c. Tác dụng sinh học
3.4. Định lƣợng một số thành phần trong cao đặc kỳ phụ vƣơng 1 Định lƣợng alkaloid toàn phần
3.4.1. Định lƣợng alkaloid toàn phần
- Mẫu nghiên cứu: phụ tử, cao đặc kỳ phụ vương
- Tiến hành: Cân 10 g phụ tử, 20 g cao đặc kỳ phụ vương, tiến hành xác định hàm lượng alkaloid toàn phần trong mục 2.2.3.1.
52
Bảng 3.7. Hàm lượng alkaloid toàn phần trong phụ tử và cao đặc kỳ phụ vương
STT Mẫu nghiên cứu n
Hàm lượng alkaloid toàn phần (%)
Tính theo dược liệu Tính theo cao
1 Phụ tử 3 0,978 ± 0,008
2 kỳ phụ vương Cao đặc 3 0,247 ± 0,006 0,087 ± 0,002
- Nhận xét: Hàm lượng alkaloid toàn phần trong cao đặc bài thuốc kỳ phụ vương ít hơn khoảng 4 lần trong dược liệu.
3.4.2. Định lƣợng flavonoid toàn phần
- Mẫu nghiên cứu: cao đặc kỳ phụ vương
- Tiến hành: Cân 5g cao đặc kỳ phụ vương, tiến hành xác định hàm lượng flavonoid toàn phần theo mục 2.2.3.2.
- Xác định khoảng tuyến tính, hệ số tương quan R2 và phương trình hồi quy:
Kết quả đo độ hấp thụ của các dung dịch rutin để xây dựng đường chuẩn định lượng flavonoid được trình bày ở bảng 3.8 và hình 3.12.
Bảng 3.8. Độ hấp thụ quang của các dung dịch rutin
STT Nồng độ rutin (µg/ml) Độ hấp thụ quang trung bình 1 2,62 0,0814 2 5,24 0,1770 3 7,86 0,2670 4 10,48 0,3576 5 13,1 0,4302 6 15,72 0,5103
53
Phương trình tuyến tính: y = 0,0327x + 0,0044
Hệ số tương quan: R2 = 0,9977
Hình 3.12. Đồ thị biểu diễn mối tương quan giữa độ hấp thụ quang và nồng độ của dung dịch rutin
Nhận xét: Hệ số tương quan R2 = 0,9977 gần giá trị 1 chứng tỏ có mối
tương quan tuyến tính giữa mật độ quang và nồng độ rutin khảo sát. Khoảng tuyến tính được xác lập từ 2,62 – 15,72 (µg/ml).
- Khảo sát độ lặp lại của phương pháp: tiến hành thí nghiệm với số lần lặp lại 5 lần của mẫu nghiên cứu.
Kết quả được trình bày ở Bảng 3.9.
Bảng 3.9. Khảo sát độ lặp lại của phương pháp đo quang
STT Nồng độ flavonoid toàn
phần đo được (µg/ml) Xử lí số liệu thống kê
1 8,031804
Kết quả trung bình X = 7,75 Độ lệch chuẩn SD = 0,19 Độ lệch chuẩn tương đối RSD = 2,45 %
2 7,525382
3 7,636697
4 7,730887
54
Nhận xét: Phương pháp có độ lặp lại đạt yêu cầu cho phép của một phép phân tích định lượng.
- Định lượng flavonoid trong cao đặc kỳ phụ vương: hàm lượng flavonoid toàn phần trong cao đặc kỳ phụ vương được tính dựa trên phương trình đường chuẩn đã xây dựng ở trên.
Kết quả định lượng được trình bày ở Bảng 3.10.
Bảng 3.10. Hàm lượng flavonoid toàn phần trong cao đặc kỳ phụ vương
Mẫu nghiên cứu Số lần (n) Hàm lượng (%)
flavonoid toàn phần
Cao đặc 5 0,635 ± 0,114
Nhận xét: Phương pháp đo quang sự phụ thuộc tuyến tính và độ lặp lại. Áp dụng phương pháp trên đã xác định được hàm lượng flavonoid toàn phần trong cao đặc kỳ phụ vương là 0,635% hay 6,35 mg/g.