503090"A鵜 nh danh L case ib 茨pi"rj逢挨pi"rjƒr"ukpj"j丑 c phân t穎
3.2. T衣o ch院 ph育m vi gói vi khu育n v噂i các lo衣i ch医t vi gói
V噂i v壱t li羽u 8逢嬰c s穎 d映ng ph鰻 bi院n hi羽n nay là alginate tuy có nh英pi"逢w" 8k吋m n鰻i b壱v"pj逢: kh違p<pi"v衣o m衣ng gel d宇f pi."mj»pi"8瓜c v噂k"e挨"vj吋, ho衣v"8瓜ng trong 8k隠u ki羽n ôn hòa, phân gi違i hoàn toàn trong ru瓜t và gi違i phóng các t院 bào vi i„kÈ"Th院 nj逢pi" eƒe" xk" j衣t alginate l衣i mj»pi" mjƒpi" 8逢嬰c acid, d磯p" 8院n hi羽n v逢嬰ng co rút và gi違m tính b隠n e挨"j丑c trong quá trình lên men lactic. Bên c衣pj"8„." gel calci Î alginate e pi"8逢嬰c ghi nh壱n không 鰻p"8鵜nh v隠 m員t hóa h丑c khi có m員t các ch医t t衣o ph泳c pj逢"rjqurjcvg, citrate và các cation pj逢"kqp natri ho員c magie; b隠 m員t h衣t x嘘p và n泳t r衣n d宇 x違y ra s詠 khu院ch tán c栄c"8瓜 育m và các ch医t l臼ng khác vào m衣ng gelÈ Fq"8„."8吋 kh逸c ph映c eƒe"pj逢嬰e"8k吋m trên và v<pi kh違 p<pi 鰻n 8鵜nh c栄a các vi h衣t t衣o thành, alginate s胤8逢嬰c pha tr瓜n hay bao ph栄 quanh màng gel v噂i các h嬰p ch医t polymer khác pj逢"gelatin, tinh b瓜t, poly-L-lysine, chitosan... [11, 25, 28, 31].
雲 n瓜i dung nghiên c泳u này, v噂i m映c tiêu ch丑n l詠a h厩n h嬰p v壱t li羽u và t益 l羽 vi gói hi羽u qu違, chúpi"v»k"8«"vi院n hành vi gói vi khu育n L. casei vjgq"rj逢挨pi"
pháp nén ép v噂i các v壱t li羽u vi gói là alginate Î gelatin và alginate Î tinh b瓜t 荏 các t益 l羽 khác nhau. Các ch雨 vk‒w"8ƒpj"ikƒ"dcq"i欝m: c医u trúc h衣t vi gói và hi羽u su医t vi gói vi khu育n L. casei. Sau khi t衣q"8逢嬰c h衣t vi gói, ta ti院n hành l丑c và r穎a v噂k"p逢噂c c医t 8吋 thu ch院 ph育m và th詠c hi羽n nh英ng thí nghi羽m kh違o sát ti院p theo. D詠a theo tài li羽u báo cáo c栄a Xiao Yan Li và c.s. [28] và MAK Zanjani và c.s. [31] chúng tôi ch丑n ra t益 l羽 gi英a alginate và gelatin là (2 : 1) và gi英a alginate và tinh b瓜t là (3 : 2). T瑛8„"mj違o sát thêm các giá tr鵜 xung quanh t益 l羽e挨"d違p"p {"8吋v·o"tc"8逢嬰c h厩n h嬰p vi gói vi khu育n t嘘k"逢w0
3.2.1. C医u trúc h衣t vi gói
C医u trúc h衣v"xk"i„k"8逢嬰c quan sát b茨ng kính hi吋p"xk"8k羽n t穎 quét (SEM) t衣i phòng thí nghi羽m K悦 thu壱t hi吋p"xk"8k羽n t穎 - Vi羽n Công ngh羽 Hóa h丑c TP.HCM.
M瓜t s嘘 hình 違nh h衣v"xk"i„k"8逢嬰c th吋 hi羽n qua nhóm hình 3.6 và 3.7.
Hình 3.6. Hình d衣ng 8衣i th吋 các h衣t vi gói
B違ng 3.4. M瓜t s嘘 tính ch医t c栄a h衣t vi gói Tính ch医t Nh壱n xét Tính ch医t Nh壱n xét M ej"vj逢噂c h衣t (mm) 0,5 Î 1,0 M壱v"8瓜 t院 bào (cfu/g) 9,70.108 Hình d衣ng D衣ng h衣t tròn Màu s逸c Tr逸pi"8映c Tính ch医t v壱t lý M隠m, dai
T瑛 hình 3.6 và b違ng 3.4 cho th医y các h衣v"xk"i„k"8逢嬰c t衣o ra b茨ng rj逢挨pi" pháp nén ép có m ej"vj逢噂c và hình d衣pi"mjƒ"8欝pi"8隠u nhau; và k院t qu違p {"e pi" g亥n v噂i k院t qu違 c栄a Xiao Yan Li và c.s. mjk"e pi"u穎 d映pi"épi"rj逢挨pi"rjƒr8吋 vi gói L. casei ATCC 393 b荏i alginate và gelatin (2 : 1), các vi h衣v"e„"m ej"vj逢噂c 8欝ng nh医t là 1,1 ± 0,2 mm. V噂i m壱v"8瓜 t院 d q"dcp"8亥u trong d鵜ch huy隠n phù là kho違ng 109 (cfu/ml) và trong h衣t vi gói là 0,97.109 (cfu/g) vj·"rj逢挨pi"rjƒr"p {" cho hi羽u qu違 vi gói vi khu育p"n "mjƒ"ecq."8衣t trên 90 % x "fq"8„"8違m b違q"8逢嬰c yêu c亥u v隠 ch雨 tiêu vi sinh v壱v"mjk"8逢c"x q"泳ng d映ng lên men thu s違n ph育m. M瓜v"8k隠u c亥p"n逢w"#"8嘘i v噂k"rj逢挨pi"rjƒr"pfip"fir"n "8吋 có th吋 gi英m ej"vj逢噂c và c医u trúc h衣t vi i„k"8逢嬰e"8欝ng nh医v."ej¿pi"v»k"8«"ej栄8瓜ng b臼 h厩n h嬰p (alginate và vi khu育n) 荏 th吋 tích cu嘘i cùng kho違ng 0,5 ml, tránh tình tr衣ng t衣o b丑t khí trong c医u trúc h衣t gây ra b荏k"vjcq"vƒe"d挨o"fwpi"f鵜ch ra kh臼k"8亥u tiêm.
D詠a vào hình 3.7 ta th医y, v噂i k悦 thu壱t ch映p SEM m員t c逸t trong c栄a h衣t vi i„k"8«"mj鰯pi"8鵜nh s詠 hi羽n di羽n c栄a các t院 bào vi khu育n L. casei bên trong h衣t. Chúng s胤 ukpj" vt逢荏ng, phát tri吋p" x " vtcq" 8鰻i ch医t thông qua l噂p màng bao bên ngoài th医o"8逢嬰e"*ign"p逢噂c) này, có vai trò v瑛c"pj逢"o瓜v"ikƒ"8叡 8吋 c嘘 8鵜nh vi sinh v壱t bên trong v瑛c"pj逢"m瓜t hàng rào giúp b違o v羽 t院 d q0"A逢運ng kính h衣t càng l噂n thì kh違p<pi"d違o v羽 vi khu育p"vtqpi"8k隠u ki羽n kh逸c nghi羽t càng cao [38].
3.2.2. Hi羽u su医t vi gói vi khu育n L. casei
Nh茨m zƒe"8鵜pj"8逢嬰c h厩n h嬰p vi gói t嘘k"逢w mang l衣i kh違p<pi"u嘘ng sót c栄a vi khu育n là cao nh医t, chúng tôi 8« 8ƒpj"ikƒ"ej医v"n逢嬰ng h衣t vi gói vjw"8逢嬰c thông qua ch雨 tiêu hi羽u su医t vi gói (hay % t院 bào vi khu育n s嘘pi"8逢嬰c)="8欝ng th運i sau th運i gian b違o qu違n là 2 tu亥n ti院n hành ki吋m tra l衣i m壱v"8瓜 t院 bào còn t欝n t衣i trong các h衣t vi gói.
Các vi h衣v"8逢嬰c phá c医u trúc gel và phóng thích t院 bào vi khu育n nh嘘t bên trong b茨ng cách x穎 lý v噂i dung d鵜ej"8羽m phosphate 荏 37 oE"vtqpi"67"rj¿v="ucw"8„" ti院p"j pj"8鰻8 c"8吋zƒe"8鵜nh s嘘n逢嬰ng t院 bào vi khu育n.
Hi羽u su医t vi gói và m壱v"8瓜 vi khu育n trong ch院 ph育m sau b違o qu違n 8逢嬰c trình bày 荏 b違ng 3.5 và 3.6. B違ng 3.5. K院t qu違 hi羽u su医t vi gói L. casei V壱t li羽u vi gói T益 l羽 S嘘n逢嬰ng vi khu育n L. casei Hi羽u su医t vi gói (%) T鰻pi"n逢嬰ng t院 d q"dcp"8亥u (cfu.108/ml) T鰻pi"n逢嬰ng t院 bào trong ch院 ph育m (cfu. 108/g) Alginate Î gelatin (2 : 0,5) 10,33 ± 0,11 9,38 ± 0,13 90,80 ± 1,24 (2 : 1) 10,33 ± 0,11 9,70 ± 0,21 93,90 ± 1,99 (2 : 2) 10,33 ± 0,11 9,54 ± 0,10 92,35 ± 0,92 Alginate Î tinh b瓜t (3 : 1) 10,21 ± 0,18 9,47 ± 0,17 92,75 ± 1,70 (3 : 2) 10,21 ± 0,18 9,51 ± 0,20 93,14 ± 1,96 (3 : 3) 10,21 ± 0,18 9,45 ± 0,08 92,16 ± 0,76
B違ng 3.6. M壱v"8瓜 vi khu育n L. casei sau 2 tu亥n b違o qu違n ch院 ph育m vi gói V壱t li羽u V壱t li羽u vi gói T益 l羽 S嘘n逢嬰ng vi khu育n L. casei T益 l羽 t院 bào còn s嘘ng (%) T鰻pi"n逢嬰ng t院 d q"dcp"8亥u (cfu.108/ml) T鰻pi"n逢嬰ng t院 bào trong ch院 ph育m (cfu. 108/g) Alginate Î gelatin (2 : 0,5) 10,33 ± 0,11 9,03 ± 0,16 87,42 ± 1,58 (2 : 1) 10,33 ± 0,11 9,42 ± 0,07 91,19 ± 0,68 (2 : 2) 10,33 ± 0,11 9,27 ± 0,16 89,74 ± 1,54 Alginate Î tinh b瓜t (3 : 1) 10,21 ± 0,18 9,04 ± 0,11 88,54 ± 1,11 (3 : 2) 10,21 ± 0,18 9,16 ± 0,06 89,72 ± 0,76 (3 : 3) 10,21 ± 0,18 9,09 ± 0,08 88,93 ± 0,74
Kｘt quＶ8⇔ぢc tính dばa trên giá trおvtwpi"d·pj"ł"8じ lうch chuｂn (n = 3)
K院t qu違vjw"8逢嬰c khi kh違o sát hi羽u su医v"xk"i„k"8嘘i v噂i các v壱t li羽u 荏 nh英ng t益 l羽 khác nhau là khá cao và g亥p"8隠u nhau, 8衣t kho違ng 90,80 Î 93,90 %; và sau 2 tu亥p"n逢w"vt英 thì m壱v"8瓜 t院 bào còn kho違ng 87,42 Î 91,19 % so v噂i t鰻pi"n逢嬰ng t院 bào dcp"8亥u. Qua 2 b違ng s嘘 li羽u trên cho th医y, v噂i ph泳c ch医t vi gói s穎 d映ng là alginate Î gelatin theo t益 l羽 (2 : 1) thì hi羽u su医t vi gói vi khu育n 8衣v"8逢嬰c là cao nh医t (93,90 %). Bên c衣pj"8„ trong th運i gian b違o qu違n ch院 ph育m, ti院p"j pj"8ƒpj"ikƒ"ej雨 tiêu m壱v"8瓜 t院 bào hi羽n di羽n trong các h衣t vi gói thì h厩n h嬰p này v磯p"fw{"vt·"8逢嬰c s嘘n逢嬰ng vi khu育n còn s嘘ng cao nh医t. Trong mjk"8„"荏 các t益 l羽 khác c栄a alginate Î igncvkp"n "*4"<"2.7+"x "*4"<"4+"jc{"8嘘i v噂i h厩n h嬰p vi gói là alginate Î tinh b瓜t 荏 c違 3 m泳c t益 l羽 kh違o sát, ta có th吋 th医y không có s詠 khác bi羽t nhi隠u gi英a các k院t qu違, hi羽u su医t vi gói ch栄 y院w"fcq"8瓜ng trong kho違ng 92 % và nh医t là sau th運k"ikcp"n逢w" tr英 thì t益 l羽 t院 bào s嘘pi"u„v"8隠u gi違m xu嘘pi"f逢噂i m泳c 90 % so v噂k"dcp"8亥u.
Fq" 8„, dばa trên ghi nhｆn kｘt quＶ thばc nghiうm ta sｖ chがn dung dおch alginate làm vｆt liうw"ej pj"8あ vi gói vi khuｂn L. casei bｊpi"rj⇔￢pi"rjƒr"pfip"fir."
còn gelatin sｖ8„pi"xck"vt”"n "nずp áo bao phて bên ngoài và tぴ lう tぐk"⇔w"ikのa chúng là (2 : 1).