Đang tải... (xem toàn văn)
LỜI CẢM ƠN Sau một thời gian dài học tập tại Học viện Quân y, đƣợc sự giúp đỡ của Nhà trƣờng và các Phòng, Ban, Bộ môn của Học viện cũng nhƣ Viện Đào tạo Dƣợc, đến nay em đã hoàn thành chƣơng trình họ.
LỜI CẢM ƠN Sau thời gian dài học tập Học viện Quân y, đƣợc giúp đỡ Nhà trƣờng Phịng, Ban, Bộ mơn Học viện nhƣ Viện Đào tạo Dƣợc, đến em hồn thành chƣơng trình học tập Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Đảng ủy - Ban Giám đốc Học viện Viện Đào tạo Dƣợc, Phòng Đào tạo, Bộ môn Dƣợc lý - Viện Đào tạo Dƣợc tạo điều kiện thuận lợi cho em thực hồn thành khóa luận Bằng tất kính trọng lịng biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cảm ơn đến PGS TS Nguyễn Hoàng Ngân, ngƣời Thầy ln hết lịng quan tâm, động viên giúp đỡ, truyền đạt kiến thức trực tiếp hƣớng dẫn em trình học tập, nghiên cứu hồn thành khóa luận Em xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến Thầy, Cơ tồn thể Cán bộ, Nhân viên Viện Đào tạo Dƣợc, đặc biệt Thầy, Cô anh chị Kỹ thuật viên Bộ môn Dƣợc lý luôn nhiệt tình giúp đỡ, hƣớng dẫn tạo điều kiện thuận lợi cho em trình học tập, nghiên cứu để hồn thành khóa luận Em xin trân trọng cảm ơn Thầy, Cô Hội đồng chấm khóa luận dành nhiều thời gian em ý kiến q báu q trình hồn thiện bảo vệ khóa luận Em vơ biết ơn chăm sóc, động viên gia đình, ngƣời thân, luôn bên cạnh chia sẻ với em điều sống Em xin trân trọng cảm ơn quan tâm giúp đỡ tình cảm quý báu bạn bè dành cho em Hà Nội, ngày 13 tháng năm 2022 Học viên Lê Thị Mai Hƣơng MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG - TỔNG QUAN VỀ TÀI LIỆU 1.1 VIÊN BAO PHIM FERTIL PRO FOR MEN 1.1.1 Nguồn gốc 1.1.2 Thành phần có viên bao phim Fertil Pro for men 1.2 TỔNG QUAN VỀ CÁC PHƢƠNG PHÁP ĐÁNH GIÁ ĐỘC 13 TÍNH BÁN TRƢỜNG DIỄN 1.2.1 Mục tiêu 13 1.2.2 Lựa chọn mơ hình thử 14 1.2.3 Thời gian thử 14 1.2.4 Liều dùng 14 1.2.5 Đƣờng dùng thuốc 15 1.2.6 Theo dõi, đánh giá 16 1.2.7 Một số số nghiên cứu 17 CHƢƠNG - NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN 23 CỨU 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 23 2.1.1 Chế phẩm nghiên cứu 23 2.1.2 Động vật nghiên cứu 24 2.1.3 Hóa chất thiết bị nghiên cứu 25 2.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 2.2.1 Thiết kế thí nghiệm 27 2.2.2 Các số đánh giá 28 2.2.3 Phƣơng pháp xác định số nghiên cứu 30 2.2.4 Xử lý số liệu 31 2.2.5 Địa điểm nghiên cứu 31 2.2.6 Đạo đức nghiên cứu 31 CHƢƠNG - KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN 32 3.1 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 32 3.1.1 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men lên tình trạng 32 chung thay đổi thể trọng chuột cống trắng dùng dài ngày 3.1.2 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men tới số 33 huyết học 3.1.3 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men tới số 35 số sinh hóa máu 3.1.4 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men lên hình ảnh 38 đại thể vi thể số quan 3.2 BÀN LUẬN 41 3.2.1 Tình trạng chung thay đổi thể trọng 42 3.2.2 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men đến chức 42 tạo máu 3.2.3 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men đến chức 43 gan 3.2.4 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men đến chức 44 thận 3.2.5 Một số cơng bố khác độc tính bán trƣờng diễn dƣợc liệu 46 viên bao phim Fertil Pro for men KẾT LUẬN 48 KIẾN NGHỊ 49 TÀI LIỆU THAM KHẢO 50 DANH MỤC CÁC BẢNG STT Tên bảng Trang 2.1 Thành phần 01 viên bao phim Fertil Pro for men 23 3.1 Trọng lƣợng thể chuột lô theo thời gian nghiên cứu 32 3.2 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men tới số số hồng cầu 33 3.3 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men tới số lƣợng bạch cầu số lƣợng tiểu cầu 34 3.4 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men lên hoạt độ enzym AST ALT 35 3.5 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men lên nồng độ creatinin máu 36 3.6 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men lên nồng độ albumin máu 37 3.7 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men lên nồng độ cholesterol máu 38 DANH MỤC CÁC HÌNH STT Tên hình Trang 1.1 Cây Tỏa dƣơng 1.2 Cây Sâm cau 1.3 Cây Ba kích 1.4 Cây Kỷ tử 1.5 Cây Thục địa 1.6 Cây Bách bệnh 10 1.7 Cây Nhân sâm 11 1.8 Lộc nhung 12 2.1 Viên bao phim Fertil Pro for men 24 2.2 Chuột cống trắng chủng Wistar 25 2.3 Cho chuột uống thuốc kim cong đầu tù 27 2.4 Sơ đồ quy trình nghiên cứu 29 2.5 Lấy máu xoang hốc mắt chuột 30 3.1 Ảnh hƣởng viên bao phim thể trọng chuột 38 3.2 Hình ảnh vi thể gan chuột lô nghiên cứu 39 3.3 Hình ảnh vi thể lách chuột lơ nghiên cứu 40 3.4 Hình ảnh vi thể thận chuột lô nghiên cứu 40 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT TT Viết đầy đủ Viết tắt ALT Alanin transaminase AST Aspartat transaminase DPPH 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl EDTA Ethylen diamin tetra acetic acid Hb Hemoglobin (Huyết sắc tố) HCT Hematocrit HGB Hemoglobin (Lƣợng huyết sắc tố có đơn vị thể tích) 10 ICH International Conference on Harmonization (Hội nghị quốc tế hài hịa hóa thủ tục đăng ký dƣợc phẩm sử dụng cho ngƣời) 11 MCV Mean Corpuscular Volume (Thể tích trung bình hồng cầu) 12 OECD Organisation for Economic Co-operation and Development (Tổ chức Hợp tác Phát triển Kinh tế) 13 PLT Platelet Count (Số lƣợng tiểu cầu) 14 RBC Red Blood Cell (Số lƣợng hồng cầu) 15 SPSS Statistical Package for the Social Sciences 16 WBC White Blood Cell (Số lƣợng bạch cầu) 17 WHO World Health Organization (Tổ chức Y tế Thế giới) ĐẶT VẤN ĐỀ Xã hội ngày phát triển với phát triển Y học đại, nhu cầu chăm sóc sức khỏe ngƣời ngày cao, đặc biệt nhu cầu chăm sóc sức khỏe sinh sản nói chung sức khỏe cho nam giới nói riêng Vơ sinh, suy sinh dục tình trạng bệnh mang tính xã hội Tổ chức Y tế Thế giới (World Health Organization, viết tắt WHO) dự báo, muộn vô sinh bệnh nguy hiểm thứ ba kỷ XXI, đứng sau ung thƣ bệnh tim mạch Hiện nay, tình trạng gia tăng có diễn biến ngày phức tạp Với lịch sử hàng nghìn năm nghiên cứu phát triển, Y học cổ truyền Việt Nam tìm nhiều loại thuốc có tác dụng việc hỗ trợ điều trị, cải thiện vấn đề giúp tăng cƣờng sinh lực nam giới Một số phải kể đến nhƣ: nhục thung dung, ba kích, bá bệnh, nhân sâm, cá ngựa, v.v… Đã có nhiều thuốc Y học cổ truyền, có tác dụng bổ thận, tráng dƣơng, cải thiện vấn đề sinh lý nam giới Một số thuốc “Bổ thận tăng tinh thang” Từ Cơng ty cổ phần Dƣợc phẩm Phú Tín nghiên cứu bào chế viên bao phim Fertil Pro for men chế phầm gồm có dƣợc liệu tự nhiên dựa thuốc cổ truyền “Bổ thận tăng tinh thang” có tác dụng tăng cƣờng sinh lực nam giới, nhờ kết hợp loại dƣợc liệu thƣờng có thuốc dân gian Để có đƣợc sở khoa học tiêu chuẩn chất lƣợng tính an tồn viên, làm sở cho nghiên cứu phát triển đại hóa Y học cổ truyền, tạo sản phẩm phục vụ rộng rãi cho cộng đồng Từ đó, em tiến hành nghiên cứu đề tài “Đánh giá độc tính bán trường diễn viên bao phim Fertil Pro for men động vật thực nghiệm” với mục tiêu sau: Đánh giá đƣợc độc tính bán trƣờng diễn viên bao phim Fertil Pro for men chuột cống trắng CHƢƠNG - TỔNG QUAN VỀ TÀI LIỆU 1.1 VIÊN BAO PHIM FERTIL PRO FOR MEN 1.1.1 Nguồn gốc Viên bao phim Fertil Pro for men sản xuất Công ty cổ phần Dƣợc phẩm Phú Tín, đạt tiêu chuẩn sở Chế phẩm đƣợc bào chế từ thuốc nghiệm phƣơng “Bổ thận tăng tinh thang”, gồm: Nhân sâm (Panax ginseng C.A Mey) 10g, Lộc Nhung (Cornu Cervi Pantotrichum) 4g, Ba kích (Morinda officinalis How) 12g, Sâm cau (Curculigo orchioides) 12g, Tongkat Ali (Eurycoma longifolia Jack) 12g, Kỷ tử (Fructus Lycii) 15g, Thục địa (Rehmannia glutinosa (Gaertn.) Libosch) 15 g, Tỏa dƣơng (Balanophora laxiflora Hemsl.) 16g Mỗi viên nén có chứa 1.000 mg cao dƣợc liệu Trong đó: Ba kích, Sâm cau, Tỏa dƣơng, Tongkat Ali, Lộc nhung: có tác dụng bổ dƣơng Thục địa, Kỷ tử: có tác dụng dƣỡng âm Nhân sâm: đại bổ ngun khí 1.1.2 Thành phần có viên bao phim Fertil Pro for men 1.1.2.1 Tỏa dương - Tên khác: củ gió đất, cu chó, củ núi, hoa đất, không lá, xà cô -Tên khoa học: Balanophora laxiflora Hemsl., họ Dó đất (Balanophoraceae) Hình 1.1 Cây Tỏa dương (Nguồn: https://tracuuduoclieu.vn/toa-duong-vt.html/ [1]) - Đặc điểm thực vật: loại cỏ trông nhƣ nấm, màu đỏ nâu sẫm, cấu tạo cán hoa lớn, mang hoa dày đặc, có mo bao bọc, màu tím, mùi Cán hoa nạc mềm, dạng thay đổi, sần sùi, khơng có Hoa đực hoa riêng, gốc hay khác gốc Cụm hoa đực hình trụ dài, 10 15 cm, cụm hoa hình dầu dài - cm Mùa hoa: tháng 10 - [2] - Phân bố: thƣờng mọc sống ký sinh rễ gốc lớn rừng sâu ẩm thấp Thƣờng gặp Hà Tây, Lào Cai, Hịa Bình, n Bái [2] - Bộ phận dùng: thân phơi khô - Thành phần hóa học: 1-hexaco-sanoylglycerol, daucosterol, methyl gallate, 4-hydroxy-3-methoxycinnamaldehyde, methyl-4 hydroxy cinnamat methyl caffeate [3] - Tác dụng: + Bổ thận tráng dƣơng, ích thận tinh, nhuận tràng thơng tiên [4] +Trị chứng tảo tiết, liệt dƣơng [5] Nhận xét: Quan sát đại thể mắt thƣờng dƣới kính lúp, cho thấy: màu sắc, hình thái gan, lách thận hai lô dùng viên bao phim Fertil Pro for men có màu nâu đỏ thẫm đồng đều, bề mặt nhẵn, khơng có u cục xuất huyết, có đàn hồi ấn xuống Khơng có khác biệt so với hình ảnh gan, lách, thận chuột lơ chứng * Hình ảnh vi thể gan, lách, thận: Kết nghiên cứu mô bệnh học gan, lách, thận chuột cho thấy: - Hình ảnh vi thể gan (hình 3.2), lơ thấy: bè gan, tiểu thùy gan tế bào gan bình thƣờng, khơng có hình ảnh thối hóa viêm, tĩnh mạch trung tâm không giãn, xoang mạch nan hoa tĩnh mạch khoảng cửa không xung huyết Lô chứng Lơ tri Lơ trị Hình 3.2 Hình ảnh vi thể gan nhuộm HE (400X) chuột lơ nghiên cứu - Hình ảnh vi thể lách: tất lô, lách rõ cấu trúc vùng vỏ vùng tủy, vùng vỏ có nang lympho lớn với động mạch bút lơng Khơng có xuất huyết, hoại tử Vi thể lách đƣợc thể hình 3.3 39 Lơ chứng Lơ trị Lơ trị Hình 3.3 Hình ảnh vi thể lách nhuộm HE (400X) chuột lơ nghiên cứu - Hình ảnh vi thể thận: tất lô thấy, tiểu cầu thận với mao cuộn mạch rõ, tế bào ống thận bình thƣờng Ảnh vi thể thận đƣợc thể hình 3.4 Lơ chứng Lơ trị Lơ trị Hình 3.4 Hình ảnh vi thể thận nhuộm HE (400X) chuột lô nghiên cứu Nhƣ vậy, viên bao phim Fertil Pro for men dùng đƣờng uống với liều 280 mg/kg/ngày 1400 mg/kg/ngày liên tục 60 ngày không gây tổn thƣơng gan, thận, lách chuột 40 3.2 BÀN LUẬN Nghiên cứu độc tính bƣớc quan trọng nghiên cứu phát triển thuốc Thuốc muốn đƣợc sử dụng ngồi hiệu lực cần phải an tồn Xét tổng thể an tồn cịn quan trọng hiệu lực, thuốc dù hiệu lực đến đâu, nhƣng khơng an tồn khơng đƣợc sử dụng [32] Để nghiên cứu tính an tồn thuốc, cần phải nghiên cứu độc tính cấp bán trƣờng diễn Theo hƣớng dẫn WHO, ngoại trừ thuốc cổ phƣơng đƣợc chiết xuất theo phƣơng pháp truyền thống, tất thuốc có nguồn gốc từ dƣợc liệu phải đánh giá độc tính cấp bán trƣờng diễn động vật thực nghiệm trƣớc đƣa vào thử nghiệm ngƣời [24] Viên bao phim Fertil Pro for men đƣợc bào chế theo phƣơng pháp đại từ dƣợc liệu, đối tƣợng cần đƣợc đánh giá độc tính bán trƣờng diễn Nghiên cứu độc tính bán trƣờng diễn đƣợc thực cách cho động vật thí nghiệm uống thuốc thử hàng ngày liên tục khoảng thời gian định Thời gian dùng thuốc thử phụ thuộc vào thời gian dùng lâm sàng Theo hƣớng dẫn WHO quy định Bộ Y tế Việt Nam, thời gian nghiên cứu bán trƣờng diễn động vật thƣờng gấp lần thời gian dự kiến dùng ngƣời [22] Tuy nhiên, nghiên cứu động vật thời gian dài, đặc biệt cho động vật dùng thuốc cƣỡng (qua kim cong đầu tù), số yếu tố nhiễu ảnh hƣởng đến kết nghiên cứu Nghiên cứu độc tính bán trƣờng diễn viên bao phim Fertil Pro for men đƣợc thực thời gian 60 ngày, nghiên cứu bƣớc đầu để đánh giá lâm sàng giai đoạn đầu (pha I, II) Độc tính bán trƣờng diễn viên bao phim Fertil Pro for men đƣợc thực chuột cống trắng, số lƣợng chuột lô 10 con, gồm lô: lô - chứng sinh lý; lô - lô trị 1, dùng viên bao phim với mức liều tƣơng đƣơng mức liều dự kiến điều trị lô - lô trị 2, dùng liều gấp lần liều Việc thiết kế mức liều số lƣợng nhƣ nhằm đảm bảo độ tin cậy nghiên cứu tuân theo qui định Bộ Y tế đánh giá tính an tồn thuốc [22] 41 Các tiêu để đánh giá độc tính bán trƣờng diễn bao gồm: tình trạng chung thay đổi thể trọng, số huyết học, sinh hoá, đánh giá chức gan, thận đặc điểm giải phẫu bệnh gan, lách, thận Từ kết nghiên cứu, ta bàn luận ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men tiêu nghiên cứu 3.2.1 Tình trạng chung thay đổi thể trọng Chế phẩm đƣợc bào chế dƣới dạng viên bao phim, khối lƣợng cao dƣợc liệu viên 1000 mg Với liều dự kiến dùng ngƣời viên/ngày tƣơng đƣơng với khoảng 40 mg/kg trọng lƣợng thể Do vậy, liều nghiên cứu độc tính bán trƣờng diễn chuột cống trắng đƣợc lựa chọn 280 mg/kg (tƣơng đƣơng với liều dự kiến dùng ngƣời) 1400 mg/kg (gấp lần liều dự kiến dùng ngƣời) Kết cho thấy khơng có chuột thuộc lơ trị chết có biểu triệu chứng ngộ độc Khơng có thay đổi da, lơng, mắt phân so sánh với lô chứng Biết liều cao chiết xuất từ thực vật chuyển hóa thành sản phẩm cuối độc hại, can thiệp vào chức dày giảm hiệu chuyển đổi thức ăn, từ dẫn đến thay đổi qua sản phẩm tiết (phân) Tuy nhiên, chuột uống viên bao phim Fertil Pro for men khơng thấy có thay đổi phân, nhƣ viên bao phim Fertil Pro for men khơng ảnh hƣởng tới tiêu hóa, hấp thu thức ăn Sự thay đổi trọng lƣợng thể chuột lƣợng thức ăn, nƣớc uống đƣa vào nhiều thân viên bao phim Fertil Pro for men chất dinh dƣỡng thuận lợi cho việc tăng cân Ở tất lơ, có tăng trọng lƣợng thể chuột thời gian nghiên cứu khơng có thay đổi trọng lƣợng thể so sánh lô dùng viên bao phim Fertil Pro for men với lô chứng (p > 0,05), nhƣ viên bao phim Fertil Pro for men khơng ảnh hƣởng tới q trình trao đổi chất bình thƣờng chuột cống trắng 3.2.2 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men đến chức tạo máu 42 Đánh giá công thức máu đánh giá sinh lý bệnh lý quan trọng động vật ngƣời Số lƣợng chất lƣợng tế bào máu phản ánh tình trạng quan tạo máu Thông thƣờng số đƣợc đánh giá RBC, PLT, WBC, HGB, HCT MCV Nếu chất thử nghiệm tác động đến quan tạo máu, có độc tính với quan tạo máu làm thay đổi giới hạn bình thƣờng số huyết học Hơn nữa, việc phân tích cơng thức máu có liên quan đến đánh giá rủi ro dùng thuốc thay đổi hệ thống huyết học có giá trị tiên đốn cao độc tính ngƣời liệu đƣợc ngoại suy từ nghiên cứu động vật [33] Ở tất lô dùng viên bao phim Fertil Pro for men 60 ngày cho thấy khơng có thay đổi đáng kể số huyết học so sánh với nhóm chứng Tác dụng khơng đáng kể viên bao phim Fertil Pro for men lên số lƣợng hồng cầu, thể tích trung bình hồng cầu, hematocrit, hemoglobin tiểu cầu cho thấy viên bao phim Fertil Pro for men không ảnh hƣởng đến tạo hồng cầu, hình thái hồng cầu sức bền tế bào hồng cầu Bạch cầu dòng tế bào bảo vệ thể đáp ứng với tác nhân truyền nhiễm, tổn thƣơng mô trình viêm Trong nghiên cứu này, viên bao phim Fertil Pro for men không làm ảnh hƣởng tới số lƣợng bạch cầu dùng liên tục 60 ngày 3.2.3 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men đến chức gan Gan tạng lớn thể, vừa có chức ngoại tiết, vừa có chức nội tiết, vừa kho dự trữ nhiều chất, vừa trung tâm chuyển hóa quan trọng thể có tính chất sinh mạng [34] Vì vậy, nghiên cứu ảnh hƣởng thuốc đến gan cần thiết đánh giá độc tính thuốc [22] Khi đƣa thuốc vào thể, thuốc gây độc với gan, làm tổn thƣơng gan Sự tổn thƣơng tế bào gan làm tăng hoạt độ số enzym có nguồn gốc gan huyết thanh, quan trọng enzym ALT AST ALT enzym có nhiều gan, khu trú bào tƣơng tế bào nhu mô gan Khi tổn thƣơng hủy hoại tế bào gan, chí cần thay đổi tính thấm 43 màng tế bào gan, hoạt độ ALT máu tăng cao Khác với ALT, 2/3 AST khu trú ty thể (mitochondria) 1/3 lƣợng AST khu trú bào tƣơng tế bào Khi tổn thƣơng tế bào gan mức độ dƣới tế bào, AST ty thể đƣợc giải phóng Do đó, tổn thƣơng gan, AST ALT tăng cao so với bình thƣờng, nhƣng mức độ tăng ALT cao so với AST, tăng sớm trƣớc có vàng da, tuần đầu vàng da [34,35] Trong nghiên cứu này, khơng có thay đổi có ý nghĩa (p > 0,05) nồng độ ALT AST lô uống viên bao phim Fertil Pro for men chứng tỏ viên bao phim Fertil Pro for men dùng 60 ngày không làm tổn thƣơng tế bào gan Kết mô bệnh học phù hợp với kết xét nghiệm hóa sinh máu Hình ảnh đại thể vi thể gan lô uống viên bao phim có cấu trúc tế bào gan bình thƣờng, khoảng cửa mạch máu bình thƣờng giống nhƣ lơ chứng, khơng thấy hình ảnh tổn thƣơng vi thể gan Albumin loại protein quan trọng huyết Albumin tham gia vào chức trì từ 70 đến 80% áp lực thẩm thấu huyết tƣơng, đồng thời liên kết vận chuyển chất có dạng phân tử nhỏ nhƣ bilirubin, acid béo thuốc có bên máu Gan nơi tổng hợp protein quan bị tổn thƣơng kéo theo chức gan bị suy giảm Điều làm cho việc hấp thụ chất dinh dƣỡng protein khơng tốt bị đình trệ dẫn tới tổng hợp albumin kém, việc xét nghiệm số nồng độ albumin máu có giá trị đánh giá tổn thƣơng chức gan [36] Kết nghiên cứu cho thấy viên bao phim Fertil Pro for men dùng mức liều, 30 ngày không gây ảnh hƣởng lên số albumin máu chuột, tiêu chứng tỏ chế phẩm không gây độc gan (không làm ảnh hƣởng đến chức tổng hợp albumin gan) Một vai trị gan chuyển hóa lipid tổng hợp cholesterol sử dụng cholesterol để sản xuất muối mật Vì vậy, đánh giá phần chức chuyển hóa lipid gan thơng qua định lƣợng cholesterol toàn phần [36] Số liệu nghiên cứu bảng 3.7 cho thấy, viên bao phim Fertil Pro for men hai mức liều khơng làm thay đổi nồng độ cholesterol tồn phần so sánh với lô chứng sinh lý tất thời điểm định lƣợng 44 3.2.4 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men đến chức thận Trong đánh giá độc tính thuốc, ảnh hƣởng chế phẩm tới gan thận yêu cầu bắt buộc phải đánh giá [22] Thứ nhất, quan quan trọng trình chuyển hóa thải trừ thuốc Thứ hai, quan dễ bị tổn thƣơng dùng thuốc Thận dễ bị tổn thƣơng dùng thuốc đặc điểm quan thải trừ, đào thải chất thể qua nƣớc tiểu Để tạo thành nƣớc tiểu, trình lọc thận mơ thận có nhiều máu qua nhất, thời gian lƣợng chất chuyển hố mà mơ thận tiếp xúc thƣờng nhiều [34] Các thuốc sản phẩm chuyển hóa thuốc thƣờng chất lạ thể, qua thận gây độc làm tổn thƣơng thận, từ ảnh hƣởng đến chức thận Hiện nay, creatinin số thƣờng đƣợc dùng để đánh giá theo dõi chức thận [36] Nguyên nhân creatinin thành phần đạm máu ổn định nhất, gần nhƣ không phụ thuộc vào chế độ ăn thay đổi sinh lý mà phụ thuộc vào khả đào thải thận Khi cầu thận bị tổn thƣơng, nồng độ creatinin máu tăng sớm Trong nghiên cứu này, kết định lƣợng creatinin máu chuột lô uống viên bao phim Fertil Pro for men mức liều dùng cho thấy lƣợng creatinin sau 30 60 ngày uống thuốc thử khơng có khác biệt so với lô chứng nhƣ so sánh thời điểm trƣớc sau uống thuốc thử (p > 0,05) Ngoài số creatinin, số albumin máu đƣợc dùng để đánh giá xem có tổn thƣơng thận hay không Mức nồng độ albumin thấp phản ánh tình trạng tổn thƣơng hƣ hại thận ngăn chặn albumin rò rỉ từ máu vào nƣớc tiểu nhanh chóng [36] Trong trƣờng hợp này, xét nghiệm nồng độ albumin bên nƣớc tiểu để xác định xác Kết nghiên cứu cho thấy việc dùng viên bao phim Fertil Pro for men thời gian dài không gây ảnh hƣởng lên nồng độ albumin máu chứng chứng tỏ viên bao phim không gây tổn thƣơng thận 45 Các kết hoàn toàn phù hợp với kết mô bệnh học thận Quan sát đại thể thận tất chuột nghiên cứu, cấu trúc vi thể thận 30% số chuột thực nghiệm lô cho thấy: lô uống viên bao phim Fertil Pro for men, hình ảnh cấu trúc vi thể vùng chức thận bình thƣờng nhƣ chuột lơ chứng 3.2.5 Một số cơng bố khác độc tính bán trƣờng diễn dƣợc liệu viên bao phim Fertil Pro for men Từ kết sinh hóa, huyết học, hình ảnh đại thể vi thể gan, lách thận chứng tỏ viên bao phim Fertil Pro for men liều 280 mg/kg 1400 mg/kg uống liên tục 60 ngày an toàn nghiên cứu chuột cống trắng Một số tác giả công bố độc tính bán trƣờng diễn dƣợc liệu có cơng thức bào chế viên bao phim Fertil Pro for men, cụ thể nhƣ: - Với sâm cau: theo Elumalai Anandakirouchenane cs (2013), dịch chiết rễ sâm cau với mức liều 200, 400 800 mg/kg 28 ngày cho thấy không ảnh hƣởng tới số sinh hóa, huyết học, chức gan, thận hình thái mơ học gan, thận [37] Cao chiết cồn sâm cau với liều 0,263 g/kg 1,315 g/kg đƣợc chứng minh không ảnh hƣởng đến thể trọng, chức tạo máu, chức gan, chức thận nhƣ mô bệnh học gan, thận suốt trình uống nhƣ sau ngừng uống 15 ngày [38] Yan Nie cs (2013), nghiên cứu độc tính sâm cau liều 30 g/kg 60 g/kg 60 ngày không gây dấu hiệu độc tính nào; nhiên liều 120 g/kg 60 ngày làm tổn thƣơng gan, thận số quan hệ sinh dục [39] - Ba kích: theo nghiên cứu độc tính bán trƣờng diễn dịch chiết ba kích đƣợc đánh giá an tồn, khơng gây độc tính dùng lâm sàng [40] - Kỷ tử: giống nhƣ loại trái thƣờng ăn khác, L barbarum không độc hại L barbarum đƣợc sử dụng theo truyền thống nhƣ loại thực phẩm nhƣ loại thuốc thảo dƣợc 2.500 năm mà khơng có độc tính cụ thể Khơng có độc tính đƣợc biết đến đƣợc báo cáo L barbarum 46 tài liệu khoa học sách giáo khoa y học cổ truyền châu Á Chính quyền Hà Lan năm 2004 Cơ quan Tiêu chuẩn Thực phẩm Vƣơng quốc Anh (2007) phân loại L barbarum loại thực phẩm loại thực phẩm mới, dựa việc sử dụng truyền thống lâu dài mà độc tính Các báo sách giáo khoa khác trích dẫn khía cạnh lợi ích truyền thống L barbarum không đề cập đến khía cạnh độc tính [41] Đối chiếu với kết nghiên cứu đƣợc công bố trƣớc độc tính dƣợc liệu đơn lẻ, với kết hợp hài hòa, khoa học dƣợc liệu kết độc tính nghiên cứu phù hợp 47 KẾT LUẬN Trên lô chuột cống trắng cho uống viên bao phim Fertil Pro for men với mức liều 280 mg/kg/ngày (tƣơng đƣơng liều điều trị quy đổi từ liều ngƣời sang liều chuột cống trắng) liều 1400 mg/kg/ngày, liên tục 60 ngày, cho thấy: - Tình trạng chung gồm hoạt động, ăn uống, tình trạng lơng, da, niêm mạc, chất tiết chuột bình thƣờng - Không gây ảnh hƣởng đến phát triển cân nặng chuột - Không làm thay đổi số huyết học (số lƣợng hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu, nồng độ huyết sắc tố, hematocrit, thể tích trung bình hồng cầu) - Khơng làm thay đổi tiêu sinh hóa máu bao gồm hoạt độ enzym AST, ALT, albumin, creatinin cholesterol toàn phần - Không gây tổn thƣơng mô bệnh học gan, lách, thận Nhƣ vậy, viên bao phim Fertil Pro for men an toàn mức liều dùng thời gian sử dụng nghiên cứu thực nghiệm chuột cống trắng 48 KIẾN NGHỊ Viên bao phim Fertil Pro for men đƣợc nghiên cứu sâu tính an toàn tác dụng, làm sở cho việc sử dụng rộng rãi lâm sàng, cụ thể: - Đánh giá sâu tính an tồn viên bao phim Fertil Pro for men động vật thực nghiệm: độc tính sinh sản, độc tính gây đột biến nhiễm sắc thể… - Đánh giá tác dụng viên bao phim Fertil Pro for men động vật thực nghiệm: tác dụng làm tăng testosterol, tác dụng tăng ham muốn tình dục, tác dụng tăng lực… - Đánh giá tính an tồn tác dụng lâm sàng 49 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tra cứu dƣợc liệu, https://tracuuduoclieu.vn/, truy cập ngày 11/7/2022 Đỗ Tất Lợi (2015) Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học, 234 - 914 Tran Duc Dai, Trinh Thi Thuy, Nguyen Ngoc Tuan, et al (2018) Chemical constituents of Balanophora laxiflora Hemsley collected in Tuyen Quang Part III - Phenolic compounds, Vietnam Journal of Chemistr: 254 Trần Quốc Bảo, Trần Quốc Bình (2011) Thuốc Y học cổ truyền ứng dụng lâm sàng, Nhà xuất Y học Hà Nội, 219 - 220 Nguyễn Xuân Hƣớng (2008) Các phương pháp bào chế đông dược Nhà xuất Y học, 311 - 312 Zhen-Hui Wang, Jian Huang, Xiao-Ci Ma, et al (2019) Phenolic glycosides from Curculigo orchioides Gaertn, Fitoterapia,86: - Nguyễn Thanh Hải, Nguyễn Thị Thùy Linh, Nguyễn đức trƣờng, et al (2019) Sử dụng dƣợc liệu Sâm cau (Curculigo orchioides) Nhục thung dung (Herba cistanches caulis cistanchis) nâng cao chất lƣợng tinh dịch, tinh trùng chó đực giống American Bully Tạp chí khoa học nơng nghiệp việt nam 2019, 505 - 507 Phan Quốc Kinh (2011) Giáo trình hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học, Nhà xuất Giáo dục Việt Nam, 215 Phạm Thanh Kỳ (2015) Dược liệu học tập 1, Nhà xuất Y học, 234 656 10 Đỗ Huy Bích cs (2006) Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, Tập 2, Quyển 1, Nhà xuất khoa học kỹ thuật, 105 - 110 11 Trần Mỹ Tiên, Nguyễn Mai Thanh Tâm, Trần Công Luận, et al (2012) Nghiên cứu tác dụng hƣớng sinh dục nam Ba kích (Morinda officinalis How.), Tạp chí Y học Thành phố Hồ Chí Minh, 192 - 198 12 Nguyễn Xuân Hƣớng (2008) Các phương pháp bào chế đông dược, Nhà xuất y học, 253 - 254 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 Potterat O (2010) Goji (Lycium barbarum and L chinense): Phytochemistry, Pharmacology and Safety in the Perspective of Traditional Uses and Recent Popularity, Planta Med, 76: - 19 Chang RCC, So KF (2008) Use of Anti-aging Herbal Medicine, Lycium barbarum, Against Aging-associated Diseases, What Do We Know So Far? Cell Mol Neurobiol, 28: 643 - 652 Li XM, Ma YL, Liu XJ (2007) Effect of the Lycium barbarum polysaccharides on age-related oxidative stress in aged mice, J Ethnopharmacol, 111(3): 504 - 511 Luo Q, Cui X, Yan J et al (2006) Lycium barbarum polysaccharides: Protective effects against heat-induced damage of rat testes and H2O2 induced DNA damage in mouse testicular cells and beneficial effect on sexual behavior and reProductive function of hemicastrated rats, Life Sci, 79(7): 613 - 621 Ru-Xue Zhang, Mao-Xing Li, Zheng-Ping Jia (2008) Rehmannia glutinosa: Review of botany, chemistry and pharmacology, Journal of Ethnopharmacology, 117(2): 199 - 214 Nguyễn Thị Dƣợc, Đỗ Đăng Giáp, Trịnh Thị Hƣơng, et al (2018) Ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng lên tăng sinh phát sinh hình thái mơ sẹo có nguồn gốc từ tử diệp bá bệnh (Eurycoma longifolia), Tạp chí Khoa học cơng nghệ Thực phẩm 15, (1): 65 - 75 Rehman SU, Choe K and Yoo HH (2016) Review on a Traditional Herbal Medicine, Eurycoma longifolia Jack (Tongkat Ali): Its Traditional Uses, Chemistry, Evidence-Based Pharmacology and Toxicology, Molecules 2016: 21 - 331 Pramoto H (2017) Eurycoma longifolia extract increases intracellular Production activity of luteinizing hormone (LH) in pituitary International Symposium on Current Progress in Mathematics and Sciences 2016 (ISCPMS 2016), AIP Conference Proceedings, 1862(1) Đỗ Duy Bích - Bùi Xuân Chƣơng (2007) Thuốc - thuốc - vị thuốc bổ dưỡng chữa bệnh, Nhà xuất y học Hà Nội, 89 - 92 Cục Khoa học Công nghệ Đào tạo - Bộ Y tế (2015) Hướng dẫn thử nghiệm tiền lâm sàng lâm sàng thuốc đông y, thuốc từ dược liệu, Ban 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 hành kèm theo Quyết định số 141/QĐ-K2ĐT ngày 27 tháng 10 năm 2015 Cục trƣởng Cục Khoa học Công nghệ Đào tạo Association of Southeast Asian Nations (ASEAN) (2016) Asean common technical dossier for the registration of pharmaceuticals for human use World Health Organisation (2000) General Guidelines for Methodologies on Research and Evaluation of Traditional Medicine, Geneva, Switzerland Bạch Vọng Hải cs (2019) Hóa sinh y học, Nhà xuất Quân đội nhân dân, Hà Nội, 283 - 390 Lê Văn Sơn cs (2007) Sinh lý học Tập 1, Nhà xuất Quân đội nhân dân, Hà Nội, 63 - 89 Hoàng Văn Cúc, Nguyễn Văn Huy cs (2006) Giải phẫu người, Nhà xuất Y học, Hà Nội, 244 - 290 Đỗ Trung Đàm (2006) Phương pháp ngoại suy liều có hiệu tương đương người động vật thí nghiệm, Nhà xuất khoa học kỹ thuật Bộ Y tế (2007) Quyết định số 01/2007/ QĐ-BYT việc ban hành“ Quy định thử thuốc lâm sàng” Turner R.A (1971) “Screening method in pharmacology”, Volume II: 75 - 85 OECD (2002) Drug safety evaluation I: Acute and subchronic toxicity assessement, USA Academy Press Đỗ Trung Đàm (2014) Phương pháp xác định độc tính thuốc, Nhà xuất Y học, Hà Nội, Harry O., Graham B., Denise R., et al (2000) Concordance of the toxicity of pharmaceuticals in humans and in animals, Regulatory Toxicology and Pharmacology, 32(1): 56-67 Tạ Thành Văn (2013) Hóa sinh lâm sàng, Nhà xuất Y học, Hà Nội, 16 - 73 35 Vũ Đình Vinh (2001) Hướng dẫn sử dụng xét nghiệm sinh hoá, Nhà xuất Y học, Hà Nội, 115 - 287 34 Nguyễn Đạt Anh, Nguyễn Thị Hƣơng (2013) Các xét nghiệm thường quy áp dụng thực hành lâm sàng, Nhà xuất Y học, Hà Nội, 46 - 98 37 Elumalai A., Chandiran I S and Balamuthu K (2013) An investigation on preliminary phytochemical and safety Profiles of methanolic root extract of Curculigo orchioides, Journal of pharmacy research, 7(8): 692 - 696 36 38 Phạm Thị Nguyệt Hằng, Nguyễn Văn Khiêm Nguyễn Văn Khởi (2017) Nghiên cứu độc tính cấp, bán trƣờng diễn tác dụng tăng lực cao chiết cồn sâm cau, Tạp chí Dược liệu, 4(22): 239 - 247 39 Nie Y., Dong X., He Y., et al (2013) Medicinal plants of genus Curculigo: traditional uses and a phytochemical and ethnopharmacological review, Journal of ethnopharmacology, 147(3): 547 - 563 40 Zhang J H., Xin H L., Xu Y M., et al (2018) Morinda officinalis How.-A comprehensive review of traditional uses, phytochemistry and pharmacology, Journal of ethnopharmacology, 213 - 255 41 Harunobu A and Norman R F (2011) A review of botanical characteristics, phytochemistry, clinical relevance in efficacy and safety of Lycium barbarum fruit (Goji), Food research international, 44(7): 1702 - 1717 ... độc tính bán trường diễn viên bao phim Fertil Pro for men động vật thực nghiệm? ?? với mục tiêu sau: Đánh giá đƣợc độc tính bán trƣờng diễn viên bao phim Fertil Pro for men chuột cống trắng CHƢƠNG... hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men lên hoạt độ enzym AST ALT 35 3.5 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men lên nồng độ creatinin máu 36 3.6 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men lên... 3.2.2 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men đến chức 42 tạo máu 3.2.3 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men đến chức 43 gan 3.2.4 Ảnh hƣởng viên bao phim Fertil Pro for men đến chức 44