BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y NGUYỄN THÙY TRANG ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG HẠ HUYẾT ÁP CỦA VIÊN NANG GERANIIN TRÊN ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ ĐẠI HỌC HÀ NỘI 2022 B.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y NGUYỄN THÙY TRANG ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG HẠ HUYẾT ÁP CỦA VIÊN NANG GERANIIN TRÊN ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ ĐẠI HỌC HÀ NỘI - 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y NGUYỄN THÙY TRANG ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG HẠ HUYẾT ÁP CỦA VIÊN NANG GERANIIN TRÊN ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ ĐẠI HỌC Cán hƣớng dẫn: Ths Nguyễn Thái Biềng TS Trần Bá Hiếu HÀ NỘI - 2022 LỜI CẢM ƠN Sau thời gian dài học tập Học viện Quân y, đƣợc giúp đỡ Nhà trƣờng Phịng, Ban, Bộ mơn Học viện Viện Đào tạo Dƣợc, đến tơi hồn thành chƣơng trình học tập Tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Đảng ủy - Ban Giám đốc Học viện Viện Đào tạo Dƣợc, Phịng Đào tạo, Bộ mơn Dƣợc lý - Viện Đào tạo Dƣợc tạo điều kiện thuận lợi cho tơi thực hồn thành khóa luận Tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc đến Thạc sĩ Nguyễn Thái Biềng Tiến sĩ Trần Bá Hiếu, ngƣời Thầy tận tình truyền đạt kiến thức cho tôi, động viên giúp đỡ trực tiếp hƣớng dẫn tơi q trình học tập, nghiên cứu hồn thành khóa luận Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Thầy, Cơ tồn thể Cán bộ, Nhân viên Viện Đào tạo Dƣợc, đặc biệt Bộ môn Dƣợc lý ln ln nhiệt tình giúp đỡ, hƣớng dẫn tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình học tập, nghiên cứu để tơi hồn thành khóa luận Tôi xin trân trọng cảm ơn Thầy Cô, Nhà khoa học Hội đồng chấm khóa luận dành nhiều thời gian ý kiến q báu q trình hồn thiện bảo vệ khóa luận Tơi vơ biết ơn chăm sóc, động viên gia đình, ngƣời thân yêu tôi, luôn bên cạnh chia sẻ với điều sống Tôi trân trọng cảm ơn quan tâm giúp đỡ tình cảm quý báu bạn bè, đồng nghiệp dành cho Hà Nội, ngày 12 tháng 07 năm 2022 Học viên Nguyễn Thùy Trang MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG - TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ VIÊN NANG GERANIIN 1.1.1 Cơng thức cấu tạo, tính chất geraniin 1.1.2 Nguồn gốc, phân bố chất geraniin thực vật 1.1.3 Tổng quan vỏ Chôm chôm 1.1.4 Tác dụng chất geraniin 1.2 TỔNG QUAN VỀ BỆNH TĂNG HUYẾT ÁP 11 1.2.1 Tổng quan huyết áp 11 1.2.2 Tổng quan tăng huyết áp 11 1.2.3 Thuốc điều trị tăng huyết áp 21 1.3 MỘT SỐ MƠ HÌNH GÂY TĂNG HUYẾT ÁP TRÊN ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM 25 CHƢƠNG NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU .29 2.1.1 Chế phẩm nghiên cứu 29 2.1.2 Động vật nghiên cứu .30 2.1.3 Hóa chất nghiên cứu .31 2.1.4 Dụng cụ, máy móc, thiết bị 31 2.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 33 2.2.1 Phƣơng pháp nghiên cứu đánh giá tác dụng hạ huyết áp geraniin động vật thực nghiệm .33 2.2.2 Xử lý số liệu 34 2.3 ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU .34 2.4 ĐẠO ĐỨC NGHIÊN CỨU .34 CHƢƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN 35 3.1 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CỦA GERANIIN TRÊN HUYẾT ÁP TÂM THU CỦA CHUỘT NGHIÊN CỨU 35 3.2 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CỦA GERANIIN TRÊN HUYẾT ÁP TÂM TRƢƠNG CỦA CHUỘT NGHIÊN CỨU 37 3.3 KẾT QUẢ ĐÁNH GÍA TÁC DỤNG CỦA GERANIIN TRÊN HUYẾT ÁP TRUNG BÌNH CỦA CHUỘT NGHIÊN CỨU 39 3.4 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CỦA GERANIIN TRÊN NHỊP TIM CỦA CHUỘT NGHIÊN CỨU 41 3.5 BÀN LUẬN .42 3.5.1 Bàn luận chế phẩm 42 3.5.2 Bàn luận động vật thực nghiệm phƣơng pháp đo huyết áp 43 3.5.3 Bàn luận mơ hình gây tăng huyết áp chuột cống 45 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 48 KẾT LUẬN 48 KIẾN NGHỊ 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO 49 DANH MỤC CÁC BẢNG Tên bảng Trang Bảng 1.1 Một số nguồn phân lập chất geraniin tự nhiên Bảng 1.2 Phân loại THA theo ACC/AHA 2017 ESC/ESH (2018) 12 Bảng 1.3 Phân loại HA đo phòng khám theo VNHA/VSH (2018) 12 Bảng 3.1 Kết huyết áp tâm thu chuột 35 Bảng 3.2 Kết huyết áp tâm trƣơng chuột 37 Bảng 3.3 Kết huyết áp trung bình chuột 39 Bảng 3.4 Kết nhịp tim chuột 41 DANH MỤC CÁC HÌNH Tên hình Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo chất geraniin Hình 1.2 Geraniin bị thủy phân nƣớc sôi cho gallic acid, ellagic acid glucose Trang Hình 1.3 Hình ảnh vỏ chơm chơm Hình 1.4 Sơ đồ phân lập geraniin từ vỏ Chơm Chơm Hình 1.5 Cơ chế gây tăng huyết áp 13 Hình 2.1 Viên nang cứng Geraniin (a), lọ đựng viên nang Geraniin (b) bột nang Geraniin (c) 29 Hình 2.2 Chuột cống trắng chủng Wistar đạt tiêu chuẩn 30 Hình 2.3 Các dụng cụ thiết bị đƣợc sử dụng nghiên cứu 32 Hình 2.4 Sơ đồ quy trình đánh giá tác dụng hạ huyết áp geraniin động vật thực nghiệm 34 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT THỨ TỰ TÊN VIẾT TẮT DOCA HA Huyết áp ISH International Society of hypertension (Hội Tăng huyết áp quốc tế) THA Tăng huyết áp WHO The World Health Organisation (Tổ chức Y tế Thế giới) RAA Renin - angiotensin - aldosteron TÊN ĐẦY ĐỦ Deoxycorticosteron acetate ĐẶT VẤN ĐỀ Tăng huyết áp (THA) bệnh lý ngày phổ biến Theo số liệu thống kê The World Health Organisation (WHO - Tổ chức Y tế Thế giới), THA ảnh hƣởng đến sức khỏe tỷ ngƣời toàn giới [1,2] Phân tích tình trạng sức khỏe giới năm 2012, ƣớc tính tỷ lệ THA nam 29,2% 24,8% nữ [3] THA yếu tố nguy bệnh lý động mạch vành, thiếu máu tim nhƣ đột quy Trên giới, THA ƣớc tính gây 7,5 triệu trƣờng hợp tử vong năm, chiếm khoảng 12,8% tổng số trƣờng hợp [4] Để điều trị THA với điều chỉnh chế độ ăn uống, sinh hoạt, thuốc điều trị THA đƣợc sử dụng phổ biến Bệnh nhân phải sử dụng thuốc hàng ngày suốt đời để kiểm soát huyết áp [5] Tuy nhiên, thuốc hóa dƣợc thƣờng có giá thành cao với nhiều tác dụng không mong muốn Xu hƣớng sử dụng sản phẩm từ thiên nhiên, hỗ trợ điều chỉnh huyết áp mức an toàn thời gian dài, khơng q tốn gây tác dụng phụ Trên sở cơng trình nghiên cứu thuốc cổ truyền nhƣ Lão quan thảo (Geranium thunbergii), Diệp hạ châu (Phyllanthus amarus) geraniin đƣợc phát hoạt chất có nhiều hoạt tính sinh học đáng ý, có khả hỗ trợ điều trị THA [5,6] Tuy nhiên, hàm lƣợng geraniin thuốc thấp, nữa, chi phí trồng trọt, thu hái chế biến thuốc dẫn đến giá thành trình phân lập geraniin cao Điều đáng lƣu ý vỏ Chôm chôm (Nephelium lappaceum L.) thuộc họ Bồ (Sapindaceae), nguồn phế thải công nghiệp chế biến hoa lại giàu geraniin [7] Vì vậy, nguồn nguyên liệu sẵn có, hứa hẹn giảm giá thành sản phẩm geraniin phân lập từ dƣợc liệu Bằng nỗ lực nghiên cứu, Phịng Thí nghiệm trọng điểm Cơng nghệ lọc, hóa dầu, Viện Hố học cơng nghiệp Việt Nam cho đời viên nang cứng Geraniin có thành phần geraniin chiết xuất tinh dùng để hạ huyết áp Vì vậy, tơi tiến hành đề tài “Đánh giá tác dụng hạ huyết áp viên nang Geraniin động vật thực nghiệm” nhằm mục tiêu: Đánh giá đƣợc tác dụng hạ huyết áp viên nang Geraniin chuột cống trắng gây tăng huyết áp cortisone CHƢƠNG - TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ VIÊN NANG GERANIIN 1.1.1 Công thức cấu tạo, tính chất geraniin Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo chất geraniin (Nguồn: https://www.researchgate.net/figure/Chemical-structure-ofgeraniin_fig1_329334372 [8] ) Cơng thức hóa học geraniin C41H28O27 với phân tử khối 952,64 g/mol Cấu trúc hợp chất đƣợc xác định quang phổ cộng hƣởng từ hạt nhân (NMR - Nuclear Magnetic Resonance) Sau kết tinh, geraniin tồn dƣới dạng tinh thể màu vàng nhạt Geraniin có chất ellagitannin tan đƣợc nƣớc, dễ dàng thủy phân nƣớc nóng, acid yếu, base yếu Geraniin tạo kết tủa protein alkaloid tan nƣớc [8] * Nhận xét: - Ở thời điểm trƣớc uống thuốc (trƣớc tiêm cortisone acetat lần đầu ngày thứ 21 kể từ bắt đầu tiêm cortisone acetat), huyết áp trung bình chuột lơ mơ hình, lơ tham chiếu, lơ trị lơ trị khơng có khác biệt (p > 0,05) - Tại thời điểm sau ngày uống thuốc (24h sau tiêm cortisone acetat lần cuối), huyết áp trung bình chuột lô tham chiếu (uống hydrochlorothiazide), lô trị lô trị (uống Geraniin) thấp so với lơ mơ hình nhƣ so với thời điểm ngày 21 (ngay trƣớc uống thuốc) với p < 0,05 p < 0,05, mức tƣơng đƣơng so với lô chứng (p > 0,05) Huyết áp trung bình lơ tham chiếu lơ trị sau ngày uống thuốc cao so với thời điểm ban đầu (p < 0,05), cịn lơ trị (uống Geraniin liều cao) trở tƣơng đƣơng (p > 0,05) - Lô trị (dùng Geraniin liều cao) có mức độ giảm huyết áp trung bình nhiều so lô tham chiếu lô trị 1, nhiên khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê lô (p > 0,05) 40 3.4 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CỦA GERANIIN TRÊN NHỊP TIM CỦA CHUỘT NGHIÊN CỨU Kết đánh giá tác dụng geraniin nhịp tim chuột nghiên cứu đƣợc trình bày bảng 3.4 Bảng 3.4 Kết nhịp tim chuột (n = 10, mean ± SD) Nhịp tim chuột (lần/phút) Lô chuột Lô chứng (1) Lơ mơ hình (2) Lơ tham chiếu (3) Lơ Geraniin 2,5mg/kg(4) Lô Geraniin 7,5mg/kg (5) pgiữa lô Trƣớc tiêm Ngày thứ 21 (kể từ 24h sau tiêm cortisone bắt đầu tiêm cortisone acetat lần đầu cortisone acetat) acetat lần cuối (a) (b) (c) pso với trƣớc 118,21 116,96 117,12 ± 12,25 ± 11,58 ± 11,04 115,92 119,13 116,93 ± 12,48 ± 12,47 ± 12,11 116,41 115,85 115,99 pc-b < 0,05 ± 10,69 ± 12,32 ± 13,27 pc-a > 0,05 117,19 118,09 119,02 pc-b < 0,05 ± 11,88 ± 13,05 ± 11,86 pc-a > 0,05 118,04 118,64 117,61 pc-b < 0,05 ± 12,15 ± 11,69 ± 12,03 pc-a > 0,05 p2,3,4,5-1 < 0,05 p3,4,5-1 > 0,05 p3,4,5-2 > 0,05 p1,3,4,5-2 < 0,05 pgiữa lô 3,4,5 > 0,05 pgiữacáclô3,4,5 > 0,05 > 0,05 41 - - - * Nhận xét: - So sánh lô thời điểm, nhƣ so sánh lô thời điểm đo, nhịp tim chuột thay đổi có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Từ kết nghiên cứu cho thấy, Geraniin cho chuột uống liều 2,5 mg/kg/ngày 7,5 mg/kg/ngày ngày liên tục làm giảm huyết áp tâm thu, huyết áp tâm trƣơng huyết áp trung bình chuột gây tăng huyết áp tiêm cortisone acetat uống dung dịch natri chloride 1%, khác biệt có ý nghĩa thống kê so với trƣớc uống thuốc nhƣ so với lơ mơ hình uống nƣớc cất (p < 0,05), đƣa huyết áp mức tƣơng đƣơng so với lô chứng (p > 0,05) Lô dùng liều cao gây hạ huyết áp mạnh nhƣng chƣa đạt ý nghĩa thống kê so với lô dùng liều thấp Các tác dụng Geraniin tƣơng đƣơng so với hydrochlorothiazide 25 mg/kg/ngày Geraniin không gây ảnh hƣởng lên nhịp tim bình thƣờng chuột (p > 0,05) 3.5 BÀN LUẬN 3.5.1 Bàn luận chế phẩm Chôm chôm ăn phổ biến vùng nhiệt đới Đông Nam Á với tên khoa học Nephelium lappaceum L., loài vùng nhiệt đới, thuộc họ Bồ (Sapindaceae) Trên giới có số nghiên cứu tác dụng hạ huyết áp mức liều thấp geraniin chiết xuất từ Chôm chôm Tại Việt Nam, đến chƣa có báo cáo cách chiết tách nhƣ tác dụng dƣợc lý hoạt chất Hợp chất geraniin đƣợc phân lập lần từ Geranium thunbergii vào năm 1977, cấu trúc hợp chất đƣợc nghiên cứu chi tiết đầy đủ phƣơng pháp đại Trong nghiên cứu khác Lin cộng sự, geraniin đƣợc phân lập từ Diệp hạ châu (Phyllanthus urinaria L.) Chuột bị tăng huyết áp nguyên phát đƣợc uống geraniin liều mg/kg/ngày Sự thay đổi huyết áp tâm thu huyết áp tâm trƣơng đƣợc đo sau 24 so sánh với captopril liều mg/kg/ngày Geraniin thể tác dụng hạ huyết áp tâm thu huyết áp tâm trƣơng đáng kể với lơ mơ hình thời điểm sau 2, 4, 6, 24 Cũng nghiên cứu trên, geraniin đƣợc chứng minh có hoạt 42 tính ức chế enzym chuyển dạng angiotensin đánh giá tác dụng invitro làm hạ huyết áp [26] Ngoài ra, ảnh hƣởng geraniin đƣợc phân lập từ Sòi (Sapium sebiferum) đến huyết áp đƣợc nghiên cứu chuột tăng huyết áp nguyên phát Geraniin đƣợc tiêm vào tĩnh mạch chuột có tác dụng làm giảm huyết áp động mạch trung bình theo cách phụ thuộc vào liều lƣợng mà không ảnh hƣởng đến nhịp tim Geraniin đƣợc nghiên cứu tác dụng gây giãn mạch thông qua việc giảm giải phóng noradrenalin Khả hạ huyết áp geraniin từ Sapium sebiferum đƣợc Cheng Hsu cơng bố Kết cho thấy geraniin có hoạt tính tƣơng đƣơng với thuốc hạ huyết áp thƣờng gặp nhƣ prazosin, nifedipin, guanethidin mức liều mg/kg/ngày mg/kg/ngày Liều gây chết 50% động vật thí nghiệm geraniin chuột đƣợc xác định 100 mg/kg/ngày Kết cho thấy geraniin sử dụng làm thuốc hạ huyết áp an toàn hiệu Một số nghiên cứu giới chứng minh chế tác dụng hạ huyết áp geraniin ức chế enzym chuyển angiotensin Nhóm thuốc ức chế enzym chuyển angiotensin có tác dụng hạ huyết áp làm giảm sức cản ngoại biên nhƣng ảnh hƣởng đến nhịp tim ức chế trƣơng lực giao cảm tăng trƣơng lực phó giao cảm So sánh với kết nghiên cứu, geraniin liều 2,5 mg/kg/24 liều 7,5 mg/kg/ngày có tác dụng gây hạ huyết áp tâm thu, huyết áp tâm trƣơng huyết áp trung bình, khơng gây ảnh hƣởng đến nhịp tim, kết tƣơng tự với báo cáo tác dụng hạ huyết áp geraniin giới Hơn nữa, geraniin liều 2,5 mg/kg/ngày có tác dụng hạ huyết áp trung bình tƣơng đƣơng so với liều 7,5 mg/kg/ngày Vì vậy, định hƣớng chọn liều sử dụng 3.5.2 Bàn luận động vật thực nghiệm phƣơng pháp đo huyết áp Trên giới, nghiên cứu thực nghiệm tác dụng huyết áp sử dụng nhiều loại động vật khác Trƣớc đây, động vật thƣờng đƣợc sử dụng chó, thỏ, mèo… Với động vật có kích thƣớc lớn nhƣ vậy, cần chi phí mua động vật cao khó tìm kiếm đƣợc nơi cung cấp động vật thí 43 nghiệm chuyên biệt dành cho nghiên cứu thực nghiệm Ƣu điểm sử dụng động vật kích thƣớc lớn kĩ thuật đo huyết áp xâm lấn dễ dàng động mạch cảnh, động mạch đùi lớn dễ tiến hành thủ thuật Kỹ thuật đo huyết áp động vật thực nghiệm trƣớc thƣờng áp dụng kỹ thuật xâm lấn (phẫu thuật bộc lộ động mạch) Phƣơng pháp có số nhƣợc điểm: chi phí nghiên cứu cao (động vật thực nghiệm lớn nên tiền mua động vật, hóa chất, mẫu thử nhiều), động vật chết nguyên nhân liên quan đến thuốc mê phẫu thuật thuốc mê ảnh hƣởng đến huyết áp [48] Hiện nay, với đời phƣơng pháp đo huyết áp không xâm lấn (đo huyết áp động mạch đuôi) với chế thông qua nhận cảm nhịp tim giải đƣợc số nhƣợc điểm Động vật thực nghiệm thƣờng đƣợc lựa chọn chuột cống có kích thƣớc nhỏ nên điều kiện ni giữ dễ dàng, chi phí mua động vật nghiên cứu thấp lƣợng hóa chất, mẫu thử cần dùng dùng động vật lớn [49] Một nhƣợc điểm phƣơng pháp đo huyết áp xâm lấn nêu phải gây mê động vật trƣớc phẫu thuật bộc lộ động mạch Quá trình gây mê động vật có số vấn đề: phải dị liều thuốc mê mức độ đáp ứng cá thể động vật với thuốc mê khác nhau, dùng liều chuột chết trình gây mê Hơn nữa, thuốc mê gây ảnh hƣởng đến huyết áp Tobin V Ansel nhận thấy huyết áp thay đổi từ 10 đến 30 phút đầu sau gây mê (biến thiên 6,29 mmHg với huyết áp tâm thu 5,27 mmHg với huyết áp tâm trƣơng), huyết áp biến thiên lớn sau gây mê từ 30 phút đến 60 phút (13,5 mmHg với huyết áp tâm thu 12,3 mmHg với huyết áp tâm trƣơng) [50] Phƣơng pháp đo huyết áp không xâm lấn không cần gây mê, không cần phẫu thuật bộc lộ động mạch Vì vậy, hạn chế đƣợc nhƣợc điểm phƣơng pháp đo huyết áp xâm lấn nêu Về nguyên lý, đo huyết áp không xâm lấn sử dụng vịng áp lực đặt vào chi để ngăn chặn dòng máu nhịp dòng chảy đƣợc cảm nhận phận cảm biến đặt phía xa gốc Huyết áp đƣợc 44 xác định cách theo dõi xuất biến nhịp tim Khi bơm căng (thời kỳ nén), vịng áp lực chèn ép động mạch làm mạch đến áp lực định Khi xả van (thời kỳ giảm nén), huyết áp tâm thu đƣợc xác định có tín hiệu mạch đập đầu tiên, huyết áp tâm trƣơng đƣợc xác định thời điểm đầu giai đoạn ổn định tín hiệu mạch Nguyên lý tƣơng tự nhƣ nguyên lý đo huyết áp không xâm lấn sử dụng băng áp lực ngƣời Điều khác biệt là, ngƣời sử dụng ống nghe để xác định nhịp tim, nhƣng hệ thống đo huyết áp không xâm lấn chuột sử dụng phận cảm biến mạch Ƣu điểm phƣơng pháp đo huyết áp không xâm lấn là: giảm giá thành, đơn giản, tốn thời gian, khơng cần gây mê, theo dõi huyết áp số lƣợng lớn động vật thực nghiệm, nhƣng ƣu điểm bật theo dõi huyết áp trƣớc - sau cá thể động vật Tuy nhiên, phƣơng pháp có nhƣợc điểm: chuột phải chịu stress q trình bơm áp lực, nhịp tim tăng Ngoài ra, số yếu tố khác nhƣ nhiệt độ mơi trƣờng ảnh hƣởng đến kết đo huyết áp [51] Kết nghiên cứu Maria Pauline cho thấy phƣơng pháp đo huyết áp không xâm lấn (đo huyết áp gián tiếp) xác, đáng tin cậy nhƣ đo huyết áp trực tiếp [48] Tƣơng tự nhƣ vậy, Xin Zhao cộng (2012) nghiên cứu chuột nhắt thấy huyết áp tâm thu huyết áp trung bình so sánh hai phƣơng pháp đo huyết áp xâm lấn không xâm lấn khác biệt có ý nghĩa thống kê [52] Vì nghiên cứu tơi sử dụng phƣơng pháp đo huyết áp không xâm lấn chuột cống trắng 3.5.3 Bàn luận mơ hình gây tăng huyết áp chuột cống Những năm gần đây, mơ hình gây tăng huyết áp phƣơng pháp phẫu thuật đƣợc đề cập mơ hình thƣờng khó thực hiện, tỷ lệ động vật chết trình thực nghiệm cao Vì vậy, mơ hình hƣớng đến gây tăng huyết áp không liên quan đến phẫu thuật, kỹ thuật tiến hành đơn giản kết gây tăng huyết áp khả quan 45 Trong nhóm mơ hình gây tăng huyết áp thực nghiệm khơng liên quan đến phẫu thuật, giới thƣờng sử dụng mơ hình gây tăng huyết áp nội tiết hormon nhóm glucocorticoid mineralcorticoid Glucocorticoid tự nhiên hormon vùng bó (lớp giữa) vỏ thƣợng thận sản xuất ra, bao gồm hai chất hydrocortisone cortisone Glucocorticoide có vai trị quan trọng điều hịa chuyển hóa chất glucid, protid, lipid, chống viêm, chống dị ứng ức chế miễn dịch Đây đƣợc coi nhóm hormon có vai trị quan trọng liên quan trực tiếp đến hoạt động có tính chất sinh mạng thể Glucocorticoide làm tăng hấp thu natri, giữ nƣớc, gây phù tăng huyết áp Cortisone acetat chế phẩm tổng hợp, có hoạt tính giữ muối nƣớc 0,8 lần hydrocortisone [53] Các corticoid đƣợc sử dụng để gây tăng huyết áp chuột cống thực nghiệm cortisone acetat, deoxycorticosteron acetat (DOCA) fludrocortison Mohamed Fouad Shalaby sử dụng fludrocortison liều 10mg/kg tiêm dƣới da chuột cống, lặp lại tuần để gây mơ hình tăng huyết áp, nhiên lƣợng fludrocortison phải sử dụng lớn, giá thành thuốc cao [54] Hiện nay, giới có nhiều nghiên cứu sử dụng DOCA để gây mơ hình tăng huyết áp Ngoài tác dụng giữ muối nƣớc, dẫn đến tăng thể tích máu gây tăng huyết áp, DOCA cịn làm tăng tiết vasopressin gây co mạch [47] Dùng DOCA gây mơ hình tăng huyết áp động vật thực nghiệm đạt hiệu cao, phƣơng pháp tƣơng đối đơn giản thời gian gây mơ hình khơng q dài, nhiên, giá thành DOCA cao Abbie I Knowlton cộng tiến hành gây mơ hình tăng huyết áp chuột cống chủng Sprague-Dawley hai thuốc: cortisone acetat liều 2,5 mg/kg/ngày DOCA liều 2,5 mg/kg/ngày, chế độ ăn hạn chế muối chế độ ăn với hàm lƣợng muối cao chuột cắt bỏ tuyến thƣợng thận chuột bình thƣờng So sánh mức độ gây tăng huyết áp hai thuốc này, tác giả nhận thấy mức huyết áp tăng nhanh tƣơng tự hai nhóm dùng cortisone acetat DOCA cho động vật ăn chế độ 46 nhiều muối [47] Cortisone acetat có giá thành rẻ nhiều so với DOCA, nên lựa chọn cortisone acetat phù hợp điều kiện kinh phí nghiên cứu cịn hạn chế Ở Việt Nam, năm 2015, Nguyễn Thị Cẩm Nhung gây mơ hình tăng huyết áp chuột cống cortison acetat tiêm dƣới da với liều tƣơng tự Abbi Knowlton, kết hợp uống NaCl 1% thời gian 21 ngày, kết huyết áp tâm thu huyết áp tâm trƣơng tăng có ý nghĩa thống kê so với lơ chứng [55] Do nghiên cứu tơi, chuột đƣợc gây tăng huyết áp cách tiêm dƣới da cortisone acetat liều 2,5 mg/kg/ngày uống dung dịch natri chloride 1% thay nƣớc uống hàng ngày liên tục 28 ngày theo phƣơng pháp Abbie I Knowlton 47 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Trên chuột cống trắng gây tăng huyết áp cho uống geraniin liều 2,5 mg/kg/ngày liều 7,5 mg/kg/ngày thể tác dụng: - Gây hạ huyết áp tâm thu, huyết áp tâm trƣơng huyết áp trung bình - Không gây ảnh hƣởng đến nhịp tim chuột Các tác dụng geraniin tƣơng đƣơng so với hydrochlorothiazide liều 25 mg/kg/ngày Kết cho thấy hoạt chất geraniin có hiệu làm hạ huyết áp tốt an toàn KIẾN NGHỊ - Tiếp tục đánh giá tác dụng tác dụng hạ huyết áp geraniin động vật thực nghiệm - Tiếp tục đánh giá thêm nhiều tác dụng khác geraniin nhƣ: tác dụng hạ đƣờng huyết, tác dụng chống viêm, tác dụng ức chế khối u động vật thực nghiệm 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ Y Tế (2017) Thực trạng đáng báo động bệnh Tăng huyết áp Việt Nam World Health Organization (2014) Prevalence of raised blood pressure: situations and trends, WHO Global Health Observatory JitendraKumar (2013) Epidemiology of hypertension Clinical Queries: Nephrology (2): 56 - 61 WHO (2008) Raised Blood Pressure Global Health Observatory (GHO) data Đào Văn Phan (2020) Thuốc chữa tăng huyết áp, Dược lý học lâm sàng Nhà xuất Y học, 393 - 409 Patel J R., Tripathi P., Sharma V et al (2011) Phyllanthus amarus: ethnomedicinal uses, phytochemistry and pharmacology: a review J Ethnopharmacol 138 (2): 286 - 313 Palanisamy Uma, Manaharan Thamilvaani, Teng Ling Lai et al (2011) Rambutan rind in the management of hyperglycemia Food Research International 44 (7): 2.278 - 2.282 Perera Asiri, Appleton David, Ying Loh Hwee et al (2012) Large scale purification of geraniin from Nephelium lappaceum rind waste using reversephase chromatography Separation and Purification Technology 98: 145 - 149 Cheng Hong Sheng, Ton So Ha Abdul Kadir Khalid (2017) Ellagitannin geraniin: a review of the natural sources, biosynthesis, pharmacokinetics and biological effects Phytochemistry Reviews 16 (1): 159 - 193 10 Okuda, T., Mori, K., & Hatano, T (1980) The distribution of geraniin and mallotusinic acid in the order geraniales Phytochemistry 19 (4): 547 - 551 11 Okuda T., Yoshida T Mori K (1975) Consitutents of Geranium thunbergii Sieb et Zucc II Ellagitannins (1) (author's transl) Yakugaku Zasshi 95 (12): 1.462 - 49 12 Velázquez-González C., Cariño-Cortés R., Gayosso de Lucio J A et al (2014) Antinociceptive and anti-inflammatory activities of Geranium bellum and its isolated compounds BMC Complement Altern Med 14: 506 13 Yang Y C., Yang Z W., Zhang Z H et al (2013) Effect of acid hydrolysis in the microwave-assisted extraction of phenolic compounds from Geranium sibiricum Linne with the guidance of antibacterial activity J Med Plants Res 7: 819 - 830 14 Rakhimov R N., Abdulladzhanova N G., Kamaev F G (2011) Phenolic compounds from Euphorbia canescens and E franchetii Chemistry of natural compounds 47 (2): 286 - 287 15 Tabata H., Katsube T., Tsuma T et al (2008) Isolation and evaluation of the radical-scavenging activity of the antioxidants in the leaves of an edible plant, Mallotus japonicus Food Chem 109 (1): 64 - 71 16 Thitilertdecha N., Teerawutgulrag A., Kilburn J D et al (2010) Identification of major phenolic compounds from Nephelium lappaceum L and their antioxidant activities Molecules 15 (3): 1.453 - 65 17 Ndjonka D., Bergmann B., Agyare C et al (2012) In vitro activity of extracts and isolated polyphenols from West African medicinal plants against Plasmodium falciparum Parasitol Res 111 (2): 827 - 34 18 Pi-Jen Tsai Josephine Azaria Gusman (2015).Extraction of Antioxidant Compounds from Rambutan Peel as Agricultural Waste in Taiwan Journal of Tropical Crop Science 2(2) 19 Báo sức khỏe đời sống (2015).Chôm chôm lợi ích biết 20 Thamilvaani Manaharanb Uma Palanisamya, Ling Lai Tengb, Ammu K.C Radhakrishnanc, Thavamanithevi Subramaniamd, Theanmalar Masilamanid (2011).Rambutan rind in the management of hyperglycemia Food Research International 44 (7): 2.278 - 2.282 21 Teerawutgulrag A Thitilertdecha N, Kilburn JD, Rakariyatham N (2010) Identification of Major Phenolic Compounds from Nephelium lappaceum L and Their Antioxidant Activities Molecules 15: 1.453 - 1.465 50 22 Palanisamy Uma D., Ling Lai Teng, Manaharan Thamilvaani et al (2011) Rapid isolation of geraniin from Nephelium lappaceum rind waste and its anti-hyperglycemic activity Food Chemistry 127 (1): 21 - 27 23 Muhtadi, Primarianti Alfiani Urilia Sujono Tanti Azizah (2015) Antidiabetic Activity of Durian (Durio Zibethinus Murr.) and Rambutan (Nephelium Lappaceum L.) Fruit Peels in Alloxan Diabetic Rats Procedia Food Science 3: 255 - 261 24 Caldeira A S P., Mbiakop U C., Pádua R M et al (2021) Bioguided chemical characterization of pequi (Caryocar brasiliense) fruit peels towards an anti-diabetic activity Food Chem 25 Phang S C W., Palanisamy U D Kadir K A (2019) Effects of geraniin (rambutan rind extract) on blood pressure and metabolic parameters in rats fed high-fat diet J Integr Med 17 (2): 100 - 106 26 Lin S Y., Wang C C., Lu Y L et al (2008) Antioxidant, anti-semicarbazidesensitive amine oxidase, and anti-hypertensive activities of geraniin isolated from Phyllanthus urinaria Food Chem Toxicol 46 (7): 2.485 - 92 27 Ogunwande Isiaka A., Avoseh Opeyemi N., Igile Daniel O et al (2019) Chemical Constituents, Anti-nociceptive and Anti-inflammatory Activities of Essential Oil of Phyllanthus muellerianus Natural Product Communications 14 (5): 1.934.578 - 1.984.635 28 Trƣờng Đại học Y Hà Nội - Bộ môn Tim mạch (2006) Tăng huyết áp, Bài giảng học viên sau đại học 29 Whelton P K., et al (2018) 2017 ACC/AHA/AAPA/ABC/ACPM/ AGS/APhA/ASH/ASPC/NMA/PCNA guideline for the prevention, detection, evaluation, and management of high blood pressure in adults: a report of the American College of Cardiology/American Heart Association Task Force on Clinical Practice Guidelines Journal of the American College of Cardiology 71(19): 127 - 248 30 Williams B., et al (2018) 2018 ESC/ESH Guidelines for the management of arterial hypertension European heart journal 39 (33): 3.021 - 3.104 51 31 Huỳnh Văn Minh, Trần Văn Huy (2018) Khuyến cáo chẩn đoán điều trị tăng huyết áp Hội Tim mạch Việt Nam, - 52 32 Đào Văn Phan (2016), Dược lý học, Nhà xuất Giáo Dục Việt Nam, Bộ Y Tế, 309-334 33 World Health Organization (2013) World Health Day: A global brief on hypertension Silent killer, global public health crisis World Health Organization, - 36 34 Global Economic Burden of Non-communicable Diseases (2011), World Economic Forum and the Harvard School of Public Health, World Economic 35 Bộ Y tế (2012) Triển khai kế hoạch năm 2013, Chương trình mục tiêu quốc gia y tế năm 2013, Hà Nội 36 Bộ Y tế (2017) Hội nghị cơng tác phịng, chống bệnh không lây nhiễm Văn số 813/TB-BYT ngày 20/7/2017, Hà Nội 37 National Institutes of Health (2012) Who is at risk for high blood pressure 38 Department of Economic and Social Affairs (2012) Population ageing and development 2012, United nations 39 Park Y H., Song M., Cho B L et al (2011) The effects of an integrated health education and exercise program in community-dwelling older adults with hypertension: a randomized controlled trial Patient Educ Couns 82 (1): 133 - 40 Robert D., Gandasentana., Rina K., Kusumarata (2011) Physical acvity reduced hypertension in the elderly and cost-effective Universa medicine 30 (3): 173 - 181 41 Cuspidi C., Tadic M., Grassi G et al (2018) Treatment of hypertension: The ESH/ESC guidelines recommendations Pharmacol Res 128: 315 - 321 42 James PA, Oparil S, Carter BL, et al (2014) Evidence-Based Guideline for the Management of High Blood Pressure in Adults: Report From the Panel 52 Members Appointed to the Eighth Joint National Committee (JNC 8) JAMA 311 (5): 507 - 520 43 Williams B., Mancia G., Spiering W et al (2018) ESC/ESH Guidelines for the management of arterial hypertension Eur Heart J 39 (33): 3.021 - 3.104 44 Bộ Y tế (2007) Dược lý học, NXB Y học, Hà Nội 45 Rosendorff C., Lackland D T et al (AHA/ACC/ASH Scientific Statement) (2015) Treatment of hypertension in patients with coronary artery disease: a scientific statement from the American Heart Association, American College of Cardiology, and American Society of Hypertension Hypertension 65 (6): 1.372 - 407 46 Guyton A C., Hall J E (2015) Textbook of Medical Physiology, Saunders Company, Philadelphia 47 Knowlton AI et al (1952) Induction of arterial hypertension in normal and adrenalectomized rats given cortisone acetate J Exp Med 96 (3): 187 - 205 48 Pauline, Maria, Sandhya T Avadhany, and K N Maruthy (2011) Non invasive measurement of systolic blood pressure in rats: a simple technique Al Ameen Journal of Medical Science (4): 365 - 369 49 Anil Gangwar et al (2014) Noninvasive measurement of systolic blood pressure in rats: A novel technique Indian J Pharmacol 46 (3): 351 - 352 50 Tobin V Ansel et al (2016) The Effect of Anesthesia on Blood Pressure Measured Noninvasively by Using the Tail-Cuff Method in Marmosets (Callithrix jacchus) J Am Assoc Lab Anim Sci 55 (5): 594 - 600 51 Lin S Y., Wang C C., Lu Y L et al (2008) Antioxidant, anti-semicarbazidesensitive amine oxidase, and anti-hypertensive activities of geraniin isolated from Phyllanthus urinaria Food Chem Toxicol 46 (7): 2.485 - 92 52 Xin Zhao et al (2011) Arterial Pressure Monitoring in Mice Curr Protoc Mouse Biol 1: 105 - 122 53 Đào Văn Phan (2012) Dược lý học lâm sàng Nhà xuất Y học, Bộ Y Tế, 410 - 415, 401 53 54 Alsayed Ahmed Zaki Mohamed Fouad Shalaby (2016) Antihypertensive Effect of Valoneic Acid Dilactone on Fludrocortisone Induced Hypertensive Rats Pharmacologia (4): 211 - 216 55 Nguyễn Thị Cẩm Nhung (2015) Đánh giá tác dụng dịch chiết Harrisonia perforata Merr theo thướng điều trị tăng huyết áp Luận văn thạc sĩ dƣợc học, Trƣờng Đại Học Dƣợc Hà Nội 54 ... Nam cho đời viên nang cứng Geraniin có thành phần geraniin chiết xuất tinh dùng để hạ huyết áp Vì vậy, tiến hành đề tài ? ?Đánh giá tác dụng hạ huyết áp viên nang Geraniin động vật thực nghiệm? ?? nhằm... 35 3.1 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CỦA GERANIIN TRÊN HUYẾT ÁP TÂM THU CỦA CHUỘT NGHIÊN CỨU 35 3.2 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CỦA GERANIIN TRÊN HUYẾT ÁP TÂM TRƢƠNG CỦA CHUỘT NGHIÊN CỨU... Tính huyết áp trung bình chuột theo cơng thức: Huyết áp trung bình = 1/3 huyết áp tâm thu + 2/3 huyết áp tâm trƣơng 33 Hình 2.4 Sơ đồ quy trình đánh giá tác dụng hạ huyết áp geraniin động vật thực