Phần 2 Tổng quan tài liệu
2.3. Hiểu biết về bệnh do Porcine Epidemic Diarrhea Virus (PEDV)
2.3.10. Định lƣợng virus
Định lƣợng virus là xác định số lƣợng virus trong một đơn vị cụ thể để xác định nồng độ virus. Đây là một biến quan trọng trong việc sản xuất vacxin, sản xuất protein tái tổ hợp bằng cách sử dụng vecter virus, nghiên cứu về đặc tính sinh học hay những nghiên cứu khác về virus. Virus đƣợc định lƣợng và điều
chỉnh ở MOI (Multiplicity Of Infection) nhất định để tối ƣu hóa sản lƣợng sản xuất và đáp ứng nhu cầu thay đổi không ngừng các ứng dụng khác.
Trong nghiên cứu về đặc tính sinh học của virus, định lƣợng virus xác định TCID50 (50% Tissue Culture Infective Dose-liều gây nhiễm 50% tế bào) có vai trị quan trọng trong việc xác định lƣợng virus cần dùng để gây nhiễm tại MOI thích hợp, đảm bảo việc so sánh đặc tính sinh trƣởng của các virus khác nhau một cách khách quan và chính xác. Ở các bƣớc tiếp theo, xác định quy luật nhân lên của virus trên môi trƣờng tế bào, log10TCID50 là biến số để xây dựng.
TCID50 là một biến số sử dụng phổ biến thể hiện định lƣợng của virus, là số virus cần thiết để gây ra 50% CPE cho môi trƣờng tế bào gây nhiễm virus. Khảo nghiệm về TCID50 đƣợc ứng dụng phổ biến trong các nghiên cứu lâm sàng phải xác định liều gây chết của virus. Khi sử dụng cho nuôi cấy tế bào, các tế bào đƣợc ủ với virus để virus gây nhiễm và nhân lên thêm. Sau đó, căn cứ vào tỷ lệ chết của tế bào bị nhiễm virus ở những giếng có độ pha lỗng virus khác nhau mà tính tốn ra TCID50.
MOI (Multiplicity Of Infection) là tỷ lệ giữa tác nhân gây nhiễm với đích gây nhiễm. Trong trƣờng hợp gây nhiễm virus vào tế bào thì MOI lúc này đƣợc xác định là tỷ lệ giữa lƣợng virus và số tế bào trong một