Từ các nghiên cứu ở trên cho phép đề xuất quy trình lên men nhƣ sau: (Hình 3.21).
Thuyết trình quy trình lên men + Chủng probiotic:
Chủng để sản xuất probiotic sau khi hoạt hóa sẽ đƣợc chuẩn bị cho quá trình lên men.
+ Chuẩn bị dịch lên men:
Thành phần môi trƣờng lên men gồm có pepton, NaCl, rỉ đƣờng, K2HPO4. Dich lên men đƣợc hấp khử trùng ở 1210C trong vòng 15 phút, sau đó chuẩn về pH 8 để chuẩn bị cho quá trình lên men.
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 0 2 4 6 8 M ật độ q ua ng ( OD 540 ) i gian ( )
Lên men
Môi trƣờng TSB cải tiến Nhiệt độ: 340
C pH=8
Tốc độ khuấy:180 vòng /phút Thu dịch lên men
Chuẩn bị dịch lên men
Ly tâm
Sinh khối tế bào
Tốc độ ly tâm: 6000 vòng/phút Thời gian: 30 phút.
Nhiệt độ: 40
C
Hình 3.21 Sơ đồ quy trình lên men + Lên men:
Chủng probiotic đƣợc bổ sung vào dịch lên men , tỷ lệ bổ sung giống là 5%. Tiến hành lên men trong thiết bị BioFlo 110 với các thông số nhƣ sau: nhiệt độ 340
C, tốc độ khuấy 180 vòng/phút, pH 8. Tiến hành lên men trong thời gian 3 giờ. Trong quá trình lên men cần chú ý đến việc phá bọt và đảm bảo đủ hàm lƣợng oxy.
+ Thu dịch lên men:
Dịch sau khi lên men đƣợc tiến hành ly tâm ở thiết bị lên men thể tích lớn BioFlo 110. Dịch sau khi lên men đƣợc đem đi ly tâm ở thiết bị ly tâm với tốc độ 6000 vòng/phút, ở nhiệt độ 40C trong thời gian 30 phút.
+ Sinh khối tế bào:
Sau khi ly tâm, sinh khối tế bào đƣợc bổ sung chất chống đông để đƣa vào đông khô sản xuất chế phẩm.