Vi khu育n V壱t li羽u vi gói A逢運ng kính
h衣t 永ng d映ng Lactobacillus bulgaricus Streptococcus diacetylactis Lactococcus cremoris Lactobacillus plantarum Lactobacillus acidophillus Alginate 1,875 % (CaCl2 1,5 M) Alginate 1,875 % (CaCl2 1,5 M) Alginate 2 % + chitosan (CaCl2 0,05 M) Alginate 2 % (CaCl2 0,1 M) Alginate 0,6 % + tinh b瓜t (CaCl2 0,3 M) 2,5 mm 2,6 mm 2 mm 2 mm 5 mm S英a chua Phô mai S違n xu医t sinh kh嘘i S違n xu医t sinh kh嘘i S違n xu医t sinh kh嘘i [24]
1.4. Các nghiên c泳w"vtqpi"p逢噂e"x "piq k"p逢噂c 1.4.1. Các nghiên c泳w"piq k"p逢噂c 1.4.1. Các nghiên c泳w"piq k"p逢噂c
P<o"4226."L0"U0"Ngg và c瓜ng s詠 8«"pijk‒p"e泳u 違pj"j逢荏ng c栄a các vi h衣t cnikpcvg"8逢嬰c bao ph栄 v噂i ba lo衣i chitosan có tr丑pi"n逢嬰ng phân t穎 mjƒe"pjcw"8嘘i v噂i s詠 t欝n t衣i c栄a Lactobacillus bulgaricus KFRI 673 trong d鵜ch d衣 dày nhân t衣o (SGJ) và d鵜ej"8逢運ng ru瓜t nhân t衣o (SIJ) và s詠 鰻p"8鵜nh c栄a chúng trong quá trình n逢w"vt英 荏 6"x "44"̇E0"Swƒ"vt·pj"xk"i„k"8逢嬰c chu育n b鵜 b茨ng cách phun h厩n h嬰p natri alginate và d鵜ch nuôi c医y t院 bào vào dung d鵜ch calci clorua s穎 d映ng thi院t b鵜 phun khí. Khi L. bulgaricus KFRI 673 ti院p xúc v噂k"o»k"vt逢運ng SGJ pH 2,0 trong 60 phút, không có vi sinh v壱t nào s嘘pi"u„v0"Vtƒk"pi逢嬰c v噂i k院t qu違 này, các phân tích vi sinh 8«"ej雨 ra r茨ng vi gói trong các vi h衣t alginate giúp c違i thi羽n s詠 s嘘ng còn c栄a ch栄ng L. bulgaricus KFRI 673 nh衣y c違m v噂i acid trong SGJ và vi羽c bao ph栄 v噂i chitosan có tr丑pi"n逢嬰ng phân t穎 l噂n mang l衣i kh違p<pi"u嘘ng cao nh医t. Nghiên c泳u s詠鰻p"8鵜nh
vtqpi"swƒ"vt·pj"n逢w"vt英 c栄a các t院 bào t詠 fq"x "8逢嬰c vi gói, các th穎 nghi羽m in vitro 8逢嬰c th詠c hi羽n t衣i 4 và 22 °C trong su嘘t kho違ng th運i gian 4 tu亥n. C違 hai t院 bào t詠 fq"x "8逢嬰c vi gói cho th医y s詠鰻p"8鵜pj"v逢挨pi"v詠 nhau 荏 4 °C. Tuy nhiên, s詠鰻p"8鵜nh c栄a Lactobacillus t衣k"44"̇E"8逢嬰c c違i thi羽p"8áng k吋 khi vi gói b茨ng vi h衣t alginate ph栄 chitosan có tr丑pi"n逢嬰ng phân t穎 l噂n. K院t lu壱n chung, vi gói vi khu育n acid lactic v噂i alginate và ph栄 chitosan là m瓜t cách hi羽u qu違 8吋 gi英 cho các t院 bào vi khu育n s嘘ng sót cho 8院n k院t tràng và duy trì s詠 t欝n t衣i c栄a chúng trong quá trình b違o qu違n l衣nh [25].
P<o"4227."R0"Ecrgnc"x "e瓜ng s詠8«"vk院n hành kh違o sát s詠 t欝n t衣i c栄a các vi khu育n probiotic bao g欝m Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus và Bifidobacterium spp. trong s英a chua và s英a chua l衣nh 8»pi" ucw"quá trình ch院 bi院n và b違o qu違n. Hi羽u qu違 c栄a vi羽c vi gói vi khu育n probiotic, e pi"pj逢"vi羽c b鰻 sung thêm các ch医t b違o v羽 l衣nh và prebiotic 8吋 c違i thi羽n kh違 p<pi"v欝n t衣i c栄a chúng e pi"8逢嬰c nghiên c泳u. K院t qu違 là k悦 thu壱t vi gói s穎 d映ng alginate giúp c違i thi羽n kh違 p<pi"v欝n t衣i c栄a các sinh v壱t probiotic trong s英a chua l衣pj"8»pi"ucw"vj運i gian b違o qu違n là 6 tháng 荏 4 và 21 oC [26].
P<o"4228."M0"Mckncucrcvj{"8«"pijk‒p"e泳u kh違 p<pi"v欝n t衣i và nh英ng 違nh j逢荏ng c栄a vi khu育n probiotic (bao g欝m Lactobacillus acidophilus và Bifidobacterium lactis) f逢噂i d衣ng t詠 do và 8逢嬰c vi gói trong calci alginate-tinh b瓜t 8嘘i v噂i pH, s詠 s違n xu医t các polysaccharide ngo衣i bào và các thu瓜c tính c違m giác c栄a s英a chua trong th運i gian b違o qu違n 7 tu亥n. Khi thêm vào vi khu育n probiotic (c違 d衣ng t詠 do ho員c vi gói) s胤 làm gi違m s詠ikc"v<pi"acid trong s英a chua trong quá trình b違o qu違n. Quá trình acid hóa x違y ra trong s英a chua v噂i các vi khu育n probiotic bao gói là ch壱o"j挨p so v噂i các vi khu育n probiotic t詠 do. Các k院t qu違 cho th医y có s詠 gia v<pi"mj違p<pi"s嘘ng sót c栄a các vi khu育n nh運 t院 bào 8逢嬰c b違o v羽 b茨pi"rj逢挨pi"rjƒr" vi gói trong su嘘t quá trình b違o qu違n. S詠 b鰻 sung các ch栄ng probiotic trong 8k隠u ki羽n t詠 do ho員c vi gói không gây 違pj"j逢荏ng 8ƒpi"m吋 8院n eƒe"8員e"8k吋m c違m quan t鰻ng th吋 c栄a s英a chua (ngo衣i tr瑛 có s詠 khác bi羽v"vtqpi"8瓜 m鵜n) [27].
P<o"4229."Zkcq"[cp"Nk"x "eƒe"e瓜ng s詠 8«"xk"i„k"xk"mjw育n probiotic b茨ng alginate-gelatin s穎 d映pi"rj逢挨pi"rjƒr"fir"8́p"x "ucw"8„"vk院n hành ki吋o"vtc"eƒe"8員c tính v隠 m ej"vj逢噂c, tính b隠n trong các o»k"vt逢運ng khác nhau và kh違 p<pi"rj„pi" thích vi khu育n t瑛 các vi h衣t. K院t qu違 vjw"8逢嬰c cho th医{"rj逢挨pi"rjƒr"p {"ik¿r"làm v<pi"u嘘n逢嬰ng t院 bào L. casei ATCC 393 là 107 CFU/g trong 8k隠u ki羽n khô và có th吋 8逢嬰c 泳ng d映ng trong các th詠c ph育m ch泳e"p<pi [28].
P<o"2007, Annan và các c瓜ng s詠 e pi" 8« ti院n hành vi gói vi khu育n Bifidobacterium adolescentis 15703T b茨ng alginate k院t h嬰p ph栄 gelatin nh茨m c違i thi羽n s詠 t欝n t衣i c栄a vi khu育n probiotic trong các 8k隠u ki羽n c詠e"8qcp"]4;].
P<o"422:."Y0M0"Fkpi"x "P0R0"Ujcj"8«"vk院n hành nghiên c泳u hi羽u qu違 c栄a các v壱t li羽w"xk"i„k"8嘘i v噂i s詠 鰻p"8鵜nh vi khu育n probiotic. Các ch栄ng kh違o sát bao g欝m: Lactobacillus rhamnosus, Bifidobacterium longum, L. salivarius, L. plantarum, L. acidophilus, L. paracasei, B. lactis BI-04, B. lactis Bi-07, HOWARU L. rhamnosus và HOWARU B. bifidum b茨ng các v壱t li羽u vi gói: alginate, guar gum, xanthan gum, locust bean gum và carrageenan gum. K院t qu違 là alginate, xanthan gum và carrageenan gum có kh違 p<pi"d違o v羽 t嘘t vi khu育n probiotic khi x穎 lý vtqpi"o»k"vt逢運ng acid và mu嘘i m壱t [30].
P<o"4233."O0C0M"¥cplcpk"x "e瓜ng s詠 8«"xk"i„k"Lactobacillus casei ATCC 39392 trong calci alginate Î tinh b瓜t b茨pi" rj逢挨pi" rjƒr pj " v逢挨pi hóa. Các vi khu育n probiotic ucw"8„"8逢嬰c cho vào bánh kem f逢噂i d衣ng t詠 do và vi gói. S詠 t欝n t衣i c栄a vi khu育n trong c違 hai d衣ng và s詠 vjc{"8鰻i pH trong dƒpj"mgo"8逢嬰c theo dõi trong su嘘t th運i gian b違o qu違n là 4 tu亥n 荏 4 và 25 °C. Các k院t qu違 cho th医y vi nang calci alginate Î tinh b瓜t giúp nâng cao kh違p<pi s嘘ng c栄a vi khu育n probiotic trong s違n ph育m. Khi so sánh gi英a L. casei vi gói và t詠 do thì k院t qu違 là s詠vjc{"8鰻i pH c栄a s違n ph育m x違y ra ch壱o"j挨p"荏 d衣ng vi gói và t益 l羽 s嘘ng sót c栄a L. casei vi gói e pi" ecq"j挨p"8ƒpi"m吋 so v噂i t詠 do. Ngoài ra, vi羽c b鰻 sung probiotic 荏 tr衣ng thái vi gói ho員c t詠 do không gây 違pj"j逢荏ng 8ƒpi"m吋 8院n eƒe"8員e"8k吋m c違m quan t鰻ng th吋 c栄a bánh kem trong th運k"ikcp"n逢w"vt英荏 4 °C [31].
P<o" 4233."Tanja Petreska Ivanovska và c瓜ng s詠 8«"nghiên c泳u vi gói Lactobacillus casei b茨ng cách s穎 d映pi"rj逢挨pi"rjƒr"s医y phun k院t h嬰p v噂i ph泳c 8c" phân c栄a alginate, fructooligosaccharide và chitosan; t衣o liên k院t ngang v噂i calci clorua x "ucw"8„ là quá trình 8»pi"mj»0"Ti院n hành kh違o sát t益 l羽 s嘘ng sót và các tính ch医t hóa lý c栄a vi h衣t t衣o ra. Ngoài ra, kh違 p<pi" v欝n t衣i c栄a Lactobacillus casei trong d鵜ch d衣 dày và d鵜ch ru瓜t nhân t衣q"e pi"8逢嬰c nghiên c泳u. K院t qu違 thu nh壱n 8逢嬰c các vi h衣v"ocpi"8k羽p"v ej"f逢挨pi"x噂k"m ej"vj逢噂c trung bình 11,08 ± 1,1 mm và kh違 n<pi"u嘘ng sót cao 10,98 ± 0,11 log cfu/g. Các vi h衣t synbiotic 鰻p"8鵜nh trong su嘘t th運i gian ti院p xúc v噂i d鵜ch d衣 dày và d鵜ch ru瓜t nhân t衣o. Pj逢" x壱y, pj逢挨pi" pháp vi gói synbiotic cho th医y ti隠o"p<pi"d違o v羽 hi羽u qu違 các t院 bào s嘘ng probiotic trong quá trình ti院p xúc v噂k"eƒe"8k隠u ki羽p"o»k"vt逢運ng kh逸c nghi羽t [32].
1.4.2. Các nghiên c泳w"vtqpi"p逢噂c
雲 p逢噂e"vc"e pi"8«"e„"pjk隠u nghiên c泳u v隠 probiotic; tuy nhiên các nghiên c泳u t衣o ch院 ph育m vi khu育n probiotic vi gói 泳ng d映ng trong các s違n ph育m th詠c ph育m jc{"f逢嬰c ph育o"8吋 b鰻 tr嬰 cho h羽 tiêu hóa hi羽n nay v磯p"ej逢c"8逢嬰c công b嘘 nhi隠u. Ak吋n hình l " 8隠 tài Nghiên cとu nâng cao chＸt n⇔ぢng sのc" ejwc" 8ｆu nành bｊng
rj⇔￢pi" rjƒr" xk" i„k" xk" mjwｂn lactic do nhóm tác gi違 Nguy宇p" N逢w" Jk隠n Trang, Nguy宇p"Vj¿{"J逢挨pi"vj詠c hi羽p"8逢嬰c công b嘘 trên t衣p chí Nông nghi羽p và phát tri吋n nông thôn, s嘘 31422:=" x " 8隠 tài CＶi thiうn khＶ p<pi" uぐng cてa vi khuｂn
Dkhkfqdcevgtkwo"dkhkfwo"vtqpi"eƒe"8kｚu kiうn cばe"8qcp"pjｊm phát triあn sＶn phｂm kem Î probiotic 8逢嬰c th詠c hi羽n b荏i nhóm tác gi違 Liêu M悦 A»pi." Piw{宇n Thúy J逢挨pi"công b嘘 trên t衣p chí Nông nghi羽p và phát tri吋n nông thôn, s嘘 6/2012.
V噂k" 8隠 tài Nghiên cとu nâng cao chＸt n⇔ぢng sのc" ejwc" 8ｆu nành bｊng
rj⇔￢pi"rjƒr"xk"i„k"xk"mjwｂn lactic nhóm tác gi違 8«"mj違o sát 違pj"j逢荏ng c栄a nhi羽t 8瓜 và th運i gian trong m厩k"e»pi"8q衣p"8院n hi羽u su医t trích ly protein trong quá trình thu d鵜ch s英a và 泳ng d映ng lên men b茨ng vi gói vi khu育n lactic nh茨m c違i thi羽n ch医t n逢嬰ng s違n ph育m s英a chua 荏 các ch雨 tiêu vi sinh v壱t. Qua th詠c nghi羽m vi gói hai ch栄ng L. bungaricus và S. thermophillus b茨pi" rj逢挨pi" rjƒr" pj嘘t trong natri Î alginate cho th医{"8«"p¤pi"ecq"ej医v"n逢嬰ng s英a chwc"8壱u nành, b違o v羽 vi khu育n lactic
b茨pi"rj逢挨pi"rjƒr"xk"i„k"pj臼 e„"m ej"vj逢噂c 1,2 mm v瑛a có th吋 b違o v羽 vi khu育n, v瑛c"mj»pi"n o"vjc{"8鰻i ch医v"n逢嬰ng c違m quan s違n ph育m [33].
Còn 荏 8隠 tài CＶi thiうn khＶp<pi"uぐng cてa vi khuｂn Bifidobacterium bifidum
vtqpi"eƒe"8iｚu kiうn cばe"8qcp"pjｊm phát triあn sＶn phｂm kem Î probiotic thì nhóm tác gi違 xem xét vai trò c栄a glycerol và s英a g亥y là ph亥n b鰻 sung trong quá trình t衣o vi gói calci Î alginate và xanthan gum v噂i vai trò là l噂p áo bao ph栄 ch院 ph育m calci Î alginate. Bifidobacterium bifidum 8逢嬰c vi gói b茨pi"rj逢挨pi"rjƒr"pj "j„c"vtqpi" calci Î alginate 2 % ho員c calci Î alginate 2 % có ch泳a glycerol 5 %, ch泳a s英a g亥y 2 % và calci Î alginate 8逢嬰c bao ph栄 b荏i xanthan gum 0,15 %. Ch院 ph育o"xk"i„k"8逢嬰c b鰻 uwpi" x q" mgo." vtqpi" 8„" o磯u ch泳a B.bifidum t詠 fq" 8逢嬰c dùng làm m磯w" 8嘘i ch泳ng. Kh違 p<pi" u嘘ng sót c栄a B.bifidum 8逢嬰c ki吋m tra trong su嘘t quá trình b違o qu違p"x "vtqpi"8k隠u ki羽p"o»k"vt逢運ng d衣 dày (SGF) và mu嘘i m壱t (SIF) nhân t衣o sau 120 ngày b違o qu違n. K院t qu違 nghiên c泳u cho th医y, s嘘 n逢嬰ng t院 bào s嘘ng trong các m磯u kem ch泳a ch院 ph育o"xk"i„k"ecq"j挨p"*R">"2.27+"uq"x噂i m磯w"8嘘i ch泳ng. 雲 m磯u 8嘘i ch泳ng, không còn t院 bào nào s嘘ng sót sau 90 phút 栄vtqpi"o»k"vt逢運ng SGF. Bên c衣pj"8„."o磯u kem ch泳a ch院 ph育m vi gói b茨ng calci Î alginate bao ph栄 b荏i xanthan gum cho kh違p<pi"u嘘ng sót c栄a vi khu育n cao nh医t [34].
Tóm l衣i, k悦 thu壱t vi gói có th吋8逢嬰e"zgo"pj逢 m瓜v"rj逢挨pi"rjƒr"v嘘k"逢w8吋 b違o v羽 vi khu育n probiotic trong 8k隠u ki羽p"o»k"vt逢運ng c詠e"8qcp"uq"x噂i các t院 bào t詠 do. V噂i cách th泳c vi gói phù h嬰p, chúng ta v瑛a có th吋 c違i thi羽n kh違p<pi"u嘘ng sót c栄a vi khu育n, v瑛c"mj»pi"n o"vjc{"8鰻i ch医v"n逢嬰ng c栄a s違n ph育m. Vì v壱y, v噂i nh英pi"逢w" 8k吋m n鰻i b壱v"p‒w"vt‒p."ej¿pi"v»k"8«"vj詠c hi羽p"8隠 tài ÐP¤pi"ecq"ejＸv"n⇔ぢng và thぜi gian bＶo quＶn sＶn phｂm sのa lên men bｊpi"rj⇔￢pi"rjƒr"xk"iói vi khuｂpÑ, nh茨m kh鰯pi"8鵜nh hi羽u qu違 c栄c"rj逢挨pi"rjƒr vi gói khi 泳ng d映ng trong lên men s英a chua so v噂i s違n ph育m lên men b荏i t院 bào vi khu育n t詠 do.
EJ姶愛PI"4<"X一T LI烏U VÀ RJ姶愛PI"RJèR"PIJKçP"E永U 2.1. Thi院t b鵜 và d映ng c映 - Bu欝ng c医y vô trùng - T栄栄 vi sinh - Oƒ{"8q"QF - N欝i h医p ti羽t trùng - Máy ly tâm - Máy l逸c - pH k院 - Cân phân tích - T栄 gi英 l衣nh - Kính hi吋p"xk"8k羽n t穎 quét - Buret chu育p"8瓜 - Rkrgvocp"322" n."3222" n - A c"rgvtk - 渦ng nghi羽m - Erlen và becher các lo衣i - Que c医y - Aflp"e欝n - 渦ng tiêmÈ 2.2. Hóa ch医t - O»k"vt逢運ng MRS broth - O»k"vt逢運ng MRS agar - Natri alginate - Gelatin - Dung d鵜ch CaCl2 0,5 M - Tween 80 - Xanthan gum - Glycerol 85 % - Dung d鵜ch NaCl 0,85 % - Dung d鵜ch pepton 0,1 %
- Dung d鵜ej"8羽m phosphate pH = 7,0 - O»k"vt逢運pi"f衣"f {"pj¤p"v衣q"*UIH+ - O»k"vt逢運ng ow嘘k"o壱v"pj¤p"v衣q"*UKH+ - Thu嘘c th穎 phenolphtalein - B瓜 nhu瓜m Gram - C欝n 90oÈ 2.3. V壱t li羽u
Gi嘘ng vi khu育n Lactobacillus casei c栄a Phòng thí nghi羽m vi sinh v壱t, B瓜 môn Công ngh羽 sinh h丑e."vt逢運pi"A衣i h丑c Bách Khoa Tp. HCM cung c医p.
2.4. N瓜k"fwpi"x "rj逢挨pi"rjƒr"pijk‒p"e泳u
406030"U挨"8欝 b嘘 trí thí nghi羽m
J·pj"4030"U挨"8欝 n瓜i dung nghiên c泳u
T嘘k"逢w"j„c Lên men b茨ng vi khu育n vi gói Lên men b茨ng vi khu育n t詠 do Aƒpj"ikƒ"ej医v"n逢嬰ng s違n ph育m Nhân gi嘘ng L. casei (trên
o»k"vt逢運ng MRS) Gi嘘ng vi khu育n Lactobacillus casei
Vi gói vi khu育n L. casei
Ki吋o"vtc"eƒe"8員c tính sinh h丑c c栄a gi嘘ng Nén ép Kh違o sát t益 l羽 alginate Î tinh b瓜t Kh違o sát t益 l羽 alginate Î gelatin Ch医v"n逢嬰ng probiotic Ch医v"n逢嬰ng s違n ph育m Zƒe"8鵜nh s嘘 n逢嬰ng vi khu育n Zƒe"8鵜nh ho衣t tính probiotic Các ch雨 tiêu hóa lý Các ch雨 tiêu vi sinh Th運i gian b違o qu違n Các ch雨 tiêu c違m quan
2.4.2. B嘘 trí thí nghi羽m
2.4.2.1. Ho衣v"j„c."v<pi"ukpj"x "ik英 gi嘘ng vi khu育n L. casei
Pha ch院o»k"vt逢運ng MRS l臼ng và m»k"vt逢運ng MRS-agar.
C医y gi嘘ng vi khu育n L. casei vào các 嘘ng nghi羽m ch泳a 10 on"o»k"vt逢運ng MRS l臼pi"8吋 ho衣t hóa gi嘘pi0"Ago"栄荏 37 oC trong 1 Î 2 ngày.
Chuy吋n toàn b瓜 嘘ng gi嘘pi"8«"jq衣t hóa vào erlen ch泳a 90 on"o»k"vt逢運ng MRS l臼pi"8吋v<pi"ukpj"x thu sinh kh嘘i t院d q0"Ago栄荏 37 oC trong 1 Î 2 ngày.
Hút 1 ml gi嘘ng vi khu育n L. casei t瑛 嘘ng nghi羽o"8«"jq衣t hóa cho vào 嘘ng nghi羽m ch泳a s印n 9 on"p逢噂c mu嘘k"ukpj"n#"8«"j医p kh穎vt́pi"8吋 ti院n hành pha loãng m磯u ra các n欝pi"8瓜 t瑛 10-18院n 10-7. Hút 1 ml dung d鵜ch 荏 eƒe"8瓜 pha loãng khác nhau x q"8 c"rgvtk."ucw"8„"8鰻o»k"vt逢運ng MRS-cict"8«"j医p kh穎 trùng và làm ngu瓜i x q"8 c0"Zqc{"vt”p"8 c"vjgq"ejk隠w"mko"8欝ng h欝 x "pi逢嬰c l衣k"8吋 phân b嘘 8隠u các ch医v"vt‒p"8 c="8吋 yên cho th衣ej"8»pi"n衣i và 8go"栄荏 37 oC t瑛 1 Î 2 ngày ch運 khu育n l衣c m丑c lên. Ucw"8„"ej丑n nh英ng khu育n l衣e"8員e"vt逢pi"e医{"tkc"vt‒p"o»k"vt逢運ng MRS- agar trong 嘘ng th衣ch nghiêng, 栄 荏 37 oC t瑛 1 Î 4"pi {."8go b違o qu違n 荏 nhi羽v"8瓜 4 Î 5 oE"8吋 làm nguyên li羽u gi英 gi嘘ng. Ngoài ra ta có th吋 s穎 d映ng gi嘘pi"8«"jq衣t hóa trong 嘘ng nghi羽m l臼ng, dùng que c医y vòng l医y gi丑v"ecpj"vt逢運ng t院 d q"8吋 c医y ria vt‒p"o»k"vt逢運ng MRS-agar trong 嘘ng th衣ej"pijk‒pi."8go"栄 荏 37 oC trong 1 Î 2 pi {."ucw"8„e pi" b違o qu違n 荏 4 Î 5 oC.
2.4.2.2. Ki吋m tra các 8員c tính sinh h丑c c栄a gi嘘ng
Mつe"8 ej
- Ki吋m tra tính thu亥n và hình d衣ng c栄a gi嘘ng.
- Kh違q"uƒv"8逢運pi"eqpi"ukpj"vt逢荏ng c栄a ch栄ng vi sinh v壱t s穎 d映ng nh茨m ch丑p"8逢嬰c th運k"8k吋m thu nh壱n sinh kh嘘i cao nh医v"vtqpi"ikck"8q衣n nhân gi嘘ng.
- Kh違o sát kh違p<pi"n‒p"ogp"cekf"ncevke. - Kh違o sát ho衣t tính catalase.
Tiｘn hành thí nghiうm
a) Quan sát 8員e"8k吋m vi th吋 và 8衣i th吋
p<pi"d逸t màu khác nhau c栄a vi khu育n Gram (+) và Gram (-). Th詠c hi羽n tiêu b違n gi丑t ép t瑛 canh vt逢運ng MRS l臼ng có gi嘘ng vi khu育p"8«"v<pi"ukpj0"Ucw"mjk"eó tiêu b違n gi丑t ép, ta th詠c hi羽n nhu瓜o"Itco"8吋 quan sát.
Cách ti院n hành:
- Dàn m臼ng thành v院t bôi.
- C嘘8鵜nh nh姻 trên ng丑n l穎c"8flp"e欝n (tránh làm nóng quá). - Nhu瓜o"et{uvcn"xkqngv0"A吋 yên 30 giây r欝i r穎a v噂k"p逢噂c. - Nhu瓜m lugol (iodine) kho違ng 30 giây r欝i r穎a v噂k"p逢噂c. - T育y b茨ng c欝n (5 giây). R穎c"p逢噂e."8吋 khô.
- Nhu瓜m fwejukp0"A吋 yên 30 giây r欝i r穎a v噂k"p逢噂c. - A吋 khô hoàn toàn.
- Swcp"uƒv"f逢噂i kính hi吋n vi [35].
Swcp"uƒv"8衣i th吋 v隠 hình d衣pi."m ej"vj逢噂c và màu s逸c khu育n l衣c vi khu育n b茨ng rj逢挨pi"rjƒr"8鰻8a trong môi vt逢運ng MRS-agar. Hút 1 ml gi嘘ng vi khu育n L. casei t瑛 嘘ng nghi羽o" 8«" jq衣t hóa cho vào các 嘘ng nghi羽m ch泳a s印p" ;" on" p逢噂c mu嘘k"ukpj"n#"8«"j医p kh穎vt́pi"8吋 ti院n hành pha loãng m磯u ra các n欝pi"8瓜 t瑛 10-1 8院n 10-7. Hút 1 ml dung d鵜ch 荏eƒe"8瓜 pha loãni"mjƒe"pjcw"x q"8 c"rgvtk."ucw"8„"8鰻 o»k"vt逢運ng MRS-cict"x q"8 c0"A吋 yên cho th衣ej"8»pi"n衣k"x "8go"栄 荏 37 oC t瑛 1 Î 2 ngày ch運 khu育n l衣c m丑c lên.
b) Kh違q"uƒv"8逢運pi"eqpi"ukpj"vt逢荏ng c栄a L. casei
C医y nhân gi嘘ng c医p 1 t瑛嘘ng gi嘘ng g嘘c sang 嘘ng nghi羽m ch泳a 10 ml môi vt逢運ng MRS l臼ng, 栄荏 37 oC trong 24 gi運.
C医y nhân gi嘘ng c医p 2 t瑛 嘘ng gi嘘ng c医p 1 sang bình erlen ch泳a 90 ml môi vt逢運ng MRS l臼ng (t雨 l羽 c医y gi嘘ng 10 %), 栄 荏 37 oC. Sau m厩i 3 gi運 nuôi c医y, l医y m磯w"8q"8瓜8映c 荏d逢噂c sóng 600 nm.
D詠pi"8逢運pi"v逢挨pi"swcp"vwy院n tính gi英c"8瓜8映c (giá tr鵜 OD600) và s嘘n逢嬰ng vi khu育n (cfu/ml). D詠c" x q" 8逢運pi" v逢挨pi" swcp" vw{院n tính trên suy ra m壱v" 8瓜 vi khu育n 泳ng v噂i giá tr鵜 OD6008q"8逢嬰c t衣i m厩i th運k"8k吋m.
Aおpj"n⇔ぢng giぐng bｊpi"rj⇔￢pi"rjƒr"8ご8 c
Hút 1 ml d鵜ch lên men và ti院n hành pha loãng m磯u ra các n欝pi"8瓜 t瑛 10-1 8院n 10-7. Hút 1 ml t瑛 eƒe"8瓜 pha loãng trên ti院p"j pj"8鰻8 c"rgvtk."8go"栄 荏 37 oC ch運 khu育n l衣c m丑c lên. Ghi nh壱n k院t qu違 b茨pi"eƒej"8院m s嘘 n逢嬰ng khu育n l衣c phát