- Mẫu 9.1: tác dụng ức chế viêm ở mức độ trung bình (ức chế 55,63%).
3.2.4.1. Xây dựng quy trình chiết xuất cao bán thành phẩm từ bài thuốc quy mô phịng thí nghiệm
phịng thí nghiệm
Từ kết quả nghiên cứu sàng lọc về tác dụng chống viêm cấp và tác dụng giảm
đau của các chế phẩm chiết xuất theo các phương pháp khác nhau có thể thấy rằng
phương án chiết xuất bài thuốc bằng nước theo cách cổ truyền và loại bớt phần không tan trong cồn 50% trong cao nước để thu lấy sản phẩm bán thành phẩm thuốc là
phương án hợp lý nhất.
Tiến hành lấy từng vị thuốc trong bài thuốc theo đúng tỷ lệ khối lượng như trong
đơn (loại bỏ đường), trộn đều và xay thành bột thô. Lấy 100g bột dược liệu bài thuốc,
thêm nước đến ngập dược liệu (1000 ml). Chiết ở 1000C 2 giờ. Gạn, lọc dịch chiết. Bã thu được chiết tiếp 2 lần, mỗi lần với 700ml nước trong 1 giờ. Gộp dịch chiết của 3 lần chiết, cô đến cắn. Sấy cắn trong tủ sấy chân không ở nhiệt độ 600C đến khối
lượng không đổi. Xác định khối lượng cao nước khô kiệt thu được và hàm lượng phân
đoạn chất tủa trong hỗn hợp aceton – diethylether (4:1) trong cao. Lấy chính xác
khuấy kỹ, để lắng tủa. Gạn, lọc lấy dịch chiết cồn. Cô dịch chiết đến cắn. Sấy cắn
trong tủ sấy chân không ở nhiệt độ 600C đến khối lượng không đổi. Xác định khối
lượng cao khô thu được và hàm lượng phân đoạn chất tủa trong hỗn hợp aceton – diethylether (4:1) trong cao.
Kết quả so sánh hiệu suất chiết xuất và hàm lượng phân đoạn chất tủa trong hỗn hợp aceton – diethylether (4:1) trong cao chiết nước và trong chế phẩm cao tinh chế
được thể hiện ở bảng 3.8.
Bảng 3.8. Hiệu suất chiết xuất và hàm lượng phân đoạn chất tủa trong hỗn hợp aceton – diethylether (4:1) (GLTP) trong cao chiết nước và trong chế phẩm cao tinh chế
Mẻ chiết 1 2 3 Trung bình
Khối lượng dược liệu (g) 100 100 100
Khối lượng khô kiệt (g) 16,783 15,961 16,249
Hiệu suất chiết (%) 16,78 15,96 16,25 16,33
Cao nước
% GLTP 8,55 8,47 8,76 8,59
Khối lượng cao nước
khô kiệt (g) 8,377 8,012 8,120
Khối lượng cao tinh chế khô kiệt (g)
2,611 2,529 2,552
Hiệu suất chiết so với
cao nước (%) 31,17 31,56 31,43 31,39
Hiệu suất chiết so với
dược liệu (%) 5,23 5,04 5,11 5,13 Cao tinh chế % GLTP 24,46 23,65 25,27 24,60 Nhận xét:
- Hiệu suất chiết cao nước bài thuốc là 15,96 - 16,78% so với dược liệu, hàm lượng phân đoạn chất tủa trong hỗn hợp aceton – diethylether (4:1) trong cao nước là 8,47 – 8,76%.
- Hiệu suất chiết cao tinh chế là 5,04 – 5,23% so với dược liệu, hàm lượng phân đoạn chất tủa trong hỗn hợp aceton – diethylether (4:1) trong cao tinh chế là
23,65 – 25,27%.
- Sau khi tinh chế cao nước bằng cách tủa cồn theo tỷ lệ 1c : 1n, lượng cao tinh chế giảm đi chỉ còn bằng 31,17 – 31,56% so với cao nước bài thuốc còn hàm lượng chất tủa trong hỗn hợp aceton – diethylether (4:1) trong cao tinh chế tăng lên. Cách tinh chế loại tạp này vẫn giữ được 88,47 – 92,31% lượng chất tủa trong hỗn hợp
aceton – diethylether (4:1) trong cao nước bài thuốc.
Thiết lập các thông số của quy trình chiết xuất cao bán thành phẩm quy mơ phịng thí nghiệm:
Sau khi khảo sát các điều kiện chiết xuất phù hợp (kích thước dược liệu, tỷ lệ nước/ dược liệu, thời gian chiết), chúng tôi đã xây dựng quy trình chiết xuất cao bán thành phẩm từ bài thuốc theo hướng có thể áp dụng được để chiết xuất trên dây
chuyền thiết bị pilot tại Khoa Công nghệ chiết xuất, Viện Dược liệu. Các thông số của quy trình chiết xuất quy mơ phịng thí nghiệm đã được xây dựng như sau:
- Xử lý dược liệu trước khi chiết: Cân các dược liệu theo tỷ lệ của bài thuốc. Các dược liệu từ rễ, thân, lá cây được cắt, thái hoặc băm chặt thành từng đoạn 2-3cm. Vảy tê tê được nung và tôi dấm.
- Chiết nước: Nhiệt độ chiết: 1000C, thời gian chiết: chiết 2 lần, mỗi lần 2 giờ tỷ lệ nước/ dược liệu: lần chiết đầu 10/1, lần chiết sau 7/1.
- Lọc dịch chiết qua vải, cô dịch chiết dưới áp suất giảm đến cao lỏng 1:1 (1 lít dịch cho 1kg dược liệu).
- Tủa cồn: Thêm cồn 96% vào cao lỏng trên theo tỷ lệ cồn : cao lỏng = 1:1,
khuấy kỹ và để lắng qua đêm.
- Gạn, lọc lấy dịch chiết cồn. Cô dịch chiết cồn đến cắn. - Sấy cắn trong tủ sấy chân không < 700C đến cao khơ.
Khảo sát độ ổn định của quy trình chiết xuất bài thuốc quy mơ phịng thí nghiệm
Quy trình chiết xuất bài thuốc thiết lập ở trên đã được áp dụng để chiết 5 mẻ,
trong hỗn hợp aceton – diethylether (4:1) trong các mẻ chiết được trình bày trong
bảng 3.9.
Bảng 3.9. Kết quả hiệu suất chiết xuất và hàm lượng phân đoạn chất tủa trong hỗn hợp aceton – diethylether (4:1) (GLTP) trong các mẻ chiết ở phịng thí nghiệm
Mẻ chiết dược liệu (kg) Khối lượng sản phẩm (g) Khối lượng Hiệu suất chiết (%) Hàm lượng GLTP (%)
Độ ẩm của cao (%) 1 1,0 51,5 5,15 22,83 2,30 2 1,0 50,9 5,09 23,44 1,98 3 1,0 49,8 4,98 22,79 2,10 4 1,0 51,4 5,14 24,32 2,14 5 1,0 50,6 5,06 25,56 2,43 Trung bình 1,0 50,8 5,08 23,79 2,19
Kết quả thu được với 5 mẻ chiết, mỗi mẻ 1kg dược liệu cho thấy quy trình chiết xuất khá ổn định, hiệu suất chiết xuất sản phẩm trung bình là 5,08% so với dược liệu. Hàm lượng phân đoạn chất tủa trong hỗn hợp aceton – diethylether (4:1) trung bình là 23,79%. Sản phẩm thu được dưới dạng bột khô màu nâu, dễ hút ẩm và chảy dẻo.