C X chuẩn thêm vào
Kiểm nghiệm thuốc bằng ph−ơng pháp sinh học
4.3.2.3. Các ph−ơng pháp tiệt trùng
Tiệt trùng là một quá trình làm cho một vật hoặc một sản phẩm khơng cịn vi sinh vật sống đ−ợc. Tiệt trùng đ−ợc thực hiện bằng ph−ơng pháp vật lý, hoá học.
Chọn ph−ơng pháp tiệt trùng phụ thuộc vào tính chất lý hố và độ bền vững của mơi tr−ờng.
•
•
•
Tiệt trùng bằng nhiệt khô:
Ph−ơng pháp này dùng để tiệt trùng các dụng cụ thí nghiệm bền với nhiệt nh− bơng, băng, vải, gạc, dụng cụ thuỷ tinh…
Điều kiện tiệt trùng là: 180oC/ 30 phút hoặc 170oC/ 1 giờ, hoặc 160oC/2 giờ. Các dụng cụ thuỷ tinh để đóng mơi tr−ờng phải đ−ợc tiệt trùng khô tr−ớc khi dùng.
Tiệt trùng bằng hơi n−ớc:
Ph−ơng pháp dùng nhiệt −ớt th−ờng đ−ợc dùng để tiệt trùng môi tr−ờng nuôi cấy và các dụng cụ phẫu thuật.
− Môi tr−ờng th−ờng đ−ợc tiệt trùng bằng nồi hấp ở 121oC/ 15 phút.
Các môi tr−ờng dễ bị hỏng bởi nhiệt nh− môi tr−ờng có đ−ờng, sữa, bia, máu, albumin… cần tiệt trùng ở nhiệt độ thấp bằng các ph−ơng pháp sau: − Tiệt trùng gián đoạn (ph−ơng pháp Tyndall):
Môi tr−ờng đ−ợc hấp 3 - 4 lần ở nhiệt độ không quá 100oC trong 30 - 40 phút, cách nhau 24 giờ. Giữa hai lần hấp cho môi tr−ờng vào ủ ở 28 - 32oC/ 24 giờ cho bao tử nảy mầm. Các bào tử sống sót nảy mầm sẽ bị tiêu diệt ở lần hấp tiếp theo.
− Khử trùng nhiệt độ thấp (ph−ơng pháp Pasteur):
Đun cách thuỷ môi tr−ờng 60oC/ 30 phút, hoặc 73oC/ 15 phút sau đó làm lạnh đột ngột d−ới 10oC. Ph−ơng pháp này không diệt đ−ợc bào tử.
Ph−ơng pháp lọc:
Ph−ơng pháp lọc đ−ợc dùng để tiệt trùng các chất dễ bị phá huỷ bởi nhiệt. Cho chất lỏng chảy qua màng lọc có kích th−ớc lỗ lọc ≤ 0,22àm. Phần
chảy qua phễu đ−ợc đựng trong các dụng cụ vô trùng. Thiết bị lọc và màng lọc phải đ−ợc tiệt trùng tr−ớc khi dùng.
•
•
Ph−ơng pháp dùng tia bức xạ:
Tia tử ngoại (UV) đ−ợc dùng nhiều nhất để tiệt trùng các buồng pha chế, tủ cấy vi sinh vật.
Đèn tử ngoại phải đ−ợc chiếu trực tiếp, thẳng góc với nơi làm thí nghiệm và liều l−ợng chiếu phải đủ với diện tích buồng.
Tia UV ít có tác dụng diệt nấm, vì vậy khi khử trùng buồng pha chế cần phối hợp thêm ph−ơng pháp dùng hoá chất để khử nấm.