Tế bào khả biến A. tumefaciens được chuẩn bị bằng HEPES (N-2- hydroxyethylpiperazine-N’-2-ethanesulfonic acid) 1 mM pH 7,0 để dùng cho biến nạp theo phương pháp xung điện. Đầu tiên, một khuẩn lạc đơn A. tumefaciens được nuôi cấy trong 2 mL môi trường YEP ở 28°C, 6 giờ. Sau đó, 50 µL dịch vi khuẩn trên nuôi cấy tiếp ở 28°C qua đêm trên 50 mL môi trường YEP lỏng đến khi OD660nm đạt 1-1,5. Tiếp theo, dịch vi khuẩn được làm lạnh mẫu trên đá 15 phút rồi ly tâm 5000 vòng/phút trong 20 phút để thu cặn tế bào. Tế bào được hòa tan trong 10 mL 1 mM HEPES lạnh và ủ trên đá 15 phút; sau đó ly tâm ly tâm 5000 vòng/phút trong 20 phút và bỏ dịch. Bước này được thực hiện hai lần. Sau đó, bổ sung 10 mL 10% glycerol vào ống tế bào, hòa tan tủa và ủ trên đá 15 phút; sau đó ly tâm ly tâm 5000 vòng/phút trong 20 phút và bỏ dịch. Tủa tế bào được hòa trong 500-700 µL 10% glycerol và chia 45 µL dịch tế bào vào mỗi ống ly tâm 1,5 mL. Các ống tế bào khả biến được làm lạnh nhanh trong nitơ lỏng và giữ tế bào ở -80°C.
Để biến nạp plasmid vào tế bào khả biến A. tumefaciens bằng phương pháp xung điện, trước tiên tế bào khả biến A. tumefaciens được làm tan bằng cách đặt ống tế bào trên đá 15 phút. 2 µL plasmid tái tổ hợp được bổ sung vào ống chứa tế bào khả biến, sau đó trộn đều và đặt ống trên đá trong 5 phút. Hỗn hợp được chuyển sang cuvette đã được làm lạnh từ trước; lau sạch bên ngoài cuvette. Tế bào khả biến được xung điện ở 5ms; hiệu điện thế 2,5 kV; điện trở 400Ω. Sau đó, bổ sung ngay 1 mL môi trường SOC lạnh vào cuvette, đảo đều và chuyển dịch khuẩn sang ống vô trùng, lắc ở 28°C trong 1,5 giờ. Dịch nuôi được cấy trải trên môi trường YEP đặc có bổ sung kháng sinh chọn lọc. Khuẩn lạc mọc sau hai ngày nuôi đĩa vi khuẩn ở 28°C.