Nghiên cứu phản ứng thủy phân bằng enzyme định hướng tổng hợp taxol

I H C QU C GIA TP.HCM I H C BÁCH KHOA - NGÔ TH M HU NGHIÊN C U PH N NG THU PHÂN B NG ENZYME NG T NG H P TAXOL Chun ngành: Cơng ngh hố h c Mã s : 60 52 75 LU Thành ph H Chí Minh, tháng 08 I H C QU C GIA TP.HCM I H C BÁCH KHOA - NGÔ TH M HU NGHIÊN C U PH N NG THU PHÂN B NG ENZYME NG T NG H P TAXOL Chuyên ngành: Cơng ngh hố h c Mã s : 60 52 75 LU ng d n chính: TS T NG THANH DANH Thành ph H Chí Minh, tháng 08 Thành phthành H t i: c hoàn Cán b i h c Bách Khoa -HCM ng d n khoa h c : T.S T ng Thanh Danh Cán b ch m nh n xét : PGS.TS Ph m Thành Quân Cán b ch m nh n xét : T.S Phan Ng c Hòa Lu cb ov t ngày 14 tháng 08 ih 2014 Thành ph n H m: (Ghi rõ h , tên, h c hàm, h c v c a H ng ch m b o v lu T.S PGs.TS Ph m Thành Quân T.S Phan Ng c Hòa GV Ph n bi n GV Ph n bi n T.S T ng Thanh Danh - y viên h ng ng Xác nh n c a Ch t ch H ngành sau lu CH T CH H ng Khoa qu n lý chuyên c s a ch a (n u có) I H C QU C GIA TP HCM C NG HÒA XÃ H I CH T NAM I H C BÁCH KHOA c l p T H nh phúc NHI M V LU H tên h c viên: NGÔ TH M HU MSHV: 12924381 Chuyên ngành: cơng ngh hóa h c Mã s : 605275 I TÀI: NGHIÊN C U PH N NG TH Y PHÂN B NG NG T NG H P TAXOL -NHI M V VÀ N I DUNG: -II NGÀY GIAO NHI M V : - III NGÀY HOÀN THÀNH NHI M V : IV CÁN B CÁN B NG D N: -TS T NG THANH DANH - NG D N CH NHI M B (H tên ch ký) (H tên ch ký) NG KHOA K THU T HÓA H C (H tên ch ký) O LÝ L CH TRÍCH NGANG H tên: NGÔ TH M HU a ch liên l c: A7/27/1A, t 11, c B, Huy n Bình Chánh, Tp.HCM O: - T IH nh - T I H C BÁCH KHOA TP HCM ng Ki t, Q.10, Tp.HCM QUÁ TRÌNH CƠNG TÁC: - T n nay: CƠNG TY TNHH PH T PHÁT c, H.Nhà Bè, Tp HCM Lô A4a, KCN Hi p L IC Con xin chân thành c ng viên, sát cánh bên nh V i tình yêu ngu o u ki n thu n l i cho h c t p , xin g i l i c n ch ng l c h tr tinh th tơi hồn thành nghiên c u Tôi xin g i l i c y cô b mơn K thu t Hóa H u tri th c, t u ki n thu n l i nh t su t trình h c t p th c hi n lu V i lịng kính tr ng bi , xin c bày t lịng c n khích, ch d n t n tình, t o m i Ti ng u ki n thu n l i cho su t th i gian th c hi n nghiên c u Tôi xin g i l i c TNHH Ph ng nghi p Công ty r t nhi u v th tơi có th hồn thành nghiên c u Tôi xin g i l i tri ân sâu s n b n Nguy n Lê M ng viên, h tr r t nhi u su t trình làm vi c hồn thành lu Trân tr ng! i ABSTRACT Lipases Amano PS from Pseudomonas cepacia and Lipase Amano AK from Pseudomonas fluorescens have been catalyzed enantioselective hydrolyses and transesterifications of racemic esters hydroxy phenyl beta lactam derivatives of the taxol side chain We have performed synthesized reactions to obtain taxol side chain e.g ( ) cis phenylazetidin one, (+ ) phenylazetidin one, (-) cis phenylazetidin one, (-) cis 3(R) one, (+ ) 3(R) cis ethoxyethoxy) ethoxyethoxy) 4 cis hydroxyl 4(S) phenyllazetidin phenyllazetidin (p methoxyphenyl) acetoxy (p methoxyphenyl) acetoxy hydroxyl phenylazetidin (p methoxyphenyl) acetoxy 4(S) phenylazetidin one, cis one, cis benzoyl 3 (1 (1 one The results show that enzymes lipase Amano PS from Pseudomonas cepacia are more capable of synthesis in enantiomeric excess than the others lipase Amano AK from Pseudomonas fluorescens due to its associated specificities The resolved enantiomera are important intermediates in the synthesis of the C 13 side chain of taxol ii TÓM T T Xúc tác sinh h c Lipase Amano PS t Amano AK t Pseudomonas fluorescens Pseudomonas cepacia Lipase c ch n làm xúc tác ch n l s phân gi i h n h p racemic ester c a d n xu phenyl c a vịng beta trình nghiên c i phân lactam qua trình th y phân ch n l i phân hydroxy i phân Quá ã th c hi n ph n ng t ng h p h p ch t c n thi nh n m ch nhánh chu i taxol side chain, c th (+) cis thu (p methoxyphenyl) acetoxy phenylazetidin one, (+) cis (p methoxyphenyl) acetoxy phenylazetidin one, (-) cis (p methoxyphenyl) hydroxyl acetoxy phenylazetidin 2 (1 4(S) phenylazetidin one, cis benzoyl one, cis (1 phenylazetidin one, (+ ) cis ethoxyethoxy) ethoxyethoxy) one, (-) 3(R) cis 3(R) hydroxyl 4(S) phenyllazetidin phenyllazetidin 2 one K t qu cho th c hi u liên k t, enzyme Lipase Amano PS t Pseudomonas cepacia có kh ng h i v i ch Pseudomonas fluorescens S phân tách ch n l tr ng t ng h p m ch nhánh chu i side chain C enzyme Lipase Amano AK t c trung gian quan ng t ng h p nên paclitaxel iii L trình khác Ngơ Th M Hu iv M CL C L IC i ABSTRACT ii TÓM T T iii L iv M C L C v DANH M C B NG BI U viii DANH M C HÌNH NH MINH H A .ix DANH M PH N NG x DANH M C CÁC KÝ HI U VÀ T VI T T T xi GI I THI U T NG QUAN 1.1 KHÁI QUÁT V H P CH T PACLITAXEL 1.2 M T S NG H P TAXOL T 10 DAB 1.2.1 T ng h p toàn ph n 1.2.2 Bán t ng h p 1.2.2.1 Bán t ng h p Taxol t 10 DAB 1.2.2.2 M t s ng h p m ch nhánh taxol side chain 11 1.2.3 Ph n ng thu phân b ng enzyme bán t ng h p taxol .14 1.2.3.1 Gi i thi u chung v lipase: 14 1.2.3.2 Gi i thi u lipase PCL, PFL 15 1.2.3.3 C 1.2.3.4 Phân gi ph n ng c a lipase: 15 ng h c v i PCL, PFL 19 1.2.3.5 M t s ph n ng t ng h p m ch nhánh có s d ng enzyme lipase 20 1.2.4 Sinh t ng h p taxol: 24 N I DUNG NGHIÊN C U 27 2.1 NG NGHIÊN C U: 27 2.2 NGUYÊN LI U VÀ THI T B : 28 2.2.1 Nguyên li u hố ch t dung mơi 28 2.2.2 D ng c thi t b 30 2.2.2.1 D ng c : 30 v Nhi nóng ch y: t50A = 184 1860C t50C = 187 1880C Ph IR (KBr), max cm-1: 1710 (-C= O), 3350 (-OH), 2920 (-NH) (Hình 4.12) 7.00E+01 6.00E+01 5.00E+01 4.00E+01 3.00E+01 2.00E+01 1.00E+01 0.00E+00 4.00E+03 3.60E+03 3.20E+03 2.80E+03 2.40E+03 2.00E+03 1.60E+03 1.20E+03 8.00E+02 4.00E+02 Hình 4.12: Ph IR h p ch t beta lactam 3A 51A Ki m tra s n ph m b ng TLC, HPLC: Rf = 0, 45 (h D) (Hình 4.13), (PL 19) Hình 4.13: TLC ph n ng t o beta lactam 3A 51A Ph kh i MS ( ESI ) v i m/z: 163,07 MNa+ d ki n: 186,06 n máy cho bi t công th c phân t là: C9H9NO2 (PL - 20) 62 Ph H NMR (DMSO, 500MHz): ppm: 4,689 (d, J=5Hz, 1H, CH J = 7Hz, 1H, CH 5Hz, 5H, H OH); 5,788(d, J= 7,5Hz, 1H, OH); 7,226 Aromatic); 8,427 (s, 1H, NH) (PL K t lu n: Ph IR, ph kh i MS, ph (R) hydroxyl (S) Ph); 4,924 (dd, 7,364 (m, J = 4,5 21) H NMR phù h p v i c u trúc c a (+) - cis phenylazetidin one CTPT: C9H9NO2 KLPT: 163,17 Góc quay c c riêng: = +28,4° (c 0,35, CH3OH) = +4,12° (c 0,7, CH3OH) nh danh c u hình 51A, 51C: góc quay c c c a s n ph m sau tách b ng s c ký c c a 51A c tri n quang k +28,40 +4,120 So sánh v i giá tr chu n t tri n quang c a (+) 51A + 198,80 (-)51A D u c a s n ph m trùng v i d u c 198,80) [42] i phân chi h n h p sau ph n ng tinh t quang h c c a s n ph m 51A, 51C: 63 Bàn lu n: N u thay dung d ch KOH MeOH b ng dung d ch KOH th y ph n ng x u su ng ph n ng 4.7 PH N NG T NG H P CIS (1 ETHOXYETHOXY) PHENYLLAZETIDIN ONE (BETA LACTAM 4A) K t qu : T ng h p: Ti n hành theo Thí nghi m m c 3.7 vàng nh c 0,62g 52A d ch l ng màu t hi u su t 97,77 % Tính ch t: d ch l ng màu vàng nh t tan ethylacetat, aceton, methanol, DCM, CHCl3, tan n hexan Ki m tra s n ph m b ng TLC: Rf = 0, 65 (h D) (Hình 4.14) Hình 4.14: TLC ph n ng t o beta lactam 4A 52A v i m/z: 235,12 MNa+ d ki n: 258,11 Ph kh i MS n máy cho bi t công th c phân t phù h p: C13H17NO3 (PL - 24) Ph 4,119 H NMR (DMSO, 500MHz): ppm: 0,861 0,889 (t, J=6,5Hz, 6H, CH3); 4, 4478( m, J= 5Hz, 2H, CH2 ); 5,053 (m, J = 5Hz, 1H, CH (dd, J=5Hz, 1H, CH Ph); 5,975 OAc ); 6,461 (d, J = 8Hz, 1H, CH), 8,101 (s, 1H, NH); 7,4 7,7 (m, J = 11,5Hz, 5H, H Aromatic) (PL 25) 64 K t lu n: Ph IR, ph kh i, 1H NMR phù h p v i c u trúc c a cis ethoxyethoxy) phenyllazetidin (1 one CTPT: C13H17NO3 KLPT: 235,12 Bàn lu n: Xúc tác acid methan sulfonic m t axit m ng c s d ng ph n ng t o ether v i ethylvinylether làm nhóm b o v ch c n s d ng m ng nh v khan tinh th r n c, v y ph i làm c ti n hành ph n ng Vì ch t có tính oxy hố m nh nên n u s d làm ph n ng r t nhanh, có th sinh r t nhi u s n ph m ph không mong mu n, d n ph m m vòng -lactam s n ph m oxy hóa Dung d ch ph n ng có tính axit, pH kho ng ng acid methan sul nên s d ì acetate natri có tính axit y u, y u h n natri hydrocarbonate nên có th thay trung hoà NaHCO3 thay cho CH3COONa S n ph m t o thành có th d ng tinh th hình kim màu tr ng tinh t v m t SKLM H n h p s n ph m 52A g dù ph 1H NMR ng phân diaster isomery v i t l 1: 2,1 M c c tinh t qu ph MS v n cho bi t k t qu phù h p 65 4.8 PH N NG T NG H P CIS BENZOYL ETHOXYETHOXY) PHENYLAZETIDIN (BETA LACTAM 5A) (1 ONE K t qu : T ng h p: Ti n hành theo Thí nghi m m c 3.8 vàng nh t c 0,8g tinh th r n ánh kim t hi u su t 75,96 % Tính ch t: tinh th ánh kim vàng nh t, tan ethylacetat, aceton, methanol, DCM, chloroform, tan n hexan Ki m tra s n ph m b ng TLC: Rf = 0, 74 (h C); Rf = 0, 74 (h B) (Hình 4.15) Hình 4.15: TLC ph n ng t o beta lactam 5A 53A 66 v i m/z: 339,15 MNa+ d ki n: 362,14 Ph kh i MS n máy cho bi t công th c phân t là: C20H21NO4 (PL - 26) Ph H NMR (DMSO, 500MHz): ppm: 1,265 1,294 (t, J=3Hz, 6H, CH3); 4,00 4,15 (m, J = 11,5Hz, 2H, CH2); 5,58 (dd, J = 14Hz, 1H, CH - Ar); 6,143 (d, J= 5Hz, 1H, CH OAc); 6,461 (d, J = 8Hz, 1H, CH); 7,45 Aromatic) (PL 7,95 (m, J = 8Hz, 10H, H 27) K t lu n: Ph kh i, ph (1 ethoxyethoxy) H NMR phù h p v i c u trúc c a cis phenylazetidin benzoyl one CTPT: C20H21NO4 KLPT: 339,15 Bàn lu n: H n h p 52A sau ph n ng ti p t c c kh o sát v i benzoyl clorid v i xúc tác DMAP CHCl3 ho c THF nh m m c tiêu h n h p sau ph n ng s phân tách tinh t cho ph 1H NMR t t qu ph NMR không tinh t ph MS cho k t qu phù h s n ph m t o thành không b u ki n b o qu c cv n u có th ng 67 Sau m t th i gian th c hi tài u ph n ng thu phân b ng enzyme ng t ng h p taxol c m c tiêu c t ng h t ng h p nên m ch nhánh c a : c d n ch paclitaxel: N Benzyliden ( ) p methoxy aniline cis (p methoxyphenyl) acetoxy phenylazetidin one (+) cis (p methoxyphenyl) acetoxy phenylazetidin one (p hydroxyl phenylazetidin one (-) cis (-) cis 3(R) acetoxy 4(S) (+ ) methoxyphenyl) cis 3(R) hydroxyl cis cis (1 4(S) ethoxyethoxy) benzoyl (1 phenylazetidin phenylazetidin phenyllazetidin ethoxyethoxy) cc one one one phenyllazetidin one tinh t c a ch t t ng h pháp phân tích hóa lý hi nh nhi c c, ph h ng ngo i IR, ph kh i MS, ph c c b ng nóng ch y, góc quay ng t h t nhân 1H NMR, HPLC cho k t qu phù h p v i chu i ph n ng d ki n S d ng xúc tác enzyme Amano PS cho ph n ng th y phân v i beta Amano AK lactam ng t ng h p m ch nhánh Taxol side chain H n ch c a lu Mu HPLC c : tinh t quang h c cao ph u ki n khơng có c t phân tích nên tơi ph i s d ng quay c c c 68 l i nh , x p x b ng nên d n có hai kh c ph n ch n l c th p ho c thi t b kh c ph c h n ch trên, th n d ch proton 1H NMR b ng cách s d ng thêm ch t d ch chuy n hóa h c vào Tuy nhiên, m u u không th y s d ch chuy n c nh c ee T k t qu nghiên c xin nêu m t s ý ki n c h n ch c a lu ng m r tài , sau: Ti p t c kh o sát ph n ng t ng h p m ch nhánh c a phân t paclitaxel nh m tìm nh u ki n t nâng cao hi u su t, tính nh c a ph n tinh t c a s n ph m Ti p t c kh o sát nâng cao hi u su t, tính u ki n t a ph n ng th y phân b ng enzyme nh c a ph n ng th i kh ph n ng th y phân b ng xúc tác enzyme khác nh t hi u su t t u ki n t Ti p t c nghiên c u ph n ng t ng h p s n ph m alcol có c u hình S c tách t ph n ng th chuy n s n ph m không mong mu n thành s n ph m h u d ng chu i nghiên c u paclitaxel N u nghiên c u c n nghiên c ng này, nên có c t chiral HPLC i vi c s d ng c t Chiral HPLC tinh t quang h c 69 TÀI LI U THAM KH O [1] n Ti n Hùng, Tr n Công Lu n, and Nguy n Ng c dài (taxol wallichiana Zucc) t o ngu n nguyên li u chi t tách ho t ch t làm thu c ch H i th o Qu c t KH&CN 2013, 2013 [2] E K Rowinsky and R vol 332, no 15, pp 1004 1014, 1995 N Engl J Med., [3] enantiomeric mixtures of beta[4] antitumor agents VI The isolation and structure of taxol, a novel J Am Chem Soc., 1971 [5] B.H Guo, G.Y Kai, H.B Jin, and K Biotechnol., vol 5, no 1, pp 15 20, 2006 [6] African J -activity relationships of a Trends Biotechnol., vol 12, no 6, pp 222 227, Jun 1994 [7] - [8] Chem 150, 2008 [9] J Nat Prod., vol 62, no 7, pp 1068 71, Jul 1999 [10] J Molèmicrotubule arrangements and function of the mitotic spindle in Haemanthus J Cell Biol., vol 96, pp 527 540, 1983 [11] N Engl J Med., vol 332, pp 1004 1015, 1995 [12] N Hayashi, S Tsuboi, V A Mamedov, H Hamamoto, and M Kitamoto, -13 side chain of paclitaxel (Taxol) and Tetrahedron: Asymmetry, vol 11 pp 4485 4497, 2000 70 [13] Crit Rev Biotechnol., vol 33, no 1, pp 81 96, Mar 2013 [14] ACS Symp Ser., 1995 [15] J Lee, Studies Toward the Diastereoselective Semisynthesis of Taxol 2008 [16] L Guo-Qiang, L Yue-Ming, and C Albert S., Principles and Applications of Asymmetric Synthesis Wiley, 2001, p 536 [17] R A Holton, H B Kim, C Somoza, F Liang, R J Biediger, P D Boatman, Completion of the C and D r 1599 1600, 1994 J Am Chem Soc., vol 116, no 4, pp [18] K C Nicolaou, Z Yang, J J Liu, H Ueno, P G Nantermet, R K Guy, C Nature, vol 367, pp 630 634, 1994 [19] J J Masters, J T Link, L B Snyder, W B Young, and S J Danishefsky, Angew Chemie, Int Ed English, vol 34, pp 1723 1726, 1995 [20] P A Wender, N F Badham, S P Conway, P E Floreancig, T E Glass, J B Houze, N E Krauss, D Lee, D G Marquess, P L McGrane, W Meng, J Am Chem Soc., vol 119, no 11, pp 2757 2758, Mar 1997 [21] T Mukaiyama, I Shiina, H Iwadare, H Sakoh, Y Tani, M Hasegawa, and Proc Japan Acad., Ser B., vol 73, pp 95 100, Jun 1997 [22] H Kusama, R Hara, S Kawahara, T Nishimori, H Kashima, N Nakamura, J Am Chem Soc., vol 122, no 16, pp 3811 3820, Apr 2000 [23] T Doi, S Fuse, S Miyamoto, K Nakai, D Sasuga, and T Tak Chem Asian J., vol 1, no 3, pp 370 383, Sep 2006 [24] benzoyl- -O-benzoyltransferase cDNA from Taxus and 71 Proc Natl Acad Sci U S A., vol 97, pp 13591 13596, 2000 [25] [26] n of 10-deacetylbaccatin III and 7-protected-10-deacetylbaccatin III derivatives from 10-deacetyl taxol A, 10-deacetyl taxol B, and 1008224005, no US 5449790 US 4857653 (Aug, 1989) Colin et al 549/511; US 4924011 (May, 1990) Denis et al 549/510; US 4960790 (Oct, 1990) Stella et al 514/449; US 5015744 (May, 1991) Holton 549/510; US 5019504 (May, 1991) Christen et al 435/123; US 5202448 (Apr, 1993) Carver et, US, Sep-1995 [27] ic reactions of aliphatic BETA.-amino-.ALPHA.Bull Chem nitro compounds XI The synthesis of hydroxycarboxylic acids and GAMMA.Soc Jpn., vol 49, no 11, pp 3181 3184, 1976 [28] sis: tyrocidine synthetase A catalyzes the production of phenylisoserinyl CoA and other amino Chem Biol., vol 19, no 6, pp 679 685, Jun 2012 [29] aJ Med Chem., vol 46, no 1, pp 12 15, Jan 2003 [30] - Can J Chem., vol 83, no 1, pp 28 36, Jan 2005 [31] T Mandai, A Kuroda, H Okumoto, K Nakanishi, K Mikuni, K Hara, and -deacetylbaccatin {III} Tetrahedron Lett., vol 41, no 2, pp 243 246, 2000 [32] H.-J Ha, G.-S Park, Y.Bioorg Med Chem Lett., vol 8, no 13, pp 1619 1622, Jul 1998 [33] S Hanessian and J.Can J Chem., vol 74, no 4, pp 621 624, Apr 1996 72 [34] M Hodge, Q.-H Chen, S Bane, S Sharma, M Loew, A Banerjee, A A Alcaraz, J side chain bridged paclitaxel: A test of the TBioorg Med Chem Lett., vol 19, no 10, pp 2884 2887, May 2009 [35] J N Denis, A E Greene, A A Serra, and M J Org Chem., vol 51, no 1, pp 46 50, Jan 1986 [36] -methoxy-pentono-1,4-lactones from (R)-2hydroxy-5-methoxy-3-pentenoic acid obtained by bioreduction of the 2-oxo Tetrahedron, vol 48, no 44, pp 9695 9706, Jan 1992 [37] S Py, J.-W Pan, and F Khuongdeacetylbaccatin III Retrosynthetic approach to the total synthesis of taxol Tetrahedron, vol 50, no 23, pp 6881 6890, Jan 1994 [38] Critical Reviews in Biotechnology pp 16, 2012 [39] Biotechnology Set, H.-J Rehm and G Reed, Eds Weinheim, Germany: Wiley-VCH Verlag GmbH, 2001, pp 37 191 [40] G P Horsman, A M F Liu, E Henke, U T Bornscheuer, and R J es moderately increase the enantioselectivity of Pseudomonas fluorescens esterase towards methyl 3bromo-2Chemistry, vol 9, no 9, pp 1933 1939, May 2003 [41] -mechanism relationships in lipases: Trends Biotechnol., vol 12, no 11, pp 464 472, Nov 1994 [42] -13 side chain of taxol: optically active 3-hydroxy-4-phenyl beta.-lactam J Org Chem., vol 58, no 5, pp 1068 1075, 1993 [43] Kouji Daiichi Pharmaceutical Co Ltd SATO, Tsutomu Daiichi Pharmaceutical Co Ltd YAGI, Yutaka Daiichi Pharmaceutical Co Ltd KITAGAWA, Shigeru Daiichi Pharmaceutical Co Ltd ICHIKAWA, and - 73 [44] -catalyzed enantioselective ring opening of unactivated alicyclic-fused betaOrg Lett., vol 5, pp 1209 1212, 2003 [45] Biotechnol Adv., vol 19, no 8, pp 627 662, Dec 2001 [46] D L Ollis, E Cheah, M Cygler, B Dijkstra, F Frolow, S M Franken, M Protein Eng., vol 5, no 3, pp 197 211, Apr 1992 [47] R D Schmid and R Ver Angew Chemie Int Ed., vol 37, no 12, pp 1608 1633, Jul 1998 [48] H Hermansyah, A Wijanarko, D., M Gozan, P Wulan, R Arbianti, R Soemantojo, T Utami, Y., M Kubo, N Shibasaki-Kitakawa, and T Makara J Technol., vol 11, no 1, pp 30 35, Apr 2007 [49] blocks: secondary al [50] L Xiang- -amino ku, 2008 [51] Reacti vol 47, no 5, pp 591 600, 1999 Chem Pharm Bull (Tokyo)., [52] dependence of the enantioselectivity of Candida rugosalipase towards (+/-)men Protein Sci., vol 10, no 10, pp 1942 1952, Oct 2001 [53] -catalyzed redox reactions and lipase-catalyzed 2005 [54] Institute of Technology, 2005 [55] Curr Org Chem., vol 8, no 11, Jun 2014 74 [56] H Hönig, P Seuferof all isomeric 3-phenylserines and pp 3841 3850, Jan 1990 -enzymatic synthesis Tetrahedron, vol 46, no 11, [57] Nguy n Th Phi Ph ng, Ph NMR s d ng phân tích h h c Qu c gia TP HCM, 2005 i [58] preparation of (3R)-cis-3-acetyloxy-4-(1,1-dimethylethyl)-2-azetidinone: a sideTetrahedron: Asymmetry, vol 14, no 23, pp 3673 3677, Nov 2003 [59] Annu Rev Microbiol., vol 52, pp 361 395, 1998 [60] biosynthesis: cloning of the taxoid C13-side-chain N-benzoyltransferase from Proc Natl Acad Sci U S A., vol 99, no 14, pp 9166 9171, Jul 2002 [61] biotechnological applicatio 2, pp 13 19, Oct 2001 Appl Microbiol Biotechnol., vol 57, no [62] F Han, L.-Z Kang, X.-L Zeng, Z.-W Ye, L.-Q Guo, and J.-F Lin, transgenic Flammulina velutipes expressing the 10-deacetylbaccatin III-10-OJ Sci Food Agric., Jan 2014 [63] Phytochem Rev., vol 5, no 3, pp 433 444, Jun 2006 [64] M D Methods Determ Gaseous Pollut Atmos., vol -1, pp 61 75, 1979 [65] C Jonathan, G Nick, and W Stuart, Organic Chemistry, 2nd ed., vol 6, no Oxford University Press, 2012, p 1264 [66] Z C Gyarmati, A Liljeblad, G Argay, A Kálmán, G Bernáth, and L T Adv Synth Catal., vol 346, no 5, pp 566 572, 2004 75 PH L C 76 ... ích tài Nghiên c u ph n u ch taxol n ng thu phân b ng t ng h p taxol T m c tiêu t m c tiêu nghiên c u c th : Nghiên c u trình t ng h p Imine làm nguyên li beta t ng h p h p ch t lactam Nghiên. .. p nên taxol Nghiên c u trình thu phân Beta raxemic thu phân lactam b ng enzyme i quang T tách h n h p u ki n ph n ng t hi u su t cao nh t Nghiên c u m t s ph n ng t ng h p m ch nhánh c a phân. .. phenyl c a vịng beta trình nghiên c i phân lactam qua trình th y phân ch n l i phân hydroxy i phân Quá ã th c hi n ph n ng t ng h p h p ch t c n thi nh n m ch nhánh chu i taxol side chain, c th (+)