chất vơ có nguồn gốc: Nội sinh: Là chất có tế bào mô thực vật Những chất tham gia vào trình sinh lý chất cặn bã q trình sinh trưởng tích lũy lại muối CaCO3, CaC2O4 v.v… Cũng có chất khác tích lũy vài loài đặc biệt với hàm lượng cao nhiều so với khác, họ Poaceae chứa chiều silic Ngoại sinh: Là chất vô (đất cát đá, bụi bẩn, v.v…) lẫn vào trình thu hái, phơi sấy hay bảo quản dược liệu Các tạp chất làm cho hàm lượng Silic tro tăng cao Các loại độ tro thường xác định kiểm nghiệm dược liệu là: • Xác định tro toàn phần: Tro toàn phần khối lượng cắn lại sau nung lượng dược liệu (đã trừ độ ẩm) 450oC chén nung tới khối lượng không đổi (chén nung sấy khô tới khối lượng không đổi trước tiến hành) Các chất vơ cịn lại tro tồn phần đường tồn dạng carbonat hay oxyd - Độ tro tồn phần tính theo cơng thức: a X = ×100 P • X: độ tro tồn phần dược liệu (%) a: khối lượng tro cân (mg) P: khối lượng dược liệu đem thử trừ độ thủy phần (mg) Xác định tro không tan acid hydrocloric (HCl): Tro không tan acid hydrocloric (HCl) lượng cắn khơng tan cịn lại sau hịa tan nóng tro tồn phần acid hydrochloric lỗng • Tro sulfat dược liệu lượng cắn lại sau đốt cháy hoàn toàn dược liệu sau cho dược liệu tác dụng với acid sulfuric đậm đặc Mỗi dược liệu có độ tro giới hạn khoảng định, thường khoảng từ – 12% Một vài trường hợp, độ tro cao tới 15 – 18% Nếu dược liệu có độ tro toàn phần bất thường (tăng cao hay thấp so với quy định) phải nghĩ đến giả mạo dược liệu lẫn nhiều tạp chất Nếu dược liệu có độ tro khơng tan HCl cao bất thường so với quy định dược liệu lẫn nhiều đất cát 55 4.2.2.6 Định tính thành phần định lượng hoạt chất  XÁC ĐỊNH CÁC CHẤT CÓ ĐƯỢC TRONG DƯỢC LIỆU Chất chiết dược liệu dung mơi chất hịa tan dung mơi tách khỏi dược liệu điều kiện quy định Chất chiết không thiết phải hoạt chất dược liệu, thơng thường gồm tất chất (hoạt chất chất khác) tan dung môi sử dụng Tùy theo dung môi mà thành phần chất chiết thay đổi dẫn tới thay đổi kết định lượng Định lượng chất chiết dược liệu xác định hàm lượng phần trăm chất chiết điều kiện quy định, thường áp dụng cho dược liệu chưa có phương pháp định lượng hóa học hay sinh học thích hợp Dung mơi dùng xác định hàm lượng chất chiết thường nước, cồn Các dung môi khác như: ether, chloroform sử dụng Có hai phương pháp chiết sử dụng là: Phương pháp chiết nóng: Phương pháp chiết nóng áp dụng với chất khó tan dung mơi nhiệt độ thường, tan tốt dung môi nóng trường hợp dùng dung mơi nước hay cồn thấp độ, chiết nhiệt độ cao thường tạo nên dung dịch nhớt, khó lọc Phương pháp chiết lạnh: Phương pháp chiết lạnh thích hợp cho hoạt chất dễ tan dung môi nhiệt độ thường dược liệu dễ bị trương nở tạo thành dung dịch keo khó khăn lọc như: tinh bột, chất nhày, pectin… Tùy trường hợp mà Dược điển quy định sử dụng phương pháp chiết thích hợp  CHIẾT XUẤT ĐỊNH TÍNH VÀ ĐỊNH LƯỢNG CÁC HOẠT CHẤT TRONG DƯỢC LIỆU Dựa vào tính chất nhóm hoạt chất mà Dược điển quy định sử dụng phương pháp chiết xuất, phản ứng định tính phương pháp định lượng thích hợp (Xem phần thực hành, đọc lại hợp chất thường gặp dược liệu xem phần phụ lục 12 DĐVN IV từ trang PL 231 – PL 249) 4.3 Một số ví dụ minh họa (TRÍCH DẪN TRONG CÁC CHUYÊN LUẬN DƯỢC LIỆU CỦA DĐVN IV) 56 4.3.1 Hòe (Nụ hoa) (Flos Styphnolobii jabonici imaturi) Nụ hoa phơi hay sấy nhẹ đến khơ Hịe (Styphnolobium jabonicum (L.) Schott; Syn Sophora japonica L.), họ Đậu (Fabaceae) Mơ tả Nụ hoa hình trứng có cuống nhỏ, ngắn đầu nhọn, dài – mm, rộng – mm, màu vàng xám Hoa chưa nở dài 0,4 – 1,0 cm, rộng 0,2 – 0,4 cm Đài hoa hình chng màu vàng xám, dài 1/2 đến 2/3 chiều dài nụ hoa, phía xẻ thành nơng Hoa chưa nở dài từ – 10 mm Cánh hoa chưa nở màu vàng Mùi thơm, vị đắng Bột Có nhiều hạt phấn hoa hình cầu, đường kính 16µm, có lỗ rãnh, bề mặt có nếp nhăn dạng mắt lưới Lông che chở đa bào gồm – tế bào, tế bào phía đầu dài thn nhọn, tế bào chân ngắn Mảnh biểu bì cánh hoa gồm tế bào nhiều cạnh nhiều vân nhỏ, sít Mảnh biểu bì đài hoa gồm tế bào nhiều cạnh có mang lỗ khí (kiểu thập tự) lông che chở Mảnh mạch xoắn SOI BỘT HOA HỊE (Flos Styphnolobii japonici) Lơng che chở đơn bào Lông che chở đa bào Hạt phấn hoa có lỗ nẩy mầm Mảnh đài hoa mang lông che chở Mảnh cánh hoa mang lông che chở lỗ khí kiểu vịng bào Mạch vạch, mạch xoắn 57 Định tính A Lấy 0,5 g bột dược liệu, thêm 10 ml ethanol (TT) Đun sôi phút, để nguội, lọc Dịch lọc (dung dịch A) dùng làm phản ứng sau dịch chấm sắc ký lớp mỏng B Lấy ml dung dịch A pha loãng với 10 ml ethanol 90% (TT) chia vào ống nghiệm: Ống 1: Thêm giọt acid hydrocloric (TT) bột magnesi (TT), dung dịch chuyển dần từ màu vàng nhạt sang màu hồng tím đỏ Ống 2: Thêm giọt dung dịch natri hydroxyd 20% (TT), xuất tủa vàng cam, tủa tan lượng dư thuốc thử Ống 3: Thêm giọt dung dịch sắt (III) clorid 5% (TT), dung dịch có màu xanh rêu C Nhỏ - giọt dung dịch A lên tờ giấy lọc, để khô, soi đèn tử ngoại (ở bước sóng 366 nm) quan sát thấy huỳnh quang màu vàng nâu D Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel GF254 Dung môi khai triển: n- butanol- acid acetic- nước (4: 1: 5) Dung dịch thử: Dung dịch A Dung dịch chuẩn: Hoà tan rutin ethanol 90% (TT) để dung dịch có chứa mg/ml Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 20 µl dung dịch Sau triển khai xong, để khơ mỏng nhiệt độ phịng Quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 366 nm, sắc ký đồ dung dịch thử phải có vết phát quang màu nâu giá trị Rf với vết rutin sắc ký đồ dung dịch đối chiếu Hiện màu amoniac đậm đặc (TT), sắc ký đồ dung dịch thử phải có vết màu vàng có giá trị Rf với vết rutin chuẩn (Rf: 0,5 - 0,54) sắc ký đồ dung dịch đối chiếu Độ ẩm Không 12 % (Phụ lục 12.13) Tro tồn phần Khơng q 10% (Phụ lục 9.8) Tạp chất (Phụ lục 12.11) Tỷ lệ hoa nở: Không 10% Tỷ lệ hoa sẫm màu: Không 1% 58 Các phận khác cây: Không 2% Định lượng Dung dịch chuẩn: Cân xác khoảng 0,2 g rutin chuẩn sấy khô (trong chân không) tới khối lượng không đổi, cho vào bình định mức 100 ml Hồ tan 70 ml methanol (TT) cách làm ấm cách thuỷ Để nguội, thêm methanol (TT) đủ 100 ml, lắc kỹ Lấy xác 10 ml dung dịch cho vào bình định mức 100 ml khác Thêm nước tới vạch, lắc kỹ (mỗi ml chứa 0,2 mg rutin khan) Xây dựng đường cong chuẩn: Lấy xác 1,0; 2,0; 3,0; 4,0; 5,0; 6,0 ml dung dịch chuẩn cho vào bình định mức 25 ml riêng biệt, thêm nước ml bình thêm ml dung dịch natri nitrit 5% (TT), trộn kỹ Để yên phút, thêm ml dung dịch nhôm nitrat 10% (TT), trộn kỹ, lại để yên phút Thêm 10 ml dung dịch natri hydroxyd 10% (TT), thêm nước tới vạch, trộn kỹ để yên 15 phút Đo độ hấp thụ bước sóng 500 nm (Phụ lục 4.1) Vẽ đường cong chuẩn, lấy độ hấp thụ trục tung, nồng độ trục hoành Dung dịch thử: Cân xác khoảng g bột dược liệu thô sấy khô 60oC cho vào bình Soxhlet Thêm 120 ml ether (TT), chiết tới dịch chiết không màu Để nguội gạn bỏ ether Thêm 90 ml methanol (TT) chiết tới dịch chiết khơng cịn màu Chuyển dịch chiết vào bình định mức 100 ml, rửa bình chiết lượng nhỏ methanol cho tiếp vào bình định mức Thêm methanol vạch lắc kỹ Lấy xác 10 ml dung dịch cho vào bình định mức 100 ml, thêm nước tới vạch trộn kỹ Lấy xác ml cho vào bình định mức 25 ml, thêm ml nước thêm ml dung dịch natri nitrit 5% (TT), trộn kỹ Để yên phút, thêm ml dung dịch nhôm nitrat 10% (TT), trộn kỹ, để yên phút Thêm 10 ml dung dịch natri hydroxyd 10% (TT), thêm nước tới vạch, trộn kỹ để yên 15 phút Đo độ hấp thụ bước sóng 500 nm (Phụ lục 4.1) Tính khối lượng rutin (µg) dung dịch thử từ nồng độ đọc đường cong chuẩn tính hàm lượng phần trăm rutin dược liệu Hàm lượng rutin nụ hoa H khơng 20% Chế biến Khi trời khô (thường vào buổi sáng), ngắt chùm hoa chưa nở, tuốt lấy nụ, loại bỏ phận khác cây, phơi nắng sấy nhẹ khô Bảo quản Để nơi khơ, tránh mốc, mọt 59 Tính vị, qui kinh Khổ, hàn Vào kinh can, đại tràng Công năng, chủ trị Lương huyết huyết, can tả hoả Chủ trị: Các chứng chảy máu, chảy máu cam, ho máu, băng huyết, đại tiểu tiện máu, đau đầu, chóng mặt, mắt đỏ, dễ cáu gắt Cách dùng, liều lượng Ngày – 12 g, dạng thuốc sắc 4.3.2 Muồng trâu (Lá) (Folium Cassiae alatae) Lá chét phơi hay sấy khô Muồng trâu (Senna alata (L.) Roxb = Cassia alata L.), họ Đậu (Fabaceae) Mô tả Lá kép lông chim, dài 30 - 40 cm, gồm 8-12 đơi chét hình trứng hình bầu dục tròn hai đầu, chét dài - 13 cm, rộng 2,5 - cm, to dần phía Cuống ngắn phình to gốc Gân hình lơng chim Mặt màu xanh đậm, mặt màu xanh nhạt hơn, hai mặt nhẵn Mép nguyên Vi phẫu Gân có mặt phẳng, mặt lồi Biểu bì biểu bì phần gân phần phiến có lơng che chở đơn bào ngắn, đầu nhọn, mặt mật độ lông dày Riêng phần phiến có u lồi cutin lỗ khí hai mặt Các tế bào mơ dày góc xếp thành đám nằm sát biểu bì phần gân Một cung libe-gỗ nằm gân lá, hai đầu cung cuộn vào phía khơng giáp Libe nằm thành đám nhỏ liên tục, gồm tế bào nhỏ thành nhăn nheo, xen kẽ với đám libe mơ mềm libe gồm tế bào to hơn, trịn, vách mỏng Gỗ tập trung thành đám dày tế bào có thành hóa gỗ vùng mặt cuống tạo vịng cung gồm bó gỗ hình tam giác mặt vùng cuống Phía ngịai cung libe-gỗ có vịng mơ cứng bao quanh thành vịng kín hình tim vùng gân lá, gồm tế bào có thành dày Phía cung libe-gỗ có mơ mềm đặc gồm tế bào thành mỏng hình đa giác Tinh thể calci oxalat hình lập phương nằm tế bào mô mềm ven theo cung mô cứng Phần mô mềm gồm tế bào to, thành mỏng, vùng phiến tạo khuyết hình xoan 60 Phần phiến có hai lớp mơ giậu, chiếm ½ bề dày phiến Bột Bột màu xanh, chất xốp nhẹ Soi kính hiển vi thấy: mảnh biểu bì biểu bì có tế bào thành mỏng mang lơng che chở đơn bào ngắn, đầu nhọn, lỗ khí kiểu song bào u lồi cutin Mảnh biểu bì cuống gân có mang lơng che chở đơn bào Mảnh lông đơn bào bị gẫy, mảnh mô mềm Sợi kèm tinh thể calci oxalat hình khối lập phương riêng lẻ Mảnh mạch điểm, mạch mạng, mạch xoắn, mạch vạch SOI BỘT LÁ MUỒNG TRÂU (Folium Cassiae) Lông che chở đơn bào Biểu bì có ụ lồi cutin lơng che chở đơn bào Mảnh biểu bì phiến mang lỗ khí cutin lồi Tinh thể calci oxalat hình khối Mảnh mạch mạng Mạch vạch Sợi cứng có kèm tinh thể calci oxalat Định tính A Lấy g bột lá, thêm 10 ml dung dịch acid sulfuric 25% (TT) đun sôi phút, để nguội, lọc vào bình gạn Cho vào dịch lọc ml cloroform (TT), lắc Để lắng, gạn lấy lớp cloroform (TT), thêm ml dung dịch natri hydroxyd 10% (TT), lắc, để lắng, lớp kiềm có màu hồng đỏ B Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel G Dung môi khai triển: Cloroform- aceton - benzen (4 : : 3) Dung dịch thử: Lấy g bột đun cách thủy với 20 ml ethanol 96% (TT) 30 phút, để nguội, lọc, để bay đến cắn khô Cắn thêm vào 10 ml nước ml dung dịch acid hydrocloric 10% (TT) đun cách thủy 30 phút, để nguội sau lắc với 20 ml ether ethylic (TT) lần, dịch ether bay đậm đặc làm dung dịch thử Dung dịch đối chiếu: Pha dung dịch chrysophanol 0,1% ethanol 96% (TT) Nếu chất đối chiếu, dùng g bột Muồng trâu (mẫu chuẩn), chiết mẫu thử Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 10 µl dung dịch thử dung dịch đối chiếu Sau triển khai, để khơ mỏng khơng khí, quan sát ánh sáng tử 61 ngoại bước sóng 365 nm amoniac Trên sắc ký đồ dung dịch thử phải có vết có màu sắc Rf với vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu Độ ẩm Không 13% (Phụ lục 12.13) Tro tồn phần Khơng q 5% (Phụ lục 9.8) Tro không tan dung dịch acid Không 0,7% (Phụ lục 9.7) Tạp chất Không 0,5% (Phụ lục 12.11) Định lượng Lấy 0,5 g bột dược liệu cho vào bình nón 100 ml Thêm ml acid acetic băng (TT) Đun hỗn hợp 20 phút với ống sinh hàn ngược cách thủy sôi Để nguội, thêm vào bình nón 40 ml ether ethylic (TT) đun hồi lưu cách thủy 15 phút Để nguội, lọc qua bơng vào bình gạn 250 ml, rửa 10 ml ether ethylic Cho trở lại vào bình nón, lặp lại cách chiết lần, lần dùng 10 ml ether ethylic (TT) đun hồi lưu cách thủy với nước sinh hàn ngược làm lạnh nước đá 10 phút Để nguội, lọc qua bơng Tráng bình nón 10 ml ether ethylic (TT), lọc qua Tập trung dịch lọc ether ethylic vào bình gạn Thêm cẩn thận 50 ml dung dịch kiềm – amoniac (TT) vào dịch chiết ether ethylic đựng bình gạn, lắc phút Sau hỗn hợp phân lớp hoàn toàn, gạn lớp nước màu đỏ suốt vào bình định mức 250 ml Tiếp tục chiết lớp ether lần, lần với 40 ml dung dịch kiềm – amoniac (TT) Tập trung dịch chiết kiềm vào bình định mức thêm dung dịch kiềm – amoniac tới vạch Hút 25 ml dung dịch thu cho vào bình nón đun nóng 15 phút cách thủy với ống sinh hàn ngược Để nguội, đo mật độ quang bước sóng 520 nm (phụ lục 4.1), so sánh với mẫu trắng dung dịch kiềm – amoniac Nồng độ anthranoid dung dịch cần đo biểu thị 1,8 dihydro anthraquinon xác định đường cong chuẩn xây dựng theo cobalt clorid (TT) Để có đường cong chuẩn, pha dãy dung dịch cobalt clorid (CoCl2 6H2O) có nồng độ từ 0,2-5% đo mật độ quang dung dịch bước sóng 520 nm (phụ lục 4.1) Trên 62 trục tung ghi mật độ quang đo Trên trục hoành ghi nồng độ dẫn chất anthranoid tương ứng với nồng độ cobalt clorid, tính mg 100 ml Theo quy ước, mật độ quang dung dịch cobalt clorid 1% mật độ quang 0,36 mg 1,8 dihydro anthraquinon 100 ml dung dịch kiềm – amoniac Hàm lượng phần trăm dẫn chất anthranoid so với dược liệu tính theo cơng thức: X% = 250 × c 10 × a (100 − h) c: Nồng độ dẫn chất anthranoid mg/100 ml tính theo đường cong chuẩn a: Khối lượng dược liệu (g) h: Độ ẩm dược liệu (%) Dược liệu phải chứa 0,2% dẫn chất anthranoid biểu thị 1,8 dihydro anthraquinon Ghi chú: Dung dịch kiềm – amoniac: Lấy g natri hydroxyd (TT) thêm ml amoniac đậm đặc (TT), thêm nước vừa đủ 100 ml Chế biến Thu hoạch vào mùa hạ, hái lấy lá, phơi âm can, sấy nhẹ hay đến khô Bảo quản Để nơi khô, mát, tránh ánh sáng Tính vị, quy kinh Tân, ơn Vào kinh can, đại trường Công năng, chủ trị Nhuận tràng, lợi gan mật, tiêu độc, tiêu viêm, sát trùng, ngứa Chủ trị: Táo bón (dùng sống), viêm gan, da vàng (dùng thc khơ) Dùng ngồi chữa hắc lào, viêm da thần kinh, ngứa lở Cách dùng, liều lượng Ngày dùng - g (nhuận tràng), dạng thuốc sắc Dùng ngồi: Lượng thích hợp, rửa sạch, giã nát lá, lấy nước cốt bôi, ngày lần, lấy tươi vò, chà sát vào chỗ bị hắc lào Kiêng kỵ Phụ nữ có thai khơng nên dùng 63 4.3.3 Cam thảo (Rễ) (Radix Glycyrhizae) Rễ còn vỏ hoặc đã cạo lớp bần, được phơi hay sấy khơ ba lồi Cam thảo Glycyrrhiza uralensis Fisch., Glycyrrhiza inflata Bat hoặc Glycyrrhiza glabra L.; họ Đậu (Fabaceae) Mô tả Đoạn rễ hình trụ, thẳng hay cong queo, thường dài 20-30 cm, đường kính 0,5-2,5 cm Cam thảo chưa cạo lớp bần bên ngoài có màu nâu đỏ vết nhăn dọc Cam thảo đã cạo lớp bần có màu vàng nhạt Khó bẻ gãy, vết bẻ màu vàng nhạt có nhiều xơ dọc Mặt cắt ngang có nhiều tia ruột từ trung tâm tỏa ra, trơng giống nan hoa bánh xe Mùi đặc biệt, vị khé cổ Vi phẫu Lớp bần dày gồm tế bào hình chữ nhật Mơ mềm vỏ có chứa nhiều hạt tinh bột Tia ruột có 3-5 hàng tế bào loe rộng thành hình phễu vùng libe Libe hình nón chứa đám sợi thành dày tinh thể calci oxalat Gỗ gồm mạch gỗ to, sợi gỗ mơ mềm gỗ hóa gỗ Trong có tủy nhỏ Bột Màu vàng nhạt đến màu vàng nâu Soi kính hiển vi thấy các mảnh mơ mềm với tế bào có thành mỏng chứa nhiều hạt tinh bột Hạt tinh bột đứng riêng rẽ, hình trứng hay hình cầu có đường kính 2- 20 μm Sợi gỗ màu vàng, có thành dày, thường kèm theo tế bào có tinh thể calci oxalat hình lăng trụ Mảnh mạch điểm màu vàng, mảnh bần màu nâu đỏ SOI BỘT CAM THẢO (Radix Glycyrrhizae) Mảnh bần màu nâu đỏ Mảnh mô mềm chứa nhiều hạt tinh bột Sợi gỗ màu vàng, kèm tinh thể calci oxalat Hạt tinh bột hình cầu - 20µm Mạch mạng màu vàng Mạch chấm đồng tiền Tinh thể calci oxalat hình khối rời 64 Định tính A Nhỏ dung dịch amoniac (TT) lên bột dược liệu có màu vàng tươi, thêm acid sulfuric 80% (TT) màu vàng tươi B Lấy 0,5 g bột Cam thảo, thêm 50 ml ethanol 70% (TT), đun nóng cách thủy 15 phút Lọc nóng qua bơng, lấy dịch lọc để làm các phản ứng sau: Lấy 10 ml dịch lọc vào chén sứ, cô cách thủy đến khô Thêm vào cắn ml anhydrid acetic (TT) ml cloroform (TT), khuấy kỹ, lọc lấy phần dung dịch trong, cho vào ống nghiệm khô Thêm từ từ theo thành ống nghiệm khoảng ml acid sulfuric (TT) Giữa lớp chất lỏng có vòng ngăn cách màu nâu đỏ, lớp dung dịch phía có màu vàng nâu sẫm Lấy - ml dịch lọc cho vào ống nghiệm, thêm một ít bột magnesi kim loại và 0,5 ml acid hydrocloric (TT) sẽ xuất hiện màu đỏ sẫm C Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel G hoạt hóa 105 oC Dung môi khai triển: Cloroform - methanol - n-hexan (7 : : 2) Dung dịch thử: Lấy khoảng 0,5 g bột dược liệu, thêm 20 ml ether ethylic (TT), đun hồi lưu cách thủy giờ, gạn bỏ dịch ether Thêm vào bã ml acid hydrocloric (TT) 20 ml cloroform (TT), đun hổi lưu giờ, để nguội, lọc lấy dịch chiết Bốc dịch chiết đến cắn, thêm vào cắn ml methanol (TT) Dung dịch đối chiếu: Lấy acid glycyrrhetic, hòa tan methanol (TT) để dung dịch có nồng độ khoảng mg/ml Nếu khơng có acid glycyrrhetic, dùng 0,5 g bột Cam thảo (mẫu chuẩn) chiết mẫu thử Cách tiến hành: Trên một mỏng chấm riêng biệt μl dung dịch Sau 65 khai triển xong, lấy mỏng để khơ ngồi khơng khí, phun dung dịch acid sulfuric 10% methanol (TT), sấy mỏng 105 oC phút Trên sắc ký đồ dung dịch thử phải có vết màu cùng giá trị R f với vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu Độ ẩm Khơng q 12% (Phụ lục 9.6) Tro tồn phần Không 6% rễ cạo vỏ; không 10% rễ không cạo vỏ (Phụ lục 7.6) Tro không tan acid hydrocloric Không 2,5% (Phụ lục 9.7) Tạp chất Không 1% (Phụ lục 12.11) Định lượng Cân xác khoảng 10 g bột dược liệu vào bình nón dung tích 250 ml Thêm 100 ml ethanol 20% (TT), đun cách thủy sôi 30 phút Để lắng, gạn lấy dịch chiết Chiết tiếp lần nữa, lần với 50 ml ethanol 20% (TT) Tập trung dịch chiết vào bình nón dung tích 250 ml, thêm 30 ml ethanol (TT), để yên qua đêm Lọc, cô dịch lọc cách thủy sôi đến hết ethanol, để nguội Thêm 50 ml nước cất, ml acid hydrocloric (TT), khuấy Đặt hỗn hợp vào nước đá tan 30 phút, gạn bỏ lớp nước, thu kết tủa Hòa kết tủa với 10 ml ethanol (TT), lọc qua giấy, rửa giấy lọc với ethanol (TT) tới nước rửa hết màu vàng Tập trung tất dịch ethanol vào cớc cân bì, bốc cách thủy đến cắn, sấy cắn 105 oC Lấy ra, để nguội bình hút ẩm Cân và tính kết Hàm lượng cắn chứa acid glycyrrhizic khơng 6% tính theo dược liệu khô kiệt Chế biến Sau đào lấy rễ, xếp thành đống lên men làm cho rễ có màu vàng sẫm hơn, phơi sấy khơ Bào chế Lấy rễ Cam thảo, phun nước cho mềm, thái phiến, phơi sấy khơ Chích Cam thảo: Lấy Cam thảo thái phiến, đem tẩm mật (cứ kg Cam thảo, dùng 200 g mật, thêm 200 g nước đun sôi), vàng thơm 66 Bảo quản Để nơi khơ, mát, tránh sâu mọt Tính vị, quy kinh Cam, bình Vào kinh tâm, phế, tỳ, vị thông 12 kinh Công năng, chủ trị Kiện tỳ ích khí, nhuận phế ho, giải độc, thống, điều hồ tác dụng thuốc Chích Cam thảo: Bổ tỳ, ích khí, phục mạch Chủ trị: Tỳ vị hư nhược, mệt mỏi yếu sức, hoá đờm ho, đánh trống ngực, mạch kết đại (mạch dừng), loạn nhịp tim Sinh cam thảo: Giẩi độc tả hoả Chủ trị: Đau họng, mụn nhọt, thai độc Cách dùng, liều luợng Ngày dùng - 12 g, dạng thuốc sắc bột Kiêng kỵ Khơng dùng chung với vị Đại kích, Nguyên hoa, Hải tảo, Cam toại TÀI LIỆU THAM KHẢO • Đỗ Tất Lợi - Cây thuốc vị thuốc Việt Nam – Nhà xuất khoa học & kỹ thuật 1991 • Bộ Y tế - Dược điển Việt Nam IV – NXB Y học Hà Nội 2009 • Phạm Hồng Hộ - Câycó vị thuốc Việt Nam – NXB Trẻ 2006 • Võ Văn Chi.- Sách tra cứu tên cỏ Việt Nam – NXB Giáo Dục 2007 • Viện Dược liệu - Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam I, II – NXB Khoa học & Kỹ thuật Hà Nội • Bộ y tế - Dược liệu học – NXB Y học 2011 • Giáo trình “Phương pháp nghiên cứu dược liệu” – Bộ môn Dược liệu – Trường Đại học Y Dược TP HCM 2004 67