chủng Bacillus subtilis
Huyền dịch tế bào của 3 chủng B. subtilis B5, H12 và VI sau khi chiếu xạ ở các liều khác nhau trong dải liều 0-3000 Gy ngay lập tức đƣợc trải lên môi trƣờng NA có bổ sung streptomycin nồng độ 20 µg/ml (đối chứng dƣơng của lô thí nghiệm là dịch nuôi cấy sau chiếu xạ đƣợc trải lên môi trƣờng NA không kháng sinh). Quan sát và thống kê số lƣợng khuẩn lạc mọc lên từ sau 1-3 ngày để tìm kiếm những khuẩn lạc vừa kháng xạ vừa kháng kháng sinh. So sánh kết quả thu đƣợc với số lƣợng khuẩn lạc sống sót sau chiếu xạ ở mỗi liều để tính toán tần số đột biến kháng streptomycin 20 µg/ml của các chủng B. subtilis ở mỗi liều chiếu xạ (Hình 3.8 ).
Hình 3.8. Tần số đột biến kháng streptomycin 20 µg/ml của 03 chủng B. subtilis
Trong tự nhiên, tần số đột biến phụ thuộc vào điều kiện phát triển của vi sinh vật và nằm trong khoảng từ 10-10 đến 10-6. Tần số này có thể tăng một cách rõ rệt bằng cách sử dụng các tác nhân gây đột biến thực nghiệm và thực tế có thể lên đến 10-5 đến 10-1 (Davati và cs, 2013).
Cả 3 chủng B. subtilis B5, H12 và VI sau chiếu xạ đều không xuất hiện bất kỳ một khuẩn lạc đột biến kháng kháng sinh nào trên các đĩa thạch NA có bổ sung 20 µg/ml streptomycin đƣợc cấy huyền dịch tế bào chiếu xạ liều lớn hơn 1200 Gy. Sau 24-48 giờ nuôi cấy, chỉ có những khuẩn lạc đột biến từ các tế bào đƣợc chiếu xạ ở liều dƣới 1000 Gy xuất hiện với số lƣợng khác nhau ở mỗi chủng vi khuẩn nghiên cứu. Có thể thấy rằng tần số đột biến tăng khi tăng liều bức xạ. Tần số biến lớn nhất là 1,61x10-3, 1,68x10-2, 2,22x10-2 tƣơng ứng lần lƣợt với các chủng B5, H12 và VI gây ra bởi liều chiếu xạ 1000 Gy. Tần số nhỏ hơn 3,09x10-6, 5,52x10-5, 7,35x10-5 gây ra bởi chiếu xạ ở 100 Gy. Kết quả cũng cho thấy tần số đột biến tự phát của các chủng B5, H12 và VI lần lƣợt là 1,78 x10-6, 1,52x10-6 và 6,67x10-6. Những kết quả thu đƣợc chứng tỏ khả năng kháng streptomycin của các chủng B. subtilis đã đƣợc cải thiện nhờ xử lý chiếu xạ.