L với nồng độ ion Hg(II) Theo đó, cường độ huỳnh quang dung dịc h giảm mạnh
c. Khảo sát ảnh hưởng của các amino acids cạnh tranh
Để đánh giá tính chọn lọc của sensor AMC đối với các biothiol khác nhau, phản ứng giữa AMC (10 μM) với các amino acids khác nhau (50 μM) trong dung dịch HEPES (10 mM, pH = 7,4) đã được khảo sát và trình bày ở Hình 3.38.
Kết quả khảo sát cho thấy, tương tự như Cys, khi bổ sung các amino acids có chứa thiol gồm GSH và Hcy, cường độ huỳnh quang của dung dịch AMC cũng tăng lên rõ rệt ở cả hai dải phát xạ, trong đó tăng mạnh mẽ ở bước sóng 450 nm và tăng không đáng kể ở bước sóng phát xạ 375 nm. Tuy nhiên, mức độ gia tăng cường độ huỳnh quang ghi nhận được không giống nhau, theo đó mức độ gia tăng cường độ huỳnh quang theo thứ tự như sau: Cys> GSH> Hcy (Hình 3.38a).
Đối với các amino acids khác không có chứa nhóm mercapto như Arginine (Arg), Glycine (Gly), Alanine (Ala), Aspartic acid (Asp), Glutamic acid (Glu), Leucine (Leu), Lysine (Lys), Isoleucine (Ion), Methionine (Met), Threonine (Thr), Serine (Ser), Tryptophan (Trp), Tyrosine (Tyr) và Valine (Val); các amino acids này hầu như không làm thay đổi cường độ huỳnh quang của dung dịch sensor AMC
Nồng độ biothiols/x10 μM
F45
0/
37
(Hình 3.38a). Sự có mặt của amino acids này cũng không làm ảnh hưởng đến phản ứng giữa các biothiol (Cys, GSH và Hcy) với AMC, bằng chứng là không có sự khác biệt đáng kể giữa phổ huỳnh quang của các dung dịch gồm AMC + biothiol + các amino acids so với phổ huỳnh quang của các dung dịch gồm AMC + biothiol (Hình 3.38b).
Hình 3.38. (a) Phổ huỳnh quang của AMC (10 μM, C2H5OH/HEPES, pH =7,4, 1/4, v/v, tại 25 oC) khi thêm Cys, Hcy, GSH, các amino acids khác (bao gồm Arg,
Gly, Ala, Asp, Glu, Leu, Lys, Ile, Met, Thr, Ser, Trp, Tyr and Val);(b) Phổ huỳnh quang của AMC (10 μM, C2H5OH/HEPES, pH =7,4, 1/4, v/v, tại 25 oC) trong sự
hiện diện của hỗn hợp các amino acids (bao gồm Arg, Gly, Ala, Asp, Glu, Leu, Lys, Ile, Met, Thr, Ser, Trp, Tyr and Val) khi thêm Cys, Hcy và GSH
Những kết quả trên cho thấy rằng, có thể sử dụng sensor AMC để phát hiện chọn lọc các biothiol trong sự hiện diện của các amino acids đã khảo sát.