2 A/Duck/VNBN/06/1 88 3 13 Cao
3.4.2.Tính ổn ñịnh ELD50 và LD50 của virút A/Duck/VNBN/06/
Với mục đích sử dụng trong thực tiễn như một chủng vi rút chuẩn cho các thí nghiệm thử thách cường độc, việc đánh giá tính ổn định về độc lực của vi rút là rất quan trọng. Trong thí nghiệm này chúng tơi tiến hành tiếp đời vi rút 5 lần qua phơi trứng gà, sau đó lập lại thí nghiệm chuẩn độ để xác định ELD50 trên phơi trứng và LD50 trên gà thí nghiệm. Kết quả lần lượt được trình bày tại các bảng 3.9, bảng 3.10 và biểu đồ minh họa tại hình 3.5 và 3.6 dưới ñây:
Bảng 3.9. ELD50 của vi rút A/Duck/VNBN/06/12 sau tiếp ñời
ELD50 (log) MDT (giờ)
Lần TN Tiếp ñời lần 2 Tiếp ñời lần 6 Tiếp ñời lần 2 Tiếp ñời lần 6
1 6,30 8,50 27,00 34,80
2 6,10 8,70 28,20 32,40
3 6,30 8,90 26,40 33,60
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 56
Hình 3.5. ELD50 và MDT của vi rút sau tiếp đời trên phơi trứng Nhận xét : Kết quả so sánh ELD50 và MDT của vi rút A/Duck/VNBN/
06/12 sau khi tiếp đời 5 lần trên phơi trứng (tiếp ñời lần 2 : pass#2 và lần 6 : pass#6) cho thấy :
(1) Vi rút A/Duck/VNBN/06/12 tăng tính thích ứng trên phơi trứng sau 5 lần tiếp ñời với liều gây nhiễm và gây chết phôi trứng là 8,70 ± 0,20 ELD50 (lần tiếp ñời thứ 6) so với 6,23 ± 0,12 ở lần tiếp ñời thứ 2 (tăng 251 lần).
(2) Song song với hiệu giá vi rút tăng lên, thời gian gây chết phôi cũng tăng từ 27,20 ± 0,92 giờ (ñời 2) lên 33,60 ± 1,20 giờ (ñời 6), tăng 1,2 lần.
Tuy thời gian gây chết phơi tăng 1,2 lần (dấu hiệu giảm độc lực) sau khi tiếp đời trên phơi 5 lần, thời gian gây chết vẫn rất ngắn và vi rút A/Duck/VNBN/06/12 có thể coi là vẫn ở mức ñộc lực rất caọ Ngược lại ở ñộ pha loãng vi rút rất cao, liều rất thấp, vi rút A/Duck/VNBN/06/12 ñã
có khả năng gây chết phơi chúng tỏ độc lực của vi rút tăng ñối với phơi trứng. Bất luận trong trường hợp nào có thể thấy tính thích nghi của vi rút trên phơi trứng tăng rõ rệt sau 5 lần tiếp ñờị
Trong thực tế, ñể bảo quản và lưu truyền vi rút sử dụng trong thử thách cường ñộc, tiếp ñời vi rút trên phôi trứng là công việc thường quỵ Tuy nhiên, ñể ñánh giá ñộ ổn ñịnh của ñộc lực vi rút A/Duck/VNBN/06/12
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 57 trên gà cảm thụ, chúng tơi lập lại thí nghiệm xác định LD50 của nước trứng gây nhiễm vi rút ñời thứ 6 và so sánh với kết quả của ñời thứ haị Kết quả của 3 lần thí nghiệm được trình bày ở bảng 3.10 và minh họa ở hình 3.6.
Bảng 3.10. LD50 của chủng vi rút A/Duck/VNBN/06/12 sau tiếp ñời
LD50 (log) MDT (giờ)
Lần TN Tiếp ñời lần 2 Tiếp ñời lần 6 Tiếp ñời lần 2 Tiếp ñời lần 6
1 5,10 4,90 42,20 46,00
2 4,70 4,70 41,20 49,40
3 5,10 4,70 40,80 47,00
Trung bình 4,97± 0,23 4,77 ± 0,12 41,40 ± 0,72 47,47 ± 75
Hình 3.6. LD50 và MDT trên gà của vi rút sau tiếp đời trên phơi trứng Nhận xét: Kết quả so sánh LD50 và MDT trên gà cảm thụ của vi rút A/Duck/VNBN/06/12 sau khi tiếp ñời 5 lần trên phơi trứng (tiếp đời lần 2 : pass#2 và lần 6: pass#6) cho thấy :
(1) Vi rút A/Duck/VNBN/06/12 giảm nhẹ độc lực trên gà từ 200 µl tại ñộ pha loãng 10-4,97± 0,23 ñến ñộ pha loãng 10-4,77 ± 0,12 (cần ñậm ñộ tăng 1,6 lần). Kết quả này chứng tỏ ñộc lực của vi rút A/Duck/VNBN/06/12 khá ổn ñịnh trên gà sau 5 lần tiếp ñờị
(2) Thời gian gây chết gà trung bình đồng thời cũng tăng từ 41,40 ± 0,72 giờ (ñời thứ 2) lên 47,47 ± 75 giờ (ñời thứ 6) (tăng 1,15 lần). Tuy nhiên, sự tăng
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 58 nhẹ của MDT và vi rút vẫn gây chết gà trong thời gian dưới 2 ngày chứng tỏ vi rút vẫn ở mức ñộc lực rất cao và ổn ñịnh.
Hình 3.7 trình bày tóm tắt dưới dạng biểu đồ so sánh kết quả ở bảng 3.9 và 3.10, sự biến động về liều gây chết 50% phơi trứng thí nghiệm và liều gây chết 50% động vật thí nghiệm sau 5 lần tiếp đời vi rút trên phơi trứng gà.
Hình 3.7. Biến động ELD50, LD50 và MDT của vi rút sau tiếp đời trên phơi trứng gà
Nhận xét:
Sau 5 lần tiếp đời trên phơi trứng gà, ELD50 của chủng A/Duck/VNBN/ 06/12 tăng từ 10-6,3 lên 10-8,7 (251 lần), trong khi thời gian gây chết trứng cũng tăng. Ngược lại, sau khi tiếp ñời trên trứng 5 lần, ñộc lực của vi rút trên gà giảm nhẹ: LD50 giảm từ 10-4,97 xuống 10-4,77 (1,6 lần), trong khi đó thời gian gây chết gà trung bình cũng tăng lên từ 41,40 giờ lên 47,47 giờ (1,15 lần). Kết quả này cho biết, tiếp ñời vi rút cúm gia cầm chủng A/Duck/VNBN/06/12 làm tăng khả năng nhân lên của vi rút trên phôi trứng gà nhưng có khuynh hướng làm giảm độc lực trên vật chủ. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 59