III. ẹOễNG VAễT CHAĐN ẹAĂU (Cephalopoda)
3. Sạn xuaõt gioõng ủoụng vaụt chađn bỳng
133 4.2.3 Chaetoceros muelleri (tạo khueđ)
4.2.3. Chaetoceros muelleri (tạo khueđ)
Chaetoceros muelleri laứ moụt loaứi trong ngaứnh Bacillariophyta, lụựp Centrophyceae, boụ Biddulphiales, hú Chaetoceraceae, gioõng Chaetoceros.
Tạo coự dỏng hỡnh hoụp loăng, teõ baứo tạo hỡnh vuođng, chửừ nhaụt. 4 goực coự 4 gai tửụng ủoõi daứi. Kớch thửụực tạo nhoỷ, dao ủoụng tửứ 3,5 – 4,6 x 4,5 – 9,2àm.
Caực giụựi hỏn sinh thaựi:
- ẹoụ maịn : 18 - 45‰ (thớch hụùp 25 - 32‰) - Nhieụt ủoụ: 10 – 39oC (thớch hụùp 25 – 30o C) - PH : 6,5 – 9,5 (thớch hụùp 8 – 8,5)
ễÛ mođi trửụứng thớch hụùp, tạo phaựt trieơn cửùc ủỏi ủỏt maụt ủoụ 1 – 1,2.106 tb/ ml. Chu kyứ phaựt trieơn ngaĩn 2 – 5 ngaứy. Pha gia toõc dửụng nhanh, pha cađn baỉng ngaĩn, pha gia toõc ađm raõt nhanh.
4. 3. Kyừ thuaụt phađn laụp vaứ lửu giửừ gioõng tạo ủụn baứo 4.3.1. Nguoăn gioõng
Gioõng tạo ủụn baứo ủửụùc taụùp hụùp tửứ hai nguoăn chớnh:
- Laõy gioõng tửứ nửụực bieơn tửù nhieđn: Platymonas sp, Chlorella sp.
- Nhaụp gioõng tửứ caực nửụực nhử Trung Quoõc, Philippine, ẹan Mỏch, Uực,: Isochrysis galbana, Nannochloropsis, Platymonas sp.,Chaetoceros muellery, Nitchia, …
4.3.2. Phađn laụp gioõng
Gioõng tạo ủửụùc phađn laụp thuaăn khieõt trong phoứng thớ nghieụm dửùa tređn phửụng phaựp keõt hụùp caõy chuyeăn nhieău laăn tređn mođi trửụứng thỏch (hoụp loăng) vaứ mođi trửụứng loỷng (oõng nghieụm).
4.3.3. Nhađn gioõng
Quaự trỡnh nhađn gioõng ủửụùc tieõn haứnh trong phoứng thớ nghieụm trửụực khi ủửa ra nuođi sinh khoõi tửù nhieđn. Vieục nhađn gioõng ủửụùc tieõn haứnh tuaăn tửù tửứ theơ tớch nhoỷ ủeõn theơ tớch lụựn hụn : oõng nghieụm 5, 10, 20ml, bỡnh tam giaực 125, 500,
134
1000ml, bỡnh thuyỷ tinh 10, 20 lớt. Trong ủoự lửụùng tạo gioõng luođn chieõm 1/ 3 – 1/ 2 theơ tớch dũch nuođi.
Sụ ủoă nuođi vaứ phửụng phaựp lửu giửừ tạo ủụn baứo
4.3.4. ẹieău kieụn mođi trửụứng nuođi
Mođi trửụứng toõi ửu ủeơ nuođi caực loỏi tạo ủửụùc xaực ủũnh nhử sau: Bạng 10: Mođi trửụứng toõi ửu ủeơ nuođi caực loỏi tạo
ẹK nuođi Teđn gioõng Cửụứng ủoụ aựnh saựng (lux) Nhieụt ủoụ ( 0C ) ẹoụ maịn (%0 ) pH Platymonas 5000-10000 25-28 30-35 7.5-8.5 Dunaliella 2000-6000 25-28 30-40 7.5-8.5 Nannochloropsis 1000-2000 25-30 30-32 7.5-8.5 Chlorella 1000-2000 25-28 30-32 6.0-8.0 Gioõng tạo tỏp Gioõng thuaăn OÂng nghieụm Bỡnh tam giaực Bỡnh10 L,20L LL L
Nuođi sinh khoõi
Lửu giửừ
Mođi trửụứng thỏch
Mođi trửụứng loỷng, 5-60C, trong toõi
Mođi trửụứng baựn loỷng, 5-60C, trong toõi
Mođi trửụứng baựn loỷng, ủaịt ụỷ ủieău kieụn phoứng thớ nghieụm
135
Chaetoceros 6000-8000 25-35 20-25 8.0-9.0
Skeletonema 4000-6000 25-30 20-25 8.0-9.0
Isochrysis 1000-6000 25-30 28-30 7.5-8.0
4.3.5. Lửu giửừ gioõng thuaăn chụng a/ Phửụng phaựp lửu giửừ tređn ủúa thỏch
Laõy gioõng tạo thuaăn caõy tređn beă maịt thỏch. ẹeơ trong ủieău kieụn aựnh saựng 2 ủeứn neon. Sau 8-10 ngaứy thaõy caực khuaơn lỏc tạo baĩt ủaău xuaõt hieụn thỡ giạm cửụứng ủoụ aựnh saựng vaứ ủeơ trong ủieău kieụn nhieụt ủoụ 20-220C.
Phửụng phaựp naứy sửỷ dỳng toõt ủoõi vụựi caực loaứi tạo xanh. Thụứi gian lửu giửừ tửứ 2-6 thaựng tuứy tửứng loaứi tạo.
b/ Phửụng phaựp lửu giửừ gioõng ụỷ mođi trửụứng loỷng, nhieụt ủoụ 5-60C trong toõi. Dũch tạo thuaăn ủửụùc thu ụỷ cuoõi pha logarit khi sửực soõng vaứ chaõt lửụùng cụa tạo laứ toõt nhaõt. Tạo ủửụùc nuođi trong oõng nghieụm, sau ủoự ủaịt vaứo tụ lỏnh ụỷ nhieụt ủoụ 5-60C.
Phửụng phaựp naứy ủửụùc sửỷ dỳng cho taõt cạ caực loaứi tạo ủụn baứo.
Thụứi gian lửu giửừ ngaĩn chư vaứi ngaứy ( Skeletonema, Isochrysis), 2-3 thaựng (caực loaứi tạo xanh)., 1-2 thaựng ủoõi vụựi tạo khueđ. Sau thụứi gian lửu giửừ tạo caõy lỏi phaựt trieơn chaụm.
c/ Phửụng phaựp llửu giửừ tạo ụỷ mođi trửụứng baựn loỷng, nhieụt ủoụ 5-60C trong toõi. Laõy gioõng tạo thuaăn ủem nuođi trong oõng nghieụm coự ủaựy thỏch. Sau ủoự ủem caõt vaứo tụ lỏnh ụỷ nhieụt ủoụ 5-60C khi tạo ủỏt maụt ủoụ gaăn toõi ủa.
ẹađy laứ phửụng phaựp toõi ửu nhaõt sửỷ dỳng cho haău heõt taõt cạ caực loaứi tạo.
Thụứi gian lửu giửừ tạo raõt daứi, 6-8 thaựng ủoõi vụựi caực loaứi tạo Heterogloea sp, Chlorella sp, Nannochloropsis oculata, 2-4 thaựng ủoõi vụựi caực loaứi trong gioõng tạo Chaetoceros
d/ Phửụng phaựp lửu giửừ tạo trong mođi trửụứng baựn loỷng, ủaịt ụỷ ủieău kieụn phoứng thớ nghieụm
136
Gioõng tạo thuaăn ủửụùc nuođi trong caực oõng nghieụm (10ml), giạm cửụứng ủoụ aựnh saựng khi tạo ủỏt ủeõn cuoõi pha logarit. ẹũnh kyứ haứng tuaăn san nửỷa theơ tớch gioõng goõc sang theơ tớch mụựi. Phửụng phaựp naứy toõn mođi trửụứng, thụứi gian chaớm soực nhieău, tạo deờ bũ laờn tỏp. Chụ yeõu sửỷ dỳng ủoõi vụựi tạo Isochrysis galbana.
Nhỡn chung gioõng tạo Chaetoceros chu kyứ phaựt trieơn ngaĩn, tạo lỏi phaựt trieơn nhanh vaứ taứn nhanh vỡ vaụy vụựi phửụng phaựp lửu giửừ naứo thỡ thụứi gian lửu giửừ cuừng ngaĩn hụn so vụựi caực loaứi tạo xanh . Chaõt lửụùng tạo ủửa vaứo lửu giửừ caứng toõt thụứi gian lửu giửừ caứng lađu. Tuy nhieđn thụứi gian bạo quạn caứng daứi thỡ ủửa ra nuođi caõy tạo caứng chaụm thớch nghi ủoõi vụựi mođi trửụứng nuođi.
e/ Mođi trửụứng dinh dửụừng cho nhađn gioõng vaứ lửu giửừ gioõng trong phoứng thớ nghieụm.
Coự theơ sửỷ dỳng moụt trong caực cođng thửực sau ủađy cụa Provasoli, L.; McLaughlin, J.J.A.; Droop, M.R. (1957):
Platymonas sp., Chlorella sp.
1. NaNO3 100mg KH2PO4 10mg FeC6 H5O7 0,1 – 0,5 mg Nửụực tieơu 3‰ Nửụực maĩm 1% Nửụực bieơn 100ml 2. (NH4)2SO4 200mg FeSO4 0,4mg NaH2PO4 28mg H3BO3 2,8mg CaSO4.H2O 30mg MnCl2.4H2O 1,8mg MgSO4.7H2O 80mg ZnSO4.7H2O 0,2mg NaHCO3 100mg EDTA 0,37mg KCl 25mg Nửụực bieơn 1000ml 3. NH4NO3 50-100mg FeC6H5O7 0,1-0,5mg KH2PO4 5mg Nửụực bieơn 1000ml Chaetoceros muelleri. 1. KNO3 20mg KH2PO4 3mg