c. Tác dụng sinh học
2.2.4.6.Thử độ nhiễm khuẩn
- Thử theo phụ lục PL 13.6 Dược điển Việt Nam IV
- Chuẩn bị thí nghiệm: Môi trường và dung dịch NaCl 0,9 % được hấp tiệt trùng ở 1210
C trong 15 phút.
Môi trường và dung dịch dùng là môi trường thạch thường, môi trường thạch Sabouraud, môi trường canh thang lactose, môi trường lỏng casein đậu tương và môi trường lỏng lactose.
Đếm số lượng vi khuẩn hiếu khí và vi nấm: + Phương pháp tiến hành: phương pháp đĩa thạch
+ Thử nghiệm được tiến hành trong buồng thổi khí sạch.
+ Cân 10,00 g mẫu thử nghiệm thêm 90 ml dd NaCl 0,9%, lắc đều trong 45
phút, thu được dịch thử nghiệm có độ pha loãng 10-1 (dung dịch X). Pha loãng
dung dịch X thành dung dịch có độ pha loãng 10-2, 10-3. Cấy 1,0 ml dịch thử
nghiệm vào các đĩa petri vô trùng. Mỗi độ pha loãng và mỗi loại môi trường tiến hành trên 2 đĩa petri vô trùng. Thêm 15 – 20 ml môi trường thạch thường hoặc môi trường Sabouraud, trộn đều, để môi trường đông khô ở nhiệt độ
thường, lật úp đĩa. Ủ đĩa phát hiện vi khuẩn ở 30–350
C/24 - 48h, vi nấm ở 20
– 250C/5 ngày. Sau thời gian ủ, kiểm tra vi khuẩn mọc ở đĩa, đếm số khuẩn
lạc tạo thành.
Tìm vi khuẩn gây bệnh:
+ Thử nghiệm được tiến hành trong buồng thổi khí sạch
+ Cấy 10,0 ml dung dịch X vào 100 ml môi trường Casein – đậu tương lỏng ủ ở 30-350
C/24-48h để phát hiện sự có mặt của Staphylococcus aureus và
Pseudomonas aeruginosa. Kiểm tra vi khuẩn mọc ở môi trường.
+ Cấy 10,0 ml dung dịch X và 100 ml môi trường lỏng lactose, ủ ở 350
C trong 1 ngày. Kiểm tra vi khuẩn mọc, lắc nhẹ nhàng.
31