2.2.3.1. Siêu âm: Sử dụng máy siêu âm GE 5002 của Nhật sản xuất, máy Siemens của Đức sản xuất với đầu dị 3,5 MHz .
Tất cả bệnh nhân được các bác sỹ chuyên khoa siêu âm của khoa thăm dị chức năng – siêu âm bệnh viện TW Huế và Bệnh viện trường Đại học Y Dược Huế thực hiện.
Kỹ thuật: cho bệnh nhân nhịn ăn.
Tư thế bệnh nhân: nằm ngữa, nghiêng phải.
Chọn đầu dị sector 3,5 MHz, ngồi ra cịn sử dụng loại đầu dị Mode B-D để khảo sát các dịng chảy trong các mạch máu của gan.
Thực hiện mặt cắt: Mặt cắt dưới sườn phải và trái, mặt cắt dọc, mặt cắt ngang, mặt cắt dọc kẻ sườn, mặt cắt dọc theo rốn và vai phải.
* Chấn đốn hình ảnh gan nhiễm mỡ trên siêu âm: - Độ hút âm gia tăng, gan tăng âm mịn và đồng nhất. - Độ hồi âm tăng.
- Mẫu hồi âm đồng nhất.
- Gan thường to, bờ đều, khơng cĩ hình ảnh các nhân tái tạo. - Khác biệt thành tĩnh mạch cửa và chủ mơ gan giảm.
- Các cấu trúc mạch của gan vùng ngoại vi thường mất. - Hình ảnh cơ hồnh trên siêu âm thường bị mờ hoặc xĩa. - Cĩ hiện tượng giảm âm vang phía sau.
- Trên phổ Doppler tĩnh mạch cửa mất đi hình dạng 3 pha, bị dẹt đi trở thành dạng 1 hoặc 2 pha.
Trường hợp gan nhiễm mỡ khu trú:
- Vùng nhiễm mỡ chỉ ở một vùng ranh giới rõ, cĩ hình dạng bản đồ. - Hiệu ứng chống chỗ khơng cĩ.
- Cấu trúc ống xuyên qua được vùng nhiễm mỡ. * Phân độ gan nhiễm mỡ:
Theo tác giả Hagen - Ansert [14]: dựa vào 2 đặc tính, độ hồi âm gia tăng và độ hút âm gia tăng cĩ thể chia GNM và thành 3 mức độ chính:
Độ 1: Gia tăng nhẹ, độ hồi âm lan toả của chủ mơ, mức độ hút âm chưa đáng kể, nên vẫn cĩ xác định được cơ hồnh và đường bờ của các tĩnh mạch trong gan.
Độ 2: Gia tăng lan toả độ hồi âm và độ hút âm, khả năng nhìn thấy bờ các tĩnh mạch trong gan và cơ là bị giảm nhiều.
Độ 3: Gia tăng rõ rệt mức độ hồi âm, tăng độ hút âm đến mức khơng cịn nhận diện được đường bờ các tĩnh mạch trong gan, cơ hồnh và một phần nhu mơ gan ở phân thuỳ gan phải trên đường cắt dưới sườn.
2.2.3.2. Định lượng Glucose lúc đĩi
Chuẩn bị bệnh nhân:
- Cho đối tượng biết thời gian,quy trình và cách tiến hành xét nghiệm. - Ăn đủ hydrat cacbon (>150g/ngày) ít nhất 3 ngày trước đĩ.
- Ngưng các thuốc cĩ ảnh hưởng đến nồng độ Gluco máu (ví dụ: thuốc lợi tiểu, thuốc chẹn β, thuốc hạ huyết áp...) ít nhất 3 ngày trước đĩ.
-Khơng hút thuốc lá, cà phê, hoạt động thể lực đặc biệt tối thiểu 8-12 giờ trước khi làm nghiệm pháp.
- Nhịn đĩi trước khi làm nghiệm pháp10-14giờ.
Buổi sáng ngủ dậy bệnh nhân chưa ăn gì, lấy máu 2ml cùng thời điểm ở tĩnh mạch cẳng tay tại giường xét nghiệm:
Xét nghiệm Glucose máu theo phương pháp GOD – PAP/ test hồ quang phổ với kít Glucose GOD. FS trên máy AUTOMATIC ANALYZER HITACHI 704 Đức, đơn vị hiển thị mmol/lít tại khoa sinh hĩa bệnh viện TW Huế và Bệnh viện Trường Đại học Y Dược Huế .
Giá trị mong đợi của Glucose theo máy là 3,05 – 6,4 mmol/lít.
Nguyên tắc :
Nguyên lý của việc định lượng Insulin dựa trên sự tranh chấp giữa Insulin được đánh dấu I125 và Insulin chuẩn ( ống mẫu) hay Insulin của bệnh nhân (trong ống huyết tương của bệnh nhân). Với một số lượng giới hạn các vị trí kháng thể kháng Insulin, kháng thể kháng Insulin và Insulin mẫu được cho kết hợp với nhau trước khi ủ với Insulin đánh dấu I125
.
Sau thời kỳ ủ, lượng Insulin đánh dấu thừa được rửa đi. Lượng Insulin được đánh dấu gắn kết với kháng thể tỷ lệ nghịch với lượng Insulin khơng đánh dấu, hiện diện trong huyết tương của bệnh nhân. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Phương pháp:
Để định lượng insulin máu, ngày nay người ta cĩ thể dùng nhiều phương pháp, trong đĩ cĩ hai phương pháp thường được sử dụng nhiều nhất đĩ là: kỹ thuật miễn dịch phĩng xạ (RIA) và kỹ thuật miễn dịch điện hố phát quang (ECLIA).
Phương pháp định lượng insulin máu bằng phương pháp miễn dịch phĩng xạ cĩ nhược điểm là thiếu chính xác vì kết quả bao gồm luơn cả insulin và proinsulin (chất ít cĩ tác dụng sinh học) [45]. Do đĩ, trong nghiên cứu, chúng tơi chọn phương pháp miễn dịch điện hố phát quang để định lượng insulin máu nhằm thu được các kết quả cĩ độ chính xác cao hơn.
Theo phương pháp miễn dịch huỳnh quanh (ECLIA: Electric Chemi- Luminessena Immuno Assay) trên máy ELECS YS 1010 tại khoa sinh hĩa BV TW Huế:
Cách tiến hành: Lấy 2ml máu tĩnh mạch cùng thời điểm với lấy máu để định lượng Glucose. Mẫu máu khơng cần chống đơng, quay ly tâm 3000 vịng/ phút để tách huyết thanh.
Dùng chỉ số Io để chỉ nồng độ Insulin máu đĩi.Đơn vị biểu thị là μU/ml.
Giá trị bình thường lúc đĩi là 2,6 – 26 µU/ml.
2.2.3.4. Xét nghiệm Bilirubin máu
Xét nghiệm Bilirubin được làm trên máy Hitachi 704 bằng phương pháp so màu. Kết quả được đánh giá theo hằng số chuẩn:
Bình thường : Bilirubin trực tiếp: 0-17,1 µmol/l (0-1mg/dl) Bilirubin gián tiếp: 3,4-13,6µm/l (0,2-0,8mg/dl)
Cơng thức chuyển đổi đơn vị đo Bilirubin từ đơn vị quy ước thơng thường sang đơn vị quốc tế (SI) và ngược lại:
17,1
/ 0,0585 /
mg dl
X ¬ →Y mol lµ [6],[11].
2.2.3.5. Định lượng SGOT, SGPT trong huyết thanh
* Nguyên lý SGOT: cho huyết thanh bệnh nhân tác dụng với cơ chất, định lượng Oxaloacetate tạo thành.
α- oxyglutarate + L- aspartate↔ L- Glutamate+ Oxaloaxetate.
*Nguyên lý SGPT: cho huyết thanh bệnh nhân tác dụng với cơ chất, định lượng Pyruvate tạo thành.
Alanin + α cetoglutarate ↔ pyruvate + L-glutamate Thực hành và kết quả:
Lấy 2ml máu tĩnh mạch gởi phòng xét nghiệm sinh hóa, và đo bằng máy Hitachi 704. Đơn vị biểu thị là UI / lít.
So sánh với kết quả chuẩn (của máy ở nhiệt đợ 37°C): Đới với nam : SGOT= 15-37 UI/ lít ; SGPT= 46 UI/ lít Đới với nữ : SGOT= 10-35 UI/ lít ; SGPT= 31 UI/ lít
2.2.3.6 .Định lượng Lipid máu: [13]
Định lượng CT toàn phần, TG, HDL-C trên máy sinh hóa Hitachi 704 và thuớc thử Boehringer Mannheim tại khoa sinh hóa bệnh viện Trung ương Huế và Bệnh viện trường Đại học Y Dược Huế và Bệnh viện Trường Đại học Y Dược Huế.
Chuẩn bị: bệnh nhân khơng được ăn những thức ăn có chứa mỡ, khơng uớng các thức uớng có cờn, rượu bia...
Đới tượng được lấy máu buởi sáng sau nhịn ăn 10-12 giờ.
Lấy 2ml máu tĩnh mạch để đơng tự nhiên, ly tâm tại chở tách huyết tương.
Bảo quản mẫu máu ở 0 – 4 0 C, khơng lưu giữ quá 2 ngày.
+ Nguyên lý định lượng Cholesterol tồn phần: Cholesterol được xác định sau khi thuỷ phân và oxy hố với enzym. Chất chỉ thị quinoneimin được tạo thành từ hydrogen peroxid và 4 – aminophenazon với sự cĩ mặt của phenol và peroxidase.
+ Nguyên lý dịnh lượng Triglycerid: Triglycerid được xác định sau khi thuỷ phân bằng lipase. Chất chỉ thị quinoneimin được tạo thành từ hydrogen peroxid và 4 – aminophenazon với sự xúc tác của peroxidase. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
+ Nguyên lý định lượng HDL – Cholesterol: Cholesterol sau khi được kết tủa bởi acid phosphotungstic và magnesiclorid, tiếp tục định lượng giống như CT.
+ Nguyên lý định lượng LDL – Cholesterol: LDL- C được tính theo cơng thức Friedel Wald:
LDL-C= Cholesterol tồn phần - (HDL-C +TG)/ 2.5 (mmol/l) Với điều kiện TG ‹4.6 mmol/l hay ‹400mg/dl)
Bảng tóm tắt phương pháp định lượng các thơng sớ Lipid huyết thanh: Xét nghiêm Phương pháp Phản ứng
TC Phương pháp so màu dùng enzyme CHOP-PAP TG Phương pháp so màu dùng enzyme GOP-PAP HDL-C Phương pháp so màu dùng enzyme CHOP-PAP
LDL-C được tính theo cơng thức Fried Wald:
Tính theo mmol/lít : LDL-C=CT - HDL-C – TG/2,2 Tính theo mg/dl : LDL-C=CT - HDL-C – TG/5
Với điều kiện TG < 4,6 mmol/l hay <400mg/dl.
Sớ liệu lipid huyết thanh thu được của các đới tượng nghiên cứu được so sánh với bảng trị sớ bình thường Lipid máu của hợi tim mạch Việt nam 1998: Lipoprotein mmol/l ± mg/dl CT 4,37 ± 0,41 169 ± 15 TG 1,68 ± 0,22 147 ± 20 LDL-C 2,45 95,7 HDL-C 1,61 ± 0,11 45,1 ± 0,43 CT/HDL-C 3,8 ± o,55 15,7 ± 0,43
Khuyến cáo của hợi tim mạch Việt nam: Có rới loạn lipid khi có mợt trong các chỉ sớ sau đây ở mức như bảng này:
Lipoprotein mmol/l
CT ≥ 5,2
TG ≥ 2,3
LDL-C ≥ 3,12
HDL-C ≤ 0,9