II- TÁCH CHIẾT RUTIN:
II.1: Phương pháp và điều kiện chiết tách Rutin:
Cho 20 gam dược liệu (bột nụ hoa Hịe) và 400 ml dung mơi vào bình cầu 500 ml, đun ở nhiệt độ 75oC và khuấy bằng máy khuấy trong 75 phút. Sau đĩ lọc nĩng dung dịch qua vải mịn. Dịch lọc sau đĩ được làm lạnh và đem acid hĩa với HCl để đưa về pH= 3-4, đem dung dịch này làm lạnh để Rutin tách ra. Lọc, rửa sạch bằng nước lạnh rồi đem phần Rutin thu được sấy khơ ở 80oC ta cĩ Rutin thơ.
Các điều kiện tiến hành : + Thời gian chiết : 75 phút + Nhiệt độ chiết : 75oC
+ Dung mơi : dung dịch NaOH 0,15%
+ Tỷ lệ chiết : 1 : 20 ( gam nguyên liệu : ml dung mơi ) + Quá trình chiết được khuấy liên tục.
+ Hiệu suất chiết:
η (%)= m'
mx100%
m’: khối lượng Rutin thu được (g) m : khối lượng nụ hịe đem chiết (g)
Máy khuấy từ Nhiệt kế Ống sinh hàn Bình phản ứng
II.2: Tinh chế và định lượng Rutin:
II.2.1: Kết tinh lại trong ethanol:
Cân 1 gam Rutin thơ, hịa tan trong 60 ml ethanol 80o. Đun sơi và khấy nhẹ bằng khuấy từ cho đến khi tan hồn tồn. Lọc nĩng dung dịch bằng giấy lọc. Dịch qua lọc được tiếp tục đun sơi hoặc sử dụng cơ quay chân khơng để loại bớt dung mơi. Sau đĩ, để lạnh dung dịch, Rutin sẽ kết tinh lại. Lọc áp suất thấp để thu tinh thể Rutin và sấy khơ ở 80oC. Đem cân Rutin thu được để tính hiệu suất tinh chế.
II.2.2: Định lượng Rutin:
Mẫu Rutin được tinh chế nhiều lần bằng cồn được dùng như Rutin chuẩn. Cân 0,0250 g Rutin chuẩn, pha với methanol thành 25ml (dung dịch A). Dung dịch A cĩ nồng độ 1000 ppm. Từ dung dịch A ta pha thành dung dịch A’ cĩ nồng độ 100 ppm. Từ A’ ta tiếp tục pha các dung dịch cĩ nồng độ 15, 20, 25, 50, 75 để lập đường chuẩn.
Mẫu Rutin trích ly ở điều kiện tối ưu và kết tinh lại trong ethanol 80o được đem kiểm tra. Cân m (g) Rutin, pha thành 50 ml (M1). Hút 1 ml, pha thành 25 ml (M’1).
Các dung dịch đều được pha chính xác trong bình định mức bằng dung mơi methanol. Các dung dịch để đo đường chuẩn và dung dịch M’1 được đo trên máy UV/Vis Spectrometer V-530 tại Viện Cơng nghệ Hĩa học.
III- TỔNG HỢP QUERCETIN: