- Khơng cân đong, pha thuốc, rửa bình bơm gần nơi giếng nước, ao hồ hoặc
9. XÁC ĐỊNH HIỆU QUẢ CỦA THUỐC TRỪ BỆNH Mục đích
Mục đích
SV phải nhận dạng được sự phát triển của vi khuẩn và nấm gây bệnh, đồng thời sát được các vịng vơ khuẩn để so sánh hiệu quả của các loại thuốc.
9.1. Mục đích - yêu cầu
- Giúp sinh viên biết cách thử nghiệm hiệu quả của thuốc trừ bệnh - Biết so sánh hiệu quả của một số loại thuốc trừ bệnh
- Yêu cầu sinh viên phải nắm các thao tác kỹ thuật, nguyên tắc và nồng độ pha chế thuốc trừ bệnh.
9.2. Nguyên vật liệu, dụng cụ thực hành 9.2.1. Dụng cụ 9.2.1. Dụng cụ
- Giấy thấm/ Giấy lọc
- Que cấy vịng, que trang, que tăm bơng - Thước đo
- Nồi hấp, đèn cồn - 8 đĩa petri
- Chai thủy tinh có nắp 0,5 lít chịu nhiệt, đủa thủy tinh
9.2.2. Nguyên vật liệu, hóa chất
- Thuốc trừ bệnh : Bordeaux, Fuji one, Anvil, Zineb, Aliette, Exin 4,5HP... - Môi trường nuôi cấy nấm và vi khuẩn: Môi trường PDA (khoai tây 200g, aga 200g, đường 20g và nước cất 1lít), TSA (mơi trường tổng hợp)
- Sulphat đồng (phèn xanh), vôi bột - Cồn 90°, nước cất
9.3. Phương pháp thực hiện 9.3.1. Pha chế môi trường 9.3.1. Pha chế môi trường
- Pha chế môi trường khoai tây agar để cấy nấm bệnh; đổ ra 4 đĩa petri, để nguội.
- Pha chế môi trường tổng hợp TSA để nuôi cấy vi khuẩn gây bệnh: đổ ra 4 đĩa petri, để nguội.
9.3.2. Cấy mẫu nấm gây hại trên lúa hoặc vi khuẩn gây bệnh trên cây rau
- Cấy mẫu cây bệnh do nấm trên đĩa môi trường khoai tây agar rồi đem ủ ở 34°C trong 24 giờ. Sau đó phân lập để có dịng thuần và dùng dịng thuần này cấy lên đĩa petri mới ở 34°C trong 24 giờ.
- Cấy mẫu cây bệnh do vi khuẩn trên môi trường TSA rồi đem ủ ở ở 34°C trong 24 giờ.
- Sau khi đã có mẫu bệnh sẽ dùng que trang/que tăm bơng lấy dòng thuần của vị khuẩn hoặc nấm cấy lên đĩa petri khác, cách cấy như sau:
Hình 2: Cách cấy mẫu vi sinh lên đĩa petri 9.3.3. Pha chế một số loại thuốc trừ bệnh
- Pha chế mỗi loại thuốc trừ bệnh 1ml thuốc riêng biệt với tỉ lệ nước theo nồng độ khuyến cáo.
- Cắt đĩa giấy lọc hình trịn, đường kính khoảng 3mm, mỗi loại thuốc trừ bệnh sử dụng 3 đĩa giấy ( mẫu nấm) 3 đĩa giấy (mẫu vi khuẩn) rồi nhúng vào dung dịch thuốc trừ bệnh.
- Dán các đĩa giấy nhúng thuốc trên bề mặt các đĩa nấm và vi khuẩn đã cấy ở trên, sau đó đem ủ tất cả những đĩa cấy trong 24 giờ.
- Quan sát và đo đường kính vịng vơ khuẩn.
- Kết luận: Đường kính vịng vơ khuẩn càng lớn, thuốc càng có hiệu quả cao đối
với nấm hoặc vi khuẩn gây bệnh.
Thực hành:
- Nuôi cấy nấm bệnh, vi khuẩn gây bệnh
- Dùng một số loại thuốc trừ nấm bệnh và vi khuẩn gây bệnh, pha đúng theo nồng độ khuyến cáo.
- Sử dụng đĩa giấy thấm nhúng vào dung dịch thuốc trừ bệnh, dán lên bề mặt môi trường nuôi cấy nấm
- Quan sát vịng vơ khuẩn
Câu hỏi ôn tập
Câu 1. Tại sao mẫu nấm bệnh phải cấy lên môi trường khoai tây agar (PDA), cấy mẫu nấm bệnh lên mơi trường TSA được khơng vì sao?
Câu 2. Hiệu quả của từng loại là như thế nào?