Tác dụng kiểu estrogen được xác định trên 3 chỉ tiêu ở 3 đối tượng chuột: (1) sự xuất hiện giai đoạn động dục đầu tiên (ở chuột non) hoặc tỉ lệ động dục dương tính (ở chuột trưởng thành bình thường và chuột giảm năng sinh dục), (2) trọng lượng tử cung-buồng trứng (ở chuột non, trưởng thành bình thường) hoặc tử cung (ở chuột giảm năng sinh dục) và (3) nồng độ estradiol trong huyết tương (ở chuột giảm năng sinh dục).
Mỗi đối tượng chuột được chia thành các nhóm: nhóm chứng (lô uống nước cất và lô uống olive), nhóm đối chiếu (các lô uống Progynova®, diosgenin và lô tiêm dưới da genistein) và nhóm thử nghiệm (uống các cao thử nghiệm).
Chuột non: chuột được cho uống các liều thử nghiệm trong 15 ngày. Khảo sát sự mở âm đạo ở chuột mỗi ngày từ ngày 1 cho đến khi âm đạo mở (chu kỳ động dục đầu tiên), ghi nhận ngày quan sát được. So sánh thời gian trung bình xuất hiện
sự mở âm đạo giữa các lô thử nghiệm. 24 giờ sau lần cho uống cuối cùng, tiến hành giết chuột, mổ lấy tử cung-buồng trứng và cân lấy trọng lượng tươi (wet weight) tính bằng mg% theo phương pháp của Astwood. So sánh trọng lượng tử cung-buồng trứng giữa các lô thử nghiệm.
Chuột trưởng thành bình thường: chuột cũng được cho uống trong 15 ngày. Tiến hành lấy phết âm đạo mỗi ngày từ ngày 1 đến ngày 14 để khảo sát chu kỳ động dục theo phương pháp Allen-Doisy (1923). Từ đó tính tỉ lệ % động dục và so sánh tỉ lệ giữa các lô với nhau. 24 giờ sau lần cho uống cuối cùng tiến hành mổ chuột lấy tử cung-buồng trứng và đem cân tương tự như ở chuột non.
Chuột giảm năng sinh dục: chuột được cho uống trong 15 ngày. Từ ngày 7 đến ngày 14 tiến hành lấy phết âm đạo để khảo sát chu kỳ động dục. 24 giờ sau lần cho uống cuối cùng, tiến hành lấy máu định lượng 17β-estradiol bằng phương pháp ELISA cạnh tranh. Sau đó tiến hành mổ chuột và cân trọng lượng tử cung.