V (ml) Tếbào có nhân (x108 /đv) (n= 112)
3. Thu hoạch tếbào gốc
3.2.1.1. Loại hồng cầu của đơn vị máu cuống rốn
Để tiến hành loại bớt hồng cầu và huyết t−ơng của đơn vị máu cuống rốn có thể tích trên 90 ml bằng ph−ơng pháp ly tâm, chúng tôi đã tiến hành nghiên cứu xác định lực ly tâm và thời gian ly tâm thích hợp nhất. Kết quả này đã đ−ợc chúng tôi mô tả cụ thể trong những công bố tr−ớc . Cụ thể, qua quá trình thực nghiệm, chúng tôi đã xác định quy trình ly tâm với lực ly tâm t−ơng đối là 500g trong thời gian 6 phút có kết quả giữ lại số l−ợng bạch cầu là nhiều nhất ( số l−ợng tế bào gốc nhiều nhất) mà vẫn loại bỏ đ−ợc phần lớn số l−ợng hồng cầu (>50%), đáp ứng yêu cầu giảm thể tích bảo quản khối tế bào gốc tạo máu (>65%) mà vẫn giữ lại đ−ợc phần lớn tế bào gốc dành cho ghép. Hiệu suất loại bỏ các thành phần tế bào và hiệu suất thu lại tế bào CD34, các chỉ số đơn vị máu cuống rốn thu đ−ợc sau qúa trình ly tâm đ−ợc trình bày trong các bảng 20 và 21 nh− sau:
Bảng 20. Kết quả loại hồng cầu và bạch cầu của đơn vị máu cuống rốn bằng ly tâm (n = 20)
Chỉ số Gía trị trung bình (%) Khoảng giá trị (%)
Tỷ lệ loại hồng cầu 51.2 ± 3.3 45.3 – 55.7 Tỷ lệ mất bạch cầu 14.5 ± 3.2 10.7 – 20.6 Tỷ lệ mất lympho 9.0 ± 3.3 5.2 – 16.7 Tỷ lệ mất mono 10.4 ± 2.7 6.0 – 15.5 Tỷ lệ loại BCTT 18.5 ± 4.8 9.2 – 28.1
Nhận xét: Qua áp dụng quy trình ly tâm đã đ−ợc lựa chọn, tỷ lệ hồng cầu bị loại bỏ đạt khá cao: 51.2 ± 3.3 % tỷ lệ mất bạch cầu chung là: 14.5 ± 3.2 %,
tỷ lệ mất các thành phần bạch cầu trung bình khá thấp, cụ thể tỷ lệ mất lympho: 9.0%, mono 10.4% và loại bạch cầu hạt trung bình tính là 18.5 %. Đồng thời, hiệu suất thu hồi tế bào CD34 đạt cao và ổn định qua các mẫu nghiên cứu (trên 85%) (bảng 23).
Bảng 22. Thể tích và số l−ợng tế bào có nhân của đơn vị MCR tr−ớc và sau ly tâm loại hồng cầu.
Chỉ số Đơn vị Giá trị trung bình Giá trị/100ml
Thể tích tr−ớc ly tâm ml 114 100 Thể tích sau ly tâm ml 38 33.3
TBCN/ đvị tr−ớc ly tâm 108/đvị 13.5 11.9 TBCN/đvị sau ly tâm 108/đvị 10.5 9.7 TBCN/ ml dịch tế bào sau xử lý 108/ml 2.75 275
Nhận xét: Với thể tích sau ly tâm trung bình là 38ml, số l−ợng bạch cầu của đơn vị máu cuống là 10.5 x 108 /đvị. Nồng độ cuối cùng của tế bào có nhân là 2.75ì 10 8 /ml dịch tế bào sau xử lý nằm trong giới hạn cho phép để bảo quản (1- 3ì10 8/ml), mà vẫn đảm bảo đ−ợc nhu cầu giảm thể tích. Dựa trên kết quả này và tỷ lệ tế bào CD34 sau khi xử lý có thể dễ dàng tính ra khả năng sử dụng chế phẩm này trên thực tế.