IV. Kỹ thuậtnuôi bào ngư
2. Kỹ thuật sản xuất giống nhân tạo bào ngư
Chọn bào ngư bố mẹ
Bào ngư bố mẹ phải được lựa chọn trong mùa sinh sản và đã thành thục sinh dục: con cái có tuyến sinh dục căng đầy, màu xanh đậm, trứng rời; con đực có tuyến sinh dục căng đầy, màu trắng sữa, tinh trùng rời nhau và vận động mạnh. Ngoài ra bào ngư bố mẹ phải có kích thước 5 – 8cm (hơn 2 tuổi), tốt nhất là khoảng 7 – 8cm, bào ngư phải khỏe mạnh, sinh trưởng nhanh (gờ sinh trưởng xoắn ốc, thưa, rõ)
Kích thích sinh sản
- Kích thích bằng chiếu tia cực tím: nước biển sạch có nhiệt độ 27 – 290C được chiếu tia cực tím (đèn cực tím có công suất 10W) và cho chảy vào bể đẻ có bào ngư bố mẹ. Sau khoảng 10 – 20 phút bào ngư sẽ đẻ và phóng tinh. Nếu bào ngư vẫn không sinh sản, ta thay nước bể đẻ và tiếp tục chiếu xạ. Hầu hết bào ngư sẽ đẻ trứng và phóng tinh sau khi tiến hành thay nước lần thứ 2. Đây là phương pháp kích thích bào ngư sinh sản nhanh chóng và đáng tin cậy.
- Phương pháp kích thích nhiệt khô: bào ngư bố mẹ được bọc trong một lớp gạc thấm nước biển sạch và đặt ngửa lên khay men phơi khô. Sau khoảng 30 – 60 phút
phơi nắng, bào ngư được đưa vào bể đẻ đậy kín và cấp nước biển vào. Sau đó một khoảng thời gian thì bào ngư sẽ đẻ. Đây là phương pháp ít hiệu quả hơn so với phương pháp chiếu tia cực tím.
- Phương pháp kích thích nhiệt ướt: nâng nhiệt độ của nước trong bể đẻ lên dần dần từ 270C đến 310C trong vòng 4 giờ và sau đó lại giảm đột ngột nhiệt độ nước trong bể đẻ xuống còn 270C bằng cách thay nước mới hay bằng đá lạnh. Lặp lại vài lần thì bào ngư sẽ đẻ trứng hoặc phóng tinh.
- Phương pháp kích thích bằng ôxy già (H2O2): bào ngư bố mẹ được vệ sinh sạch rồi bọc trong lớp gạc thấm nước biển sạch và đặt ngửa trên khay men phơi khô trong 10 phút. Sau đó bào ngư bố mẹ được cho vào bể đẻ cấp nước biển lọc sạch và chứa dung dịch ôxy già với nồng độ 4mM trong thời gian 30 – 60 phút. Thay nước trong bể đẻ và cấp nước mới, sau khi cấp nước mới khoảng 30 phút thì bào ngư sẽ đẻ.
Đây là phương pháp có độ tin cậy cao và kích thích sinh sản 100% nếu như bào ngư bố mẹ hoàn toàn thành thục sinh dục. Tuy nhiên, cần phải lưu ý rằng H2O2 rất độc với tế bào trứng và tinh trùng của bào ngư, vì vậy mà khi bào ngư bắt đầu sinh sản thì phải hút bỏ H2O2 ra khỏi bể đẻ ngay.
- Phương pháp kích thích sinh sản bằng thay đổi chu kỳ ánh sáng nhân tạo: bào ngư bố mẹ được cho vào bể đẻ cấp nước biển lọc sạch. Ban ngày bể được che kín bằng bạt màu đen. Ban đên từ 16 giờ đến 6 giờ sáng, bể được mở bạt và chiếu sáng bằng đèn nêon có công suất 40W. Bào ngư được cung cấp thức ăn tươi chất lượng cao và đầy đủ, sục khí mạnh và cấp nước chảy liên tục với tốc độ 10 lít/phút. Bào ngư sẽ sinh sản sau 17 – 20 ngày nuôi kích đẻ.
- Phương pháp kích thích sinh sản bằng kết hợp giữa chiếu tia cực tím với kích thích nhiệt: đây là phương pháp được áp dụng nhiều ở nước ta hiện nay.
Trước tiên ta vệ sinh bể đẻ sạch rồi cấp nước biển lọc sạch với điều kiện môi trường: + Độ mặn: 30%.
+ pH: 7.5 – 8.5. + EDTA: 5 – 10ppm.
Bào ngư bố mẹ được sử dụng với tỷ lệ: đực/cái là 1 : 2 hoặc 1 : 1. Bào ngư được bọc vào tấm gạc có thấm nước biển và đặt ngửa trên khay men để phơi khô
độ của nước từ 270C lên 310C trong khoảng thời gian 3 giờ, rồi giảm nhiệt độ nước về 270C trong khoảng 40 – 60 phút. Dùng đèn chiếu tia cực tím trong bể đẻ khoảng 5 – 10 phút kết hợp với phủ bạt kín và giữ yên lặng. Sau đó quan sát thấy bào ngư di chuyển thì kích thích đã thành công. Nếu bào ngư không di chuyển thi tiếp tục kích thích lần 2 (giống như lần 1) và sau khi kích thích lần 2 thì bào ngư hoạt động rất mạnh và sẽ phóng tinh và đẻ trứng.
Đẻ trứng và phóng tinh: bào ngư vành tai có thể bắt đầu sinh sản vào buổi chiều nhưng phần lớn đều sinh sản vào ban đêm. Con đực thường nhạy cảm với kích thích nên sẽ phóng tinh trước, tinh trùng được phóng ra từ lỗ hô hấp thứ 2 hoặc thứ 3 trên vỏ. Sự phóng tinh của con đực sẽ kích thích con cái đẻ trứng và nó trở thành phản ứng dây chuyền kích thích các con khác trong bể đẻ sinh sản.
Khi bào ngư đã sinh sản xong thì phải vớt bào ngư bố mẹ ra và phủ bạt kín bể đẻ.
Thụ tinh: thụ tinh là một khâu quan trọng quyết định đến thành công trong qúa trình sinh sản nhân tạo bào ngư. Trứng phải được thụ tinh trong một thời gian ngắn (khoảng 2 phút) thì tỷ lệ thụ tinh mới cao và ấu trùng mới phát triển đồng đều. Vì vậy mà trong sinh sản nhân tạo thường cho bào ngư bố mẹ phóng tinh và đẻ trứng riêng biệt. Sau đó lượng trứng và tinh trùng được thu riêng và định lượng sao cho tỷ lệ tinh trùng so với trứng là 5:1. Trộn lẫn tinh trùng với trứng rồi khuấy đều nhẹ nhàng. Sau một vài phút quá trình thụ tinh sẽ xảy ra. Sau khi thụ tinh 5 – 10 phút trứng sẽ chìm xuống đáy bể và được thu rồi rửa sạch rồi chuyển sang bể ấp với mật độ 5 – 10 trứng/lít.
Trong quá trình ấp phải duy trì sục khí nhẹ nhàng, đậy bạt đen kín bể và duy trì nhiệt độ trong bể ấp trong khoảng từ 27 – 290C. Tiến hành thay nước 5 – 6 lần trong suốt thời gian ấp và mỗi lần thay 3/4 lượng nước.
Ương nuôi ấu trùng:
Bào ngư là động vật biến nhiệt nên thời gian nở của trứng phụ thuộc vào nhiệt độ môi trường xung quanh. Trong khoảng nhiệt độ từ 27 – 300C, trứng được thụ tinh và sẽ nở ra ấu trùng bánh xe sau 5 – 7 giờ. Ấu trùng bánh xe có tính hướng quang nên bơi lội tự do trên tầng mặt của bể ương.
Thu ấu trùng bánh xe chuyển qua bể ương với mật độ ương 10 con/ml. Bể ương có diện tích 1 – 3m3, tiến hành vệ sinh bể và dụng cụ rồi cấp nước biển lọc
sạch với các điều kiện môi trường: độ mặn: 30ppt, pH: 7.5 – 8.5, nhiệt độ: 28 – 300C, EDTA: 5 – 10ppm.
Ấu trùng bánh xe dinh dưỡng bằng noãn hoàng. Do đó, điều quan trọng trong giai đoạn này là đảm bảo các điều kiện môi trường ổn định để giảm thiểu hoạt động của ấu trùng. Hàng ngày thay nước và theo dõi sự phát triển và tỷ lệ sống của ấu trùng. Ấu trùng khỏe luôn bơi lội theo cột nước lên lớp nước tầng mặt và từ từ chìm xuống đáy bể.
Sau 9 – 10 giờ ấu trùng bánh xe sẽ chuyển sang giai đoan ấu trùng diện bàn (veliger). Đặc điểm của ấu trùng giai đoạn này là vùng đỉnh đầu dẹt, vành tiêm mao phát triển dài và hình thành vỏ trong suốt. Lúc này ấu trùng bắt đầu sử dụng thức ăn ngoài nên ta phải cấp tảo tươi vào bể ương. Các loài tảo được sử dụng là:
Nanochlorosis, Chlorella, Monas, Tetraselmis. Ngày cấp tảo 2 lần vào 7 giờ sáng
và 4 giờ chiều. Mật độ tảo ban đầu là 3.000 – 10.000 tế bào/ml, sau đó có thể tăng dần mật độ tảo lên. Khi cho ăn cần phải chú ý quan sát độ no, đói và hoạt động của ấu trùng. Sau 24 – 27 giờ, ấu trùng chuyển sang giai đoạn hậu ấu trùng diện bàn với sự xuất hiện của mắt và xúc tu đầu.
Theo dõi sự phát triển của ấu trùng để xác định thời điểm chuyển sang giai đoạn ấu trùng bám để kịp thời cung cấp thức ăn và vật bám cho ấu trùng bám.
Sau 29 – 32 giờ thì hấu hết ấu trùng sẽ chuyển sang giai đoạn ấu trùng bám. Lúc này vành tiêm mao đầu của ấu trùng thoái hóa, hình thành cơ khép vỏ, chân bắt đầu phát triển và xuất hiện xúc tu chân. Ấu trùng bám có tập tính tìm kiếm giá thể để bám và kiếm thức ăn. Do đó, cần phải cung cấp kịp thời các tấm vật bám bằng nhựa có cấy tảo bám làm thức ăn cho ấu trùng.
Kỹ thuật gây nuôi tảo bám làm thức ăn cho ấu trùng bào ngư
Tảo khuê đáy là là nguồn thức ăn quan trọng nhất cho ấu trùng bào ngư từ giai đoạn sống bàm đến kích cỡ 5 – 10mm trước khi ăn thức ăn mầm rong tươi và rong câu chỉ vàng (Gracilaria verrucosa).
Tảo khuê bám dùng làm thức ăn cho ấu trùng bào ngư là các loại: Navicula spp, Skeletoma costatum, Chaetoceros sp. Bể nuôi tảo có kích thước 0.5 – 1m3, được vệ sinh sạch sẽ rồi cấp nước biển lọc sạch vào. Mặt trong của thành bể phải được quét sơn màu trắng để đảm bảo đủ ánh sáng cho tảo phát triển.
Dùng các tấm nhựa có kích thước 30 x 40cm làm vật bám để tảo bám làm thức ăn cho ấu trùng bào ngư. Tảo giống thuần chủng được phân lập và lưu giữ trong phòng thí nghiệm, môi trường sử dụng để nuôi tảo bám như sau:
+ Đạm: KNO3, NaNO3: 10ppm. + Lân: KH2PO4, NaH2PO4: 2 – 5ppm. + EDTA: 10ppm.
+ Silíc: K2SiO3, Na2SiO3: 0.5 – 1ppm và thêm vài giọt FeCl3
Nhiệt độ nước trong bể nuôi tảo dao động trong khoảng 27 – 300C, độ mặn > 30ppt, cường độ chiếu sáng từ 1.500 – 3.500 lux. Sau 3 – 4 ngày tảo phát triển đạt mật độ 2.000 – 3.000 tế bào/mm2 thì cho các tấm nhựa vào bể để cho tảo bám vào.
Sau khi các tấm nhựa đã có tảo bám vào thì chúng được chuyển sang bể ương làm thức ăn cho ấu trùng bào ngư. Các tấm nhựa có chứa tảo bám được đặt cách nhau 3cm trong bể ương ấu trùng để thuận tiện cho các thao tác kỹ thuật. Quan sát sự phát triển của tảo và tốc độ bắt mồi của ấu trùng bào ngư trên các tấm nhựa bám. Nếu thấy màu sắc của các tấm nhựa có tảo bám nhạt đi là tảo đã gần hết khi đó phải thay tấm nhựa có tảo bám mới và vệ sinh tấm nhựa cũ để tiếp tục cấy tảo vào. Kích thước tảo bám phù hợp cho ấu trùng bào ngư trong khoảng 5 – 7 ngày ương là 5 - 10µm, sau 20 ngày ương ấu trùng có thể ăn tảo bám có kích thước 20µm.
Sau hơn 30 ngày ương nuôi ấu trùng bào ngư chuyển sang giai đoạn ấu trùng mất nắp vỏ, chân phân hóa. Ở giai đoạn này thức ăn của ấu trùng vẫn là tảo bám nhưng có bổ xung thêm mầm rong tươi và rong câu chỉ vàng tươi băm nhỏ cho đến khi đạt kích cỡ 10 – 15mm. Ở giai đoạn này, ấu trùng bám xuất hiện lỗ hô hấp đầu tiên trên vỏ. Đây là đặc điểm để nhận dạng khi bào ngư chuyển từ giai đoạn ấu trùng bám sang giai đoạn con giống.
Điều kiện môi trường trong bể ương ở giai đoạn này như sau: nhiệt độ từ 27 – 300C, độ mặn > 30ppt, ôxy hòa tan > 4mg/l, pH dao động từ 7.5 đến 8.5, mật độ ương 100 – 200 con/lít.
Sau 45 đến 60 ngày nuôi bào ngư giống đạt kích cỡ 10 – 15mm thì tiến hành thu giống. Khi thu giống nhỏ một giọt rượu vào chân của bào ngư thì chúng sẽ rời ra khỏi vật bám.