L với nồng độ ion Hg(II) Theo đó, cường độ huỳnh quang dung dịc h giảm mạnh
KẾT LUẬN CHUNG VỀ NGHIÊN CỨU SENSO RL
3.2.2.2. Nghiên cứu thực nghiệm về đặc tính và ứng dụng của sensor AMC a Khảo sát phổ hấp thụ và phổ huỳnh quang của sensor AMC
a. Khảo sát phổ hấp thụ và phổ huỳnh quang của sensor AMC
Hình 3.33.(a) Phổ hấp thụ, AMC (10 μM) trong C2H5OH/HEPES (pH=7,4, 1/4, v/v) tại 25C khi thêm 20 μM Cys; (b) Phổ huỳnh quang, AMC (10 μM) khi thêm 1,
2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60 μM Cys trong C2H5OH/HEPES (pH =7,4, 1/4, v/v) tại 25C, bước sóng kích thích 320 nm
Kết quả khảo sát thực nghiệm phổ hấp thụ và phổ huỳnh quang của dung dịch AMC được thể hiện ở Hình 3.33. Ở phổ hấp thụ (Hình 3.33a), AMC đạt cực đại tại bước sóng 275 và 320 nm trong ethanol/HEPES, với hệ số hấp thụ mol xác định được là 104 M-1.cm-1. Khi thêm Cys vào dung dịch của AMC, phổ hấp thụ thay đổi không đáng kể. Ở phổ huỳnh quang, AMC hiển thị một dải phát xạ huỳnh quang vai với hai đỉnh cực đại ở bước sóng 375 nm và 450 nm trong ethanol/HEPES (Hình 3.33b). Hiệu suất lượng tử huỳnh quang (Φ) của sensor
AMC đã được xác định là khá nhỏ, bằng 0,05 so với chất chuẩn là 9,10- diphenylanthracene (Φ = 1).
Khi thêm Cys vào dung dịch sensor AMC, cường độ huỳnh quang tăng dần ở cả hai đỉnh phát xạ. Trong đó, cường độ huỳnh quang tăng mạnh mẽ ở bước sóng 450 nm, trong khi đó cường độ huỳnh quang ở bước sóng 375 nm có sự gia tăng không đáng kể. Cuối cùng, khi thêm một lượng vừa đủ Cys vào dung dịch sensor AMC để phản ứng kết thúc, cường độ huỳnh quang ở bước sóng 450 nm tăng gấp 8 lần, trong khi đó cường độ phát xạ ở bước sóng 375 nm chỉ tăng
[AMC]/AMC+[Cys] (μM)
2,2 lần. Sự thay đổi cường độ huỳnh quang ở cả hai bước sóng 375 và 450 nm như trên dẫn đến một khả năng có thể sử dụng AMC để làm sensor huỳnh quang hoạt động dựa trên sự biến đổi tỷ lệ cường độ huỳnh quang ở hai bước sóng (ratiometric fluorescent sensor) để xác định Cys. Một kiểu sensor huỳnh quang có nhiều ưu điểm vượt trội, nhất là khắc phục sự ảnh hưởng của tín hiệu huỳnh quang nền khi ứng dụng phân tích trong thực tế.