2) Ý nghĩa thực tiễn:
1.2.2.Những nghiên cứu trên thế giới
Khi nghiên cứu về các yếu tố ảnh hưởng đến hoạt tính của gene độc tố không bền nhiệt LT của vi khuẩn E. coli, Mundell và cs (1976) đã viết: Trong E. coli chủng H-10407, hoạt tính của độc tố LT đã giảm đi rõ rệt nếu pH ban đầu của môi trường nuôi cấy đã được giảm đến pH 7,5 (pH ban đầu là 8,5) hoặc thấp hơn. Lứa nuôi cấy vi khuẩn có chứa LT có thể được bảo quản ở 40C trong vài ngày không làm cho hoạt tính của độc tố bị hao hụt; Tuy nhiên, việc lưu trữ lâu dài hoặc đông lạnh ở -700C được khuyến khích.
Một phương pháp nhanh chóng và đơn giản để thực hiện đã được Germani và cs (1984) dùng để xác định kháng nguyên độc tố LT của vi khuẩn E. coli là ELISA. Phương pháp này cho phép xác định sự hiện diện của gene độc tố LT trong vòng 10- 12h. Trong số 54 mẫu phân thu thập được, có đến 40 mẫu cho kết quả dương tính với LT. Phương pháp này được sử dụng rộng rãi để phát hiện các chủng ETEC có trong phân (Mills và Tietze, 1984; Blanco và cs,1997;. Guler và cs. năm 2008).
Ngoài phương pháp PCR thông thường mà nhiều tác giả đã sử dụng để phát hiện gene độc tố LT (Jacek Osek, 2001; Lang và cs, 1994) thì O’Meara và cs (1995) cũng đã dùng phương pháp PCR so màu để khuếch đại và phát hiện gene LT trong các chủng ETEC. Phương pháp này cho tỷ lệ phát hiện rất cao LT trong các dòng ETEC dương tính với LT (100%).
Trên thế giới nhiều nhà khoa học đã nghiên cứu và sản xuất thành công protein tái tổ hợp tiểu đơn vị A/B của độc tố LT của ETEC và sử dụng protein tái tổ hợp này để thiết kế các bộ sinh phẩm chẩn đoán các ETEC gây bệnh bằng kỹ thuật ELSA và latex đã thu được kết quả tốt (Cryan B, 1990; Yolken và cs,1977).
Trong một nghiên cứu của Feil et al., 1996, tiểu đơn vị A của LT đã được biến đổi gene để trung hòa độc tính của nó. Các gen wtLT và NLT được biểu hiện một cách hiệu quả trong các tế bào vi khuẩn E. coli kết hợp các plasmid JM109. Biểu hiện của độc tố LT trong E. coli có thể thu được 10% protein trong tổng số protein của vi khuẩn (De Mattos và cs, 2002). Một số phương pháp lọc protein biểu hiện của độc tố LT cũng được nhiều tác giả nghiên cứu: phương pháp tủa (Cheng và cs, 1999), sắc ký ái lực (Guidry và cs 1997, De Mattos và cs 2002).