10 A/Duck/VNBN/06/12 Vịt Bắc Ninh 24/02/
3.4.2.Tính ổn ñị nh ELD50 và LD50 của virút A/Duck/VNBN/06/
Với mục ñích sử dụng trong thực tiễn như một chủng vi rút chuẩn cho các thí nghiệm thử thách cường ñộc, việc ñánh giá tính ổn ñịnh về ñộc lực của vi rút là rất quan trọng. Trong thí nghiệm này chúng tôi tiến hành tiếp ñời vi rút 5 lần qua phôi trứng gà, sau ñó lập lại thí nghiệm chuẩn ñộ ñể xác ñịnh ELD50 trên phôi trứng và LD50 trên gà thí nghiệm. Kết quả lần lượt ñược trình bày tại các bảng 3.9, bảng 3.10 và biểu ñồ minh họa tại hình 3.5 và 3.6 dưới ñây:
Bảng 3.9. ELD50 của vi rút A/Duck/VNBN/06/12 sau tiếp ñời
ELD50 (log) MDT (giờ)
Lần TN Tiếp ñời lần 2 Tiếp ñời lần 6 Tiếp ñời lần 2 Tiếp ñời lần 6
1 6,30 8,50 27,00 34,80
2 6,10 8,70 28,20 32,40
3 6,30 8,90 26,40 33,60
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 56
Hình 3.5. ELD50 và MDT của vi rút sau tiếp ñời trên phôi trứng Nhận xét : Kết quả so sánh ELD50 và MDT của vi rút A/Duck/VNBN/ 06/12 sau khi tiếp ñời 5 lần trên phôi trứng (tiếp ñời lần 2 : pass#2 và lần 6 : pass#6) cho thấy :
(1) Vi rút A/Duck/VNBN/06/12 tăng tính thích ứng trên phôi trứng sau 5 lần tiếp ñời với liều gây nhiễm và gây chết phôi trứng là 8,70 ± 0,20 ELD50 (lần tiếp ñời thứ 6) so với 6,23 ± 0,12 ở lần tiếp ñời thứ 2 (tăng 251 lần).
(2) Song song với hiệu giá vi rút tăng lên, thời gian gây chết phôi cũng tăng từ 27,20 ± 0,92 giờ (ñời 2) lên 33,60 ± 1,20 giờ (ñời 6), tăng 1,2 lần.
Tuy thời gian gây chết phôi tăng 1,2 lần (dấu hiệu giảm ñộc lực) sau khi tiếp ñời trên phôi 5 lần, thời gian gây chết vẫn rất ngắn và vi rút A/Duck/VNBN/06/12 có thể coi là vẫn ở mức ñộc lực rất caọ Ngược lại ở ñộ pha loãng vi rút rất cao, liều rất thấp, vi rút A/Duck/VNBN/06/12 ñã có khả năng gây chết phôi chúng tỏ ñộc lực của vi rút tăng ñối với phôi trứng. Bất luận trong trường hợp nào có thể thấy tính thích nghi của vi rút trên phôi trứng tăng rõ rệt sau 5 lần tiếp ñờị
Trong thực tế, ñể bảo quản và lưu truyền vi rút sử dụng trong thử thách cường ñộc, tiếp ñời vi rút trên phôi trứng là công việc thường quỵ Tuy nhiên, ñể ñánh giá ñộ ổn ñịnh của ñộc lực vi rút A/Duck/VNBN/06/12
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 57 trên gà cảm thụ, chúng tôi lập lại thí nghiệm xác ñịnh LD50 của nước trứng gây nhiễm vi rút ñời thứ 6 và so sánh với kết quả của ñời thứ haị Kết quả của 3 lần thí nghiệm ñược trình bày ở bảng 3.10 và minh họa ở hình 3.6.
Bảng 3.10. LD50 của chủng vi rút A/Duck/VNBN/06/12 sau tiếp ñời LD50 (log) MDT (giờ) Lần TN Tiếp ñời lần 2 Tiếp ñời lần 6 Tiếp ñời lần 2 Tiếp ñời lần 6 1 5,10 4,90 42,20 46,00 2 4,70 4,70 41,20 49,40 3 5,10 4,70 40,80 47,00 Trung bình 4,97± 0,23 4,77 ± 0,12 41,40 ± 0,72 47,47 ± 75
Hình 3.6. LD50 và MDT trên gà của vi rút sau tiếp ñời trên phôi trứng Nhận xét: Kết quả so sánh LD50 và MDT trên gà cảm thụ của vi rút A/Duck/VNBN/06/12 sau khi tiếp ñời 5 lần trên phôi trứng (tiếp ñời lần 2 : pass#2 và lần 6: pass#6) cho thấy :
(1) Vi rút A/Duck/VNBN/06/12 giảm nhẹ ñộc lực trên gà từ 200 µl tại ñộ pha loãng 10-4,97± 0,23 ñến ñộ pha loãng 10-4,77 ± 0,12 (cần ñậm ñộ tăng 1,6 lần). Kết quả này chứng tỏ ñộc lực của vi rút A/Duck/VNBN/06/12 khá ổn ñịnh trên gà sau 5 lần tiếp ñờị
(2) Thời gian gây chết gà trung bình ñồng thời cũng tăng từ 41,40 ± 0,72 giờ (ñời thứ 2) lên 47,47 ± 75 giờ (ñời thứ 6) (tăng 1,15 lần). Tuy nhiên, sự tăng
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 58 nhẹ của MDT và vi rút vẫn gây chết gà trong thời gian dưới 2 ngày chứng tỏ vi rút vẫn ở mức ñộc lực rất cao và ổn ñịnh.
Hình 3.7 trình bày tóm tắt dưới dạng biểu ñồ so sánh kết quả ở bảng 3.9 và 3.10, sự biến ñộng về liều gây chết 50% phôi trứng thí nghiệm và liều gây chết 50% ñộng vật thí nghiệm sau 5 lần tiếp ñời vi rút trên phôi trứng gà.
Hình 3.7. Biến ñộng ELD50, LD50 và MDT của vi rút sau tiếp ñời trên phôi trứng gà
Nhận xét:
Sau 5 lần tiếp ñời trên phôi trứng gà, ELD50 của chủng A/Duck/VNBN/ 06/12 tăng từ 10-6,3 lên 10-8,7 (251 lần), trong khi thời gian gây chết trứng cũng tăng. Ngược lại, sau khi tiếp ñời trên trứng 5 lần, ñộc lực của vi rút trên gà giảm nhẹ: LD50 giảm từ 10-4,97 xuống 10-4,77 (1,6 lần), trong khi ñó thời gian gây chết gà trung bình cũng tăng lên từ 41,40 giờ lên 47,47 giờ (1,15 lần). Kết quả này cho biết, tiếp ñời vi rút cúm gia cầm chủng A/Duck/VNBN/06/12 làm tăng khả năng nhân lên của vi rút trên phôi trứng gà nhưng có khuynh hướng làm giảm ñộc lực trên vật chủ.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 59