7. Cấu trúc của luận văn
1.4.2. Phương pháp GC – MS xác định thành phần các hợp chất từ dịch
dịch chiết thân rễ sâm cau
Sắc kí khí là một phương pháp chia tách trong đó pha động là một chất khí (được gọi là khí mang, khí mang thông dụng và thích hợp thường dùng là heli) và pha tĩnh chứa trong cột là một chất rắn hoặc lỏng phủ trên bề mặt chất mang trơ dạng rắn hay phủ đều lên thành phía trong của cột. Tùy thuộc vào bản chất của pha tĩnh chia thành hai loại sắc kí.
+ Sắc kí khí – rắn (GSC): Chất phân tích được hấp thụ trực tiếp trên pha tĩnh là các tiểu phân rắn.
+ Sắc kí khí – lỏng (GLC): Pha tĩnh là một chất lỏng không bay hơi. Với sắc kí khí, có hai loại kỹ thuật phân tích:
+ Giữ cho nhiệt độ không đổi trong suốt quá trình tách, phương pháp này khó tách hoàn toàn.
+ Thay đổi nhiệt độ trong quá trình tách, phương pháp này tuy tốn thời gian nhưng tách hoàn toàn.
Phương pháp khối phổ là phương pháp nghiên cứu các chất bằng cách đo, phân tích chính xác khối lượng phân tử của chất đó dựa trên sự chuyển động của các hạt mang điện hay bay ion trong một điện trường hay từ trường nhất định.
Máy khối phổ là thiết bị dùng cho phương pháp phổ khối, cho ra phổ khối lượng của một mẫu, để tìm ra thành phần của nó.
Theo tính năng của bộ ghi, người ta chia các máy khối phổ thành hai loại:
+ Máy khối phổ kí ghi bằng kính ảnh: Tín hiệu phổ được ghi bằng kính ảnh ở dạng vạch có độ đen khác nhau.
điện bằng các dao động kí điện tử nhiều kênh, hoặc đưa vào máy tính điện tử, tín hiệu sẽ được đưa ra dưới dạng bản đồ hoặc đồ thị thích hợp.
Ngày nay trong phương pháp khối phổ người ta dùng các máy khối phổ kế.
Nguyên lý hoạt động của máy khối phổ: Mẫu các chất cần phân tích sẽ được chuyển hành trạng thái hơi, sau đó mới bắt đầu quá trình đo phổ. Để đo được các dặc tính của các phân tử cụ thể, máy khối phổ sẽ chuyển chúng thành các ion. Ion sau khi được tạo thành sẽ được phân tách bằng cách gia tốc và tập trung chúng thành một dòng tia mà sau đó sẽ bị uốn cong bởi một từ trường ngoài. Các ion sau đó sẽ được thu nhận bằng đầu dò điện tử và thông tin tạo ra sẽ được phân tích và lưu trữ trong một máy vi tính.
Phương pháp Sắc ký khí kết hợp với khối phổ (viết tắt là GC-MS) dựa trên cơ sở nối ghép máy sắc kí và khối phổ.GC-MS là một phương pháp với độ nhạy cao được sử dụng trong các nghiên cứu về thành phần các chất trong không khí[11].
Công dụng máy sắc kí khí kết hợp khối phổ GC-MS:
-Phân tích: GC-MS có thể phân tách các hỗn hợp hóa chất phức tạp trong không khí hay trong nước. Ở đây, tốc độ được quyết định bởi tính bay hơi. Chất nào có tính bay hơi cao sẽ di chuyển nhanh hơn chất có tính bay hơi thấp.
- Định lượng: GC-MS có thể định lượng một chất bằng cách so sánh với mẫu chuẩn, là chất biết trước và đã được định lượng chuẩn bằng GC-MS.
- Nhận dạng: Nếu trong mẫu có một chất lạ xuất hiện, khối phổ có thể nhận dạng cấu trúc hóa học độc nhất của nó. Cấu trúc của chất này sau đó được so sánh với một thư viện cấu trúc của các chất đã biết. Nếu không tìm được chất tương ứng trong thư viện, ta thu được một dữ liệu mới và đóng góp vào thư viện cấu trúc sau khi tiến hành thêm các biện pháp để xác định được chính xác loại hợp chất mới này.
CHƯƠNG 2
NGHIÊN CỨU THỰC NGHIỆM