1. Trang chủ
  2. » Luận Văn - Báo Cáo

Đánh giá tác dụng tăng cường miễn dịch của bài thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm trên động vật thực nghiệm

74 4 0

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Định dạng
Số trang 74
Dung lượng 2,16 MB

Nội dung

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y PHẠM KHÁNH HUYỀN ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG TĂNG CƯỜNG MIỄN DỊCH CỦA BÀI THUỐC CỬU VỊ KHƯƠNG HOẠT THANG GIA GIẢM TRÊN ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM KHÓA LUẬN TỐT NGH.

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y PHẠM KHÁNH HUYỀN ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG TĂNG CƯỜNG MIỄN DỊCH CỦA BÀI THUỐC CỬU VỊ KHƯƠNG HOẠT THANG GIA GIẢM TRÊN ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC HÀ NỘI - 2022 LỜI CẢM ƠN Sau thời gian dài học tập Học viện Quân y, giúp đỡ Nhà trường Phịng, Ban, Bộ mơn Học viện Viện Đào tạo Dược, đến hồn thành chương trình học tập Tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Đảng ủy - Ban Giám đốc Học viện Viện Đào tạo Dược, Phòng Đào tạo, Bộ môn Dược lý - Viện Đào tạo Dược tạo điều kiện thuận lợi cho thực hồn thành khóa luận tốt nghiệp Tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc đến Thạc sĩ Bùi Thị Bích Vân, người Cơ tận tình truyền đạt kiến thức cho tơi, động viên giúp đỡ trực tiếp hướng dẫn q trình học tập, nghiên cứu hồn thành khóa luận Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến Thầy, Cơ tồn thể Cán bộ, Nhân viên Viện Đào tạo Dược, đặc biệt Bộ mơn Dược lý ln ln nhiệt tình giúp đỡ, hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình học tập, nghiên cứu để tơi hồn thành khóa luận Tơi xin trân trọng cảm ơn Thầy Cô, Nhà khoa học Hội đồng chấm khóa luận dành nhiều thời gian tơi ý kiến q báu q trình hồn thiện bảo vệ khóa luận Tơi vơ biết ơn chăm sóc, động viên gia đình, người thân yêu tôi, luôn bên cạnh chia sẻ với điều sống Tôi trân trọng cảm ơn quan tâm giúp đỡ tình cảm quý báu bạn bè, đồng nghiệp dành cho Hà Nội, ngày 30 tháng năm 2022 Học viên Phạm Khánh Huyền MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH, BIỂU ĐỒ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ BÀI THUỐC CỬU VỊ KHƯƠNG HOẠT THANG GIA GIẢM 1.1.1 Khương hoạt 1.1.2 Phòng phong 1.1.3 Xuyên khung 1.1.4 Sinh địa 10 1.1.5 Cam thảo 11 1.1.6 Thương truật 12 1.1.7 Quế chi 13 1.1.8 Bạch 15 1.1.9 Hoàng cầm 16 1.1.10 Kim ngân hoa 18 1.1.11 Cát cánh 19 1.1.12 Bách 20 1.2 ĐẠI CƯƠNG VỀ MIỄN DỊCH 21 1.2.1 Định nghĩa 21 1.2.2 Phân loại 21 1.2.2.1 Đáp ứng miễn dịch tự nhiên 22 1.2.2.2 Đáp ứng miễn dịch thu 22 1.2.3 23 Suy giảm miễn dịch lâm sàng 1.2.3.1 Khái niệm 23 1.2.3.2 Phân loại 23 1.2.4 Các chất kích thích miễn dịch sử dụng lâm sàng 23 1.2.5 Các tác nhân gây suy giảm miễn dịch sử dụng thực nghiệm 27 1.3 MƠ HÌNH GÂY SUY GIẢM MIỄN DỊCH VÀ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG TĂNG CƯỜNG MIỄN DỊCH CỦA CHẤT KÍCH THÍCH MIỄN DỊCH 29 1.3.1 Cơ chế tác dụng cyclophosphamide 29 1.3.2 Lựa chọn điều kiện thí nghiệm để triển khai mơ hình 29 1.3.3 Các thơng số đánh giá 30 CHƯƠNG II NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 31 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 31 2.1.1 Chế phẩm nghiên cứu 31 2.1.2 Động vật nghiên cứu 31 2.1.3 Thiết bị nghiên cứu 32 2.1.4 Hóa chất nghiên cứu 32 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 32 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu 32 2.2.2 Các tiêu nghiên cứu 33 2.2.3 Sơ đồ nghiên cứu 35 2.3 XỬ LÝ SỐ LIỆU 38 2.4 ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU 38 CHƯƠNG III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN 39 3.1 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CỦA BÀI THUỐC LÊN SỰ THAY ĐỔI KHỐI LƯỢNG CƠ THỂ CHUỘT 39 3.2 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CỦA BÀI THUỐC LÊN SỰ THAY ĐỔI KHỐI LƯỢNG TƯƠNG ĐỐI LÁCH, TUYẾN ỨC 41 3.3 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CỦA BÀI THUỐC LÊN CÁC CHỈ SỐ HUYẾT HỌC 43 3.3.1 Kết đánh giá tác dụng thuốc lên số lượng công thức bạch cầu chuột nghiên cứu 43 3.3.2 Kết đánh giá tác dụng thuốc lên số tiêu huyết học khác 45 3.4 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CỦA BÀI THUỐC LÊN LÊN MÔ BỆNH HỌC LÁCH VÀ TUYẾN ỨC 47 3.4.1 Kết đánh giá tác dụng mẫu thử lên lên mô bệnh học lách 47 3.4.2 Kết đánh giá tác dụng mẫu thử lên lên mô bệnh học tuyến ức 48 BÀN LUẬN 49 4.1 MÔ HÌNH GÂY SUY GIẢM MIễN DỊCH BẰNG CYCLOPHOSPHAMID 49 4.2 LỰA CHỌN CHỨNG DƯƠNG 50 4.3 ẢNH HƯỞNG CỦA BÀI TH́C CỬU VỊ KHƯƠNG LÊN MƠ HÌNH GÂY SUY GIẢM MIỄN DỊCH BẰNG CYCLOPHOSPHAMIDE VÀ SO SÁNH VỚI LÔ CHỨNG 51 4.3.1 Khối lượng chung 51 4.3.2 Lách tuyến ức 51 4.3.3 Công thức bạch cầu 53 4.3.4 Một số thông số huyết học khác 54 4.4.5 Giải phẫu bệnh 55 KẾT LUẬN 56 KIẾN NGHỊ 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO 58 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT STT Viết đầy đủ Viết tắt Acquired immunedeficiency syndrome AIDS (Hội chứng suy giảm miễn dịch mắc phải) AND Acid Deoxyribonucleic CD Cluster of differentiation CFU Meg Colony forming unit – megakaryocyte ConA Concanavalin A CR3 Complement receptor CSF Colony-stimulating factors CY Cyclophosphamide CYB2B Cytochrome P450 2B 10 DPPH 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl 11 EDTA Ethylenediaminetetraacetic acid i 12 EO Eosin 13 FKBP FK-binding protein Granulocyte colony-stimulating factor 14 G-CSF (Yếu tố kích thích bạch cầu hạt Colony) Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor 15 GM-CSF (Bạch cầu hạt đại thực bào thuộc địa yếu tố kích thích) 16 Hb Hemoglobin 17 Hct Hemactorit 18 HE Hematoxylin – Eosin Human immodeficiency virus 19 HIV (Virus suy giảm miễn dịch người) 20 IFN Interferon 21 Ig Immunoglobulin 22 IL Interleukin 23 JAK Janus kinase ii 24 LD Lethal Dose 25 LPS Lipopolysaccharid 26 LYM Lympho Mitogen-activated protein kinase 27 MAPK (Protein kinase hoạt hóa phân bào) 28 MCV Mean Corpuscular Volume (Thể tích hồng cầu) Major histocompatibility complex 29 MHC (Phức hợp hịa hợp mơ chủ yếu) 30 MO Mono Macrophage colony-stimulating factor 31 M-CSF (Yếu tố kích thích khuẩn lạc) 32 NEU Neutrophil 33 NK Natural killer cell (Tế bào tự nhiên) 34 NO Nitric oxide 35 NMSL Nước muối sinh lý iii 36 OA Ovalbumin + Al(OH)3 37 PLT Platelet Count (Tiểu cầu) 38 RBC Red Blood Cell (Hồng cầu) The signal transducers and activators 39 STAT (Các yếu tố hoạt hóa dẫn truyền tín hiệu phiên mã) 40 Tc Cytotoxic T lymphocyte 41 TLR Toll-like receptor 42 TNF Tumor necrosis factor 43 TNF-α Tumor Necrosis Factor α 44 UV Ultraviolet (Tia tử ngoại) 45 WBC White Blood Cell (Bạch cầu) World Health Organization 46 WHO (Tổ chức Y tế Thế giới) iv 3.4.2 Kết đánh giá tác dụng mẫu thử lên lên mô bệnh học tuyến ức Lơ chứng Lơ tham chiếu Lơ mơ hình Lơ trị Lơ trị Hình 3.3 Hình ảnh mơ bệnh học tuyến ức (HE x 40) Nhận xét: hình ảnh mơ bệnh học tuyến ức chuột lơ mơ hình cho thấy giảm đáng kể tế bào sản sinh bạch cầu vùng rìa Sự hồi phục nhìn thấy rõ lô dùng mẫu thử lô dùng 𝛽-glucan 48 BÀN LUẬN 4.1 MƠ HÌNH GÂY SUY GIẢM MIỄN DỊCH BẰNG CYCLOPHOSPHAMIDE Đa số chất kích thích miễn dịch thể rõ tác dụng hệ thống miễn dịch bị tổn thương hệ miễn dịch bình thường Vì vậy, để nghiên cứu tác dụng kích thích miễn dịch chất, người ta thường tiến hành nghiên cứu hệ miễn dịch bị suy yếu Hoạt động hệ miễn dịch chống lại tác nhân gây bệnh bao gồm vai trò đáp ứng miễn dịch tự nhiên miễn dịch đặc hiệu (miễn dịch dịch thể miễn dịch qua trung gian tế bào) Sự suy giảm miễn dịch xảy hàng rào bảo vệ bị tổn thương [20,21] Cho đến nay, để gây suy giảm miễn dịch thực nghiệm, nhà khoa học sử dụng nhiều tác nhân phương pháp khác tùy vào mục đích nghiên cứu dùng hóa chất, tia phóng xạ, vi sinh vật, mơ ung thư hay động vật biến đổi gen Trongđó, mơ hình gây suy giảm miễn dịch hóa chất (cyclophosphamide) trongnhững mơ hình sử dụng phổ biến giới Việt Nam Cyclophosphamide tác nhân alkyl hóa kìm tế bào Bản thân CY khơng có hoạt tính, nhiên, gan (và mô khác), nhờ enzyme CYP2B, CY bị biến đổi sinh học thành sản phẩm chuyển hóa có hoạt tính alkylhóa phospho-amide mustard, acrolein Các chất phản ứng liên kết đồnghóa trị với gốc guanin (G) ADN hình thành liên kết G-G sợi ADN liên kết chéo hai dải ADN, ngăn chặn chép phiên mã ADN CY ức chế phân chia tất tế bào tăng sinh (đặc biệt tế bào tủy xương), đó, miễn dịch, CY gây suy giảm đáp ứng miễn dịch dịch thể miễn dịch qua trung gian tế bào [4,41,42] Vì lý trên, CY sử dụng làm chất gây suy giảm miễn dịch chuột nhắt trắng Theo Hussain A (2013), LD50 CY tiêm màng bụng chuột nhắt trắng 360 mg/kg, chuyển hóa thải trừ nhanh vịng 20 - 30 49 phút Trên giới, nhiều nghiên cứu dùng liều nhỏ CY liên tục nhiều ngày tiêm màng bụng CY liều 80 mg/kg liên tục ngày hay CY liều 70 mg/kg 3ngày liên tiếp để gây suy giảm miễn dịch Tại Việt Nam, Phan Thị Phi Phivà cộng tiến hành tiêm CY cho chuột nhắt trắng với liều khác (từ liều thấp đến liều cao), từ dùng cách quãng đến dùng lần Nếu dùng liều thấp cách qng, tổn thương khơng rõ, khó đánh giá mức độ hồi phục, dùng liều cao, súc vật chết sau vài tổn thương nặng quan Trên lâm sàng, CY gây ức chế tủy xương cấp tính, số lượng tế bào máu ngoại vi giảm mạnh từ - 10 ngày hồi phục 14 - 21 ngày Trên sở đó, chúng tơi tiến hành nghiên cứu thăm dị liều CY thời điểm phù hợp để tiến hành xét nghiệm trước hệ miễn dịch phục hồi Từ đó, áp dụng mơ hình gây tổn thương hệ miễn dịch tiêm phúc mạc cyclophosphamide liều 110 mg/kg liều 150 mg/kg vào thời điểm trước bắt đầu uống thuốc ngày ngày (tương ứng) 4.2 LỰA CHỌN CHỨNG DƯƠNG β-glucan polysaccharide với đơn phân phân tử đường βD-glucose gắn với thông qua liên kết β-glucoside Phân tử glucose gắn với phân tử glucose khác vị trí khác cấu trúc vịng carbon Các số 1, 3, 4, thể vị trí ngun tử cacbon có liên kết glycoside đánh số vị trí nhóm oxy thuộc vịng carbon [43] Các β-glucan nhóm phân tử phân biệt dựa vào phân tử khối, độ hòa tan, độ nhớt cấu trúc không gian chiều Các hợp chất thường tồn dạng phổ biến cellulose thực vật, vỏ cám hạt ngũ cốc, thành tế bào nấm men, nấm vi khuẩn Một số loại β-glucan sử dụng chất dinh dưỡng người hợp chất tạo mịn chất sơ hòa tan, nhiên lại bị biến đổi trong q trình đun sơi [43] β-glucan biết đến nhiều với tác động tới hệ thống kháng thể người, ví dụ tăng cường miễn dịch tồn thân: β-glucan giúp tăng cường miễn dịch cho tất đối tượng từ người già, trẻ nhỏ đến 50 người bị suy giảm miễn dịch ốm, bệnh ung thư, tiểu đường Bên cạnh đó, β-glucan giúp khống chế phát triển khối u ngăn ngừa di nhờ khả điều hòa miễn dịch bẩm sinh miễn dịch đặc hiệu nên chúng có tác dụng với tế bào khối u - tế bào lạ, phân chia theo cấp số nhân phát triển thành khối u β-glucan làm giảm dấu hiệu viêm toàn thân bệnh lý gút, viêm ruột, viêm nha chu, viêm đường hô hấp 4.3 ẢNH HƯỞNG CỦA BÀI THUỐC CỬU VỊ KHƯƠNG HOẠT GIA GIẢM LÊN MƠ HÌNH GÂY SUY GIẢM MIỄN DỊCH BẰNG CYCLOPHOSPHAMIDE VÀ SO SÁNH VỚI LÔ CHỨNG 4.3.1 Khối lượng chung Như ta thấy bảng 3.1 Sau thời gian tiêm CY, trọng lượng chuột giảm có ý nghĩ thống kê nhóm, cho thấy hiệu lực suy giảm miễn dịch CY lên lô nghiên cứu Hiệu lực tương đồng tất lô chuột Biến đổi khối lượng xuất sớm thời gian dùng thuốc thể đồng toàn nghiên cứu Ở nhận thấy xu hướng cải thiện tốt liều dùng cao hơn, cụ thể khối lượng chuột tăng tăng lên tăng liều dùng Xu xuất thời gian dùng thuốc lẫn xét toàn khung thời gian nghiên cứu Chúng tơi cho hiệu lực thuốc có tác động tuyến tính mối liên quan với việc cải thiện khối lượng chuột Để đánh giá xác mối liên hệ này, cần thêm nghiên cứu với mẫu lớn nhiều mức độ liều lượng khác Sự cải thiện khối lượng chuột mẫu liều cao gần tương đương có nhỉnh đôi chút so với lô dùng β-glucan Tất nhóm chuột có dùng thuốc cho cải thiện có ý nghĩa thống kê so vơi lơ mơ hình Như vậy, liều lượng thấp, thuốc cửu vị khương thể tác động định 4.3.2 Lách tuyến ức Các quan chịu trách nhiệm miễn dịch thuộc mô lympho chia thành quan trung ương quan ngoại vi Các quan lympho trung ương nơi sinh sản biệt hóa tế bào lympho đến trưởng thành, đủ tư cách 51 xử lý kháng nguyên Sau đó, tế bào lympho chuyển tới quan ngoại vi, trú ngụ lâu dài biệt hóa tác dụng kháng nguyên [20,21] Lách tổ chức lympho ngoại vi lớn, nơi trú ngụ lympho bào (chủ yếu lympho bào B) đại thực bào Đây nơi tập trung kháng nguyên, kháng nguyên vào thể đường máu Sau xâm nhập đại thực bào xử lý, kháng nguyên kích thích tế bào lympho B lách phân chia, biệt hóa thành tương bào sản xuất kháng thể để loại trừ kháng nguyên Theo dõi trọng lượng lách đánh giá phần tổn thương tế bào lympho mẫn cảm Từ đối chiếu với tiêu cấu trúc vi thể lách chức tế bào lympho B lách để đánh giá đầy đủ khả đáp ứng miễn dịch dịch thể Tuyến ức quan lympho trung ương, đảm nhiệm chức huấn luyện, phân chia, biệt hóa tế bào lympho T Tế bào lympho tuyến ức từ tủy xương di cư tới Tuyến ức tạo vi môi trường thuận lợi để tế bào lympho biệt hóa thành dịng tế bào lympho T Ra khỏi tuyến ức để định cư quan ngoại vi tế bào lympho T đủ tiêu chuẩn: (a) mang CD4 CD8, (b) có khả nhận MHC thể, (c) có thụ thể nhận kháng ngun khơng phải Do đó, trọng lượng tuyến ức số quan trọng với cấu trúc vi thể, chức lympho bào T để đánh giá đáp ứng miễn dịch qua trung gian tế bào Do tác dụng alkyl hóa nên CY gây ảnh hưởng tới phân bào, đặc biệt mơ có tốc độ phân bào nhanh mô lympho tủy xương Việc đánh giá trọng lượng tương đối mô lympho hỗ trợ phân tích giải phẫu bệnh học mơ phần đánh giá tác dụng phục hồi miễn dịch Kết nghiên cứu bảng 3.2 cho thấy lơ mơ hình sử dụng CY, khối lượng tương đối lách khối lượng tương đối tuyến ức giảm rõ rệt, đồng thời giải phẫu bệnh có tình trạng suy giảm số lượng tế bào rõ rệt cho thấy tình trạng suy giảm miễn dịch Sau thời gian dùng thuốc, nhận thấy biến đổi rõ rệt kích thước tuyến ức lách tất lô chuột 52 nghiên cứu Những biến đổi có ý nghĩa thống kê thể rõ khía cạnh: khối lượng tuyệt đối lẫn tỉ lệ % so với thể Cụ thể, lách, khối lượng tuyệt đối tăng so với lơ mơ hình nhóm sử dụng β-glucan nhóm dùng cửu vị khương: khối lượng trung bình lơ dùng β-glucan 0,074 ± 0,013g, nhóm dùng mẫu thử liều 0,072 ± 0,004g 0,076 ± 0,008g so với lơ mơ hình 0,046 ± 0,007g; xét theo tỉ lệ % với thể, số tăng từ 0,274 ± 0,041% lơ mơ hìnhlên 0,274 ± 0,041% lô dùng β-glucan, 0,358 ± 0,013% lô mẫu thử liều 0,370 ± 0,042% lô mẫu thử liều Đối với tuyến ức, thông số cho thấy điều tương tự Khối lượng tuyệt đối tuyến ức tăng từ 0,014± 0,004g lên 0,024 ± 0,004g mẫu thử liều 0,025 ± 0,003 gở mẫu thử liều Tỉ lệ % so với thể giảm theo tương ứng Chúng thấy khơng có khác biệt nhiều khối lượng lách tuyến ức liều lượng thử nghiệm lô dùng β-glucan Sự cải thiện khối lượng tương đối tuyệt đối lách tuyến ức phản ánh tác động cải thiện rõ rệt thuốc lên hệ miễn dịch, kết nghiên cứu phản ánh biến đổi mang tính chất định tính Chúng tơi khơng nhận thấy biến đổi tuyến tính khối lượng tạng liên quan miễn dịch kể 4.3.3 Công thức bạch cầu Với chất gồm vị thuốc có tác động lên hệ thống miễn dịch tế bào, dễ hiểu có biến đổi có ý nghĩa thống kê cơng thức bạch cầu lô chuột nghiên cứu Bảng 3.4 biến đổi tỉ lệ nhóm bạch cầu, nhiên tổng số lượng bạch cầu có cải thiện rõ rệt sánh lơ dùng thuốc với lơ mơ hình lơ chứng Đây điểu dễ hiểu, vị thuốc đông y thành phần khơng có xu hướng tác động cụ thể vào đơn dịng bạch cầu cả, thay vào chúng có tác động tổng hợp lên q trình chuyển hóa nội sinh, kết cuối thể số lượng bạch cầu tuyệt đối Ở mẫu thử liều cao, thấy tăng bạch cầu rõ rệt so với liều thấp nhóm dùng betaglucan, cụ thể 1,38G/l so với 1,32G/l 1,29G/l 53 Những biến đổi mang ý nghĩa thống kê với trị số p < 0,05 Dường thuốc Cửu vị khương hoạt gia giảm có tác động tuyến tính theo chiều hướng dương lên bạch cầu Đây dấu hiệu rõ ràng trực tiếp cho thấy tác động tích cực lên hệ miễn dịch Tủy xương nơi diễn tăng sinh mạnh mẽ tế bào đích tác dụngquan trọng thuốc gây độc tế bào (trong có CY) Sự phá hủy cáctế bào dòng tủy tủy xương làm khả tái tạo tế bào máu dẫnđến tình trạng giảm bạch cầu CY gây ức chế tủy xương cấp tính, làm số lượngcác tế bào máu ngoại vi giảm mạnh từ - 10 ngày hồi phục 14 - 21ngày [4,35] Số lượng bạch cầu máu ngoại vi số mang tính định lượng,phản ánh đáp ứng miễn dịch tự nhiên miễn dịch đặc hiệu, số huyết họcphải theo dõi chặt chẽ lâm sàng dùng CY Sự thay đổi sốlượng bạch cầu máu ngoại vi phản ánh tác động thuốc lên tế bào gốc tạomáu tủy xương 4.3.4 Một số thông số huyết học khác Bên cạnh việc tác động lên hệ thống miễn dịch, phản ánh thay đổi hệ thống miễn dịch tế bào, thuốc Cửu vị khương hoạt gia giảm cho thấy tác động tích cực lên thơng số huyết học khác, cụ thể giúp cải thiện tình trạng thiếu máu chuột bị suy giảm miễn dịch gây CY Số lượng hồng cầu lẫn nồng độ hemoglobin hematocrit gia tăng lơ uống thuốc Khơng có nhiều khác biệt mức độ tăng lô Trong thành phần thuốc Cửu vị khương hoạt gia giảm, khơng có vị có tác dụng trực tiếp lên trình tạo máu, tác động huyết học thuốc có lẽ hệ điều hòa miễn dịch Việc khả miễn dịch cải thiện giúp tăng khả chống chịu thể, trình hồi phục tủy xương theo thời gian giúp gia tăng số lượng tế bào Thông số MCV ủng hộ giả thuyết khơng cho thấy biến đổi có ý nghĩa thống kê lô chuột nghiên cứu - khơng có tác 54 động trực tiếp lên q trình tạo hồng cầu tủy, đường kính trung bình hồng cầu ổn định Số lượng tiểu cầu phục hồi nhanh so với hồng cầu, kết cho thấy số lượng tiểu cầu phục hồi mức khơng có khác so với lơ chứng, đó, số lượng hồng cầu nồng hemoglobin phản ánh thiếu máu 4.4.5 Giải phẫu bệnh Như bàn luận trên, tác động thuốc Cửu vị khương hoạt gia giảm lên quan miễn dịch xảy mức độ đại thể vi thể Song song với gia tăng kích thước lách tuyến ức, hình ảnh mơ bệnh học cho thấy phục hồi rõ ràng nhu mô lách tái tạo tế bào vùng rìa tuyến ức 55 KẾT LUẬN Cao lỏng thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm liều 14,4g/kg/ngày 28,8g/kg/ngày (tính theo dược liệu khơ) thể tác dụng tăng cường miễn dịch thông qua khả làm ức chế biểu suy giảm miễn dịch chuột nhắt trắng bị gây suy giảm miễn dịch cyclophosphamide Cụ thể: - So với lô chứng không gây suy giảm miễn dịch, lơ mơ hình (gây suy giảm miễn dịch cyclophosphamide) có khối lượng thể chuột, khối lượng lách tuyến ức, số huyết học (bạch cầu, hồng cầu, hemoglobin, hematocrit), giảm rõ rệt (p < 0,05) Hình ảnh mơ bệnh học nhuộm HE lách, tuyến ức cho thấy thay đổi teo liên quan đến giảm tế bào sản sinh bạch cầu lách tuyến ức - Chuột uống cao lỏng thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm liều 14,4g/kg/ngày 28,8g/kg/ngàyức chế biểu suy giảm miễn dịch nói chuột nghiên cứu, làm tăng rõ rệt khối lượng thể chuột, khối lượng lách tuyến ức, số huyết học (bạch cầu, hồng cầu, hemoglobin, hematocrit) so với lơ mơ hình (p < 0,05) Các tác dụng mẫu thử tương đương so với 𝛽-glucan liều 250 mg/kg/ngày (p > 0,05) 56 KIẾN NGHỊ Từ kết nghiên cứu động vật thực nghiệm tác dụng kích thích miễn dịch cao lỏng thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm, xin đề xuất kiến nghị sau: -Tiếp tục thực nghiên cứu đáp ứng miễn dịch dịch thể đáp ứng miễn dịch qua trung gian tế bào để đánh giá rõ tác dụng kích thích miễn dịch cao lỏng thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm chức hệ miễn dịch - Triển khai nghiên cứu mơ hình khác để đánh giá đầy đủ tác dụng kích thích miễn dịch cao lỏng thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO McComb, S., Thiriot, A., Krishnan, L., & Stark, F (2013) Introduction to the immune system In Immunoproteomics Humana Press, Totowa, NJ 19(3): 1-20 Tổ chức Y tế Thế giới (2022) WHO, Influenza https://www.who.int/vietnam/vi/health-topics/influenza-(seasonal), truy cập ngày 27/06/2022 3.Katzung, B.G., Trevor clinicalpharmacology: 60-63 & A.J.(Eds.).(2018) Basic & Goodman, L S., & Gilman, A (2021) The pharmacological basis of therapeutics, McGraw-Hill Companies, Inc: 1476-1478 5.Đỗ Tất Lợi (2015) Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y Học,116-118, 187-189, 235-237, 266-268, 315-317, 407-409 6.Azietaku, J.T., Ma, H., Yu, X.A., Li, J., Oppong, M.B., Cao, J., & Chang, Y.X (2017) A review of the ethnopharmacology, phytochemistry and pharmacology of Notopterygium incisum.Journal ofethnopharmacology, 202: 241-255 7.Bộ Y tế (2016) Dược học cổ truyền, NXB Y học, 245-251 Venkatesha, S.H., Astry, B., Nanjundaiah, S.M., Kim, H.R., Rajaiah, R., Yang, Y., & Moudgil, K.D (2016) Control of autoimmune arthritis by herbal extracts and their bioactive components asian journal of pharmaceutical sciences, 11(2): 301-307 9.Tuệ Tĩnh, Y Học Cổ Truyền (2016)3033 Cây thuốc đông y (Tuệ Tĩnh),141-145 10.Yang, M., Wang, C.C., Wang, W.L., Xu, J.P., Wang, J., Zhang, C.H., & Li, M.H (2020) Saposhnikovia divaricata—An ethnopharmacological, phytochemical and pharmacological review Chinese journal of integrative medicine, 26(11): 873-880 58 11.Ran, X., Ma, L., Peng, C., Zhang, H., & Qin, L.P (2019) Ligusticum chuanxiong Hort: a review of chemistry and pharmacology Pharmaceutical Biology, 49(11):1180-1189 12.Bộ Y tế(2019), Dược liệu học tập I, NXB Y Học, 236-240 13.Kwak, M., Yu, K., Lee, P.C.W., & Jin, J.O (2018) Rehmannia glutinosa polysaccharide functions as a mucosal adjuvant to induce dendritic cell activation in mediastinal lymph node International journal of biological macromolecules, 120: 1618-1623 14.Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Trung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiền, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Đoàn Thị Thu, Nguyễn Tập, Trần Toàn (2015) Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam Tập II, NXB Khoa học kỹ thuật,178 - 184 15.Ishii, T., Okuyama, T., Noguchi, N., Nishidono, Y., Okumura, T., Kaibori, M., & Nishizawa, M (2020) Antiinflammatory constituents of Atractylodes chinensis rhizome improve glomerular lesions in immunoglobulin A nephropathy model mice Journal of naturalmedicines, 74(1): 51-64 16.Bộ Y tế (2019) Dược liệu học tập II, NXB Y Học,197-203 17.Zhang, C., Fan, L., Fan, S., Wang, J., Luo, T., Tang, Y., & Yu, L (2019) Cinnamomum cassia Presl: a review of its traditional uses, phytochemistry, pharmacology and toxicology Molecules, 24(19):3473 18.Yu, M., Li, T., Raza, A., Wang, L., Song, H., Zhang, Y., & Hua, Y (2020) Sensory-guided identification of bitter compounds in Hangbaizhi (Angelica dahurica) Food Research International:129 19.Zhao, T., Tang, H., Xie, L., Zheng, Y., Ma, Z., Sun, Q., & Li, X (2019) Scutellaria baicalensis Georgi (Lamiaceae): a review of its traditional uses, botany, phytochemistry, pharmacology and toxicology Journal of Pharmacy and Pharmacology, 71(9):1353-1369 20.Bộ môn Miễn dịch – Sinh lý bệnh (2016) Sinh lý bệnh miễn dịch, NXB Y học,154-161 59 21.Vũ Triệu An (2018) Miễn dịch học, NXB Y học, 83-89 22.Nguyễn Ngọc Lanh, Văn Đình Hoa (2011) Miễn dịch học, NXB Y học, 65-74 23.Bộ môn Miễn dịch (2011) Miễn dịch học, NXB Quân đội nhân dân, 121129 24.Phan Thị Phi Phi (2017), Một số vấn đề y sinh học cập nhật cho bác sĩ, NXB Y học,72-75 25.Nguyễn Trang Thúy(2016)Nghiên cứu tác dụng kích thích miễn dịch dịch chiết toàn phần hai loài nấm linh chi Canoderma Applanatum (PERS) PAT.; Canoderma Lucidun (LEYSS EXFR.) KARST chuột nhắt trắng, Luận văn thạc sĩ dược học, Đại học Dược Hà Nội, 65 - 67 26.Phạm Thị Vân Anh (2019)Các thuốc có tác dụng kích thích hệ thống miễn dịch.Chuyên đề tiến sĩ, Đại học Y Hà Nội,18-21 27.Phạm Thị Vân Anh(2018) Nghiên cứu tác dụng kích thích miễn dịch chống oxy hóa cao nhàu (Morinda citrifolia L Rubiaceae) động vật thực nghiệm, Luận án tiến sĩ Y học, Đại học Y Hà Nội, 127-131 28.Bộ môn Dược lý (2018) Dược lý học lâm sàng, Trường Đại học Y Hà Nội, NXB Y học, 65-69 29.Nya, E.J., & Austin, B (2010) Use of bacterial lipopolysaccharide (LPS) as an immunostimulant for the control of Aeromonas hydrophila infections in rainbow trout Oncorhynchus mykiss (Walbaum) Journal of applied microbiology, 108(2): 686-694 30.Brown, G.D., Herre, J., Williams, D.L., Willment, J.A., Marshall, A.S., & Gordon, S (2019) Dectin-1 mediates the biological effects of βglucans The Journal of experimental medicine, 197(9): 1119-1124 31.Stier, H., Ebbeskotte, V., & Gruenwald, J (2018) Immune-modulatory effects of dietary Yeast Beta-1, 3/1, 6-D-glucan Nutrition journal, 13(1):1-9 32.Saroj, P., Verma, M., & Jha, K.K (2018) AN OVERVIEW ON IMMUNOMODULATION Journal of Advanced Scientific Research, 3(1) 60 33.Pompidou, A., Delsaux, M.C., Telvi, L., Mace, B., Coutance, F., Falkenrodt, A., & Lang, J.M (2018) Isoprinosine and imuthiol, two potentially active compounds in patients with AIDS-related complex symptoms Cancer Research, 45(9 Supplement):4671-4673 34.Phạm Thị Vân Anh, Nguyễn Trọng Thông, Vũ Thị Ngọc Thanh (2020) Nghiên cứu ảnh hưởng cao nhàu (Morinda citrifolia L Rubiaceae) động vật thực nghiệm bị suy giảm miễn dịch chiếu tia xạ, Tạp chí nghiên cứu Y học, 32(6),82-86 35.Haque, M.R., Ansari, S.H., & Rashikh, A (2019) Coffea arabica seed extract stimulate the cellular immune function and cyclophosphamideinduced immunosuppression in mice Iranian journal of pharmaceutical research: IJPR, 12(1):101 36.Tan, B.K., & Vanitha, J (2020) Immunomodulatory and antimicrobial effects of some traditional Chinese medicinal herbs: a review Current medicinal chemistry, 11(11):1423-1430 37.Bộ môn Y học hạt nhân (2018) Y học hạt nhân, NXB Y học, 138-142 38 Nguyễn PhươngThanh (2021) Nghiên cứu tác dụng kích thích miễn dịch chống viêm gan mạn viên nén Livganic thực nghiệm, Luận án tiến sĩ Y học, Đại học Y Hà Nội, 107-109 39 Hussain, A., Shadma, W., Maksood, A., & Ansari, S.H (2019) Protective effects of Picrorhiza kurroa on cyclophosphamide-induced immunosuppression in mice Pharmacognosy research, 5(1): 30-34 40 Kim, J.W., Choi, J.S., Seol, D.J., Choung, J.J., & Ku, S.K (2018) Immunomodulatory effects of kuseonwangdogo-based mixed herbal formula extracts on a cyclophosphamide-induced immunosuppression mouse model Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, 2018: 114 41 Bộ Y tế (2021) Dược thư quốc gia, Hội đồng Dược điển Việt Nam, NXB Y học, 217 - 219 61 42 Ritter, J.M., Flower, R.J., Henderson, G., Loke, Y.K., MacEwan, D., & Rang, H.P (2020) Rang Y Dale Farmacología Elsevier: 237-241 43 Du, B., Lin, C., Bian, Z., & Xu, B (2015) An insight into antiinflammatory effects of fungal beta-glucans Trends in Food Science & Technology, 41(1): 49-59 62 ... ? ?Đánh giá tác dụng tăng cường miễn dịch thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm động vật thực nghiệm? ?? với mục tiêu: Đánh giá tác dụng tăng cường miễn dịch thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm. .. nay, thuốc Cửu vị Khương điều chỉnh lại giảm bớt thay số vị dược liệu để tăng cường hiệu lực phương thuốc, thành thuốc Cửu vị Khương hoạt thang gia giảm, bào chế dạng cao lỏng, có tác dụnghiệu việc... Các tác nhân gây suy giảm miễn dịch sử dụng thực nghiệm 27 1.3 MÔ HÌNH GÂY SUY GIẢM MIỄN DỊCH VÀ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG TĂNG CƯỜNG MIỄN DỊCH CỦA CHẤT KÍCH THÍCH MIỄN DỊCH 29 1.3.1 Cơ chế tác dụng

Ngày đăng: 07/08/2022, 20:25

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN