Phần 4 Kết quả và thảo luận
4.4. Kết quả đánh giá thời hạn bảo quản của vacxin
4.4.2. Kết quả kiểm tra tính vô trùng của vacxin trong thời gian bảo quản
Vô trùng là yêu cầu cơ bản nhất của một vacxin. Vacxin được bảo quản trong thời gian dài vẫn cần được đảm bảo yêu cầu về tính vô trùng. Để đánh giá tính vô trùng của vacxin Kyoto Biken Porcine Parvovirus trong thời gian bảo quản, tiến hành lấy mẫu vacxin từ các lô 74, 75, 76, mỗi lô lấy ngẫu nhiên 2 lọ vacxin tại các thời điểm 0, 12, 24 và 30 tháng để kiểm tra.
Phương pháp kiểm tra vô trùng được thực hiện như mô tả ở mục 3.5.1. Thử nghiệm được thực hiện trong buồng cấy vô trùng cấp độ A đặt trong phòng sạch cấp độ B. Phòng có áp lực dương, được giám sát liên tục về nhiệt độ, độ ẩm, áp suất.
Mỗi lọ vacxin được cấy trực tiếp vào 2 loại môi trường là TGC và SCD, mỗi loại môi trường cấy trên 4 ống thử, 2 ống thử cấy 1ml vacxin và 2 ống thử cấy 0.5ml vacxin. Các ống môi trường TGC sau khi cấy được nuôi ở nhiệt độ 36 – 38oC trong 14 ngày. Các ống môi trường SCD sau khi cấy được nuôi ở nhiệt độ 20 – 25oC trong 14 ngày.
Sau khi nuôi cấy, tiến hành đọc kết quả ở các thời điểm 3 – 5 ngày, 7 – 9 ngày, 14 ngày sau khi cấy bằng các so sánh màu và độ đục của ống đã cấy mẫu vacxin và ống đối chứng cùng loại.
Kết quả dương tính khi môi trường tạo váng, đục hoặc lắng cặn.
Kết quả âm tính khi môi trường không có sự thay đổi về màu sắc và độ đục, giống ống đối chứng.
Vacxin được đánh giá là vô trùng khi tất cả các ống thử đều cho kết quả âm tính sau 14 ngày nuôi cấy.
Kết quả theo dõi thử nghiệm tính vô trùng của vacxin tại các thời điểm được thể hiện ở bảng sau:
Bảng 4.9. Kết quả đánh giá tính vô trùng của vacxin trong thời gian bảo quản
Số lô
Thời gian bảo quản (tháng)
Môi trường thử nghiệm
TGC SCD 74 0 0/8/2* 0/8/2 12 0/8/2 0/8/2 24 0/8/2 0/8/2 30 0/8/2 0/8/2 75 0 0/8/2 0/8/2 12 0/8/2 0/8/2 24 0/8/2 0/8/2 30 0/8/2 0/8/2 76 0 0/8/2 0/8/2 12 0/8/2 0/8/2 24 0/8/2 0/8/2 30 0/8/2 0/8/2
* : Số ống thử nghiệm dương tính đối với vi khuẩn và nấm/số ống thử nghiệm được cấy mẫu vacxin/ số lọ vacxin thử nghiệm
Bảng 4.9 cho thấy: Ở tất cả các thời điểm tiến hành kiểm tra trên cả 3 lô vacxin, không có ống thử nào cho kết quả dương tính trên 2 loại môi trường TGC và SCD. Tức là không có bất kỳ ống thử nào xuất hiện hiện tượng nổi váng, lắng cặn hoặc môi trường trở nên đục tại các thời điểm theo dõi. Tất cả các ống thử đều trong, không thay đổi màu sắc so với trước khi cấy mẫu (giống ống đối chứng). Như vậy, có thể kết luận: các mẫu vacxin thử nghiệm không bị nhiễm tạp khuẩn và nấm, vacxin đảm bảo yêu cầu vô trùng trong thời gian bảo quản đến 30 tháng.