- ELIS A, PCR
2. Candida (nấm men) 1 Đặc tính hình thá
2.1 Đặc tính hình thái
Candida, một loại nấm dạng men điển hình. Hầu hết các nấm thuộc chi này chưa được biết có chuyển hình hoàn toàn (teleomorph, tức là kỳ sinh sản hữu tính) hay khơng. (kỳ vơ tính của nấm được gọi là chuyển hình khơng hồn tồn, anamorph, cịn kỳ sinh sản hữu tính gọi là chuyển hình hồn tồn, teleomorph, và trong trường hợp ở một nấm diễn ra cả hai dạng chuyển hình thì gọi là nấm chuyển hình hoàn toàn [holomorphous fungus] thường được phân lớp dựa theo dạng bào tử hữu tính, cịn nấm chỉ có kỳ vơ tính thì gọi là nấm bất toàn [imperfect fungus] nay đổi thành Nấm bào tử vơ tính ngun phân, nhóm này hầu như gồm các nấm có chuyển hình hồn tồn nhưng chưa được phát hiện. Đôi khi, do hai kỳ của một nấm được phát hiện và mô tả riêng rẽ mà nhiều nấm có hai tên khác nhau tùy thuộc vào kỳ sinh sản). Nấm Candida phát triển nhờ nẩy chồi từ nhiều điểm (nẩy chồi đa phát), hình thành khuẩn ty giả, đơi khi cũng thấy hình thành khuẩn ty thực. Thơng thường, khuẩn lạc có dạng kem màu trắng, có mùi lên men đặc hữu. Bào tử có hình cầu, hình trứng, hình ellips,... Các nấm thuộc chi này đều khơng có khả năng sử dụng nitrate,
67
các phản ứng urease, sản sinh sắc tố carotenoid, sản sinh các chất dạng tinh bột đều âm tính.
2.2 Đặc tính ni cấy
Có thể ni cấy trên các môi trường Sabourraud và bột ngơ của lồi nấm C. tropicalis làm điển hình
Mơi trường Sabourraud được chế bằng cách hòa 10 g peptone, 40 glucose, 20 g agar vào 1 lít nước cất, đun cách thủy cho tan, khơng cần chỉnh pH vì thơng thường sau khử trùng pH sẽ vào khoảng 5,4 - 6,2, hấp cao áp ở 121 °C trong vòng 15 phút để khử trùng. Để ức chế vi khuẩn có thể thêm 0,5 g cycloheximide (actidione) và 0,05 g chloramphenicol khi nhiệt độ của thạch nguội đến 50 °C, chú ý rằng có trường hợp các chất này ức chế nấm gây bệnh. Đổ đĩa Petri.
Môi trường thạch bột ngô (corn-meal agar) được chế bằng cách trộn đều 40 g bột ngô xay mịn với 1 lít nước, đun nóng ở 65 °C tạo dịch hồ, lọc qua gạc, thêm 2% agar, đun cho tan đều, rót ống, hấp cao áp tiệt trùng 15 phút ở 121 °C. đây là môi trường tốt kích thích sự hình thành bào tử của nấm bạch biến. Nếu thêm 0,3% Tween 80 thì được mơi trường kích thích sự hình thành bào tử màng dày ở Candida albicans.
2.3 Tính gây bệnh
Loài C. albicans
Nấm này được phân lập từ các loại ổ bệnh khác nhau như mũi, khoang miệng, ống tiêu hóa, cơ quan sinh dục - tiết niệu,... của các loài động vật khác nhau. Đặc biệt, ở các lồi chim như gà,... nấm thường hình thành những ổ bệnh ở phần trên của ống tiêu hóa. Bệnh trạng phần nhiều thường mãn tính. Vi sinh vật này còn được biết như tác nhân gây bệnh viêm vú ở bị sữa.
Lồi C. tropicalis
Nấm men này là một trong những nguyên nhân gây bệnh viêm buồng vú và sẩy thai ở bò cái. Bên cạnh đó các nấm men như C. parapsilopsis và C. krusei cũng là ngun nhân các bệnh đó ở bị cái.
2.4 Chẩn đoán
2.4.1 Phương pháp chẩn đoán
Soi tươi hoặc nhuộm (theo phương pháp nhuộm gram hay nhuộm PAS) Nuôi cấy trên môi trường thạch bột ngô hoặc thạch khoai tây.
68
2.4.2 Thực hiện quy trình
Phương pháp nhuộm PAS (periodic acid - Schiff's stain) thường dùng để nhuộm polysaccharide như glycogen, mucin, acid hyaluronic, reticulin, fibrin, hyalin,... Phương pháp này thường dùng để nhuộm lát cắt tổ chức đã loại parafin. Sau khi xử lý tiêu bản bằng dung dịch 0,5% acid periodic (H 5IO6 ) thì nhuộm lại bằng dung dịch leucofuchsine của Schiff (chế bằng cách hòa 1 g basic fuchsine vào 100 ml nước cất sôi, làm nguội đến 50 °C và lọc, thêm 2 g metabisulfate natri và 20ml HCl 1 N, nút kín và giữ ở chỗ tối qua đêm, thêm 300 mg bột than hoạt tính, lắc đều ít phút rồi lọc. Dung dịch phải trong suốt không màu hoặc vàng nhạt), rồi nhuộm tương phản (nhuộm nhân) bằng dung dịch hemotoxylin. Nấm trong tổ chức có màu đỏ đến màu tím, nhân có màu xanh tím.
2.5 Phòng trị
2.5.1 Biện pháp phòng
Vệ sinh và khử trùng chuồng trại, Thường xuyên theo dõi và điều trị những con vật có b nấmiểu hiện hoặc triệu chứng nghi ngờ bệnh, hạn chế dùng các loại thuốc ức chế miễn dịch như corticoid
2.5.2 Biện pháp trị nấm
Candida ở niêm mạc miệng, lưỡi thì rửa, bằng dung dịch natricácbonat hoặc chấm dung dịch glycerinborat 3 % và bằng Daktarilgel.
Candida âm đạo rửa bằng dung dịch nabicácbonat, đặt thuốc chống nấm như : nystatin, polygynax, tergynan, clotriamazole/ Miconazole ( 100 mg /viên)/ đêm/7 ngày, Clotriamazole (500mg/ viên) / 1 lần duy nhất, Econazole (150 mg/ viên)/ đêm /3 ngày. , kết hợp uống thuốc chống nấm như nizoral, sporal hoặc fluconazol (150 mg/viên ) uống liều duy nhất, Itraconazol (100 mg/viên)/2 viên/ngày/ 3 - 5 ngày.
Với candida ở da có thể bôi thuốc màu như gientian 2%, milian, castellani, fungizon hoặc kem nystatin, nizoral, canesten. Nếu tổn thương rộng thì ngồi bơi tại chỗ phải uống thuốc chống nấm thuộc nhóm imidazol như ketoconazol, itraconazol, fluconazol.
Candida hệ thống hay u hạt do candida có thể truyền tĩnh mạch chậm amphotericin B 0,25 - 1,0 mg/ kg thể trọng/ ngày hoặc uống thuốc chống nấm nhóm polyen hay nhóm imidazol.
69
Trong điều trị nấm candida cần tăng cường uống vitamin B các loại, cần giảm lượng đường trong chế độ ăn, khi bị bệnh
70