5. Định tính nhóm đường và acid amin [4]
2.2.1.3.Phương pháp định lượng
- Định lượng phân đoạn chất tan trong ethyl acetat theo phương pháp cân:
Mô tả phương pháp:
Định lượng phân đoạn chất tan trong ethyl acetat trong dược liệu:
Cân chính xác khoảng 4g dược liệu xay nhỏ (P gam) đã xác định độ ẩm (W %), cho vào bình cầu 500ml. Thêm 200ml methanol, tiến hành chiết siêu âm trong 30 phút. Cân khối lượng bình cùng dung mơi trước và sau khi chiết. Bổ sung dung môi cho đến khối lượng ban đầu. Lọc lấy 100ml dịch lọc (tương đương 2g dược liệu). Cô cạn trên bếp cách thủy đến cắn. Hòa cắn trong 20ml nước, chuyển vào bình lắng gạn. Lắc với đồng lượng ether dầu vài lần đến khi dịch chiết ether dầu hết màu. Pha nước còn lại được lắc tiếp với đồng lượng ethyl acetat. Gạn lớp ethyl acetat vào cốc đã sấy đến khối lượng không đổi. Tiếp tục làm như vậy đến khi dịch chiết ethyl acetat không màu. Cô dịch ethyl acetat trên bếp cách thủy đến cắn. Sấy cốc cùng cắn trong tủ sấy ở 1050C trong 3 giờ. Để cốc trong bình hút ẩm 30 phút và cân nhanh. Tính khối lượng cắn (a gam).
Hàm lượng chất chiết được trong ethyl acetat được tính theo cơng thức: a × 20000
X(%) =
P × (100 – W)
Trong đó: X: Hàm lượng chất chiết được bằng ethyl acetat trong dược liệu (%) P: Khối lượng bột dược liệu đã cân để định lượng (g)
W: Độ ẩm của dược liệu (%)
- Định lượng phân đoạn chất tủa trong hỗn hợp aceton - diethylether (4:1) trong dược liệu, trong cao bán thành phẩm và trong viên chữa thấp khớp bằng phương pháp cân.
Mô tả phương pháp:
Định lượng phân đoạn chất tủa trong hỗn hợp aceton - diethylether (4:1) trong
dược liệu:
Cân chính xác khoảng 10 g bột dược liệu (P gam) đã xác định độ ẩm (W %), cho vào túi lọc rồi chiết Soxhlet với methanol đến khi dịch chiết không màu. Dịch chiết methanol được thu hồi dung môi dưới áp suất giảm bằng máy cất quay cho tới khi còn khoảng 40ml. Để nguội, lọc qua giấy lọc. Tráng giấy lọc bằng 10ml methanol. Cơ cịn khoảng 30ml. Rót từ từ vào 300ml hỗn hợp aceton – diethylether (4:1). Để cốc vào tủ lạnh qua đêm. Gạn lấy tủa. Để tủa ngồi khơng khí cho hay hơi hết dung mơi, hịa lại trong 20ml methanol, lọc, tráng giấy lọc bằng 10ml methanol. Rót từ từ dịch methanol vào 300ml hỗn hợp aceton – diethylether (4:1), để lạnh qua đêm. Gạn lọc lấy tủa. Sấy tủa trong tủ sấy chân không ở nhiệt độ 600C đến khối lượng không đổi. Cân và tính hàm lượng chất tủa trong aceton-diethyl ether (4:1) theo cơng thức sau:
a × 10000 X(%) =
P × (100 – W)
Trong đó: X: Hàm lượng chất tủa trong aceton-diethyl ether (4:1) trong dược liệu (%)
P: Khối lượng bột dược liệu đã cân để định lượng (g) a: Khối lượng của tủa (g)
W: Độ ẩm của dược liệu (%)
Định lượng phân đoạn chất tủa trong hỗn hợp aceton - diethylether (4:1) trong
cao bán thành phẩm:
Cân chính xác khoảng 0,3g chế phẩm cho vào bình nón dung tích 100ml, thêm 40ml methanol, lắc siêu âm 30 phút, lọc qua giấy lọc vào cốc có mỏ có dung tích 100ml, rửa bình nón và giấy lọc bằng 10ml methanol. Gộp dịch rửa vào cốc có mỏ trên. Cơ dịch chiết methanol trên cách thủy đến còn khoảng 5ml, để nguội. Thêm 50ml hỗn hợp aceton- diethylether (4:1), khuấy đều, để lắng qua đêm ở nhiệt độ 2-30C. Lọc nhanh tủa vào giấy lọc (đã sấy ở 1050C trong 3 giờ và cân xác định
khối lượng). Tráng cốc và tủa bằng 10ml hỗn hợp aceton- diethylether (4:1). Sấy giấy và tủa ở 1050C trong 3 giờ, lấy ra để trong bình hút ẩm 15 phút, cân nhanh xác định khối lượng. Hàm lượng các chất tủa trong hỗn hợp aceton - diethylether (4:1) được tính theo cơng thức:
a × 10000 X(%) =
P × (100 – W) Trong đó: Trong đó:
P: Khối lượng cao đã cân để định lượng (g) a: Khối lượng của tủa (g)
W: Độ ẩm của cao (%)
Định lượng phân đoạn chất tủa trong hỗn hợp aceton - diethylether (4:1) trong
viên chữa thấp khớp:
Lấy 20 viên, cạo bỏ lớp bao ngoài, cân và xác định khối lượng trung bình viên, nghiền mịn, trộn đều. Cân chính xác khoảng 0,5g bột viên cho vào bình nón dung tích 100ml, thêm 40ml methanol, lắc siêu âm 30 phút, lọc qua giấy lọc vào cốc có mỏ có dung tích 100ml, rửa bình nón và giấy lọc bằng 10ml methanol. Gộp dịch rửa vào cốc có mỏ trên. Cơ dịch chiết methanol trên cách thủy đến còn khoảng 5ml, để nguội. Thêm 50ml hỗn hợp aceton- diethylether (4:1), khuấy đều, để lắng qua đêm ở nhiệt độ 2-30C. Lọc nhanh tủa vào giấy lọc (đã sấy ở 1050C trong 3 giờ và cân xác định khối lượng). Tráng cốc và tủa bằng 10ml hỗn hợp aceton- diethylether (4:1). Sấy giấy và tủa ở 1050C trong 3 giờ, lấy ra để trong bình hút ẩm 15 phút, cân nhanh xác định khối lượng.
Hàm lượng các chất tủa trong hỗn hợp aceton- diethylether (4:1) trong mỗi viên được tính theo cơng thức: (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
a x MTB X(g/v) = --------------- P Trong đó:
a: Khối lượng tủa thu được (g)
MTB: Khối lượng trung bình viên đã loại bỏ lớp bao (g). P: Khối lượng mẫu đem thử (g)