II. CÁC PHẢN ỨNG HUYẾT THANH HỌC THƯỜNG DÙNG TRONG CHẨN ĐOÁN BỆNH
4. Phản ứng kết hợp bổ thể
Phản ứng kết hợp bổ thể thực hiện được nhờ 2 hệ thống: hệ thống dung khuẩn và hệ thống dung huyết với sự tham gia của bổ thể, bởi vì hiện tượng dung khuẩn khơng thể quan sát được bằng mắt thường, do đó phải dùng hệ thống dung huyết để đánh giá kết quả.
Cho hệ thống dung khuẩn (hệ thống 1) vào ống nghiệm trước, gồm có kháng nguyên đã biết và huyết thanh con vật cần chẩn đoán đã đun cách thủylên 56°Ctrong 30 phút để diệt bổ thể, sau đó cho tiếp vào ống nghiệm một lượng bổ thể đã được chuẩn độ vủa đủ lượng cần thiết
(thường dùng huyết thanh tươi chuột lang) ủ ở 37°C trong vịng 20 - 30 phút.
Sau đó cho tiếp vào ống nghiệm hệ thống 2 (hệ thống dung huyết)gồm có hồng cầu và huyết thanh miễn dịch chống hồng cầu cừu đã được đun 56°C trong 30 phút để diệt bổ thể, ủ tiếp cả 2 hệ thống ở 37°C trong 20-30 phút rồi đọc kết quả. Nếu ở hệ thống 1 (hệ thống dung khuẩn), kháng nguyên và kháng thể tương ứng, thì sự kết hợp kháng nguyên kháng thể sẽ chiếm lấy bổ thể, khơng cịn bổ thể cho hệ thống 2, nên khơng có sự dung huyết, hồng cầu đóng thành cục tròn đỏ dưới đáy ống nghiệm. Phản ứng dương tính, tức con vật có kháng thể tương ứng với kháng nguyên.
Nếu ở hệ thống 1 khơng có sự kết hợp kháng nguyên kháng thể do trong huyết thanh khơng có kháng thể tương ứng, thì bổ thể sẽ khơng được dùng cho hệ thống 1, bổ thể cịn sẽ tham gia vào hệ thống 2 làm tan hồng cầu, tạo nên huyễn dịch có màu đỏ. Phản ứng âm tính, tức là trong huyết thanh khơng có kháng thể tương ứng.