- Các kết qủa đo phổ iH -N M R và khối phổ đã khảng định (X II) là 2 ’, 4 - dihydroxi - 4', 5', 6’ trimetoxi chalcon, với các số liệu cụ thể sau: dihydroxi - 4', 5', 6’ trimetoxi chalcon, với các số liệu cụ thể sau:
iH -N M R (CDCI3, 3 00 MHz): s = 3.84 (3H, s, OCH3) 3 .90 (3H, s, OCH3);
3.93 (3H, s, OCH3); 7 .84 (2H, s, H - a và H- ß) ; 6.30 (1H, s, H-3'); 6.87 (2H, d. J =
8.6 H z, H-3 và H-5); 7.57 (2H, d, J = 8.6 Hz, H-2 và H-6); 13.76 (1H, s, OH).MS: Cria trị tính: 330.1102; giá trị tìm: 330.40 (100% ). MS: Cria trị tính: 330.1102; giá trị tìm: 330.40 (100% ).
pic theo m /z (%): 2 10 (C l0H10O5 , 93.46). 195 (C9H7O5, 75.62); 167 (C8H70 4i 27.05); 91 (C7H7, 11.21).
3 .7 .3 . T ách chalcon 2
S KLM phân đoạn 1-9 của cột 1 cho thấy trong phân đoạn tổn tại 2 vệt chất. Sau khi bay hơi dung m ồi và đ ể qua đêm trong tủ lạnh thu được mẫu đặc mầu vàng. Thực hiện SKC nhanK cho phân đoạn này trong hệ dung m ôi P.E/EtOAc 7/3, ký hiệu
là cột 3.
Kết qủa tách sắc ký cột 3 như sau: Fr 9-10; R f = 0.78 (11.2 mg); Fr 18-22: R f = 0.43 ( 2.3 mg); Fr 28-35: R f = 0.22 (0.2 m g). Phân đoạn 9-10 sau khi cho bay hơi dung m ô i cộ dạng dung dịch sệt, màu vàng, ký hiệu là L2.
Phân đoạn 18-22 là tinh thể màu vàng cam, ký hiệu là (X I).
Kết qủa phân tích ^H-NMR của L2 khơng thể hiện pic cụ thể, sắc đồ có dạng như của l polim ẹ
(X I) thể hiện là chất sạch, tnc = 136.5 - 137.5 (EtOAc/P.E); tnc [41] = 142 -
144°c.
Các kết qủa phổ đã khẳng định được (X I) là odorátin, giá trị cụ thể như sau: iH -N M R (CDCI3, 3 00 MHz): 5 = 3.84 (3H, s, OCH3); 3.86 (3H, s, OCH3); 3 .90
(3H, s, OCH3); 3.93 (3H, s, OCH3); 7.85 (2H, s, H - a và H - ß y , 6 .30 (1H, s, H -3’); 6.94 (2H , d, J = 8.7 Hz, H - 3 và H- 5); 7.61 (2H, d, J = 8.7 Hz, H-2 và H- 6); 13.78 (1H, s, OH).
MS: pic theo m/z: 210 (C ịo H io C ^ )’ 195 (C9H7O5); 167 (C8H7O4); 91 (C7H7).
3 .7 .4 . T ách fla v a n o n
Trong kết qủa sắc ký của cột 1, có phân đoạn từ 22 trở về cuối cần được khảo sát ở hệ dung m ôi tách chất mớị
Chúng tôi đã chọn hệ dung m ồi CHCl3/EtOAc 6/4 để thực hiện tách SKC nhanh cho phân đoạn này, ký hiệu là cột 4.
. 91
92
5-8
^ 0
12-17 cột 4
2 0-24
H ình48: sắ c ký đồ sau khi chạy cột 4
Các đặc điểm cụ thể của sắc ký đã được trình bày trong bảng 14.
H iện bẳng Fr 5-8 F rl2-17 Fr 20-24 Anh sáng tử ngoại Ẫ = 2 54 run 1 vệt mờ 1 vệt tím 2 vệt nâu 1 vệt mờ 2 vệt nâu Ả = 365 nm 1 vệt nâu 1 vệt nâu 1 vệt nâu vàng 1 vêt vàng 1 vệt nâu vàng 1 vệt vàng Hấp phụ iot 1 vệt 1 vệt 1 vệt R f 0.77; 0.65 0.75; 0.65; 0.54 0.67; 0.57
Bảng 14: Sắc ký đồ căn chiết sau khi chạy cột 4
Phân đoạn 5-8 gần như là lượng vết, phần này đã được khảo sát ở 3.7.3.
Phân đoạn 12-17 có một vệt hấp phụ Ỉ2, thể hiện hàm lượng tương đối lớn nẽn chủng tổi lấy phân đoạn này đ ể tiếp tục khảo sát trên cột 5.
Cột 5 tiến hành trong hệ dung m ôi CộHộ/EtOAc 7/3 theo SKC thông thường. Sắc ký đổ các phân đoạn sau khi chạy cột 5 thể hiện ở hình 49.
5-18 ^ 0
19-37 cột 5
38-53 o < £ $
Các đặc díểm của SKLM sau khi chạy c t 5 được tóm tắt với giá trị R f như sau: Fr 5-18: 0.68; 0.61; Fr 19-37: 0.7; 0.62; 0.56; Fr 38-53: 0.62; 0.55. Phân đoạn 19-37 cua cột 5 sau khi cho bay hơi dung m ôi và để trong tủ lạnh qua đêm thấy xuất hiện tinh thể. Kết tinh lại phần tinh thế trong dung môi EtOAc/P.E thu được 2.9 mg tinh thể màu tráng ngà, hình kim, hiệu suất 0.0003% so với NLT, ký hiệu là (X III).
tnc = 193 - 194°c.
Các phản ứng khảo sát khung flavonoit của (X III)