L với nồng độ ion Hg(II) Theo đó, cường độ huỳnh quang dung dịc h giảm mạnh
a. Khảo sát phổ chuẩn độ UV-Vis và phổ huỳnh quang của phức Hg2L
Phức chất Hg2L2 được sử dụng để xác định phân tử sinh học có chứa thiol trong dung dịch nước. Cys được đưa vào dần dần trong dung dịch của Hg2L2, các đường cong chuẩn độ đã được mô tả ở Hình 3.24.
Hình 3.24. Phổ chuẩn độ UV-Vis (a) và phổ huỳnh quang (b) của dung dịch Hg2L2
(2,5 μM) trong C2H5OH/HEPES (1/9, v/v), pH=~7,4, ở 25C khi thêm 0-10 μM Cys, bước sóng kích thích 540 nm, bước sóng phát huỳnh quang 585 nm
Hình 3.24a cho thấy, khi tăng dần Cys vào dung dịch phức Hg2L2, trong phổ UV-Vis thu được, đỉnh hấp thụ cực đại ở bước sóng 460 nm dần dần biến mất, đồng thời xuất hiện một đỉnh hấp thụ cực đại mới với cường độ hấp thụ rất mạnh ở bước sóng 540 nm. Thêm vào đó một điểm isosbestic xuất hiện tại bước sóng 490 nm. Khi nồng độ Cys thêm vào dung dịch đúng bằng một đương lượng so với Hg2L2, phổ UV-Vis thu được hoàn toàn phù hợp với phổ UV-Vis của dung dịch L tự do có cùng nồng độ. Kết quả này có thể giải thích là do Cys đã phản ứng với Hg2L2 và giải phóng L tự do, làm thay đổi phổ hấp thụ. Tương tự, Hình 3.24b cho thấy, dung dịch Hg2L2 hầu như không phát huỳnh quang ở bước sóng 585 nm. Khi thêm dần Cys vào dung dịch Hg2L2, cường độ huỳnh quang tăng dần trở lại. Khi lượng Cys thêm vào đạt một đương lượng, cường độ huỳnh quang dung dịch ở bước sóng 585 nm đạt khoảng 95% so với cường độ huỳnh quang của dung dịch L tự do có cùng nồng độ ban đầu. Kết quả này một lần nữa cho thấy Cys đã phản ứng với Hg2L2 và giải phóng L tự do.