Đang tải... (xem toàn văn)
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y ĐỖ THU THẢO ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CHỐNG HUYẾT KHỐI CỦA BÀI THUỐC CỬU VỊ KHƯƠNG HOẠT THANG GIA GIẢM TRÊN ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y ĐỖ THU THẢO ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CHỐNG HUYẾT KHỐI CỦA BÀI THUỐC CỬU VỊ KHƯƠNG HOẠT THANG GIA GIẢM TRÊN ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC HÀ NỘI - 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y ĐỖ THU THẢO ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CHỐNG HUYẾT KHỐI CỦA BÀI THUỐC CỬU VỊ KHƯƠNG HOẠT THANG GIA GIẢM TRÊN ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC Cán hướng dẫn: Ths Bùi Thị Bích Vân HÀ NỘI - 2022 LỜI CẢM ƠN Sau thời gian dài học tập Học viện Quân y, giúp đỡ Nhà trường Phịng, Ban, Bộ mơn Học viện Viện Đào tạo Dược, đến tơi hồn thành chương trình học tập Tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Đảng ủy - Ban Giám đốc Học viện Viện Đào tạo Dược, Phòng Đào tạo, Bộ môn Dược lý - Viện Đào tạo Dược tạo điều kiện thuận lợi cho thực hồn thành khóa luận Tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc đến Thạc sĩ Bùi Thị Bích Vân, người Thầy tận tình truyền đạt kiến thức cho tôi, động viên giúp đỡ trực tiếp hướng dẫn tơi q trình học tập, nghiên cứu hồn thành khóa luận Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Thầy, Cơ tồn thể Cán bộ, Nhân viên Viện Đào tạo Dược, đặc biệt Bộ môn Dược lý ln ln nhiệt tình giúp đỡ, hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi cho trình học tập, nghiên cứu để tơi hồn thành khóa luận Tôi xin trân trọng cảm ơn Thầy Cô, Nhà khoa học Hội đồng chấm khóa luận dành nhiều thời gian ý kiến q báu q trình hồn thiện bảo vệ khóa luận Tơi vơ biết ơn chăm sóc, động viên gia đình, người thân u tôi, luôn bên cạnh chia sẻ với điều sống Tôi trân trọng cảm ơn quan tâm giúp đỡ tình cảm quý báu bạn bè, đồng nghiệp dành cho Hà Nội, ngày 12 tháng 07 năm 2022 Học viên Đỗ Thu Thảo MỤC LỤC Trang TRANG PHỤ BÌA LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁCH HÌNH VẼ, BIỂU ĐỒ DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG - TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ BÀI THUỐC CỬU VỊ KHƯƠNG HOẠT THANG GIA GIẢM 1.1.1 Khương hoạt 1.1.2 Phòng phong 1.1.3 Xuyên Khung 1.1.4 Sinh địa 1.1.5 Cam thảo 1.1.6 Thương truật 11 1.1.7 Quế chi 13 1.1.8 Bạch 15 1.1.9 Hoàng cầm 16 1.1.10 Kim ngân 18 1.1.11 Cát cánh 19 1.1.12 Bách Bộ 21 1.2 HUYẾT KHỐI 22 1.2.1 Định nghĩa 22 1.2.2 Phân loại 22 1.2.3 Các mơ hình gây huyết khối thực nghiệm 23 1.2.4 Phòng điều trị huyết khối 24 1.3 CÁC XÉT NGHIỆM ĐÔNG MÁU CƠ BẢN VÀ Ý NGHĨA 28 LÂM SÀNG 1.3.1 Xét nghiệm thời gian thrombin (TT) 28 1.3.2 Thời gian thromboplastin phần hoạt hóa (APTT: 28 Activited Partial Thromboplastin Time) 1.3.3 Thời gian Prothrombin (Prothrombin Time: PT) (thời gian 29 Quick) 1.3.4 Định lượng Fibrinogen 29 CHƯƠNG – NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 31 NGHIÊN CỨU 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 31 2.1.1 Chế phẩm nghiên cứu 31 2.1.2 Động vật nghiên cứu 32 2.1.3 Thiết bị nghiên cứu 33 2.1.4 Hóa chất nghiên cứu 34 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 2.2.1 Phương pháp nghiên cứu tác dụng chống huyết khối 34 2.2.2 Xử lý số liệu 36 2.3 ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU 36 CHƯƠNG – KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN 37 3.1 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ CHIỀU DÀI HUYẾT KHỐI ĐUÔI 37 CHUỘT 3.2 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ CÁC CHỈ SỐ ĐÔNG MÁU 40 3.2.1 Định lượng fibrinogen 40 3.2.2 Chỉ số prothrombin time (PT) 41 3.2.3 Chỉ số thrombin time (TT) 42 3.3 BÀN LUẬN 42 3.3.1 Chế phẩm nghiên cứu 42 3.3.2 Động vật nghiên cứu 43 3.3.3 Mơ hình gây huyết khối K-carrageenan 43 3.3.4 Thuốc chứng dương 45 3.3.5 Tác dụng chống huyết khối thuốc Cửu Vị Khương 45 hoạt thang gia giảm KẾT LUẬN 47 KIẾN NGHỊ 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO 49 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Tên bảng Các thành phần thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm Trang 3.1 Kết đo chiều dài huyết khối đuôi chuột thời điểm 24h 37 3.2 Kết đo chiều dài huyết khối đuôi chuột thời điểm 48h 38 3.3 Kết so sánh chiều dài huyết khối đuôi chuột thời điểm 24h 48h 39 3.4 Kết đánh giá nồng độ fibrinogen 41 3.5 Kết đánh giá chi số PT 41 3.6 Kết đánh giá số TT 42 DANH MỤC CÁC HÌNH, BIỂU ĐỒ Hình, biểu đồ 1.1 Khương hoạt Tên hình, biểu đồ Trang 1.2 Phịng phong 1.3 Xuyên khung 1.4 Sinh địa 1.5 Cam thảo 1.6 Thương truật 11 1.7 Quế chi 13 1.8 Bạch 15 1.9 Hoàng cầm 16 1.10 Kim ngân 18 1.11 Cát cánh 19 1.12 Bách 21 1.13 Cơ chế tác động thuốc kháng đông hệ 27 2.1 Cao lỏng thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm 31 2.2 Động vật nghiên cứu 33 2.3 Thiết bị nghiên cứu 33 2.4 Sơ đồ phương pháp nghiên cứu 35 3.1 So sánh chiều dài huyết khối đuôi chuột thời điểm 24h 48h 40 DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu APTT Giải nghĩa Activited Partial Thromboplastin tromboplastin phần hoạt hóa) AVK Antivitamin K (kháng vitamin K) DPPH 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl Time (thời gian DIC Disseminated Intravasscular Coagulation (đông máu rải rác lòng mạch) HCl Acid Hydrochloric HUVEC Human Primary Umbilical Vein Endothelial Cell (tế bào nội mô tĩnh mạch rốn người) HIV Human Immunodeficiency Virus (virus gây suy giảm miễn dịch người) HSV Virus herpes simplex (virus hợp bào hô hấp) LPS Lipopolysaccharid NC Nghiên cứu NO Nitric Oxide NOAC Novel oral anticoagulant (thuốc chống đông đường uống hệ mới) FDP Fructose-1,6-Diphosphate FIB Fibrinogen PT Prothrom time (thời gian prothrombin) TLCT Trọng lượng thể TLPT Trọng lượng phân tử TT Thrombin time (thời gian thrombin) - So sánh lô dùng thuốc nghiên cứu, chiều dài huyết khối đuôi chuột lô dùng liều cao nhỏ khơng có ý nghĩa thống kê so với lô dùng liều thấp (p > 0,05) Thuốc nghiên cứu có tác dụng ngăn chặn hình thành huyết khối khoảng thời gian 24h đầu sau gây huyết khối K- carragenan Aspirin chưa thể rõ tác dụng ngăn cản hình thành huyết khối giai đoạn Bảng 3.2 Kết đo chiều dài huyết khối đuôi chuột thời điểm 48h Lô nghiên cứu Chiều dài đuôi (cm) Chiều dài huyết khối (cm) % huyết khối Lơ mơ hình (1) 15,86 ± 0,41 13,58 ± 1,40 85,61 ± 8,68 Chứng aspirin (2) 15,69 ± 0,38 11,34 ± 1,36 72,26 ± 7,62 NC liều (3) 15, 72 ± 0,36 11,12 ± 1,46 70,75 ± 7,13 NC liều (4) 15,81 ± 0,45 10,97 ± 1,32 69,42 ± 7,01 p > 0,05 p3,4-1 < 0,05; p2-1 < 0,05; p3,4-2 > 0,05; p3-4 > 0,05 Nhận xét: - Chiều dài đuôi chuột lơ khơng có khác biệt (p > 0,05) - Lô aspirin chiều dài huyết khối đuôi chuột thời điểm 48h nhỏ có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) so với lơ mơ hình - Ở hai lô dùng thuốc NC, chiều dài huyết khối đuôi chuột thời điểm 48 h nhỏ có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) so với lô mơ hình 38 - So sánh lơ dùng thuốc nghiên cứu, chiều dài huyết khối đuôi chuột lơ dùng liều cao nhỏ khơng có ý nghĩa thống kê so với lô dùng liều thấp (p > 0,05) Bảng 3.3 Kết so sánh chiều dài huyết khối đuôi chuột thời điểm 24h 48h Lô nghiên cứu Chiều dài huyết khối (cm) thời điểm 24h Chiều dài Độ dài huyết khối phát huyết khối triển khoảng thời (cm) thời gian 24-48h điểm 48h Lơ mơ hình (1) 11,62 ± 1,34 13,58 ± 1,40 1,95 ± 0,71 Chứng aspirin (2) 11,28 ± 1,46 11,34 ± 1,36 0,06 ± 0,02 NC liều (3) 10,95 ± 1,63 11,12 ± 1,46 0,17 ± 0,09 NC liều (4) 10,82 ± 1,19 10,97 ± 1,32 0,15 ± 0,08 p - - p3,4-1 < 0,05; p2-1 < 0,01; p3,4-2 < 0,05; p3-4 > 0,05 39 16 14 Độ dài (cm) 12 13.58 11.62 11.28 11.34 10.95 11.12 10.82 10.97 10 1.95 0.06 0.17 0.15 Chứng aspirin NC liều (3) NC liều (4) Lơ mơ hình Lơ nghiên cứu Chiều dài huyết khối 24h Chiều dài huyết khối 48h Độ dài huyết khối phát triển thời gian 24-48h Biểu đồ 3.1 So sánh chiều dài huyết khối đuôi chuột thời điểm 24h 48h Nhận xét: - Chiều dài chuột lơ khơng có khác biệt (p > 0,05) - Ở lơ aspirin có chiều dài huyết khối phát triển khoảng thời gian 24-48h nhỏ nhất, khác biệt có ý nghĩa thống kê so với lơ mơ hình với p < 0,01 khác biệt có ý nghĩa thống kê so với lô thuốc NC với p < 0,05 - Ở hai lô dùng thuốc NC, chiều dài huyết khối phát triển khoảng thời gian 24-48h nhỏ có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) so với lơ mơ hình - So sánh lô dùng thuốc nghiên cứu, chiều dài huyết khối phát triển khoảng thời gian 24-48h lô dùng liều cao nhỏ khơng có ý nghĩa thống kê so với lô dùng liều thấp (p > 0,05) Như vậy, thuốc nghiên cứu có tác dụng ngăn chặn hình thành huyết khối khoảng thời gian 24 đầu, đồng thời có tác dụng ngăn chặn phát triển huyết khối khoảng thời gian 24-48h sau gây huyết khối K- Carragenan Aspirin chưa thể rõ tác dụng ngăn cản hình thành huyết khối khoảng thời gian 24 đầu, thể rõ tác dụng ngăn chặn phát triển huyết khối khoảng thời gian 24-48h sau gây huyết khối K- Carragenan 40 3.2 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ CÁC CHỈ SỐ ĐÔNG MÁU 3.2.1 Định lượng Fibrinogen Bảng 3.4 Kết đánh giá nồng độ fibrinogen Lô nghiên cứu Fibrinogen (g/L) p Lơ mơ hình (1) 4,38 ± 0,46 p3,4-1 < 0,05, Chứng aspirin (2) 4,05 ± 0,39 p2-1 > 0,05, NC liều (3) 3,84 ± 0,35 p3,4-2 > 0,05, p3-4 > 0,05 NC liều (4) 3,79 ± 0,37 Nhận xét: - Ở hai lô thuốc NC, nồng độ fibrinogen nhỏ có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) so với lơ mơ hình - Ở lơ aspirin cịn fibrinogen nhỏ khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) so với lơ mơ hình - So sánh hai lô thuốc nghiên cứu lô aspirin, nồng độ fibrinogen khơng có khác biệt - So sánh lô thuốc nghiên cứu, nồng độ fibrinogen khơng có khác biệt 3.2.2 Chỉ số prothrombin time (PT) Bảng 3.5 Kết đánh giá số PT Lơ nghiên cứu PT (s) p Lơ mơ hình (1) 9,11 ± 0,15 p3,4-1 < 0,05, Chứng aspirin (2) 8,68 ± 0,12 p2-1 < 0,05, NC liều (3) 8,72 ± 0,24 p3,4-2 > 0,05, NC liều (4) 8,65 ± 0,18 p3-4 > 0,05 41 Nhận xét: - Ở lơ nghiên cứu, số PT nhỏ có ý nghĩ thống kê so với lơ mơ hình - Lơ chứng aspirin số PT nhỏ có ý nghĩa thống kê so với lơ mơ hình - So sánh lô nghiên cứu lô aspirin, số đơng máu khơng có khác biệt 3.2.3 Chỉ số thrombin (TT) Bảng 3.6 Kết đánh giá số TT Lô nghiên cứu TT (s) Lô mô hình (1) 37,19 ± 2,12 Chứng aspirin (2) 37,45 ± 3,01 NC liều (3) 37,36 ± 2,96 NC liều (4) 37,48 ± 2,72 p p>0,05 Nhận xét: Chỉ số PT lơ khác khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) 3.3 BÀN LUẬN 3.3.1 Chế phẩm nghiên cứu Cao lỏng thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm công ty cổ phần Đông Dược Thăng Long cung cấp, đạt tiêu chuẩn DĐVN V Cao chiết xuất máy chiết hàn quốc, theo quy trình đạt chuẩn, với thể chất lỏng, sánh, dễ hấp thu, dễ dàng hút kim cong đầu tù chuyên dụng cho chuột uống Q trình cho chuột uống khơng gặp khó khăn trường hợp chế phẩm bị cặn, phân lớp Cao lỏng bào chế từ dược liệu có nhiều tác dụng sinh học Trong đó, Khương hoạt, Phòng phong, Xuyên khung, Sinh địa, Bạch Chỉ, Kim Ngân có tác dụng chống huyết khối theo nhiều chế khác (giãn 42 mạch, chống kết tập tiểu cầu ) Hồng cầm, Quế chi có tác dụng hoạt huyết, kết hợp với Thương truật, Kim ngân, Bách Bộ, Cát cánh chống viêm, diệt khuẩn làm gia thêm tác dụng thuốc Nghiên cứu tác dụng chống huyết khối thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm góp phần vào việc phát triển thuốc thành thuốc dự phịng đơng máu, tắc mạch thể bị nhiễm virus 3.3.2 Động vật nghiên cứu Mục đích nghiên cứu đánh giá tác dụng chống huyết khối cao lỏng thuốc Cửu vị Khương Hoạt thang gia giảm Đối tượng nghiên cứu chuột cống trắng chủng Wistar, khỏe mạnh hai giống đực Cân nặng khoảng 200,0 ± 20,0g Chuột Ban cung cấp động vật thí nghiệm - Học viện Quân y cung cấp, nuôi dưỡng điều kiện chuẩn phịng chăn ni thực nghiệm Bộ mơn Dược lý tuần trước làm thí nghiệm Chuột ăn thức ăn theo tiêu chuẩn cho động vật nghiên cứu, nước (đun sôi để nguội) uống tự Mọi điều kiện môi trường (nhiệt độ, ánh sáng, độ ẩm) kiểm soát chặt chẽ đảm bảo đáp ứng yêu cầu trình nghiên cứu Các nghiên cứu huyết khối thường lựa chọn động vật thí nghiệm chuột nhắt, thỏ, chuột cống Tuy nhiên, việc lựa chọn chuột cống đối tượng nghiên cứu thích hợp chúng có giá thành rẻ, dễ ni, thuận lợi việc gây huyết khối dễ dàng việc theo dõi, quan sát Vì vậy, việc lựa chọn chuột cống đối tượng nghiên cứu phù hợp đề tài 3.3.3 Mơ hình gây huyết khối K-carrageenan Carrageenan polysaccharides cực nhỏ có chứa lưu huỳnh gồm đơn vị lặp lại D-galactose 3,6-anhydro-D-galactose Chúng chiết xuất từ tảo biển đỏ, sử dụng rộng rãi ngành công nghiệp thực phẩm ngành công nghiệp khác Trên sở vị trí liên kết sulfate khác carbohydrat, carrageenan phân làm loại: Kappacarrageenan, Lamda-carrageenan va Iota-carrageenan Kappa-carrageenan (Kcarrageenan) có nhóm sulfat disaccharid Iota-carrageenan 43 có nhóm Sulfat disaccharid, Lamda-carrageenan có nhóm sulfat disaccharid [35] Carrageenan ứng dụng rộng rãi công nghiệp thực phẩm với tính chất tạo gel, làm dày, ổn định… Tuy nhiên, H.Bekemeier đồng nghiệp báo carrageenan gây huyết khối chuột, k-carrageenan có khả gây huyết khối tốt [36] Đặc điểm hình thành rõ ràng huyết khối đuôi chuột sưng đỏ từ phần đầu tự đuôi quan sát thấy từ thí nghiệm Sau đó, mơ hình sử dụng để kiểm tra nhiều thuốc lâm sàng có tác dụng chống huyết khối tan huyết khối (heparin, UK, aspirin ) Carrageenan sử dụng để gây viêm mô gây huyết khối đuôi mơ hình động vật (chuột nhắt, chuột cống) Có số chứng cho thấy mối liên hệ hai chiều đơng máu viêm Viêm dẫn đến kích hoạt hệ thống đơng máu yếu tố mô (TF) yếu tố XII (yếu tố Hageman) tạo thrombin trung gian, từ làm giảm thiểu chế chống đông máu, ức chế tiêu sợi huyết, mặt khác kích hoạt hệ thống đơng máu ảnh hưởng đến hoạt động viêm thông qua chế trực tiếp gián tiếp Cơ chế K-carrageenan gây huyết khối biết đến tăng cường sản xuất interleukin-1β yếu tố hoại tử khối u dẫn đến gia tăng biểu yếu tố XII [19,36] từ dẫn đến khởi đầu kích hoạt dịng thác đơng máu Sự điều chỉnh tăng cường kích thích kích hoạt tiểu cầu thúc đẩy hình thành cục máu đơng Do đó, ức chế hoạt hóa tiểu cầu điều quan trọng để phịng ngừa điều trị huyết khối Ưu điểm mơ hình huyết khối dễ dàng thao tác, dễ quan sát, đo xác liên tục phạm vi huyết khối mà khơng giết chết động vật với chi phí thấp Tuy nhiên, hình thành huyết khối K-carrageenan phụ thuộc vào nhiều yếu tố nên tần suất chiều dài huyết khối khác nhiều đợt nghiên cứu khác Sau mơ hình chứng minh thuốc có hiệu lâm sàng heparin, urokinase aspirin, mơ hình áp ứng dụng nhiều để kiểm tra chọn thuốc thử có tiềm chống huyết khối Do chúng tơi lựa chọn K-carrageenan để tiến hành nghiên cứu [36] 44 Sau 24 tiêm phúc mạc K-carrageenan, đuôi chuột xuất sưng tấy có màu đỏ từ đầu tự do, điều chứng tỏ huyết khối hình thành Từ nghiên cứu thực cho thấy K-carrageenan liều 20 mg/kg gây huyết khối tối ưu đuôi chuột cống, kết phù hợp với nghiên cứu trước sử dụng [25] 3.3.4 Thuốc chứng dương Các nghiên cứu thực nghiệm trước có sử dụng nhiều loại chứng dương khác heparin [37], streptokinase, aspirin… Trong heparin thuốc chống đơng sử dụng việc phòng điều trị huyết khối tĩnh mạch, aspirin thuốc chống kết tập tiểu cầu sử dụng việc phòng điều trị huyết khối động mạch [21] Khả chống huyết khối heparin dựa chế tạo phức với antithrombin III, phức tăng cường tác dụng antithrombin III lên 1000 lần, từ ức chế protease serine, bao gồm số yếu tố đông máu - quan trọng thrombin (yếu tố IIa) Stuart Factor (yếu tố Xa) dẫn đến máu khơng đơng Bên cạnh đó, aspirin thuốc chống kết tập tiểu cầu dựa chế ức chế enzyme thromboxan synthetase acetyl hóa phần có hoạt tính cyclooxygenase, từ làm giảm tổng hợp thromboxan A2 làm cho tiểu cầu không kết tập Aspirin thuốc tiếp tục sử dụng rộng rãi điều trị huyết khối động mạch [38] Nhiều nghiên cứu mô hình huyết khối sử dụng thuốc chứng dương aspirin Zhang cộng (2013) nghiên cứu mô hình huyết khối gây carrageenan cho thấy aspirin 50 mg/kg làm giảm đáng kể chiều dài huyết khối [22] Ning Ma (2015) báo cáo aspirin 25 mg/kg có xu hướng làm giảm chiều dài huyết khối trung bình mơ hình huyết khối chuột gây K-carrageenan [25] Như vậy, để đánh giá khả chống huyết khối thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm dựa chế chống kết tập tiểu cầu tơi lựa chọn aspirin 25 mg/kg chứng dương nghiên cứu 45 3.3.5 Kết nghiên cứu 3.3.5.1 Chiều dài phần trăm huyết khối đuôi chuột Chiều dài đầy đủ đuôi chuột đo thí nghiệm khơng có khác biệt Sau tiêm K-carrageenan, quan sát thời điểm 24h 48h cho thấy hình thành huyết khối lô nghiên cứu Chiều dài huyết khối khác lô dùng thuốc khác Sự cải thiện chiều dài huyết khối đuôi chuột lô dùng thuốc nghiên cứu có nhỉnh đơi chút so với lô dùng aspirin Ngay liều thấp, thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm thể tác dụng chống huyết khối có ý nghĩa thống kê so với mơ lơ hình Ở chúng tơi nhận thấy xu hướng cải thiện tốt dùng liều cao hơn, cụ thể chiều dài huyết khối giảm rõ rệt so với lô không dùng thuốc Chúng tơi cho hiệu lực thuốc tác động tuyến tính mối liên quan với việc cải thiện chiều dài huyết khối đuôi chuột Để đánh giá xác mối liên hệ này, cần thêm nghiên cứu với mẫu lớn thực nhiều mức độ liều lượng khác 3.3.5.2 Các thông số đông máu Tác dụng chống huyết khối cao lỏng thuốc đánh giá xét nghiệm đông máu cổ điển thời gian prothrombin (PT), thời gian thrombin (TT) fibrinogen Khi so sánh lô dùng aspirin, lô sử dụng chế phẩm nghiên cứu với lô mơ hình, kết cho thấy giá trị PT FIB giảm giá trị TT tăng lên Sự kéo dài TT ức chế hoạt động thrombin trình chuyển thành fibrin Từ kết thực nghiệm, khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê lô Thời gian prothrombin khảo sát đường đông máu ngoại sinh, chủ yếu biểu hoạt tính yếu tố đơng máu Các yếu tố đơng máu đóng vai trị quan trọng việc kích hoạt prothrombin việc thiếu yếu tố đơng máu dẫn đến kéo dài giá trị PT Cao lỏng làm giảm giá trị PT thơng qua việc ức chế hình thành huyết khối Sự giảm nồng độ fibrinogen gây ức chế chuyển đổi fibrinogen thành fibrin Do đó, thuốc có hiệu việc ngăn ngừa huyết khối giảm nồng độ fibrinogen 46 KẾT LUẬN Cao lỏng thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm mức liều nghiên cứu (8,4 g/kg/24h 16,8 g/kg/24h) thể tác dụng chống huyết khối chuột cống trắng gây huyết khối K-carrageenan Cụ thể: - Các lô chuột cống trắng dùng cao lỏng thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm mức liều (8,4 g/kg/24h 16,8 g/kg/24h) có tác dụng ngăn chặn hình thành huyết khối khoảng thời gian 24 đầu, đồng thời có tác dụng ngăn chặn phát triển huyết khối khoảng thời gian 24-48h sau gây huyết khối K- carragenan Aspirin chưa thể rõ tác dụng ngăn cản hình thành huyết khối khoảng thời gian 24 đầu, thể rõ tác dụng ngăn chặn phát triển huyết khối khoảng thời gian 24-48h sau gây huyết khối K- carragenan - Cả lô dùng cao lỏng thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm (mức liều 8,4 g/kg/24h 16,8 g/kg/24h) làm kéo dài thời gian thrombin (TT, giây) (p > 0,05), tương tự tác dụng aspirin liều 25 mg/kg/24h Cả lô dùng cao lỏng thuốc mức liều nghiên cứu làm giảm thời gian prothrombin (PT) hàm lượng fibrinogen máu 47 KIẾN NGHỊ Từ kết nghiên cứu động vật thực nghiệm tác dụng chống huyết khối cao lỏng thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm, xin đề xuất kiến nghị sau: - Nghiên cứu đánh giá tính an toàn cao lỏng thuốc người - Tiếp tục nghiên cứu sâu tác dụng chống huyết khối thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm mơ hình dược lý thực nghiệm, làm sở để bào chế chế phẩm ứng dụng thực tế 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO Feng Yan, Junpeng Yan, Weiting Sun, et al (2019) Thrombolytic effect of subtilisin QK on carrageenan induced thrombosis model in mice, Journal of thrombosis and thrombolysis 28 (4) 444-448 Y Suzuki et al (2015), "Analysis of the Interaction between Clopidogrel, Aspirin, and Proton Pump Inhibitors Using the FDA Adverse Event Reporting System Database", Biol Pharm Bull, 38(5), 680-6 C E Seculini Patino A.H.Tabares (2016), "Heparin-induced thrombocytopenia New therapeutical options", Medicina (B Aires), 76(4), 230-4 Đỗ Tất Lợi (2019) Những thuốc vị thuốc Việt Nam, In lần thứ mười bốn, Nhà xuất y học, 309 – 311 D Voora, H L McLeod, C Eby, et al (2017) The pharmacogenetics of coumarin therapy, Pharmacogenomics (5) 503-13 J T Azietaku, H Ma, X A Yu, et al (2017) A review of the ethnopharmacology, phytochemistry and pharmacology of Notopterygium incisum, J Ethnopharmacol 202 241-255 Đại học dược Hà Nội (2008) Dược học cổ truyền, Nhà xuất y học 215-287 M Yang, C C Wang, W L Wang, et al (2020) Saposhnikovia divaricata-An Ethnopharmacological, Phytochemical and Pharmacological Review, Chin J Integr Med 26 (11) 873-880 Li W, Li L, Liu YY (2016) Experimental study of pharmacological action of active composition of Radix Saposhnikoviae Chin J Exp Tradit Med Form (Chin),12:29-31 10 Chen ZJ, Li QS, Yu ZP, et al (2013) Experimental study on antiallergic effect of Saposhnlkovia divarlcata (Turcz.) Schischk and Tribulus terrestris L Yunnan J Tradit Chin Med Mater Med (Chin),24:30-32 11 M, Zhao C, Wong RN (2014) Inhibition of shear-induced platelet aggregation in rat by tetramethylpyrazine and salvianolic acid B Clin Hemorheol Microcirc, 31, 97–103 49 12 X Ran, L Ma, C Peng, et al (2015) Ligusticum chuanxiong Hort: a review of chemistry and pharmacology, Pharm Biol 49 (11) 1180-9 13 R X Zhang, M X Li, and Z P Jia (2018) Rehmannia glutinosa: review of botany, chemistry and pharmacology, J Ethnopharmacol 117 (2) 199-214 14 W J Zhang, Z Y Zhao, L K Chang, et al (2021) Atractylodis Rhizoma: A review of its traditional uses, phytochemistry, pharmacology, toxicology and quality control, J Ethnopharmacol 266 113415 15 C Zhang, L Fan, S Fan, et al (2019) Cinnamomum cassia Presl: A Review of Its Traditional Uses, Phytochemistry, Pharmacology and Toxicology, Molecules 24 (19) 16 M Deng, L Xie, L Zhong, et al (2020) Imperatorin: A review of its pharmacology, toxicity and pharmacokinetics, Eur J Pharmacol 879 173124 17 T Zhao and H Tang (2019) Scutellaria baicalensis Georgi (Lamiaceae): a review of its traditional uses, botany, phytochemistry, pharmacology and toxicology 71 (9) 1353-1369 18 Xiaofei Shang, Hu Pan, Maoxing Li, et al (2011) Lonicera japonica Thunb.: ethnopharmacology, phytochemistry and pharmacology of an important traditional Chinese medicine, Journal of ethnopharmacology 138 (1) 1-21 19 Ming-Yue Ji, Agula Bo, Min Yang, et al (2020) The pharmacological effects and health benefits of Platycodon grandiflorus a medicine food homology species, Foods (2) 142 20 Mary Anne Koda-Kimble (2012) Koda-Kimble and Young's applied therapeutics: the clinical use of drugs, Lippincott Williams & Wilkins 21 British medical associaton and Royal Pharmaceutial (2017), British National Formulary (BNF), ed 73 22 Nguyễn Thị Giang (2018) Xây dựng mơ hình bước đầu đánh giá tác dụng chống huyết khối cao giàu saponin tam thất hoang, Khóa luận tốt nghiệp dược học, Đại học Quốc gia Hà Nội 50 23 Trần Thái Hà, Đào Xuân Tỉnh, Phạm Thị Vân Anh, et al (2022) Tác dụng chống đông viên hoàn Trân châu ngưu hoàng hoàn thực nghiệm, Tạp chí Nghiên cứu Y học 151 (3) 247-254 24 Phạm Thị Vân Anh, Nguyễn Thị Thanh Loan, Mai Phương Thanh, et al (2018) Tác dụng q trình đơng máu tiêu fibrin viên nang TD-HK01 thực nghiệm Tạp chí nghiên cứu y học, 115(6):80-89 25 Ning Ma, Xi-Wang Liu, Ya-Jun Yang, et al (2015) Preventive effect of aspirin eugenol ester on thrombosis in κ-carrageenan-induced rat tail thrombosis model, PLoS One 10 (7) e0133125 26 Đỗ Lập (2018), Khảo Sát thực trạng sử dụng thuốc kháng đông đường uống hệ bệnh viện đa khoa Xanh Pơn, Khóa luận tốt nghiệp 27 Ansell J, Hirsh J, Hylek E, et al Pharmacology (2018), Pharmacology and Management of Vitamin K Antagonist: Antithrombotic therapy and Prevention of Thrombosis, 8th ed: American College of Chest Physicians Evidence – based Clinical Practise Guidelines, Chest, 133, p.160-198 28 UferM (2015), Comparative Pharmacokinetics of VitaminK Antagonist Clin Pharmacokinet, 44 (12), 1227-1246 29 Hoàng Thị Kim Huyền, Brouwers J.R.B.J (2010) Những nguyên lý sử dụng thuốc điều trị, tập 2, Nhà xuất Y học, tr 247- 252 30 Bộ Y tế (2007), Dược lý học, tập 2, Nhà xuất Y học tr 113-121 31 Bộ Y tế (2008), Khuyến cáo hội Tim Mạch Việt Nam chẩn đoán điều trị rung nhĩ, Nhà xuất Y học, tr 167-168 32 R De Caterina, S Husted, L Wallentin, et al (2012) New oral anticoagulants in atrial fibrillation and acute coronary syndromes: ESC Working Group on Thrombosis-Task Force on Anticoagulants in Heart Disease position paper, J Am Coll Cardiol 59 (16) 1413-25 33 V D Prajapati, P M Maheriya, G K Jani, et al (2014) Carrageenan: a natural seaweed polysaccharide and its applications, Carbohydr Polym 105 97-112 34 Cung Thị Tý (2006), Cơ chế đông cầm máu xét nghiệm thăm dò, Bài giảng huyết học - truyền máu, Nhà xuất y học 247-262 51 35 V D Prajapati, P M Maheriya, G K Jani, et al (2014) Carrageenan: a natural seaweed polysaccharide and its applications, Carbohydr Polym 105 97-112 36 Q Li, Y Chen, D Zhao, et al (2018) NaoXinTong Capsule Inhibits Carrageenan-Induced Thrombosis in Mice, J Cardiovasc Pharmacol 72 (1) 49-59 37 R Arslan et al (2015) "Evaluation of the antithrombotic effects of Crataegus monogyna and Crataegus davisii in the carrageenan-induced tail thrombosis model", Pharm Biol, 53(2), 275-9 38 D R Phillips et al (2005), "Therapeutic approaches in arterial thrombosis", J Thromb Haemost, 3(8), 1577-89 52 ...BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y ĐỖ THU THẢO ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CHỐNG HUYẾT KHỐI CỦA BÀI THUỐC CỬU VỊ KHƯƠNG HOẠT THANG GIA GIẢM TRÊN ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM KHÓA LUẬN... vị Khương hoạt thang gia giảm động vật thực nghiệm? ?? nhằm mục tiêu: Đánh giá tác dụng chống huyết khối thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm chuột cống trắng gây huyết khối K-carrageenan CHƯƠNG... 2.2.1 Phương pháp nghiên cứu tác dụng chống huyết khối Để gây tượng huyết khối tác dụng chống huyết khối thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm thể, mơ hình huyết khối chuột xây dựng dựa tham