Nhìn vào kết quả ta thấy: Hiệu giá trung bình vi rút dịch tả lợn khi nuôi cấy bằng cả 4 loại môi trường đều cho hiệu giá vi rút chênh lệch nhau không nhiều. Tuy nhiên, môi trường MEM cho hiệu giá trung bình cao nhất ở cả 3 lô, trung bình 3 lô đạt 106,87±0,13 TCID50/ml. Môi trường LH hiệu giá trung bình 3 lô đạt 106,2±0,11TCID50/ml, môi trường M199 trung bình đạt 106,33±0,13TCID50/ml, Môi trường DMEM trung bình đạt 106,47±0,13TCID50/ml.
Sử dụng phần mềm Minitab 16 (ANOVA), P< 0,005. Như vậy, chúng tôi lựa chọn môi trường MEM 1% FBS có bổ sung 1% kháng sinh và 1% Hepes làm nuôi cấy để tiếp tục tiến hành các thử nghiệm tiếp theo đối với vi rút dịch tả lợn.
4.2.1.2. Xác định pH môi trường duy trì sau gây nhiễm vi rút
Sau khi xác định được môi trường duy trì cho nuôi cấy vi rút DTL tôi tiến hành xác định pH tối ưu để nuôi vi rút đạt hiệu quả cao. Tôi tiến hành thí nghiệm với pH = 7,0±0,1; pH= 7,2±0,1; pH= 7,4±0,1.
Kết quảđược trình bày dưới bảng 4.12.
Bảng 4.12. Kết quả hiệu giá vi rút Dịch tả lợn ởcác điều kiện pH khác nhau Hiệu giá (TCID50/ml) Hiệu giá (TCID50/ml)
pH = 7,0±0,1 pH = 7,2±0,1 pH= 7,4±0,1
Lô 1 105,9-106,1 106,9-107,1 106,3-106,5
Lô 2 105,7-105,9 106,7-106,9 106,1-106,3
Lô 3 105,9-105,9 106,9-106,9 106,3-106,3
Ở các điều kiện pH môi trường nuôi khác nhau thu được nguyên dịch vi rút với hiệu giá vi rút khác nhau. Tuy nhiên ở cả 3 lô thí nghiệm đều cho kết quả ở điều kiện môi trường nuôi có pH = 7,2±0,1 cho hiệu giá(106.9±0,12TCID50/ml)cao hơn hẳn môi trường nuôi pH = 7,0±0,1; pH = 7,4±0,1.
Sử dụng phần mềm Minitab 16 (ANOVA), P< 0,005 nên chúng tôi lựa chọn pH= 7,2±0,1 để nuôi vi rút DTL.
4.2.2. Xác định liều gây nhiễm (MOI) cho vi rút DTL
Để xác định liều gây nhiễm vi rút thích hợp tôi tiến hành thí nghiệm với 4 liều MOI khác nhau. Kết quả theo dõi thí nghiệm được trình bày tại bảng 4.13
Bảng 4.13. Kết quả hiệu giá vi rút của các liều gây nhiễm (MOI) Thời gian
gây nhiễm vi rút
(giờ)
Hiệu giá vi rút (log10 TCID50/ml)
0,01 0,005 0,001 0,0005 48h 6,5 6,1 4,7 4,1 54h 5,9 5,7 5,5 4,8 72h 5,5 5,3 7,1 6,3 96h 4,9 5,1 6,5 6,7 Từ bảng 4.13 chúng tôi tiến hành xây dựng đồ thị hình 4.11