Kết quả tách chiết DNA tổng số từ mẫu niêm mạc miệng

Một phần của tài liệu Xác định đa hình kiểu gene ACE I/D bằng kỹ thuật PCR và ACTN3 R577X bằng kỹ thuật PCR-RFLP của một số vận động viên điền kinh và bơi lội ở Việt Nam (Trang 54)

Việc tách chiết DNA tổng số từ mẫu tế bào niêm mạc miệng đƣợc thực hiện theo quy trình tại mục 2.2.3. DNA thu đƣợc sau tách chiết đƣợc chúng tôi tiến hành kiểm tra trên gel agarose 1 % (Hình 3. 2).

(Giếng M: Marker 100 bp; Giếng B: mẫu VĐV bộ môn bơi lội; Giếng (-): mẫu đối chứng âm)

Để kiểm tra độ tinh sạch và hàm lƣợng DNA sau khi tách chiết, chúng tôi tiến hành do OD kiểm tra tỉ số OD260 nm/OD280 nm bằng máy quang phổ Quawell Q3000 (Quawell, Mỹ).Kết quả cho thấy nồng độ DNA tổng số đạt từ 24 ng/μL đến 70 ng/μL. Tỉ số OD260 nm/OD280 nm cho kết quả từ 1,80 đến 2,00.

Hình 3.1. Điện di đồ sản phẩm DNA tổng số tách từ mẫu máu trên thẻ FTA

Hình 3. 2. Điện di đồ sản phẩm DNA tổng số tách từ mẫu niêm mạc miệng

53 Nhƣ vậy, chúng tôi đã tách thành công DNA tổng số từ cả 2 loại mẫu là mẫu tế bào niêm mạc miệng và mẫu máu trên thẻ FTA. DNA thu đƣợc từ hai phƣơng án tách chiết đều có chất lƣợng tốt, không bị đứt gãy và có độ tinh sạch cao, hàm lƣợng DNA đủ để làm các thí nghiệm tiếp theo.

So sánh giữa hai phƣơng pháp thu mẫu, chúng tôi thấy rằng việc sử dụng mẫu tế bào niêm mạc miệng để tách DNA tổng số của VĐV có nhiều ƣu điểm hơn so với sử dụng mẫu máu trên thẻ FTA, vì đây là mẫu rất dễ thu, đơn giản, không cần dụng cụ phức tạp để thu mẫu, đặc biệt là các VĐV có thể tự thu mẫu, từ đó tạo điều kiện thuận lợi cho việc triển khai ứng dụng xét nghiệm này trong tƣơng lai. Do vậy, mẫu tế bào niêm mạc miệng là loại mẫu đƣợc chúng tôi lựa chọn làm nguồn mẫu tách DNA tổng số cho các nghiên cứu tiếp theo.

Một phần của tài liệu Xác định đa hình kiểu gene ACE I/D bằng kỹ thuật PCR và ACTN3 R577X bằng kỹ thuật PCR-RFLP của một số vận động viên điền kinh và bơi lội ở Việt Nam (Trang 54)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(99 trang)