MeOH
Khảo sát ban đầu về hoạt tính sinh học của lá cây Lá giang, chúng tôi khảo sát hoạt tính kháng vi khuẩn và nấm của cao chiết MeOH. Việc khảo sát này cũng giúp định hướng khảo sát các chất có trong Lá giang và định hướng
nghiên cứu sâu về hoạt tính sinh học của nó. Kết quả nghiên cứu được trình bày ở Bảng 3.10.
Bảng 3.10. Kết quả kháng vi khuẩn và nấm của cao chiết MeOH
Chủng vi sinh vật và nấm
Nồng độ ức chế 50% sự phát triển của vi khuẩn và nấm - IC50 (µg/mL) Gram (+) Staphylococcus aureus Bacillus subtilis Lactobacillus fermentum >128 >128 >128 Gram (-) Salmonella enteric Escherichia coli Pseudomonas aeruginosa >128 >128 >128 Nấm Candida albican >128
Các chủng vi sinh vật được sử dụng gồm: vi khuẩn Gram (+) Bacillus subtillis, Staphylococcus aureus Lactobacillus fermentum; vi khuẩn Gram (-)
Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enterica; nấm
Candida albicans. Các đối chứng dương tính là Streptomycin cho vi khuẩn (+), Penicillin cho vi khuẩn Gram (-), nystatin cho nấm mốc và nấm men, kết quả ở Bảng 3.10 cho thấy, chất phân lập có nồng độ ức chế 50% sự phát triển của vi khuẩn và nấm có giá trị IC50 (µg/mL) đều lớn hơn 128 µg/mL. Kết quả này cho thấy cao chiết MeOH không thể hiện được hoạt tính kháng vi khuẩn và kháng nấm ở các nồng độ nghiên cứu.
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN
Từ những kết quả thu được trong quá trình nghiên cứu đề tài cho phép chúng tôi đưa ra những kết luận chính như sau:
1. Đã xác định được các lớp chất có mặt trong lá của cây Lá giang gồm: Alkaloid, triterpenoid, các hợp chất phenol, steroid.
2. Đã nghiên cứu phân lập được hợp chất methyl-3,4-dihydroxybenzoate trong lá của cây Lá giang (Aganonerion polymorphum Pierre ex Spire) thu hái tại Tuy phước, Bình Định bằng phương pháp sắc ký cột từ cao chiết EA. Hợp chất methyl-3,4-dihydroxybenzoate đã được xác định bằng các phương pháp phổ: 1H NMR, 13C NMR, DEPT, MS và so sánh với tài liệu đã công bố. Kết quả này là đóng góp mới về thành phần hóa học của cây Lá giang.
3. Đã xây dựng được quy trình phân lập hợp chất chất methyl-3,4- dihydroxybenzoate từ lá của cây Lá giang thông qua 2 bước chiết và 3 bước sắc ký cột.
4. Đã khảo sát các yếu tố ảnh hưởng đến lượng cao chiết MeOH, khối lượng mẫu lá của cây Lá giang khảo sát cố định là 20 g. Kết quả cho hàm lượng tốt nhất theo điều kiện khảo sát là:
+ Phương pháp ngâm chiết: Thời gian ngâm chiết là 72 giờ và tỉ lệ khối lượng bột lá và thể tích dung môi MeOH là 1 : 10 (g/mL).
+ Phương pháp chiết soxhlet: Thời gian đun mẫu là 4,5 giờ cho 20 g mẫu.
+ Phương pháp chiết siêu âm: thời gian chiết là 30 phút và tỉ lệ khối lượng bột lá và thể tích dung môi MeOH là 1 : 7 (g/mL).
5. Đã khảo sát hoạt tính kháng vi khuẩn và kháng nấm của cao chiết MeOH trên một số vi khuẩn và nấm: Vi khuẩn Gram (+) Bacillus subtillis,
Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enterica; nấm Candida albicans. Kết quả cao chiết MeOH của lá cây Lá giang không có hoạt tính kháng vi khuẩn và kháng nấm ở các nồng độ nghiên cứu.
KIẾN NGHỊ
Qua quá trình nghiên cứu, chúng tôi nhận thấy do hạn chế về mặt thời gian, trang thiết bị cũng như điều kiện nên các thí nghiệm khảo sát vẫn chưa được thực hiện hoàn chỉnh. Để hoàn thiện hơn, cần khảo sát thêm với các loại dung môi để chọn được dung môi nào hòa tan tốt các chất có trong bột lá của cây Lá giang. Để hoàn thiện hơn chúng tôi có một số kiến nghị sau:
- Khảo sát thêm với từng loại cao chiết để có kết quả tốt hơn.
- Nghiên cứu và phân lập tiếp các chất có trong từng phân đoạn để đánh giá thành phần và hàm lượng một cách cụ thể hơn.
- Nghiên cứu khảo sát sâu hơn hoạt tính sinh học của hợp chất phân lập được.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
[1] Nguyễn Tiến Bân, Nguyễn Quốc Bình, Vũ Văn Cẩn, Lê Mộng Chân, Nguyễn Ngọc Chính, Vũ Văn Dũng, Nguyễn Văn Dư, Trần Đình Đại, Nguyễn Kim Đào, Nguyễn Thị Đỏ, Nguyễn Hữu Hiến, Nguyễn Đình Hưng, Dương Đức Huyến, Nguyễn Đăng Khôi, Nguyễn Khắc Khôi, Trần Kim Liên, Vũ Xuân Phương, Hoàng Thị Sản, Nguyễn Văn Tập, Nguyễn Nghĩa Thìn (2000), Tên cây rừng Việt Nam, Nhà xuất bản Nông nghiệp, pp. 54.
[2] Lê Anh Hào, Nguyễn Tiến Vững (2011), Phân lập và xác định cấu trúc của adynerin, acid betulinic và betulin từ lá trúc đào, Tạp chí Dược học, 423 (51), pp. 19-22.
[3] Lê Anh Hào, Nguyễn Tiến Vững (2012), Phân lập và xác định cấu trúc của Δ16-dehydroadynerigenin và Δ16-digitoxigenin từ hoa cây trúc đào, Tạp chí Hóa học, 4A50, pp. 174-176.
[4] Lê Anh Hào, Nguyễn Tiến Vững, Đào Công Minh (2013), Phân lập và xác định cấu trúc của quercetin và kaempferol từ hoa trúc đào, Tạp chí Hóa học, 2AB51, pp. 314-316.
[5] Đỗ Tất Lợi (2006), Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, NXB Y học, pp. 586-589.
[6] Nguyễn Kim Phi Phụng (2007), Phương pháp cô lập hợp chất hữu cơ, NXB Đại học Quốc gia thành phố Hồ Chí Minh, 73-150.
[7] Nguyễn Lê Tuấn, Diệp Thị Lan Phương, Võ Thị Thanh Tuyền, Huỳnh Minh Hùng, Nguyễn Thị Nghĩa, Võ Văn Quân, Nguyễn Thị Việt Nga (2017), Giáo trình Hóa học các hợp chất thiên nhiên, NXB Đại học Quốc gia thành phố Hồ Chí Minh.
[8] Lưu Hồng Trường, Lý Ngọc Sâm, Nguyễn Vinh Hiển (2007), Thực vật hữu ích chọn lọc từ núi Tà Kóu, khu BTTN Tà Kóu, NXB Tổng hợp TP Hồ Chí Minh, pp. 8-9.
[9] Nguyễn Tiến Vững, Lê Anh Hào (2012), Phân lập và xác định cấu trúc của gitoxigenin-3-O-α-L-oleandroside và acid 3,27-dihydroxyurs-12-en- 28-oic từ lá trúc đào, Tạp chí Dược học, 433 (52), pp. 23-25.
[10] Nguyễn Tiến Vững, Lê Anh Hào, Vũ Đức Lợi, Bùi Thị Xuân, Nguyễn Thị Thu Lan (2016), Chiết xuất, phân lập một số hợp chất từ vỏ thân cây trúc đào(Nerium Oleander L), Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, 32 (2), pp. 52-57.
[11] Aguiar, A. C., Cunha, A. C., Ceravolo, I. P., Goncalves, R. A., Oliveira, A. J., Krettli, A. U. (2015), Aspidosperma (Apocynaceae) plant cytotoxicity and activity towards malaria parasites. Part II: experimental studies withAspidosperma ramiflorum in vivo and in vitro,
Mem Inst Oswaldo Cruz, 110 (7), pp. 906-913.
[12] Amole O.O, Ilori O.O. (2010), Antimicrobial activity of the aqueous and ethanolic extracts of the stem bark of Alstonia boonei, International Journal of Phytopharmacology, 1(2), pp. 119-123.
[13] Chan, E. W., Wong, S. K., Chan, H. T. (2016), Apocynaceae species with antiproliferative and/or antiplasmodial properties: a review of ten genera, J Integr Med, 14 (4), pp. 269-284.
[14] David J. Middleton (1996), A Revision of Aganonerion Pierre ex Spire, Parameria Benth. & Hook. f. and Urceola Roxb. (Apocynaceae), Blumea, 41 (1), pp. 69-122.
[15] Erharuyi, O., Falodun, A., Langer, P. (2014), Medicinal uses, phytochemistry and pharmacology of Picralima nitida (Apocynaceae) in tropical diseases: a review, Asian Pac J Trop Med, 7 (1), pp. 1-8.
[16] Goutarel, R. và Janot, M. M. (1953), Ibolutein, new alkaloid extracted from iboga (Tabernanthe iboga H. Bn, Apocynaceae), Ann Pharm Fr, 11 (4), pp. 272-274.
[17] Joseph Joselin, Thankappan Sarasabai Shynin Brintha, Augustian Rajam Florence, Solomon Jeeva (2012), Screening of select ornamental flowers of the family Apocynaceae for phytochemical constituents, Asian Pacific Journal of Tropical Disease, S260-S264.
[18] Kapewangolo, P., Knott, M., Shithigona, R. E., Uusiku, S. L., Kandawa- Schulz, M. (2016), In vitro anti-HIV and antioxidant activity of Hoodia gordonii (Apocynaceae), a commercial plant product, BMC Complement Altern Med, 16 (1), pp. 411.
[19] Kazuhito Ogihara, Mariko Kuwae, Toshimasa Suzuka, and Matsutake Higa (2012), Constituents from the fruits of Messerschmidia argentea (IV), Bull. Fac. Sci., Univ. Ryukyus, 93, pp 47-54.
[20] Krengel, F., Mijangos, M. V., Reyes-Lezama, M., Reyes-Chilpa, R (5/2019), Extraction and Conversion Studies of the Antiaddictive Alkaloids Coronaridine, Ibogamine, Voacangine, and Ibogaine from Two Mexican Tabernaemontana Species (Apocynaceae), Chem Biodivers.
[21] Li Ping-tao, Antony J. M. Leeuwenberg, David J. Middleton (1995),
Apocynaceae, Flora of China, 16, pp. 143–188.
[22] Middleton D.J. & Regalado J.C. Jr (2005), Nomenclatural notes on species of Apocynaceae described from Cambodia, Laos and Vietnam,
Adansonia, 27 (2), pp. 291-308
[23] Obiagwu, M. O., Ihekwereme, C. P., Ajaghaku, D. L., Okoye, F. B. (2014), The Useful Medicinal Properties of the Root-Bark Extract of Alstonia boonei (Apocynaceae) May Be Connected to Antioxidant Activity, Hindawi Publishing Corporation ISRN Pharmacology, 4 pages.
[24] Olajide O.A, Awe S.O, Makinde J.M, Ekhelar A.I, Olusola. A, Morebise. O, Okpako D.T (2000), Studies on the anti-inflammatory, antipyretic and analgesic properties of Alstonia boonei stem bark, Journal of Ethnopharmacology. 71(1-2) pp.179–186.
[25] Pornkamon Sakong, Tueanjit Khampitak, Ubon Cha’on, Chadamas Pinitsoontorn, Pote Sriboonlue, Puangrat Yongvanit and Patcharee Boonsiri (2011), Antioxidant activity and bioactive phytochemical contents of traditional medicinal plants in northeast Thailand, Journal of Medicinal Plants Research, 5(31), pp. 6822-6831.
[26] Sasitorn Chusri1, Thanyaluck Siriyong, Pinanong N a- Phatthalung, Supayang Piyawan Voravuthikunchai (2014), Synergistic effects of ethnomedicinal plants of Apocynaceae family and antibiotics against clinical isolates of Acinetobacter baumannii, Asian Pacificjournal of Tropical Medicine, pp. 456-461.
[27] Shiyuan Wen, Yanyan Chen, Yunfang Lu, Yuefei Wang, Liqin ing, Miaomiao Jiang (2016), Cardenolides from the Apocynaceae family and their anticancer activity, Fitoterapia, 112, pp. 74-84.
[28] Syed Majid Shah, Farhat Ullah, Muhammad Ayaz, Abdul Sadiq, Sajid Hussain, Azhar-ul-Haq Ali Shah, Syed Adnan Ali Shah, Nazif Ullah, Farman Ullah, Ikram Ullah, Akhtar Nadhman (2019), Benzoic Acid Derivatives of Ifloga spicata (Forssk.) Sch.Bip. as Potential Anti- Leishmanial against Leishmania tropica, Processes, 7, pp. 208.
[29] Szostak, H. và Kowalewski, Z. (1975), The flavonoids in the leaves of Vinca minor L. (Apocynaceae), Pol J Pharmacol Pharm. 27(6), pp. 657- 63.
[30] Tanaka, Yoshitaka; Van Ke, Nguyen (2007), Edible Wild Plants of Vietnam: The Bountiful Garden, Thailand: Orchid Press. p. 28.
[31] Thidarat Somdee, Udomsak Mahaweerawat, Methin Phadungkit and Suneerat Yangyuen (2016), Antioxidant Compounds and Activities in Selected Fresh and Blanched Vegetables from Northeastern Thailand,
Chiang Mai J. Sci.; 43(4) : 834-844.
[32] Torres-Rego, M., Furtado, A. A., Bitencourt, M. A., Lima, M. C., Andrade, R. C., Azevedo, E. P., Soares Tda, C., Tomaz, J. C., Lopes, N. P., da Silva-Junior, A. A., Zucolotto, S. M., Fernandes-Pedrosa Mde, F. (2016), Anti-inflammatory activity of aqueous extract and bioactive compounds identified from the fruits of Hancornia speciosa Gomes (Apocynaceae), BMC Complement Altern Med, 16, pp. 275.
[33] Wen, S., Chen, Y., Lu, Y., Wang, Y., Ding, L., Jiang, M. (2016),
Cardenolides from the Apocynaceae family and their anticancer activity,
Fitoterapia, 112, pp. 74-84.
[34] Zibbu G, Batra A., (2011), GC-MS analysis of the desert plants of Apocynaceae family: Nerium oleander L. and Thevetia peruviana (Pers.) Schum, Int J Pharmaceut Res Dev,3(10): 49-62.
[35]http://www.botanyvn.com/cnt.asp?param=edir&v=Aganonerion%20poly morphum&list=species Truy cập ngày 18 tháng 7 năm 2019.
[36]https://suckhoedoisong.vn/la-giang-lam-thuoc-n70015.html Trang Sức khỏe và đời sống, cập nhật 23/12/2013, Truy cập 20/7/2019.
[37]https://trungtamduoclieu.vn/cay-la-giang-id1223.html#prettyPhoto, Truy cấp 20/7/2019