Phát triển phương pháp phân tích 1 naphthylacetic acid và 1 naphthylacetamid trong trái táo đỏ bằng kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu năng cao ghép đầu dò DAD

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HCM PHẠM MINH TIẾN PHÁT TRIỂN PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 1 NAPHTHYLACETIC ACID VÀ 1 NAPHTHYLACETAMID TRONG TRÁI TÁO ĐỎ BẰNG KỸ THUẬT SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO GHÉP ĐẦU DÒ DAD LUẬN VĂN THẠC SĨ Chuyên ngành Công Nghệ Thực Phẩm Mã số ngành 8540101 TP HỒ CHÍ MINH, tháng 09 năm 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HCM PHẠM MINH TIẾN PHÁT TRIỂN PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 1 NAPHTHYLACETIC ACID VÀ 1 NAPHTHYLACETAMID TRONG TRÁI TÁO ĐỎ BẰNG KỸ TH.

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HCM - PHẠM MINH TIẾN PHÁT TRIỂN PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 1-NAPHTHYLACETIC ACID VÀ 1-NAPHTHYLACETAMID TRONG TRÁI TÁO ĐỎ BẰNG KỸ THUẬT SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO GHÉP ĐẦU DÒ DAD LUẬN VĂN THẠC SĨ Chuyên ngành: Công Nghệ Thực Phẩm Mã số ngành: 8540101 TP HỒ CHÍ MINH, tháng 09 năm 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HCM - PHẠM MINH TIẾN PHÁT TRIỂN PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 1-NAPHTHYLACETIC ACID VÀ 1-NAPHTHYLACETAMID TRONG TRÁI TÁO ĐỎ BẰNG KỸ THUẬT SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO GHÉP ĐẦU DÒ DAD LUẬN VĂN THẠC SĨ Chuyên ngành: Công Nghệ Thực Phẩm Mã số ngành: 8540101 CÁN BỘ HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS LÂM VĂN MÂN TP HỒ CHÍ MINH, tháng 09 năm 2021 CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HỒN THÀNH TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC CƠNG NGHỆ TP HCM Cán hướng dẫn khoa học : TS LÂM VĂN MÂN Luận văn Thạc sĩ bảo vệ Trường Đại học Công nghệ TP HCM ngày 12 tháng 09 năm 2021 Thành phần Hội đồng đánh giá Luận văn Thạc sĩ gồm: (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị Hội đồng chấm bảo vệ Luận văn Thạc sĩ) TT Họ tên Chức danh Hội đồng TS Nguyễn Lệ Hà Chủ tịch TS Ngô Đức Vượng Phản biện GS.TS Đống Thị Anh Đào Phản biện TS Nguyễn Thị Ái Vân Ủy viên TS Nguyễn Minh Xuân Hồng Ủy viên, Thư ký Xác nhận Chủ tịch Hội đồng đánh giá Luận sau Luận văn sửa chữa (nếu có) Chủ tịch Hội đồng đánh giá LV TS Nguyễn Lệ Hà TRƯỜNG ĐH CÔNG NGHỆ TP HCM VIỆN ĐÀO TẠO SAU ĐẠI HỌC CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc TP HCM, ngày 15 tháng 09 năm 2021 NHIỆM VỤ LUẬN VĂN THẠC SĨ Họ tên học viên: PHẠM MINH TIẾN Giới tính: Nam Ngày, tháng, năm sinh: 02/02/1992 Nơi sinh: Đồng Nai Chuyên ngành: Công Nghệ Thực Phẩm MSHV: 1841910012 I- Tên đề tài: Phát triển phương pháp phân tích 1-naphthylacetic acid 1-naphthylacetamid trái táo đỏ kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu cao ghép đầu dò DAD II- Nhiệm vụ nội dung: Nhiệm vụ: Xây dựng phương pháp phân tích NAA NAAm táo đỏ phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao ghép đầu dò DAD Nội dung: cần thực mục tiêu cụ thể sau:  Xây dựng quy trình phân tích mẫu chuẩn NAA NAAm phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao ghép đầu dị DAD  Xây dựng quy trình xử lý mẫu táo đỏ dùng phân tích NAA NAAm thiết bị sắc ký lỏng hiệu cao ghép đầu dị DAD  Phân tích NAA NAAm táo đỏ thu mua từ chợ địa phương siêu thị III- Ngày giao nhiệm vụ: 30-01-2021 theo định số 1773/QĐ-ĐKC IV- Ngày hoàn thành nhiệm vụ: 15-09-2021 V- Cán hướng dẫn: Tiến sĩ Lâm Văn Mân CÁN BỘ HƯỚNG DẪN KHOA QUẢN LÝ CHUYÊN NGÀNH (Họ tên chữ ký) (Họ tên chữ ký) TS Lâm Văn Mân i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu Luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Tơi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực Luận văn cảm ơn thông tin trích dẫn Luận văn rõ nguồn gốc Học viên thực Luận văn Phạm Minh Tiến HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân ii LỜI CÁM ƠN Để hồn thành khóa luận này, em xin chân thành cảm ơn thầy cô Viện Khoa Học Ứng Dụng nói chung thầy mơn Cơng Nghệ Thực Phẩm nói riêng truyền đạt cho em kiến thức chuyên môn sống Em xin chân thành cảm ơn thầy TS Lâm Văn Mân – người trực tiếp hướng dẫn em thực đề tài Thầy giúp đỡ em việc hiểu thêm kiến thức chuyên môn, cách nhìn nhận vấn đề khoa học cách suy luận logic, Thầy quan tâm, động viên em gặp khó khăn sống Cuối tơi xin gởi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè, đồng nghiệp động viên giúp đỡ để tơi hồn thành đề tài Phạm Minh Tiến HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân iii TÓM TẮT Ngày nay, việc sử dụng loại thuốc tăng trưởng để tăng suất cho loại sử dụng nhiều, loại thuốc tăng trưởng ngồi khả kích thích cịn làm ảnh hưởng đến sức khỏe người Vì cần có quy định giới hạn tối đa cho phép phương pháp phân tích chất tăng trưởng Hai chất tăng trưởng 1-naphthylacetic acid 1-naphthylacetamid EU giới hạn mức tối đa cho phép táo đỏ 0,15mg/kg Trong đề tài xây dựng quy trình phân tích riêng biệt hai chất mức giới hạn định lượng cho chất 0,06mg/kg, phù hợp cho phân tích mẫu thực tế Thiết bị sắc ký lỏng hiệu cao ghép đầu dò DAD thiết bị rẻ tiền vận hành đơn giản sử dụng để phân tích mẫu NAA NAAm táo đỏ HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân iv ABSTRACT Today, plant growth regulators have been used for increase productivity in tree fruits However, it affect human health Therefore, it is necessary to have the regulations on the maximum allowable limit as well as the method of analyzing these plant growth regulators The plant growth regulators 1-naphthylacetic acid and 1-naphthylacetamide are limited by the EU to the maximum allowed in red apples of 0.15mg/kg In this thesis, Simultaneous Analysis procedure for these two substances has been established at quantitative limits for each substance 0.06mg/kg, suitable for real sample analysis The High Performance Liquid Chromatograph – Diode Array Detector is a cheap and simple-to-operate device used to analyze NAA and NAAm samples in red apples HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân v MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CÁM ƠN ii TÓM TẮT iii ABSTRACT iv MỤC LỤC .v DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT vii DANH MỤC CÁC BẢNG viii DANH MỤC CÁC HÌNH .ix MỞ ĐẦU .1 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Cấu tạo, danh pháp, tính chất độc tính 1-napthylacetic acid (NAA) 1-naphthylacetamid (NAAm) 1.1.1 Cấu tạo, danh pháp tính chất NAA NAAm 1.1.2 Nghiên cứu độc tính NAA NAAm 1.2 Các phương pháp phân tích NAA NAAm 1.2.1 Các phương pháp phân tích NAA NAAm 1.2.1.1 Phương pháp sắc ký lỏng ghép đầu dò quang phổ mảng diod (DAD) 1.2.1.2 Phương pháp sắc ký lỏng ghép đầu dò khối phổ 1.2.1.3 Phương pháp sắc ký lỏng ghép đầu dò huỳnh quang 13 1.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến q trình phân tích mẫu thiết bị sắc ký lỏng ghép đầu dò DAD 14 1.3.1 Dung mơi hịa tan 14 1.3.2 Cột sắc ký lỏng 14 1.3.3 Pha động sắc ký lỏng 15 1.3.4 Bộ phận tiêm mẫu 15 1.3.5 Nhiệt độ buồng cột 15 1.4 Các thông số phê duyệt phương pháp 16 1.4.1 Độ đặc hiệu/ độ chọn lọc 16 1.4.2 Xây dựng đường chuẩn 16 1.4.3 Xác định giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng 16 1.4.4 Độ phương pháp 17 1.4.5 Độ chụm phương pháp 17 1.4.6 Khoảng xác định 17 1.5 Nghiên cứu nước 18 1.6 Nghiên cứu quốc tế 19 CHƯƠNG 2: NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.1 Nguyên vật liệu nghiên cứu 23 2.1.1 Hóa chất, chất chuẩn dụng cụ 23 2.1.1.1 Hóa chất, chất chuẩn 23 2.1.1.2 Dụng cụ 23 2.1.2 Thiết bị 24 2.1.3 Nguyên liệu 26 2.2 Quy trình nghiên cứu dự kiến 26 2.2.1 Xây dựng quy trình phân tích NAA NAAm táo đỏ phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao ghép đầu dò DAD 26 HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân vi 2.2.2 Xây dựng quy trình xử lý mẫu táo đỏ dùng phân tích NAA NAAm phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao ghép đầu dò DAD 27 2.2.3 Phân tích NAA NAAm táo đỏ thu mua từ chợ Phạm Văn Bạch, siêu thị coop-mart Quang Trung siêu thị BigC Gò Vấp 27 2.3 Nội dung nghiên cứu 27 2.3.1 Xây dựng quy trình phân tích mẫu chuẩn NAA NAAm phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao ghép đầu dò DAD 28 2.3.2 Xây dựng quy trình xử lý mẫu táo đỏ dùng phân tích NAA NAAm phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao ghép đầu dò DAD 34 2.3.3 Phân tích NAA NAAm táo đỏ thu mua từ chợ siêu thị địa phương 38 2.4 Phương pháp phân tích số liệu 40 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 42 3.1 Xây dựng phương pháp phân tích mẫu chuẩn NAA NAAm thiết bị HPLC-DAD 42 3.1.1 Khảo sát bước sóng cực đại 42 3.1.2 Khảo sát thành phần pha động 43 3.1.3 Khảo sát tỷ lệ pha động 44 3.1.4 Khảo sát nhiệt độ cột phân tích 47 3.1.5 Khảo sát thể tích tiêm mẫu 49 3.1.6 Xây dựng đường chuẩn NAA NAAm thiết bị HPLC-DAD 50 3.2 Xây dựng quy trình xử lý mẫu táo đỏ dùng phân tích NAA NAAm thiết bị HPLC-DAD 54 3.2.1 Khảo sát hàm lượng NAA NAAm táo đỏ phương pháp HPLC-DAD 54 3.2.2 Khảo sát thành phần dung môi chiết mẫu đến độ thu hồi NAA NAAm 56 3.2.3 Khảo sát kỹ thuật chiết 57 3.2.4 Khảo sát thời gian chiết 59 3.2.5 Kỹ thuật làm giàu mẫu 60 3.2.6 Xác định hàm lượng NAA NAAm mẫu táo đỏ theo quy trình xử lý mẫu tối ưu 65 3.2.7 Xác định hiệu suất thu hồi NAA NAAm mẫu táo đỏ thêm chuẩn 65 3.3 Phân tích hàm lượng NAA NAAm thu từ chợ siêu thị địa phương 67 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 69 TÀI LIỆU THAM KHẢO 71 PHỤ LỤC 74 HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân Phụ lục 48: Khảo sát độ lặp lại 10 lần tiêm mẫu NAA NAAm ngày 20-4-2020 HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân Phụ lục 49: Khảo sát độ lặp lại 10 lần tiêm mẫu NAA NAAm ngày 21-04-2020 HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân Phụ lục 50: Khảo sát đường chuẩn NAA NAAm HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân Phụ lục 50: Khảo sát đường chuẩn NAA NAAm lần HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân Phụ lục 51: Nồng độ NAA NAAm mẫu táo đỏ HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân Phụ lục 51: Độ thu hồi NAA NAAm theo dung môi chiết khác HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân Phụ lục 52: Độ thu hồi NAA NAAm theo dung kỹ thuật chiết khác HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân Phụ lục 53: Độ thu hồi NAA NAAm theo thời gian chiết khác HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân Phụ lục 54: Độ thu hồi NAA NAAm theo kỹ thuật làm giàu mẫu khác lần HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân Phụ lục 55: Độ thu hồi NAA NAAm theo dung môi chiết khác lần HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân Phụ lục 56: Hàm lượng NAA NAAm theo xử lý mẫu tối ưu HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân Phụ lục 57: Độ thu hồi NAA NAAm theo quy trình tối ưu HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân Phụ lục 58: Hàm lượng NAA NAAm mẫu táo đỏ thu từ chợ Phạm Văn Bạch HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân Phụ lục 59: Hàm lượng NAA NAAm mẫu táo đỏ KANZI thu từ siêu thị HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân Phụ lục 60: Hàm lượng NAA NAAm mẫu táo đỏ Red thu từ siêu thị HVTH: Phạm Minh Tiến GVHD: TS Lâm Văn Mân ... cơt sắc ký (Hage, 2 018 ) Sắc ký phân làm hai loại sắc ký lỏng sắc ký khí Trong sắc ký lỏng chia làm loại dựa vào chế phân tách sắc ký hấp phụ, sắc ký phân bố, sắc ký ion, sắc ký rây phân tử sắc ký. .. (DAD) 1. 2 .1. 2 Phương pháp sắc ký lỏng ghép đầu dò khối phổ 1. 2 .1. 3 Phương pháp sắc ký lỏng ghép đầu dò huỳnh quang 13 1. 3 Các yếu tố ảnh hưởng đến q trình phân tích mẫu thiết bị sắc ký. .. NAAm phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao ghép đầu dò DAD 28 2.3.2 Xây dựng quy trình xử lý mẫu táo đỏ dùng phân tích NAA NAAm phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao ghép đầu dò DAD 34 2.3.3 Phân